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岩黄连总碱对小鼠急性化学性肝损伤的保护作用研究



全 文 :CHINA MODERN MEDICINE 中国当代医药
2010 年 9月第 17卷第 27期 实验研究
岩黄连(Corydalis saxicola bunting)因其功效近似黄连且
生长于石缝中或岩石旁而得名,又叫岩连(四川、云南),黄连
(湖北、云南),菊花黄连、鸡爪连、土黄连(广西 ),岩胡 (贵
州),据《中华本草》记载,岩黄连(Corydalis saxicola bunting)
系罂粟科 (Papaveraceae)紫堇属 (Corydalis)植物石生黄堇
(Corydalis saxicola bunting)的全草及肥大的根茎[1]。 临床上可
用于治疗急慢性肝炎、肝硬化、肝癌、疮疖肿毒、急性肠胃炎
及其他肿瘤的辅助治疗等。迄今为止对岩黄连的化学成分的
研究不多,现已分离鉴定出的化合物主要是生物碱。 肝脏具
有包括代谢、合成和储存,以及调节和维持内部环境稳定等
功能[2]。 当肝脏受到损伤时,便出现相关的临床特征表现,如
转氨酶的升高、血清中蛋白含量的变化等。 本实验所采用的
动物急性肝损伤模型是国际上常用的四氯化碳(CCl4)肝损伤
模型。
1 材料与方法
1.1 药物与试剂
联苯双酯: 联苯双酯滴丸, 北京协和药厂, 国药准字
H11020980,批号 08110103;岩黄连总碱 (HJ-1)粉末,南京中
医药大学提供;四氯化碳(CCl4):分析纯,南京化学试剂一
厂,临用前用橄榄油配制成 0.1% CCl4橄榄油溶液;橄榄油,
化学纯,上海凌峰化学试剂有限公司,批号 080328;门冬氨
酸氨基转移酶(AST/GOT)测定试剂盒(赖氏法)批号 20080324;
丙氨酸氨基转移酶 (ALT/GPT) 测定试剂盒 (赖氏法 ) 批号
20080326,均购自南京建成生物工程研究所。
1.2 实验动物
ICR 雄性小鼠,体重 18~22 g,购自南京医科大学实验动
物中心,合格证号:SCXK(苏 ) 2007-0031,饲养于(22±2) ℃
的环境中,动物分笼饲养,自由摄食和饮水,室内采取 12 h
光照、黑暗循环。
1.3 实验仪器
酶标仪 (Multiskan spectrum) 型号:1500, Thermo Elec-
trom 公司产品;METTLER TOLEDO PB303-N 电子天平。
1.4 实验方法
雄性 ICR 小鼠 72 只,按体重随机分为 6 组,分别为空白
对照组,模型对照组,联苯双酯 100 mg/kg 组,岩黄连总碱
(HJ-1)100 mg/kg、50 mg/kg、25 mg/kg 组,岩黄连总碱加羧甲
基纤维素钠助溶。 灌胃量 0.2 ml/10 g,第 1次给药后 30 min,
除空白对照组外, 其余各组均按体重腹腔注射 0.1% CCl4橄
榄油溶液,注射剂量为 0.1 ml/10 g 体重,空白对照组和模型
组灌胃给予 0.5% 羧甲基纤维素钠溶液 0.2 ml/10 g。 灌胃给
药 8 h 后,各组以相同剂量再次给药,并禁食 12 h 后进行摘
眼球取血,室温静置 1 h 后,于 3 000 r/min 离心 15 min,分离
血清,测定 AST(门冬氨酸氨基转移酶)、ALT(丙氨酸氨基转移
酶)含量。 解剖取各鼠肝脏称重,计算肝指数[4]。 公式如下:
肝指数=肝脏重/体重。
1.5 统计学处理
采用 SPSS 11.5 软件进行统计学处理, 计量资料以 x±s
表示,组间差异采用 student-t检验。 检验水准 α=0.05。
岩黄连总碱对小鼠急性化学性肝损伤的
保护作用研究
周劲光
(河南大学淮河医院临床教学办 & 药剂科,河南开封 475000)
[摘要] 目的:研究岩黄连总碱对 CCl4所致小鼠急性肝损伤的保护作用。 方法:腹腔注射给予 CCl4致小鼠急性肝损
伤,通过灌胃给药观察岩黄连总碱对其保护作用。 结果:岩黄连总碱可明显降低 CCl4因素所致急性肝损伤小鼠血清
AST、ALT 的含量。 结论:岩黄连总碱对 CCl4所致小鼠急性肝损伤具有保护作用。
[关键词] 岩黄连总碱;四氯化碳;肝损伤
[中图分类号] R-332 [文献标识码] A [文章编号] 1674-4721(2010)09(c)-029-02
Study of hepatoprotective effect of the total alkaloids from Corydalis saxicola
bunting of the acute chemical hepatic injury model mice
ZHOU Jinguang
(Department of BST&Pharmacy,the Affiliated Huaihe Hospital of Henan University,Henan Province,Kaifeng 475000,China)
[Abstract] Objective: To study the protective effect of the total alkaloids from Corydalis saxicola bunting of the acute hep -
atic injury model mice caused by carbon tetrachloride.Methods: The protective effect of the total alkaloids from Corydalis
saxicola bunting by intragastric administration against peritoneal injection CCl 4-induced hepatic injury in mice were inves-
tigated. Results: The contents of serum transaminases(ALT and AST) of medication administration team compare with mod -
el team was degraded. Conclusion: The results indicate that the CCl4-induced hepatic injury of mouse was protected sig-
nificantly.
