全 文 ：醉鱼草果实三萜类成分及其活性研究
吴德玲1，3，汪洋奎1，2，王训翠1，3，刘劲松1，3，金传山1，3，张 伟1，3
(1. 安徽中医学院，安徽 合肥 230031;2. 皖西卫生职业学院，安徽 六安 237000;3. 安徽省现代中药重点
实验室，安徽 合肥 230031)
摘要 目的:研究醉鱼草果实的三萜类成分及其活性。方法:采用多种色谱方法对其含有的化合物进行分离
纯化，利用波谱法对得到的化合物进行结构鉴定，通过MTT法评价了化合物对神经细胞的保护作用。结果:分离鉴
定了 3 个化合物，分别为:oleanane，α-L-msnnopyranoside derive(1)、13，28-epoxy-3β，23-dihydroxy-11-oleanene(2)、3，
23，28-trihydroxyoleane-11，13(18)-diene(3) ，并对化合物 1 ～ 3 进行了神经细胞保护作用研究，结果表明化合物 1 ～ 3
对神经细胞具有较好的保护作用。结论:首次对化合物 1 进行了波谱学数据的报道，首次对化合物 1 ～ 3 进行了神
经细胞保护作用的研究。
关键词 醉鱼草果实;化学成分;神经细胞保护作用
中图分类号:R284. 1 /R284. 2 文献标识码:A 文章编号:1001-4454(2011)12-1884-04
Study on the Chemical Composition of Triterpenoid from the Fruit of
Buddleja lindleyana and Their Neuroprotective Activitiy
WU De-ling1，3，WANG Yang-kui1，2，WANG Xun-cui1，3，LIU Jin-song1，3，JIN Chuan-shan1，3，ZHANG Wei1，3
(1. Department of Pharmacy，Anhui College of Traditional Chinese Medicine，Hefei 230031，China;2. West Anhui College of Health
Vocational，Luan 237000，China;3. Anhui Key Laboratory for Modern Chinese Materia Medica，Hefei 230031，China)
Abstract Objective:To study the chemical composition of triterpenoid from the fruit of Buddleja lindleyana. Methods:The
chemical components were isolated by chromatography. The structures were identified by spectral data. The neuroprotective activity of
these compounds were evaluated by using MPP + induced injury in PC12 cells. Results:3 compounds were separated and identified as
oleanane，α-L-msnnopyranoside derive(1) ，13，28-epoxy-3β，23-dihydroxy-11-oleanene(2) ，3 23，28-trihydroxyolean-11，13(18)-diene
(3). Compounds 1 ～ 3 showed obviously neuroprotective activity。Conclusion:The data of compound (1)is reported for the first
time. The neuroprotective activities of compounds 1，2，3 are reported for the first time.
Key words Buddleja lindleyana Fort.;Chemical constituent;Neuroprotective activitiy
收稿日期:2011-07-26
基金项目:安徽省教育厅基金重点项目(KJ2011A185) ;安徽中医学院自然科学基金项目(2010zr009B)
作者简介:吴德玲(1973-) ，男，副教授，硕士生导师，主要从事中药有效成分、中药质量标准规范化和创新药物的研究;Tel:0551-5169227，
E-mail:dlwu7375@ sina. com。
马钱科醉鱼草属植物醉鱼草 Buddleja lindley-
ana Fort. 具有祛风解毒、驱虫之功效〔1〕，文献〔2-5〕报
道醉鱼草属植物含有三萜、倍半萜、环烯醚萜类等成
分，并发现醉鱼草中具有神经细胞保护作用的成
分〔6〕，目前对醉鱼草果实的成分研究较少，因此本
研究组对醉鱼草果实的化学成分进行研究，并且对
分离得到的化合物进行神经细胞保护作用活性筛选。
1 仪器及材料
核磁共振仪:Bruker DRX-500 MHz、400 MHz
(瑞士 Bruker 公司) ;Dr Flash-Ⅱ中压制备液相(上
海利穗科技有限公司) ，分离柱为 SepaFlash 预装
