全 文 ：中南药学 2014 年 3 月 第 12 卷 第 3 期　Central South Pharmacy. March 2014, Vol. 12 No. 3
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香樟叶不同溶剂提取物清除 DPPH自由基的研究
孙崇鲁，胡晓渝，张祺照（浙江医药高等专科学校，浙江 宁波 315100）
摘要：目的　研究香樟叶不同溶剂提取物清除 1，1-二苯基 -2-三硝基苯肼（DPPH）自由基的作用，筛选出香
樟叶清除自由基活性的有效部位。方法　采用系统溶剂法将香樟叶的乙醇提取物分成石油醚、三氯甲烷、乙酸
乙酯、正丁醇和水 5种溶剂提取物，采用 DPPH自由基体系法测定其抗氧化活性。结果　香樟叶的石油醚、三
氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇和水溶剂提取物对 DPPH的 IC50分别为 6.003 8、1.329 8、0.398 7、0.346 7、5.087 0
mg • mL－ 1。结论　香樟叶不同溶剂提取物均有抗氧化活性，其正丁醇提取物的抗氧化能力最强。
关键词：香樟叶；DPPH自由基；抗氧化活性
中图分类号：R965　　　　文献标识码：A　　　　文章编号：1672-2981(2014)03-0223-03
doi:10.7539/j.issn.1672-2981.2014.03.008
DPPH free radical scavenging activity of extracts from leaves of
Cinnamomum camphora with different solvents
SUN Chong-lu, HU Xiao-yu, ZHANG Qi-zhao (Zhejiang Pharmaceutical College, Ningbo Zhejiang 315100)
Abstract: Objective To study the DPPH free radical scavenging activity of extracts from leaves of Cinnamomum
camphora and screen the effective fraction in the radical scavenging capacity. Methods The alcohol extracts from
the leaves of Cinnamomum camphora were divided into 5 parts including petroleum ether part, trichloromethane
part, ethyl acetate part, n-butyl alcohol part and water part by systematic solvent method. The antioxidant activity of
the 5 parts was determined by free radical DPPH systematic method. Results IC50 of scavenging effect on free radi-
cal DPPH by the extracts from the petroleum ether part, trichloromethane part, the ethyl acetate part, the n-butyl part
and the water part of Cinnamomum camphora leaves was 6.003 8, 1.329 8, 0.398 7, 0.346 7 and 5.087 0 mg • mL－ 1,
respectively. Conclusion The 5 extracts from leaves of Cinnamomum camphora have antioxidant activity, and the ef-
fect of n-butyl alcohol extract is the strongest.
Key words: leaf of Cinnamomum camphora; DPPH free radical; antioxidant activity

基金项目：浙江医药高等专科学校校级资助项目（No.KZXZ2011010）。
作者简介：孙崇鲁，男，硕士研究生，实验师，主要从事天然产物分离纯化研究，Tel：（0574）88222743。
