免费文献传递   相关文献

不同培养基对火焰南天竹增殖与生长的影响



全 文 :第 4 1 卷第 1 期 江 苏 林 业 科 技 Vol . 4 1 No . 1
2 0 1 4 年 2 月 Journal of Jiangsu Forestry Science & Technology Feb . 2 0 1 4
文章编号:1001 - 7380(2014)01 - 0017 - 03
不同培养基对火焰南天竹增殖与生长的影响
王 姗,王永平,鲍华鹏
(江苏农林职业技术学院,江苏 句容 212400)
收稿日期:2013-10-17;修回日期:2013-10-28
基金项目:江苏省科技支撑(农业)项目“新型作物快繁智能化育苗工厂成套设备的研发”(BE2011349);镇江市科技支撑项目“组培苗规
模化生产微环境智能调控系统的研发”(NY2010023)
作者简介:王 姗(1985 -),女,安徽宿州人,硕士研究生,主要从事组织培养方面的研究。E-mail:shanzi8080@ qq. com。
摘要:以火焰南天竹(Nandina domestica‘Fire power’)为材料,研究了 6 种培养基对火焰南天竹增殖和生长的影响。
试验结果表明:6 个培养基对火焰南天竹的增殖倍数、含水量、植株高度、叶片面积、叶绿素含量均有显著的影响,其
中 M6 培养基处理的火焰南天竹增殖倍数最高,M5 培养基处理的植株生长健壮,平均株高、叶绿素含量、含水量均
显著高于其他处理组,但增殖倍数并非最高。综合分析表明:M6 培养基较目前常用的单一培养基而言更适宜于火
焰南天竹的增殖培养,M5 培养基更适宜于火焰南天竹的壮苗培养。
关键词:火焰南天竹;培养基;增殖倍数
中图分类号:Q949. 746. 8 文献标识码:A doi:10. 3969 / j. issn. 1001 - 7380. 2014. 01. 004
Effect of different basic media on proliferation and
growth of Nandina domestica‘Fire power’
WANG Shan,WANG Yong-ping,BAO Hua-peng
(Jiangsu Polytechnic College of Agriculture and Forestry,Jurong 212400,China)
Abstract:To establish a high efficient shoot regeneration system of Nandina domestica‘Fire power’,a comparative re-
search of six basic media on shoot proliferation was conducted. Shoot proliferation per explant,leaf area,plant height,shoot
water content,shoot length and leaf chlorophyll concentration were significantly affected by different media for Nandina dom-
estica‘Firepower’. M6 media was particularly suitable for proliferation while on M5 medium,plants grew stronger and aver-
age plant height,chlorophyll content,water content were significantly higher than other treatment group. Comprehensive a-
nalysis results indicated that mixed media M6 were better than common single media WPM for proliferation of its clumpy
shoot. M5 medium was particularly suitable for seedling strengthening.
