全 文 ：文章编号:1006-1126 (2004)03-0136-03
荔枝叶黄酮提取及其含量测试
作者简介:陈全斌 , 男 , 高级工程师 , 从事天然产品开发与研究。
陈全斌 , 黄绍军 , 义祥辉 , 阮　敏
(广西师范大学资源与环境学系 , 桂林　541004)
摘　要:采用沸水提取荔枝叶 , 水提取液经 D-101 大孔吸附树脂吸附富集 , 然后用 80%的乙醇洗脱 , 对荔树叶
中的总黄酮进行提取 、 精制;对提取出的黄酮进行水解 , 用高压液相色谱进行标准品对照分析 , 首次发现其黄
酮甙元为槲皮素和山奈酚 , 并利用 HPLC 检测其含量。试验表明叶中总黄酮含量为 0.49%。
关键词:荔枝叶;黄酮;提取;含量;甙元
中图分类号:S667.109　文献标识码:B
　　荔枝 (Li tchi chinensis)为无患子科 (Sapin-
daceac)[ 1]常绿乔木 , 在南 、 北回归线附近的国家
和地区均有栽培 。荔枝果肉是岭南佳果之一 , 适量
食用 , 有补脾 、 益肝 、 养血 、 悦颜之功效[ 3] 。荔
枝树根 (行力止痛 、 固肾涩精)、 树皮 (疏肝解郁 、
祛风健胃)、树枝 (治虚喘)、 叶 (解暑消滞 、收湿
剑疮)、花 (治喉痹肿痛)、 果壳 (治血崩)、 果核
(行气散结 、 祛寒止痛)均可药用[ 2 , 3] 。近十多年
来 , 荔枝的经济和药用价值逐渐受到国内外的关
注 , 有关其化学成分 、药理作用及临床应用的研究
有较大进展[ 3] 。
目前对荔枝的研究有很多 , 但大多是果实的保
鲜及荔枝核的研究利用 , 无人对荔枝叶的化学成分
及药理作用进行系统的研究 , 大量的荔枝叶没有得
以利用。黄酮类化合物广泛分布于植物界 , 近年来
黄酮类化合物日益引起人们的重视 。国内外已经发
现的黄酮类化合物有数千种 , 大多数具有显著生理
药理活性 , 对一些常见病多发病有重要的生理作
用[ 4] , 如有抗氧化作用和清除氧自由基作用;抗
癌 、防癌作用;用于对心血管 、 脑血管 、 动脉硬
化 、 高血压等疾病的治疗 , 有其他药物不能达到的
特殊疗效[ 5 , 6] , 因此 , 我们对荔枝叶中黄酮进行了
提取研究 。
1　实验部分
1.1　材料与试剂
荔枝叶:2003年秋采于广西陆川 。
D-101大孔吸附树脂 (天津富邦化工科技有
限公司)80%乙醇 (食用)、 盐酸 (A.R)、 甲醇
(A.R)、 磷酸 (A.R);二次蒸馏水。对照品槲皮
素及山奈酚 (中国药品生物制品检定所)。
1.2　仪器
RE-52A 型旋转蒸发仪 (上海亚生化仪器
厂)、 WS210S 型电子天平 (北京塞多利斯仪器系
统有限公司)。
P200Ⅱ型高压液相色谱仪 (大连依立特), 包
括 UV20Ⅱ紫外可变波长检测器 、 Echrom98 色谱
工作站;色谱柱:Hypersil C18 (5μm , 4.6 mm ×
250 mm)。
色谱条件:
流动相:V甲醇∶V水∶V磷酸=60∶40∶0.3;
流　速:1.0 mL/min;　检验波长:360nm;
灵敏度:0.005;　　柱　温:室温
1.3　荔枝叶黄酮提取
提取按下列工艺进行:
荔枝叶※煮沸 (三次)※过滤※合并滤液※吸
附※水洗至无色※75%乙醇洗脱※洗脱液干燥※粗
黄酮※无水乙醇溶解※过滤※干燥※精制黄酮 。
称取荔枝叶 100 g , 破碎 , 加 1 000 mL 蒸馏
水 , 煮沸 2 h , 冷却过滤 , 重复三次 , 合并滤液。
将滤液以 20 mL/min 的速度过 D-101大孔吸附树
脂柱 (4.0 cm×60 cm)。吸附完毕后 , 首先用蒸馏
水洗柱 , 至柱流液为无色 , 然后用 80%的乙醇洗
脱。洗脱液用旋转蒸发仪旋干 , 得到粗黄酮6.0 g ,
粗黄酮再经无水乙醇回流溶解 、 过滤 , 将滤液旋干
得精制黄酮 2.91 g 。
第 33 卷　第 3 期
2004 年 9 月 　　　　　　　　　　　　　
广 西 林 业 科 学
Guangxi Forestry Science
　　　　　　　　　　　　　　　Vol.33　No.3
Sep.2004
1.4　产品分析
1.4.1　标准溶液及样品制备
分别配制浓度为 0.97 mg/mL 的槲皮素和
1.12 mg/mL 的山奈酚标准溶液 ,然后按照 1∶1混
合得槲皮素 、山奈酚混合标样 。混合后槲皮素和山
奈酚的浓度分别为 0.485 、0.56 mg/mL。
准确称取上述精制黄酮 60.70 mg , 置于圆底
烧瓶 , 加入甲醇 30 mL 溶解 , 再加入盐酸 (1∶1)
10 mL , 水浴加热回流水解 1小时 , 冷却后 , 用甲
醇定容至 50 mL 得样品待测溶液。
1.4.2　定性分析
分别取混合标准样和样品待测溶液进样 , 色谱
图见图 1 、 图 2。
　　在上述色谱条件下标准液和样品得到充分的洗
脱和分离 , 样品两峰的保留时间分别与标样中槲皮
素和山奈酚的保留时间一致。
