全 文 ：现代药物与临床 Drugs & Clinic 第 29 卷 第 2 期 2014 年 2 月

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HPLC 法测定茯苓皮中松苓新酸
闫雪生 1，赵许杰 2，韩媛媛 2
1. 山东省中医药研究院，山东 济南 250014
2. 山东中医药大学，山东 济南 250355
摘 要：目的 建立茯苓皮中松苓新酸的 HPLC 测定方法。方法 采用高效液相色谱法，Lichrospher C18色谱柱（200 mm×4.6
mm，5 μm），流动相为乙腈–0.5%磷酸水溶液（80∶20），检测波长为 242 nm，体积流量为 1.0 mL/min，柱温为 30 ℃，进
样量为 10 μL。结果 松苓新酸在 0.142 5～2.280 0 μg 与峰面积呈良好的线性关系（r=0.999 3），平均回收率为 101.83%，RSD
值为 1.45%（n=6）。结论 该方法操作简便，稳定可行，重复性好，可用于茯苓皮中松苓新酸的测定。
关键词：茯苓皮；三萜类；松苓新酸；高效液相色谱
中图分类号：R286.02 文献标志码：A 文章编号：1674 - 5515(2014)02 - 0166 - 03
DOI:10.7501/j.issn.1674-5515.2014.02.014
Determination of dehydrotrametenolic acid in peels of Poria cocos by HPLC
YAN Xue-sheng1, ZHAO Xu-jie2, Han Yuan-yuan2
1. Shandong Academy of Chinese Medicine, Jinan 250014, China
2. Shandong University of Traditional Chinese Medicine, Jinan 250355, China
Abstract: Objective To establish an HPLC method for the determination of dehydrotrametenolic acid in the peels of Poria cocos.
Methods HPLC was carried out on a Lichrospher C18 column (200 mm×4.6 mm, 5 μm) with acetonitrile-0.5% phosphoric acid
(80∶20) as mobile phase. The detection wavelength was set at 242 nm. The injection volume was 10 μL at the flow rate of 1.0
mL/min. The column temperature was at 30 ℃. Results The calibration curve was linear over the range of 0.142 5—2.280 0 μg
(r=0.999 3) for dehydrotrametenolic acid. The average recovery rate was 101.83% with RSD value at 1.45% (n=6). Conclusion The
established method is rapid, sensitive, and accurate, and could be used for the determination of dehydrotrametenolic acid in the peels of
P. cocos.
Key words: peels of Poria cocos; triterpenes; dehydrotrametenolic acid; HPLC

茯苓皮为多孔菌科真菌茯苓 Poria cocos
(Schw.) Wolf.菌核的干燥外皮。味甘、淡，性平，
归肺、脾、肾经，具有利水消肿的作用[1]。茯苓皮
中主要有效成分为三萜类，研究发现茯苓皮中的三
萜类具有抗氧化[2]、抑菌[3]等作用。但是，目前有
关茯苓中三萜类成分分析及质量评价的文献报道比
较少，为了更好地控制茯苓皮的质量，本实验采用
HPLC 法对茯苓皮中松苓新酸进行测定。
1 仪器与试药
BP211D 赛多利斯电子天平（德国赛多利斯股份
有限公司）；Waters 高效液相色谱仪包括 Waters 600
泵，996 二极管阵列检测器，Empower 色谱工作站（美
国 Waters 公司）；HH—4 数显电子恒温水浴锅（江
苏金坛市晶玻实验仪器厂）。
松苓新酸对照品（山东省中药新型制剂工程中
心制备，质量分数 98.0%）；茯苓皮药材分别来自安
徽、云南、山东（批号分别为 130415、130313、
130322），经山东省中医药研究院林慧彬研究员鉴定
为茯苓 Poria cocos (Schw.) Wolf.的干燥外皮；乙腈、
甲醇（色谱纯，美国 DNK 公司）；磷酸（色谱纯，
天津市科密欧化学试剂有限公司）；蒸馏水。
2 方法与结果
2.1 色谱条件
Lichrospher C18 色谱柱（200 mm×4.6 mm，5