Key words:Nandina domestica‘Fire power’;Medium;Proliferation ratio
火焰南天竹(Nandina domestica‘Fire power’),
属小檗科南天竹属,为国外培育的南天竹园艺新品
种[1]。植株矮小,株形紧凑,叶片椭圆或卵形,其节
间特短,火焰南天竹在江苏地区 4 月中旬开始萌芽,
长出嫩红的新叶,叶片长、大,气温 30 ℃以上就逐渐
转绿,12 月,当温度降到 5 ℃以下,昼夜温差在 10
℃以上,叶片开始变红,由于其耐寒常绿,经冬不凋,
非常美丽,适宜做地被和小庭院环境布置。
由于火焰南天竹植株矮小,茎节短[2 - 3],节间只
有普通南天竹的 l /10,枝条细弱,扦插繁殖困难且繁
殖速度慢。自从 1995 年上海植物园作为资源收集
引进该品种以来,我国对火焰南天竹的研究才开始,
生产上通常采用扦插育苗法,繁殖周期长,繁殖率极
低[4 - 5]。关于火焰南天竹组织培养再生植株方面的
报道很少,生根困难和移栽成活率低的问题限制了
火焰南天竹的大面积推广[6 - 7]。而传统的组织培养
方法虽然取得了一定成功,但增殖系数低和生长速
度慢成为技术瓶颈,2002 年浙江慈溪棉花科学研究
所研究表明火焰南天竹采用传统组织培养方法,继
代培养需 45 d,芽的增殖系数仅为 2. 5,2003 年上海
市园林研究所研究表明生根率仅在 30% ~ 50%之
间,因此采用传统的组织培养方法对火焰南天竹的
快繁并没有突破性进展。本试验利用课题组自行研
制的浸没式液体组织培养系统,从基本培养基角度
对火焰南天竹的组织培养快繁方法进行了研究,以
期为该品种的快速繁殖和推广提供适用技术。
1 材料与方法
1. 1 材料
以实验室火焰南天竹优良单株的新稍诱导培养
的试管无菌苗为试验材料。
1. 2 方法
分别配制 WPM、改良的 WPM 和 MS 基本培养
基,分别将 MS 与 WPM、MS 与改良的 WPM 等体积
混合配制成 MS-WPM、MS-改良的 WPM 混合培养
基。试验设 6 种不同培养基分别为 M1:WPM;M2:
1 /2WPM;M3:改良的 WPM(大量、微量元素减半);
M4:MS-WPM;M5:MS-改良的 WPM;M6:B5,其中
M1 作为对照处理组,根据预实验结果可知,各培养
基中添加 2 mg /L 6-BA、30 g /L蔗糖,pH 5. 8。接种
在自行研制的浸没式液体培养摇床上,培养容器为
容量2 000 mL 的塑料瓶,其中灌入 200 mL 的培养
液,每瓶接种 15 株组织培养苗,各重复 3 次,置于温
度(25 ± 2)℃ 、光照度1 800 ~ 2 000 lx、光照时间
16 h /d的培养室内培养。30 d 后统计 6 种处理植
株的生长形态,每株组织培养苗的平均增殖倍数,参
照张志良等[8]的方法测定叶片的叶绿素含量。根
据鲜质量和干质量计算含水量,计算公式为:含水量
=〔(鲜质量 -干质量)/鲜质量〕× 100%。各指标
均取 3 次重复的平均值。
1. 3 数据整理与统计方法
采用 Excel 2003 软件对实验数据进行基本整
理,采用 SPSS 统计分析软件对实验数据进行相关
性分析、方差分析和 Duncan’s 新复极差检验。
2 结果与分析
2. 1 不同基本培养基对火焰南天竹增殖倍数影响
在不同基本培养基中火焰南天竹丛生芽的总增
殖倍数和有效增殖倍数见表 1。由表 1 可以看出,
火焰南天竹在不同基本培养基上培养 30 d 后的总
增殖倍数和有效增殖倍数存在明显差异。对于火焰
南天竹来说,在 M6 培养基上丛生枝的总增殖倍数
和有效增殖倍数显著高于其他培养基处理组。在
M2 和 M3 培养基上丛生芽的总增殖倍数和有效增
殖倍数较低,显著低于其他培养基处理组。不同于
表 1 不同基本培养基对火焰南天竹丛生芽增殖的影响
培养基 总增殖倍数 有效增殖倍数
M1 1. 81 d 1. 63 d