为了进一步确定样品是否含有槲皮素和山奈酚 ,
我们分别将槲皮素和山奈酚单一的标准溶液加入样品
中 , 用高压液相色谱分析 , 其谱图见图 3和图4。
137第 3 期　　　　　　　　　　陈全斌 , 黄绍军 , 义祥辉 , 等:荔枝叶黄酮提取及其含量测试
　　根据 HPLC 的保留时间定性原理 , 实验表明
荔枝叶含有黄酮甙 , 其甙元为槲皮素和山奈酚。
1.4.3　定量分析
1.4.3.1　标准曲线绘制
分别取混合标准溶液 2 、 4 、 6 、 8 、 10μL 进
样 , 测定槲皮素和山奈酚的质量 (μg)和峰面积
(mv.min)之间关系 , 其线性回归方程分别为:
槲皮素线性回归方程:y =97478.43 x +
34052.33　　r=0.9993;
山奈酚线性回归方程:y =128639.48 x +
45019.15　　　r=0.9996。
1.4.3.2　精密度试验
精确吸取标样溶液 10μL.重复进样 5次。
计算得槲皮素和山奈酚的 RSD (%)分别为
1.86%、 0.66% (n=5)。
1.4.3.3　样品测试
准确称取上述精制黄酮 60.70 mg , 置于圆底
烧瓶 , 加入甲醇 30 mL 溶解 , 再加入盐酸 (1:1)
10 mL , 水浴加热回流水解 1小时 , 冷却后 , 用甲
醇定容至 50 mL得样品待测溶液 。
准确吸取制得样品待测溶液 10 μL , 进样 , 测
定槲皮素 、山奈酚色谱峰面积积分值 , 以外标法计
算其含量 。
经计算 , 荔枝叶精制黄酮中 , 槲皮素含量为:
3.09%;山奈酚含量为:3.62%。
1.4.3.4　总黄酮含量计算
总黄酮含量计算按银杏提取物总黄酮甙含量计
算方法[ 7] :
荔枝叶精制黄酮中总黄酮甙含量=(槲皮素含
量+山奈酚含量)×2.51=16.85%。
按 2.4工艺得率计算:
荔枝叶中总黄酮的含量为:2.91%×16.85%
=0.49%
2　讨论
2.1　试验结果表明荔枝叶中含有黄酮类化合物 ,
其甙元是槲皮素和山奈酚。
2.2　荔枝叶精制黄酮中槲皮素含量为 3.09%;山
奈酚含量为 3.62%, 总黄酮甙含量 16.85%。荔枝
叶总黄酮含量为 0.49%。
2.3本实验的结果预示着荔枝叶具有含黄酮类化合
物的药用功能 , 具有较大的研究和开发价值。
参考文献
[ 1] 江苏新医学院.中药大辞典 [ M] .上海科学技术出版
社 , 1986.
[ 2] 中华人民共和国卫生部药典委员会编.中华人民共和
国药典 [ M] .广州:广东科技出版社—化学工业出版
社 , 1995.
[ 3] 杨燕.荔枝研究引文分析 [ J] .玉林师范学院学报
(自然科学), 2003 , 24 (4):80 ～ 82.
[ 4] 王忠凤 , 韩洪莉 , 刘瑛华.高效液相色谱测定黄酮类
物质研究进展 [ J] .西部粮油科技 , 2003 , (5):53 ～
55.
[ 5] 陆阳.葡萄中天然产物白藜芦醇的化学防癌活性[ J] .
中草药 , 1997 , 28 (5):314.
[ 6] 汪鲲.植物类黄酮提取物饲料添加剂的应用前景.北
京天 福 莱 生 物 科 技 有 限 公 司.http:// www .
achem.cn/3LUNWEN/M06.htm
[ 7] 中国国家药典委员会.中华人民共和国药典 [ M] .北
京:化学工业出版社 , 2000.
(上接第 166页) 　农村经济中的作用 , 推进信息
服务功能和社会化。针对科技成果转化率不高 , 科
技信息交流不畅 , 科研与生产脱节的现状 , 加快林
业科技信息化 , 建立林业科技信息网络服务体系 ,
有效地加强林业科研与生产的信息沟通 , 加快林业
科技成果的交流和推广。
3.2　加强林业信息资源的建设和开发利用
信息资源是信息服务工作的根本和基础 。围绕
信息需求多样化的实际 , 加强信息源和信息渠道的
开拓。信息资源采集和加工是一项长期的基础工
作 , 每天产生大量的信息需不断进行搜集处理 , 同
时又要对信息资源进行分析 、 加工和深层次开发 。
数据库的建设是信息资源开发的最实用的办法。紧
紧围绕重点工程建设 、 生态建设和可持续发展的需
要 , 有针对性地搜集国内林业新成果 、新技术 , 建
立各种专题项目库 , 如实用技术数据库 、 科技成果
数据库 , 在研项目数据库 、 信息资源动态数据库 、
服务于西部开发的退耕还林数据库等 , 对指导和推
动科技成果转化具有重要作用。
参考文献
[ 1] 徐春富.加强林业科技成果管理 , 加速科技成果转化
[ J] .科技成果纵横 , 2003 , (3):25～ 26.
[ 2] 王振国 , 胡晓梅.农业科技推广与农业信息服务[ J] .
图书馆理论与实践 , 2003 , (5):67 ～ 68.
[ 3] 许翠霞.林业信息化 , 政府推动力是关键 [ J] .中国
林业 , 2002 , 8 (13):36.
138 广 西 林 业 科 学　　　　　　　　　　　　　　　　　第 33 卷