收稿日期：2013-09-13
作者简介：闫雪生（1964—），男，研究员，研究方向为中药质量控制及新制剂研究。Tel: (0531)82948006 E-mail: tcmyxs@126.com
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μm），流动相为乙腈–0.5%磷酸水溶液（80∶20），
检测波长为 242 nm，体积流量为 1.0 mL/min，柱温
为 30 ℃，进样量为 10 μL。
2.2 对照品溶液的制备
精密称取松苓新酸对照品 2.28 mg，置于 10 mL
量瓶中，甲醇溶解并稀释至刻度，得 228 μg/mL 的
松苓新酸对照品溶液，备用。
2.3 供试品溶液的制备
取茯苓皮粗粉约 1.0 g，精密加入甲醇 50 mL，
称定质量，加热回流 1 h，放冷，再称定质量，用甲
醇补足减失的质量，摇匀，滤过。精密量取续滤液
2 mL，蒸去溶剂，转移至 10 mL 量瓶中，加甲醇稀
释至刻度，摇匀，0.45 μm 的微孔滤膜滤过，取续
滤液，即得。
2.4 专属性试验
将松苓新酸对照品溶液和茯苓皮供试品溶液按
照上述色谱条件分别进样，结果见图 1。供试品色
谱图中，在松苓新酸对照品色谱峰相应的位置上可
见对应的色谱峰。

*-松苓新酸
*- dehydrotrametenolic acid
图 1 松苓新酸对照品（A）和茯苓皮（B）的 HPLC 色谱图
Fig. 1 HPLC of dehydrotrametenolic acid reference
substance (A) and peels of P. cocos (B)
2.5 方法学考察
2.5.1 线性关系考察 分别精密吸取 228 μg/mL 松
苓新酸对照品溶液适量置量瓶中，用甲醇稀释至刻
度，制成 14.25、28.50、57.00、114.00、228.00 μg/mL
松苓新酸对照品溶液。上述色谱条件下分别进样
10 μL，测定峰面积值。以进样质量为横坐标，松
苓新酸峰面积积分值为纵坐标，绘制标准曲线，得
回归方程 Y＝232 126 8 X−144 703（r＝0.999 3），结
果表明松苓新酸在 0.142 5～2.280 0 μg 与峰面积呈
良好的线性关系。
2.5.2 精密度试验 取批号 130415 样品制备的供
试品溶液，在上述色谱条件下，连续进样 6 次，测
定松苓新酸峰面积，计算得其 RSD 值为 0.53%。
2.5.3 稳定性试验 取批号 130415 样品制备的供
试品溶液，分别于 0、2、4、8、12、24 h 进样，测
定松苓新酸峰面积，计算得其 RSD 值为 1.72%
（n=6），表明供试品溶液在 24 h 内稳定。
2.5.4 重复性试验 取批号 130415 的茯苓皮粗粉约
1 g，精密称定，平行 6 份，制备供试品溶液。按照
上述色谱条件，进样 10 μL，测定峰面积，计算各样
品中松苓新酸的质量分数，结果其 RSD 值为 1.22 %
（n=6）。
2.5.5 回收率试验 取批号 130415 的茯苓皮粗粉约
0.5 g，精密称定，平行 6 份，加入 228 μg/mL 对照品
溶液 27 mL，精密加入甲醇补足 50 mL，称定质量，
加热回流 1 h，放冷，再称定质量，用甲醇补足减失
的质量，摇匀，滤过。精密量取续滤液 2 mL，蒸发
溶剂，转移至 2 mL 量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇
匀，用 0.45 μm 的微孔滤膜滤过，取续滤液，测定，
并计算得松苓新酸的平均回收率为 101.83%，RSD 值
为 1.45%（n=6）。
2.6 样品测定
取不同产地的茯苓皮样品，制备供试品溶液，
进样测定，外标法计算茯苓皮中松苓新酸的质量分
数，结果见表 1。
表 1 不同产地茯苓皮中松苓新酸的测定结果（n=2）
Table 1 Determination of dehydrotrametenolic acid in
peels of P. cocos from different habitats (n=2)
批 号 松苓新酸/%
130415 1.23
130313 1.27
130322 0.65

测定结果表明，不同产地茯苓皮中松苓新酸的
质量分数以云南茯苓皮中最高，安徽次之，山东的
较低。说明不同地区的茯苓皮药材中松苓新酸的差
异很大。

0 5 10 15 20 25 30
B
*
A
t /min
*
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3 讨论
3.1 提取条件的选择
本实验考察了 95%乙醇及甲醇的提取效果，结
果表明甲醇的提取效果明显优于乙醇；进一步实验，
以甲醇为溶剂分别加热回流提取 0.5、1、1.5、2 h，
结果发现提取时间对测定结果影响的差异无显著
性。为了节省时间，保证提取完全，故选择提取时
间为 1 h。
3.2 色谱条件的选择
本实验通过结合其他茯苓三萜类成分测定的相
关文献报道[4-7]，经选择优化，确定乙腈–0.5%磷酸
水溶液为流动相，其比例为 80∶20。
本研究建立了茯苓皮药材中三萜类成分松苓新
酸的测定方法，线性关系及重复性良好，方法稳定，
可作为茯苓皮中松苓新酸测定的方法。
参考文献
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