[Key words] The total alkaloids from Corydalis saxicola Bunting; CCl4; Hepatic injury
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2010 年 9月第 17卷第 27期实验研究
中国当代医药 CHINA MODERN MEDICINE
正常组
模型组
联苯双酯组
岩黄连(高)
岩黄连(中)
岩黄连(低)
组别 剂量(mg/kg) 动物数
-
-
100
100
50
25
12
12
12
12
12
12
AST(U/L)
18.6±7.1**
149.6±19.2
113.1±19.5
70.7±21.0**
73.8±24.0**
96.7±17.4*
ALT(U/L)
21.0±6.9**
122.1±25.2
101.0±28.5
95.8±15.2
82.6±19.0*
111.0±22.8
肝指数
0.051±0.003**
0.063±0.010
0.062±0.010
0.054±0.007
0.055±0.009
0.062±0.007
2结果
数据结果显示, 模型组小鼠血清中 AST 和 ALT 的含量
明显高于空白对照组,提示动物造模成功。 岩黄连总碱各剂
量组血清中 AST 的含量明显低于模型对照组, 差异具有统
计学意义; 岩黄连总碱中剂量组血清中 ALT 的含量明显低
于模型组,且差异具有统计学意义。 给药各组肝指数比模型
组均有所降低,但不显著。 结果见表 1。
表 1 岩黄连总碱对急性肝损伤小鼠 AST 和 ALT 以及肝指数的影响
(x±s)
与模型组比较,*P<0.05,**P<0.01
3 讨论
急性四氯化碳肝损伤模型为国际上常用的化学性肝损
伤模型[5]。肝损伤时肝实质细胞结构受损,特别是膜性结构受
损, 胞浆内 ALT 和线粒体内 AST 释放, 从而引起血清 ALT
和 AST 升高, 四氯化碳肝损伤动物模型是一种经典的实验
性肝损伤模型[6]。 四氯化碳进入动物体内后,经肝脏细胞p450
激活,生成三氯化碳(CCl3·),通过氢吸附而攻击内质网膜上
的磷脂分子,引起膜的脂质过氧化,CCl3·继而与膜脂质和单
蛋白质大分子共价结合,引起膜结构和功能完整性的破坏 [7]。
CCl3·还可以抑制细胞膜和微粒体膜上钙泵的活性,使 Ca2+内
流增加,从而引起细胞中毒死亡[8]。
本研究结果表明:口服岩黄连总碱能够降低 CCl4所致小
鼠血清中 ALT及 AST水平的升高,且呈现出一定的剂量依赖
性,能有效地减轻化学药物对小鼠肝脏的损害。 以上结论证
明岩黄连总碱对小鼠急性化学性肝损伤具有保护作用,目前
对于岩黄连总碱对急性肝损伤保护作用的物质基础及作用
机制还有待进一步深入研究。
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(收稿日期:2010-06-22)
血流量明显降低, 则提示椎动脉功能下降, 或者管腔变窄。
本实验结果表明,随着时间延长,椎动脉血流量随退变出现
显著下降,可能是由于:颈椎退变后,钩椎关节松动变位而波
及两侧上下横突孔,以致出现轴向或侧向移位而刺激或压迫
椎动脉,引起椎动脉痉挛或折曲改变所致;或者椎动脉受到
压迫或刺激后,引起椎动脉内膜损伤,导致过度增生,引起管
腔狭窄所致;颈椎间盘退变后椎体间距变短,同节段的椎动
脉相对变长,破坏了椎动脉与颈椎之间原有的平衡,以致椎
动脉迂曲所致。本研究观察到实验组椎动脉在术后第 3个月
管壁厚度均值明显高于对照组(P<0.05);实验组椎动脉在术
后第 3个月内径均值明显低于对照组(P<0.05)。 这可能是由
于颈椎退变后,椎动脉遭受压迫或刺激,内膜受到损伤,致使
分泌抑制血管平滑肌细胞(VSMC)增殖的肝素样物质减少,
一氧化氮(NO),前列腺素(PGI)分泌减少,内皮素(ET)分泌增
加,导致血管收缩 [10],同时内皮细胞对 VSMC 的接触抑制丧
失, VSMC大量增殖,向内膜移行,新生内膜增厚,管腔狭窄[11]。
[参考文献]
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(收稿日期:2010-08-18)
(上接第 6页)
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