柱;API QSTAR Pulsar I 质谱仪(Applied Biosys-
tems) ;WRS-1B数字熔点测定仪(温度计未校正，上
海索光光电技术有限公司) ;RE-52A 系列旋转蒸发
器(上海亚荣生化仪器厂)。柱色谱硅胶和薄层色谱
用硅胶(青岛海洋化工厂) ，凝胶为 Sephadex LH-20
(50 μm，GE公司) ，其他试剂均为分析纯;MTT(Am-
ersco，武汉生命技术有限公司分装) ;PC12 细胞株购
自中科院上海细胞学研究所;MPP +(每瓶含 MPP +单
体 100 mg，批号 20090422，纯度 99. 0%，Sigma公司)。
醉鱼草果实采自安徽舒城万佛山，经安徽中医
学院药学院刘守金教授鉴定为马钱科醉鱼草属植物
醉鱼草 Buddleja lindleyana Fort. 的果实，药材标本
存放于安徽中医学院药学院天然药物化学教研
室。
2 提取与分离
醉鱼草果实 7. 0 kg 粉碎，依次用 95%、50%乙
醇渗漉提取，合并渗漉液，减压回收乙醇得浸膏。浸
膏加水分散，依次用石油醚、乙酸乙酯进行萃取，得
到石油醚萃取部位 (55 g)和乙酸乙酯萃取部位
(198 g)。乙酸乙酯萃取部分以氯仿-丙酮梯度洗
脱，在氯仿-丙酮 2∶ 1 洗脱部分经反复硅胶柱色谱洗
·4881· Journal of Chinese Medicinal Materials 第 34 卷第 12 期 2011 年 12 月
脱和中压制备色谱(甲醇-水 5∶ 5 ～ 7∶ 3 梯度洗脱)纯
化得到化合物 1(40 mg) ;石油醚萃取部分以石油
醚-乙酸乙酯梯度洗脱，在石油醚-乙酸乙酯 5 ∶ 1 洗
脱部分，经过反复硅胶柱层析纯化得化合物 2(80
mg) ;在石油醚-乙酸乙酯 2 ∶ 1 洗脱部分，经反复硅
胶柱层析纯化和 Sephadex LH-20 柱色谱纯化得化
合物 3(50 mg)。
3 结构鉴定
化合物 1:白色针晶(甲醇) ，mp 214 ～ 215 ℃。
易溶于甲醇、吡啶等有机溶剂。Liberman-Burchard
反应为阳性，Molish 反应为阳性。ESI-MS m/z:637
［M + Cl］－;HR-ESI-MS m/z:637. 3873［M + Cl］－;
该化合物的分子式为 C36H58O7。UVλmax nm:251. 4，
245. 0，263(logε3. 1，MeOH)。［α］19. 2D － 36. 10(c
0. 12，MeOH)。IR(KBr)υmax cm
-1:3 424，2 940，2
859，1 630，1 459，1 385，1 363，1 057。从13C-NMR，
DEPT谱可知，该化合物中有 8 个为季碳，10 个为叔
碳，有 11 个为仲碳，7 个为伯碳。NMR 数据见表 1。
从13C-NMR、1H-NMR 数据及 Molish 反应推测该化
合物可能为苷类化合物。1H-NMR 谱中可知，信号
δ5. 53(1H，d，J = 10. 0 Hz) ，6. 38(1H，d，J = 10. 0
Hz) ，结合 HSQC、DEPT 谱归属其相应的碳分别为
δ125. 9(C-11) ，125. 1(C-12)。而从13C-NMR、HMBC
谱中可知，δ135. 1(C-13) ，135. 2(C-18)与 δ5. 53
［(1 H，d，J = 10. 0 Hz) ，(C-11，125. 9) ］，3. 43
［(1H，dd，J = 11. 0，11. 0 Hz) ，(C-28，61. 6) ］，1. 79
［(1 H，m) ，(C-19，37. 5) ］，1. 58［(1H，s) ，(C-15，
32. 2) ］，1. 79［(1H，s) ，(C-16，24. 1) ］相关。从
HMBC可知，δ104. 8［4. 14(1 H，d，J = 7. 1 Hz) ，(C-
1) ］与 δ3. 33［(1 H，m) ，(C-2，73. 7) ］，δ3. 08［(1
H，m) ，(C-5，70. 9) ］，δ3. 22 ［(1 H，br s) ，(C-3，
79. 7) ］相关，可知糖与 3-OH相连，而结合 H-1的偶
合常数为 7. 1 Hz 可判断该糖与苷元形成了 β 构型
的苷键。通过核磁数据及参考文献，可推测出该糖
为呋糖，将化合物 1 进行酸水解，将水解得到的糖与
呋糖对照品进行薄层色谱检识，检测出含有呋糖。
而从 ROESY谱可知，δ6. 38(H-11)与 1. 79(H-9)相
关，所以 11 位氢应为 α 构型。同样可知，δ5. 53(H-
12)与 1. 79(H-19)相关，所以 12 位氢为 β构型。结
构式见图 1，图 2。
表 1 化合物 1 的 NMR数据(DMSO-d6)
NO. δC DEPT δH NO. δC DEPT δH
1 37. 7 CH2 1. 79(m) 19 37. 5 CH2 1. 79(m)
1. 28(m) 1. 22(m)
2 28. 7 CH2 1. 64(m) 20 34. 5 C
1. 64(m) 21 34. 5 CH2 1. 28
3 79. 7 CH 3. 22(br s) 1. 08
4 39. 4 C 22 31. 5 CH2 1. 46(m)
5 46. 0 CH 1. 04(m) 1. 08(m)
6 20. 4 CH2 1. 09(m) 23 62. 6 CH2 3. 74(m)