香樟系樟科樟属，为亚热带常绿乔木植物，是我国
亚热带绿阔叶林的主要树种之一，属药用植物 [1-2]。香樟
具有抗血栓、动脉硬化、肿瘤、氧化衰老等作用，民间
主要用于治疗风湿痹痛、水火烫伤、疮疡肿毒、疥癣皮
肤瘙痒、毒虫咬伤等 [3]。目前，国内外对植物提取物的
抗氧化作用的研究很多 [4-5]，主要因为天然抗氧化剂比人
工合成的抗氧化剂安全。我国植物资源丰富，原料易得，
从中筛选提取天然抗氧化物质具有重要意义。
目前香樟叶的研究主要集中在香樟叶挥发油的各种
化学成分和提取加工工艺 [6-7]，对其抗氧化性的研究报道
较少。孙崇鲁等 [8]采用烘箱储存法测定了香樟叶片黄酮
提取物在猪油中抗氧化活性，叶辉等 [9]对贵州豹皮樟中
黄酮类提取物进行了抗氧化活性研究，结果均显示出明
显的抗氧化活性。本文采用 1，1-二苯基 -2-三硝基苯肼
（DPPH）自由基体系法，系统测定了香樟叶不同极性的
溶剂提取物的抗氧化能力，比较出不同极性提取物的抗
氧化能力的大小，筛选出香樟叶清除 DPPH自由基的有
效部位，旨在为香樟叶的提取和香樟叶综合开发利用提
供理论参考。
1 材料
1.1 试药
香樟叶采自于浙江医药高等专科学校校内，由中南
林业科技大学黄克瀛教授鉴定为香樟叶，阴干、粉碎后
备用；DPPH自由基（C18H12N5O6，相对分子质量 394.3，
纯度 97%，日本东京化成工业株式会社）；石油醚、氯仿、
乙酸乙酯、正丁醇、95%乙醇均为分析纯。
1.2 仪器
UV-1240紫外可见分光光度计（日本岛津公司）；
LABOROTA 4000旋转蒸发仪（德国海道夫公司）；数
显恒温水浴锅（郑州长城科工贸有限公司）；超声波清
洗器（Sigma仪器有限公司）；AL204型万分之一电子
天平（梅特勒托利多仪器有限公司）。
Central South Pharmacy. March 2014, Vol. 12 No.3　中南药学 2014 年 3 月 第 12 卷 第 3 期
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2 方法与结果
2.1 DPPH标准曲线的制作
准确称取 DPPH 25 mg，用 95%的乙醇溶解并定容到
100 mL的量瓶中，得到浓度为 0.25 mg • mL－1的标准溶液，
置冰箱中备用。分别精密量取 1、2、3、4、5、6 mL标准
溶液，用 95%的乙醇溶液定容到 50 mL，得到浓度为 5、
10、15、20、25、30 μg • mL－ 1的 DPPH溶液。分别测定
上述 DPPH溶液在 517 nm波长下的吸光度，并制作标准曲
线。可得到标准曲线的线性方程为A＝ 0.026 2C＋ 0.002 1，
r2＝ 0.999 7，线性范围：DPPH浓度 5～ 30 μg • mL－ 1。
2.2 香樟叶不同溶剂提取物的制备
称取 20 g的香樟叶粉末于 200 mL圆底烧瓶中，加
入 150 mL 95%的乙醇溶液，置于 60 ℃水浴中加热提取
2 h，将提取物减压过滤，再重复 2次，减压浓缩得到香
樟叶的乙醇提取物，加水混悬，分别依次加入石油醚、
三氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇进行萃取，分别得到石油
醚提取物、三氯甲烷提取物、乙酸乙酯提取物、水饱和
正丁醇提取物和水提取物，挥干溶剂，称定浸膏重量，
得不同溶剂提取物的得率见表 1。以 95%的乙醇为溶剂
溶解各提取物，石油醚和水提取物定容于 50 mL的量瓶
中，三氯甲烷提取物定容于 250 mL量瓶中，乙酸乙酯和
正丁醇提取物定容于 1 000 mL的量瓶中，全部低温保存
备用。
5 10 15 20 25 30 35 40
0.4
0.1
0
0.2
0.3
t/min
图 1 样品与自由基 DPPH反应时间曲线
Fig 1 Response time curves of sample with DPPH free radical
0.5
0.6
0.7
表 1 香樟叶不同溶剂提取物的得率
Tab 1 Different solvent extract rates of leaves of
Cinnamomum camphora
溶剂
（solvent）
提取物重量
（weight of extract）/g
得率
（yield）/%
石油醚 1.38 6.90
三氯甲烷 0.65 3.25
乙酸乙酯 0.35 1.75
正丁醇 1.37 6.85
水 1.83 9.25
2.3 DPPH溶液稳定性试验
在 DPPH溶液中加入香樟叶乙醇提取液后，测定吸
光度（A）与时间（t）的变化关系见图 1。在最初 15 min
