全 文 ：南瓜瓤中总黄酮的提取及含量测定
张欣 ,曾光银　(吉林农业科技学院 ,吉林吉林 132101)
摘要　[目的]测定南瓜瓤中的总黄酮含量。 [方法]以 70%的乙醇溶液为提取剂 ,运用索氏提取法对南瓜瓤中总黄酮进行提取 ,运用紫
外 -可见分光光度法测定南瓜瓤中总黄酮的含量。 [结果]紫外-可见分光光度法最佳 ,测定波长为 364nm,南瓜瓤中含有丰富的黄酮
类化合物 ,其含量达到 2.365%。 [结论 ]试验所用测定方法简单、准确 ,平均回收率为 97.52%,相对标准偏差(RSD)为 1.01%, 结果令
人满意。
关键词　南瓜;黄酮;紫外 -可见分光光度法;含量
中图分类号　S37　　文献标识码　A　　文章编号　0517-6611(2010)36-20754-02
ExtractionandDeterminationofFlavonoidsinGourdPulp
ZHANGXinetal　(JilinUniversityofAgriculturalScienceandTechnology, Jilin, Jilin132101)
Abstract　[ Objective] Thecontentofthetotalflavanoneinthegourdpulpweredetermined.[ Method] Extractedthetotalflavanoneinthe
gourdpulpbysoxhletextractionmethodwith70%alcoholsolutionastheextractant, determinedthecontentofthetotalflavanoneinthegourd
pulpwithultraviolet-visiblespectrophotometer.[Result] Thebestdeterminationwavelengthwas364nm.Therewereabundanceflavanonesin
thegourdpulp;itscontentwas2.365%.[ Conclusion] Thismethodwassimpleandaccurate, theaveragerecoveryratewas97.52%, the
relativelystandarddeviation(RSD)was1.01%, theresultwassatisfying.
Keywords　Gourdpulp;Flavanone;Ultraviolet-visibleSpectrophotometer;Content
作者简介　张欣(1981-),男 ,吉林松原人 ,助教 ,从事生物工程和天然
药物的教学 、科研工作。
收稿日期　2010-11-05
　　南瓜(Cucurbitamoschata),别名金瓜 、番瓜 、窝瓜 、饭瓜 、
倭瓜等 ,是葫芦科南瓜属的一年生蔓性植物 [ 1] 。南瓜的营养
成分较全 ,营养价值也较高 。南瓜不仅对糖尿病有明显的预
防和治疗作用 ,还可以防癌 、抗衰老 、抵制多种疾病 ,是一种
不可多得的保健食物 。据文献报道南瓜中含有黄酮类物质。
现代药理研究表明黄酮是一类天然色素及苷类物质的总称 ,
药用价值很高 [ 2-4] 。黄酮具有扩血管 、降血脂 、清除自由基 、
抗凝作用 ,并且可以抑制血管内皮细胞增殖及血管生成 ,还
具有抗白血病 、抗辐射 、抗肿瘤等作用 ,对内分泌也有一定的
影响 [ 5-6] 。
随着研究的深入 ,科学家逐渐认识到蔬菜 、水果中的植
物黄酮对人类的饮食健康有着无可替代的作用。如槐米中
的芦丁和陈皮中的陈皮苷 ,能降低血管的脆性 ,改善血管的
通透性 、降低血脂和胆固醇 ,被用于防治老年高血压和脑溢
血。由银杏叶制成的舒血宁片含有黄酮和双黄酮类 ,被用于
冠心病 、心绞痛的治疗。全合成的乙氧黄酮又名心脉舒通或
立可定 ,有扩张冠状血管 、增加冠脉流量的作用 [ 7-8] 。然而
到目前为此 ,关于对南瓜瓤中黄酮类物质的研究报道较少。
为此 ,笔者以南瓜瓤为原料 , 70%的乙醇为提取剂 ,采用索氏
提取法对其中的总黄酮进行提取 ,采用紫外 -可见分光光度
法对提取液中总黄酮含量进行测定 ,以期为南瓜瓤的药用价
值开发提供数据支持。
1　材料与方法
1.1　仪器与试剂　主要仪器:UV-1600型记录式紫外 -可