M2 1. 64 e 1. 40 e
M3 1. 67 e 1. 37 e
M4 3. 23 b 2. 96 b
M5 2. 58 c 2. 27 c
M6 4. 35 a 4. 33 a
同列中不同的小写字母表示差异显著(P < 0. 05)。
传统组织培养,本实验中培养基成分的不同对火焰
南天竹的增殖倍数产生了显著影响,由于 M6 培养
基为 B5 培养基,分析可知 B5 培养基硝态氮含量较
高,更适宜火焰南天竹的增殖,M1、M2、M3 和 M4
培养基条件下的植株生长不良,可能是硝态氮含量
达不到火焰南天竹生长要求。但 M5 培养基条件下
植株生长健壮,但增殖倍数却和 M1、M2、M3、M4 4
种培养基差异不显著,需要增设试验做进一步说明。
2. 2 不同基本培养基对火焰南天竹形态指标影响
不同基本培养基对火焰南天竹平均株高和叶面
积的影响见表 2。火焰南天竹在 M5 培养基上平均
株高为 7. 3 cm,显著高于其他培养基处理,观察可
以发现在 M5 培养基上生长的植株不仅较高,且生
长健壮;而在其他 5 种培养基上,火焰南天竹的平均
株高差异不显著,由此可知,M5 培养基很适合火焰
南天竹的营养生长。火焰南天竹在 M5 培养基上叶
面积为 0. 462 cm2,其次为 M6 培养基,显著高于其
他 4 种培养基处理下的叶面积,其他 4 种培养基处
理的火焰南天竹植株叶面积差异不显著。植株的叶
面积和植株营养是息息相关的,在硝态氮含量较高
的培养基上,植株叶面积也大。分析可知,M5 和M6
培养基钙离子含量相对于其他几种培养基较低,推
测火焰南天竹可能为忌钙植物。
表 2 不同基本培养基对火焰南天竹形态指标的影响
培养基 平均株高 / cm 叶面积 / cm2
M1 5. 6 b 0. 126 c
M2 5. 7 b 0. 131 c
M3 5. 4 b 0. 129 c
M4 5. 5 b 0. 263 b
M5 7. 3 a 0. 462 a
M6 5. 8 b 0. 451 a
同列中不同的小写字母表示差异显著(P < 0. 05)。
2. 3 不同基本培养基对火焰南天竹含水量的影响
不同基本培养基对火焰南天竹鲜质量、干质量
及含水量的影响见表 3。
不同基本培养基对火焰南天竹的含水量有较大
81 江 苏 林 业 科 技 第 41 卷
表 3 不同基本培养基对火焰南天竹鲜质量、干质量及含水
量的影响
培养基 鲜质量 / g 干质量 / g 含水量 /%
M1 0. 12 b 0. 04 a 66. 67 d
M2 0. 09 c 0. 03 b 66. 67 d
M3 0. 1 c 0. 03 b 70. 00 c
M4 0. 13 b 0. 03 b 76. 92 b
M5 0. 15 a 0. 01 c 93. 33 a
M6 0. 12 b 0. 03 b 75. 00 b
同列中不同的小写字母表示差异显著(P < 0. 05)。
影响。在 M5培养基处理下的火焰南天竹叶片含水
量最高,达到 93. 33%,显著高于其他 5 种培养基,其
次在 M4、M6 和 M3 培养基处理组含水量分别达到
76. 92%,75. 00%,70. 00%,M1 和 M2 培养基间含水
量最低为 66. 67%。相关性分析表明,火焰南天竹叶
片的含水量与总增殖倍数的相关性不显著,表明总增
殖倍数高的培养基处理组,其含水量不一定高。M5
培养基条件下植株生长健壮,含水量也较高。
2. 4 不同基本培养基对火焰南天竹叶片叶绿素含
量的影响
不同基本培养基对火焰南天竹叶片叶绿素含量
的影响见表 4。在 M5 培养基处理下,叶绿素 a和叶
绿素 b含量最高,分别达到2. 208 9 mg /g 和0. 762 2
mg /g,显著高于其他培养基处理下的叶绿素含量,
其次为 M6 培养基处理,叶绿素 a 含量为1. 366 0
mg /g,叶绿素含量和植株体内硝态氮含量也存在相