1. 04(m) 3. 22(m)
7 32. 6 CH2 1. 46(m) 24 12. 5 CH3 0. 91(s)
1. 08(m) 25 18. 2 CH3 1. 04(s)
8 41. 6 C 26 17. 2 CH3 0. 83(s)
9 53. 9 CH 1. 79(m) 27 23. 7 CH3 0. 71(s)
10 35. 7 C 28 61. 6 CH2 3. 43(d)
11 125. 9 CH 5. 53(d) 3. 08(d)
12 125. 1 CH 6. 38(d) 29 31. 7 CH3 0. 62(s)
13 135. 1 C 30 25. 1 CH3 0. 51(s)
14 42. 5 C fuc
15 32. 2 CH2 1. 58(m) 1 104. 8 CH 4. 14(d)
1. 10(m) 2 73. 7 CH 3. 33(m)
16 24. 1 CH2 1. 79(m) 3 71. 2 CH 3. 47(m)
1. 22(m) 4 70. 9 CH 4. 58(m)
17 41. 7 C 5 69. 7 CH 3. 08(m)
18 135. 2 CH 6 16. 8 CH 1. 40(d)
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图 1 化合物 1 的结构式
图 2 化合物 1 的主要 HMBC
化合物 2:白色粉末(石油醚-乙酸乙酯 5 ∶ 1) ，
mp 256 ～ 257 ℃。易溶于吡啶、氯仿-甲醇的混合溶
剂。Libermann-Burchard反应为阳性，说明该化合物
可能为三萜或甾体类化合物。EI-MS m/z:456。1H-
NMR(400 MHz，pyridine-d5)δ:5. 94(1H，d，J = 8. 0
Hz，H-12) ，5. 56(1H，dd，J = 8. 0，4. 0 Hz，H-11) ，
4. 20(1H，br t，J = 16. 0 Hz，H-3) ，1. 35(3H，s，H-
26) ，1. 08(3H，s，H-25) ，1. 03(3H，s，H-24) ，1. 00
(3H，s，H-29) ，0. 93(3H，s，H-27) ，0. 80(3H，s，H-
30)。以上数据与文献〔7〕报道数据基本一致，故确
定化合 物 2 为 13，28-epox-3β，23-dihydroxy-11-
oleanene。
化合物 3:白色粉末(石油醚-乙酸乙酯 5 ∶ 1) ，
mp 283 ～ 285 ℃。易溶于吡啶、氯仿-甲醇的混合溶
剂。Libermann-Burchard反应为阳性，说明该化合物
可能为三萜或甾体类化合物。EI-MS m/z:456。1H-
NMR(400 MHz，pyridine-d5)δ:6. 57(1H，d，J = 8. 0
Hz，H-12) ，5. 69(1H，d，J = 8. 0 Hz，H-11) ，1. 02
(3H，s，H-26) ，0. 98(3H，s，H-25) ，0. 94(3H，s，H-
24) ，0. 91(3H，s，H-29) ，0. 86(3H，s，H-27) ，0. 81
(3H，s，H-30)。以上数据与文献［7］报道数据基本一
致，故确定化合物 3 为 3，23，28-trihydroxyoleane-11，
13(18)-diene。
4 各化合物对 PC12 神经细胞的保护作用
将处于对数生长期的 PC12 细胞以 2 × 104 个 /
孔接种于 96 孔培养板，24 h 后细胞完全贴壁，弃去
原培养液，换含有不同浓度 MPP +的完全培养基，正
常对照组不加 MPP +，于37 ℃，5% CO2 条件下培
养〔8，9〕24 h后，以每孔 1. 0 ～ 4. 0 × 104 /mL 的活细胞
悬液 200 μL接种于 96 孔培养板中，100、10、1、0. 1
μmol /L化合物 1、2、3(溶于 DMSO，DMSO终浓度低
于 0. 02%) ，预先作用 PC12 细胞 30 min 后加入 1
mmol /L MPP +，作用 48 h 后分别加入 50 mg /mL 的
MTT 20 μL继续孵育 3 h，吸去培养基，加入 150 μL
DMSO，摇床摇动 15 min，酶标仪 570 nm波长检测吸
光度值(A) ，MTT 法检测细胞存活率〔10〕，按下列公
式计算细胞存活率，存活率(%)= A实验 /A正常。实验
结果见表 2。
表 2 不同浓度的化合物对MPP +
损伤的 PC12 细胞的保护作用
化合物 浓度 /(μmol /L) A值(珋x ± s) 细胞存活率 /%
对照组
模型组
化合物 1
化合物 2
化合物 3
0. 1
1
10
100
0. 1
1
10
100
0. 1
1
10
100
1. 068 ± 0. 0068
0. 638 ± 0. 047
0. 631 ± 0. 068
0. 639 ± 0. 069
0. 618 ± 0. 072
0. 676 ± 0. 091
0. 769 ± 0. 084
0. 732 ± 0. 061
1. 053 ± 0. 067
1. 055 ± 0. 091
0. 825 ± 0. 080
0. 625 ± 0. 075
1. 061 ± 0. 071
1. 070 ± 0. 094
100
59. 7##
63. 3＊＊
57. 8*
59. 8*
59. 1*