见分光光度计(北京仪器有限公司);索氏提取器(上海洪纪
仪器设备有限公司);ESJ205-4型电子天平(沈阳龙腾电子有
限公司);101A-2型数显电热鼓风干燥箱(中国上海第二五
金厂);XA-1高速万能粉碎机(金坛市恒丰仪器厂);HH-S电
热恒温水浴锅(江苏省金坛市正基仪器有限公司)。
主要试剂:芦丁标准品(中国药品生物制品检定所);乙
醇(沈阳市新化试剂厂 ,分析纯);蒸馏水。
1.2　供试材料　南瓜 ,购于吉林九站。南瓜洗净后 ,取出南
瓜中南瓜籽得南瓜瓤 ,将南瓜瓤置于电热鼓风干燥箱中低温
烘干处理为干品 ,置于干燥器中备用。
1.3　试验方法
1.3.1　南瓜瓤中总黄酮的提取。将干燥的南瓜瓤用粉碎机
粉碎后 ,称取 10.000 g,用滤纸包好 ,置于索氏提取器中 ,取
70%乙醇溶液 80ml,先往向索氏提取器中加入 70%乙醇至
与虹吸管相平 ,剩余液体加入圆底烧瓶中 ,将样品浸泡 2 h,
然后在水浴锅上加热回流至无色。把回流液倒于蒸馏瓶中
进行减压蒸馏至 50 ml,超声溶解 ,过滤 ,装于容量瓶中 ,得待
测液 ,置于冰箱中备用。
1.3.2　南瓜瓤中总黄酮含量的测定方法。
1.3.2.1　芦丁对照品溶液的制备。精密称取在 120 ℃减压
干燥至恒重的芦丁对照品 25.000 mg,置 50 ml容量瓶中 ,加
入 95%乙醇 ,超声溶解并稀释至刻度 ,摇匀 ,即得 0.500
mg/ml的芦丁标准溶液。
1.3.2.2　标准曲线的绘制。精密吸取 0.500 mg/ml的芦丁
标准品溶液 0.00、0.50、0.75、1.00、1.25、1.50 ml,分别置于
25ml的容量瓶中 ,加入 95%乙醇定容至刻度 ,在 364 nm处
测定吸光度值。以吸光度值为纵坐标 ,以浓度为横坐标 ,进
行线性回归 ,得回归方程 A=31.740C+0.004,相关系数 r=
0.998 2(n=5)。芦丁在 0.000 ～ 0.030 mg/ml范围内呈现良
好线性关系 。
1.3.2.3　南瓜瓤中总黄酮含量的测定 。取 “1.3.1”制备的
南瓜瓤提取液 10 ml置于 25 ml容量瓶中 ,采用 “1.3.2.2”方
法测定吸光度值 ,平行测定 5次 ,根据回归方程计算样品中
总黄酮的含量。
1.3.2.4　稳定性试验 。取芦丁对照品溶液 1.00 ml置于 25
ml容量瓶中 ,加入 95%乙醇定容至刻度 ,分别于 0、1、2、4、8、
12、24 h在 364nm处测吸光度值 ,考察溶液放置后吸光度值
的变化情况 。计算得相对标准偏差(RSD)值为 0.12%,表明
芦丁标准溶液在 24h内稳定。
责任编辑　高晓余　责任校对　卢瑶安徽农业科学 , JournalofAnhuiAgri.Sci.2010, 38(36):20754, 20755
1.3.2.5　回收率与精密度试验。为考察方法的可靠性 ,进
行了回收率和精密度的测定。准确称量南瓜瓤粉末 5份 ,每
份 0.100g,精密加入芦丁对照品 1.000 mg,按 “1.3.1”方法
进行提取 ,按 “1.3.2.2”方法测定其吸光度值 ,根据结果计算
回收率和相对标准偏差。
2　结果与分析
2.1　南瓜瓤中总黄酮的含量　根据 “1.3.2.3”方法测定南
瓜瓤中总黄酮的平均含量为 2.365%。
2.2　回收率与精密度　根据 “1.3.2.5”方法测定回收率和相
对标准偏差。结果如表 1所示 ,平均回收率为 97.52%, RSD值
为 1.01%,说明该测定方法具有较好的准确度和精密度。
2.3　测定波长的选择　黄酮类化合物具有特定的紫外吸收
带 ,其结构中的肉桂酰环产生的Ⅰ带在 300 ～ 400 nm内 ,由苯
甲酰环产生的Ⅱ带在 240 ～ 285 nm内 ,不同类型的黄酮类化
合物在这 2个吸收带的吸收强度不同。对照品芦丁在这 2
个吸收带都有强吸收 ,含黄酮类化合物的原料经提取纯化
后 ,理论上均可直接于最大吸收波长处测定其吸光度 ,以芦
丁为对照品计算其含量。但由于在紫外低波长区容易被溶
剂干扰 ,可能引起误差 ,故选择芦丁在Ⅰ带的最大吸收波长
364 nm作为测定南瓜瓤中总黄酮含量的测定波长。
表 1　回收率的测定(n=5)
Table1　Detectionofrecoveies(n=5)
编号
No.