关性,同样和植株体内钙离子含量呈反比,M5 和M6
培养基中钙离子含量较低,相应的叶绿素含量较高。
而在 M3 培养基上,叶绿素 a 和叶绿素 b 的含量均
最低,分别为0. 083 5 mg /g 和0. 011 8 mg /g,培养基
不同营养成分直接影响了植株的生长状况,表现在
植株体内硝态氮和钙离子含量对植株产生的影响。
表 4 不同基本培养基对火焰南天竹叶片叶绿素含量的影响
基本培养基
叶绿素 a含量
/(mg /g)
叶绿素 b含量
/(mg /g)
M1 0. 377 0 d 0. 249 4 b
M2 0. 099 9 c 0. 027 4 c
M3 0. 083 5 c 0. 011 8 c
M4 1. 292 1 b 0. 358 5 b
M5 2. 208 9 a 0. 762 2 a
M6 1. 366 0 b 0. 297 4 b
同列中不同的小写字母表示差异显著(P < 0. 05)。
3 结论与讨论
本研究中,在 M6 培养基上,火焰南天竹丛生芽
的总增殖倍数、有效增殖倍数显著高于其他培养基,
但株高、叶面积,含水量及叶绿素含量并非最高;在
M5培养基上,火焰南天竹总增殖倍数仅为2. 58,但植
株高度、叶面积、含水量及叶绿素含量均显著高于其
他培养基。总体而言,在 M6 培养基上火焰南天竹增
殖最快,其增殖效果明显优于其他培养基,适宜作为
火焰南天竹的增殖培养基;在 M5 培养基上,火焰南
天竹植株生长健壮,长势最好,含水量及叶绿素含量
最高,适宜作为火焰南天竹的壮苗培养基。各培养基
处理的火焰南天竹生长表现不一,其原因可能是各组
合培养基含氮量不同,M5培养基为混合培养基,综合
了 MS和WPM 单一培养基的优势,平衡了盐分浓度,
既避免了因 WPM 单一培养基中盐分浓度较低而出
现的养分不足状况,又避免了因 MS 单一培养基中盐
分浓度较高而导致的养分过剩现象,更加有效地调节
了培养基中的氮素浓度,对因氮素不足而出现叶片发
红的症状有一定的改善作用。
火焰南天竹增殖系数低,增殖速度慢是火焰南
天竹快繁的瓶颈,用 MS做为基础培养基,从诱导不
定芽到植株发根,长成完整植株要 3 个月以上[6,9],
该研究采用 M6 培养基进行培养,从接种到丛生芽
增殖仅需 30 d 左右,增殖系数为 4 以上,时间大大
缩短,说明 M6 作为基本培养基比 MS更适应火焰南
天竹增殖培养,因此在浸没式液体培养条件下,火焰
南天竹增殖培养基可采用 M6 + 2 mg /L 6-BA,而采
用 M5 培养基则有利于火焰南天竹的壮苗生长,火
焰南天竹的壮苗培养基可采用 M5 +2 mg /L 6-BA。
参考文献:
[1] 蒋泽平,王福银,徐招娣,等.火焰南天竹离体保存技术研究初
报[J].江苏林业科技,2010,37(3):6-8.
[2] 宋 刚,朱 艳. 火焰南天竹的组织培养和规模化生产[J].
植物生理学通讯,2010(2):157-158.
[3] 邓玉营,吕秀立.火焰南天竹组织培养的研究[J].北方园艺,
2010(20):141-143.
[4] 王玉勤,杜永芹,倪林娟.火焰南天竹的扦插繁殖法[J]. 上海
农业科技,2004(5):97.
[5] 杜永芹,倪林娟,王玉勤,等.观赏林木新品种火焰南天竹的引
进与繁育技术研究[J].上海农业科技,2007,23(3):38-41.
[6] 周南镚,黄一青,王青华.火焰南天竹的组织培养[J].农业科
技通讯,2002(11):17.
[7] 杜永芹,倪林娟,王玉勤.耐寒彩叶树种火焰南天竹的快繁技
术研究[J].上海农业学报,2004,20(4):1-4.
[8] 张志良,瞿伟菁.植物生理学实验指导:3 版[M].北京:高等
教育出版社,2004:67-70.
[9] 李 慧.彩叶树种火焰南天竹的离体快繁研究[J].江苏农业
科学,2010(1):74-76.
91第 1 期 王 姗等:不同培养基对火焰南天竹增殖与生长的影响