全 文 :收稿日期:2008-02-11
作者简介:娜吾热克孜·亚库甫(1960-),女 ,维吾尔族 ,副教授 ,
理学学士 ,从事分析化学教学工作。
细穗柽柳花中总黄酮的提取及含量测定
娜吾热克孜·亚库甫
(新疆喀什师范学院生命与环境科学系 ,新疆 喀什 844007)
摘要:以芦丁为对照品 ,确定了以 70%乙醇为溶剂为柽柳植物中总黄酮的最佳提取条件 , 在此条件下总黄酮
的得率为 1.96%。
关键词:柽柳花;黄酮;芦丁
中图分类号:R282.71 文献标识码:B 文章编号:1005-5320(2008)04-0069-01
柽柳(Tamari x chinensis Lour)属植物是干旱区 、半干旱
区的大面积沙荒地和盐碱化土地上广泛分布的一类重要灌
木植物 ,灌木或小乔木 ,枝条细而下垂 ,叶鳞片状细小 。本植
物嫩枝叶入药 ,称西河柳 ,能疏风解表 、解毒利尿 、祛风湿 。
柽柳以其独特的生物 、生态学特征和重要的生态 、经济作用
已经引起了人们的重视[ 1 , 2] 。黄酮类化合物是植物中分布最
广的一类物质 ,是药用植物主要活性成分之一 ,具有消除氧
自由基 、抗氧化 、抗过敏 、抗炎 、抗菌 、抗突变 、抗肿瘤 、保肝雌
激素样作用 、泻下 、保护心脑血管系统和抗病毒以及杀虫等
广谱的生理活性 。近年来随研究方法和技术的不断提高 ,发
现了许多新的黄酮类化合物及其生理作用 ,特别是抗自由基
及抗癌 、防癌的作用 ,使黄酮类化合物的研究进入了一个新
的阶段[ 3] 。
1 材料与方法
1.1 材 料
柽柳花(来自新疆喀什地区)。
1.2 试剂与仪器
标准品芦丁(上海化学试剂公司),试剂均为分析纯 ,
95%的无水乙醇 ,UV -754型紫外分光光度计(上海仪器分
析厂)。
1.3 方 法
1.3.1 黄酮的定性分析 柽柳花中含有黄酮类化合物[ 3 , 4] 。
1.3.2 最大吸收波长的选择 70%的乙醇为溶剂 ,以硝酸
铝为显色剂 ,分别作柽柳及标准品芦丁的吸收曲线 ,结果表
明在 510 nm处有强吸收 ,故选择 510 nm为测定波长 。
1.3.3 对照品溶液的制备 准确称取芦丁(120℃干燥至恒
重)10 mg于 50 ml烧杯中 ,用 70%的乙醇溶液溶解后转移到
100 ml容量瓶内 ,定容至刻度 。
1.3.4 绘制标准曲线 将芦丁溶液用 70%的乙醇稀释成
0.0 、5.0 、10 、15 、20 、25 、30 、35 、40 、45 、50 μg/ml ,各吸取 1 ml
于试管中 ,加 70%乙醇 1 ml ,各加入 5%的亚硝酸钠溶液 0.3
ml ,混匀 ,放置 6 min后 ,加 10%的硝酸铝溶液 0.3 ml ,摇匀 ,
放置 6 min ,再加 4%的氢氧化钠溶液 2 ml ,摇匀 ,放置 10
min后于分光光度法在λ=510 nm处以溶剂为空白测定吸光
度 ,以吸光度 A 为纵坐标 ,浓度 C 为横坐标 , 绘制标准曲
线[ 3] 。把实验数据线性拟核 ,得芦丁浓度 C与吸光度 A的关
系曲线的回归方程式:A=0.0025C-0.0031 ,相关系数 r =
0.9989 ,所以本检测方法中芦丁浓度与吸光度呈良好的线性
关系 。
1.3.5 样品制备 取适量药材样品 , 95 ~ 105℃干燥 ,用研
钵研磨为细粉 , 干燥至恒重 ,备用 。准确称取 1g 柽柳花粉
末 ,加入 60 ml 70%的乙醇溶液 ,浸泡 48 h ,待黄酮类化合物
充分溶出后转移到 100 ml容量瓶中 ,定容至刻度[ 3] ,在 510
nm 处测定其吸光度 。
2 结 果
2.1 分别稀释 5 、10 、15倍的吸光度 ,比色结果表明 ,只有稀
释 10倍时与标准曲线的线性范围相符合 ,所以选用稀释 10
倍时的吸光度 ,计算得柽柳花中总黄酮的含量为 1.96%。
2.2 加样回收率的测定 取标准样溶液 ,加芦丁 0.6 mg ,其
它步骤与标准曲线制作相同 ,测定吸光度 , 平均回收率为
95%~ 100%。
2.3 稳定性试验 取样品溶液 ,每隔一定时间测定一次吸
光度 ,结果表明 ,从加显色剂开始 1.5 h内测定 ,其吸光度基
本保持稳定 ,但随着时间的延长 ,不论是样品还是标准品加
显色剂后溶液逐渐混浊 ,吸光度增大 ,最后导致沉淀产生 。
3 小 结
在总黄酮测定过程中应很好的掌握时间 ,否则会产生较
大的误差 。黄酮类化合物广泛存在于自然界 ,是一类重要的
天然有机化合物 。黄酮类化合物的种类和数量较多 ,故具有
多方面生理活性 ,例如 ,一部分具有能维持血管正常渗透压 ,
一部分具有止咳祛痰作用和抗菌消炎作用 ,另一部分有治疗
肝炎 、肝硬化和护肝作用[ 5 , 6] 。因此 ,黄酮类是维吾尔医药或
中药中值得注意的一类成分 。
参考文献:
[1] 新疆维吾尔自治区革命委员会卫生局.新疆中草药(维
文), 1973.
[ 2] 米吉提·胡达拜尔地.新疆高等植物检索表[ M ] .乌鲁木
齐:新疆大学出版社 ,2000.
[3] 娜吾热克孜·亚库甫.石榴花中总黄酮含量的测定[ J] .
喀什师范学院学报(维文),2005 , 6:44-46.
[ 4] 毛丽珍.蜂交口服液中黄酮类化合物的测定[ J] .中草
药 ,1998 , 29(7):453.
[ 5] 姜纪武.比色法测定凤尾草中黄酮类化合物的含量[ J] .
中国药学杂志 ,1996 ,31(10):37.
[6] 杨宏建.天然药物化学 [ M ] .郑州:郑州大学出版社 ,
2004.
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第 25 卷Vo l.25 第 4 期No.4 微 量 元 素 与 健 康 研 究S tudies of T race Elements and Health 2008 年 7 月Jul. 2008