59. 0*
56. 1*
81. 0＊＊
80. 8＊＊
63. 3＊＊
47. 9*
81. 4＊＊
82. 1＊＊
注:与对照组比较，##P ＜ 0. 01;与模型组比较，* P ＜ 0. 05，＊＊P ＜
0. 01
5 结果与讨论
本文从醉鱼草果实中分得化合物 1、2、3，通过
Sci-Finder数据库检索，发现化合物 1 有 CAS 号，但
并没有相关的文献记载，所以笔者首次对化合物 1
进行了波谱学数据的报道;首次报道了这 3 个化合
物神经细胞保护作用的活性，实验研究结果表明:化
合物 1、2、3 对 PC12 神经细胞具有保护作用，其中
化合物 2、3 在 10 ～ 100 μmol /L 的浓度范围内具有
较好的神经细胞保护活性。
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参 考 文 献
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新疆莴苣子挥发油成分气相色谱质谱法分析
徐 芳1，2，3，王 强1，2，阿吉艾克拜尔·艾萨1*
(1. 中国科学院新疆理化技术研究所植物资源化学重点实验室，新疆 乌鲁木齐 830011;2. 中国科学院研
究生院，北京 100039;3. 新疆维吾尔自治区药物研究所，新疆 乌鲁木齐 830004)
摘要 目的:分析新疆莴苣子中挥发油成分。方法:采用水蒸气蒸馏法提取新疆莴苣子挥发油，运用气相色谱-
质谱联用技术(GC-MS)进行分析鉴定。结果:共分离出 71 种成分，确认了其中 62 种成分，占挥发油总离子流的
95. 07%，其中主要成分为正己醇(36. 31%)、正己醛(13. 71%)、反式-2-辛烯-1-醇(8. 09%)和 2-正戊基呋喃
(4. 41%)。结论:该结果为新疆莴苣子资源的开发利用提供了理论依据。
关键词 莴苣子;挥发油;气相色谱-质谱
中图分类号:R284. 1 /R284. 2 文献标识码:A 文章编号:1001-4454(2011)12-1987-05
Analysis of Essential Oil Extracted from Lactuca sativa
Seeds Growing in Xinjiang by GC-MS
XU Fang1，2，3，WANG Qiang1，2，HAJI Akber Aisa1
(1. Key Laboratory of Plant Resources and Natural Products Chemistry，Xinjiang Technical Institute of Physics and Chemistry，Chinese
Academy of Sciences，Urumqi 830011，China; 2. Graduate University of Chinese Academy of Sciences，Beijing 100039，China;
3. Xinjiang Institute of Materia Medica，Urumqi 830004，China)
Abstract Objective:To analyze the components of essential oil from Lactuca sativa seeds growing in Xinjiang. Methods:The
components of essential oil from Lactuca sativa seeds were analyzed by gas chromatography-mass spectrometry (GC-MS). Results:62
components were identified from 71 separated peaks，amounting to total mass fraction 95. 07% . The dominant compounds were n-Hex-
anol(36. 31%) ，n-Hexanal(13. 71%) ，trans-2-Octen-1-ol (8. 09%)and 2-n-Pentylfuran(4. 41%). Conclusion:The research pro-
vides a theoretical basis for the exploitation and use of Lactuca sativa seeds resource.
Key words Lactuca sativa L. seeds;Essential oil;Gas chromatography-mass spectrometry
收稿日期:2011-07-05
基金项目:国家杰出青年科学基金项目(30925045) ;中国科学院干旱区植物资源化学重点实验室择优支持项目(2009-03)
作者简介:徐芳(1973-) ，女，在读博士研究生，副研究员，主要从事中药民族药新药研发;Tel:0991-2320227，E-mail:xufangxj@ 163. com。
* 通讯作者:阿吉艾克拜尔·艾萨，Tel:0991-3835679，E-mail:haji@ ms. xjb. ac. cn。
·7881·Journal of Chinese Medicinal Materials 第 34 卷第 12 期 2011 年 12 月