取样量∥g
Sampleamount
样品含量∥mg
Samplecontent
加入对照品量∥mg
Additionamount
测得量∥mg
Detectedamount
回收率∥%
Recovery
平均回收率∥%
Averagerecovery
相对标准偏差 ∥%
RSD
1 0.100 2.365 1.000 3.343 98.70 97.52 1.01
2 0.100 2.365 1.000 3.328 96.30
3 0.100 2.365 1.000 3.348 98.30
4 0.100 2.365 1.000 3.334 96.90
5 0.100 2.365 1.000 3.339 97.40
2.4　提取剂的选择　试验中曾用不同浓度甲醇(60%、
65%、70%、75%、80%)、乙醇(60%、65%、70%、75%、80%)
作提取剂 ,结果发现当用 70%乙醇溶液进行提取时 ,提取总
黄酮的量最多 ,且回收率最好。
2.5　提取温度的选择　试验中分别试用了在 65、70、75、80、
85、90℃下进行样品的提取。结果表明 ,当提取温度高于 85℃
时 ,提取液中总黄酮含量明显降低。由此可知 ,当温度高于
85 ℃时 ,某些黄酮可能发生了化学变化 。因此 ,在提取的过
程中应注意对温度的控制 ,提取温度最好不要高于 85 ℃,否
则会对提取结果有较大影响。
3　结论　
试验结果表明 ,紫外 -可见分光光度法测定南瓜瓤中总
黄酮含量的最佳检测波长为 364 nm,测得南瓜瓤中总黄酮含
量为 2.365%。由此可知 ,南瓜瓤中总黄酮的含量较高 ,这一
测定结果为开发和利用南瓜瓤中的黄酮类物质提供了理论
和试验依据。
该研究采用的测定方法简单易操作 ,并有较好的重复
性 、准确度和精密度。如果能将该方法应用到生产实践中 ,
可使南瓜瓤变废为宝 ,具有一定的现实意义。但该提取与测
定方法在应用中还有许多实际问题 ,其提取工艺条件还有待
于进一步优化。
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(上接第 20753页)
用油 ,通过硫代硫酸钠滴定碘的方法测定 ,过氧化值均符合
国家标准 。太原市市面所售食用植物油及散装食用油在自
动氧化的过程中产生的过氧化物较少 ,油脂的品质保持在一
个较稳定的水平 ,对人体没有害处 ,可放心食用。通过对比
可以看出 ,特香天然谷物调和油和鲁花花生油的过氧化值较
高 ,其他 4种油样的过氧化值基本没有差别。
3.3　羰基价　该试验中所用的太原市市面所售食用植物油
及散装食用油的羰基价均符合国家标准 ,羰基价值均较小 ,
由此说明所测定油样的氧化程度低 ,并且品质较好 ,可放心
食用。对比羰基价的测定值可以看出 ,福临门和豆油的测定
结果较小 ,其他基本没有差异。这说明油样在保存时保存环
境与方法较好 ,油样的 2、3次氧化程度很低 ,油的品质及营
养价值保持在一个较高的水平 ,食用安全且营养良好。
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2075538卷 36期　　　　　　　　　　　　　　　　　张 欣等　南瓜瓤中总黄酮的提取及含量测定