内吸光度值下降的较快；但在 15～ 25 min内，吸光度
值变化缓慢；25 min后吸光度值基本保持不变。故测
定时选择 DPPH与香樟叶不同溶剂提取液反应时间为
25 min较为合适。
2.4 清除 DPPH自由基活性的评估
DPPH自由基清除的测定方法参阅文献 [10-11]。分别量
取“2.2”项下不同溶剂提取液各 10、20、30、40、50、
60 μL，量取浓度为 25 μg • mL－ 1的 DPPH溶液至 2 mL
立即混匀，25 min后在 517 nm波长处进行吸光度测定。
清除率计算公式：
清除率（%）＝ [1－ A1/A0] ×100%
式中 A0为未加试样的 DPPH在 517 nm处的吸光度，
A1为抗氧化性物质与DPPH反应后在 517 nm处的吸光度。
2.5 清除 50% DPPH自由基时样品浓度（IC50）的计算方法
根据 DPPH清除率与香樟叶提物各组分的浓度，制
作两者的关系曲线，通过线性回归分析可以得到回归方
程，而根据回归方程式可以计算出 DPPH清除率为 50%
时香樟叶各组分的浓度，即 IC50值，IC50越小其清除自
由基能力越强。
3 结果
香樟叶不同溶剂提取物对 DPPH自由基清除率值的
测定结果见图 2。
由图 2可以看出，不同溶剂提取液对 DPPH自由基
图 2 香樟叶不同溶剂提取液浓度与 DPPH自由基清除率关系
Fig 2 Relation between different extract concentrations of Cinnamomum camphora leaves and DPPH free radical scavenging rate
A.石油醚提取液（ether extract）；B.三氯甲烷提取液（trichloromethane extract）；C.乙酸乙酯提取液（ethyl acetate extract）；D.正丁醇提取液（n-butyl
alcohol extract）；E.水提取液（water extract）。
0 2 4 6 8 10 12 14
A
相当于原材料浓度 mg • mL－ 1
D
PP
H
自
由
基
清
除
率
/%
10
20
30
40
50
60
70
80
90
0 0.5 1 1.5 2 2.5 3
B
相当于原材料浓度 mg • mL－ 1
D
PP
H
自
由
基
清
除
率
/%
10
20
30
40
50
60
70
80
90 C
相当于原材料浓度 mg • mL－ 1
D
PP
H
自
由
基
清
除
率
/%
10
20
30
40
50
60
70
80
D
相当于原材料浓度 mg • mL－ 1
D
PP
H
自
由
基
清
除
率
/%
10
20
30
40
50
60
70
80
90
0 2 4 6 8 10 12 14
E
相当于原材料浓度 mg • mL－ 1
D
PP
H
自
由
基
清
除
率
/%
10
20
30
40
50
60
70
80
90
100
0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6 0.7
0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6 0.7
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表 2 香樟叶提取物清除 DPPH自由基的回归方程
Tab 2 Regression equation of DPPH free radical scavenging of
extract from Cinnamomum camphora leaves
提取物
（extract）
回归方程
（regression equation） r
2
IC50
/mg • mL－ 1
石油醚 Y＝ 6.885X＋ 8.664 0.966 7 6.003 8
三氯甲烷 Y＝ 35.89X＋ 2.273 0.997 3 1.329 8
乙酸乙酯 Y＝ 117.6X＋ 3.131 0.993 7 0.398 7
水饱和正丁醇 Y＝ 132.9X＋ 3.909 0.992 9 0.346 7
水 Y＝ 8.132X＋ 8.634 0.960 6 5.087 0
都具有一定的清除活性。随着各组分加入量，即浓度的
增加，其对 DPPH自由基的清除能力增加，呈现明显的
剂量效应关系。由图 2得到各提取物清除 DPPH自由基
的回归方程，并且计算出香樟叶不同提取物的 IC50值，
见表 2。可以得出，香樟叶不同溶剂提取物对 DPPH自
由基均有一定的清除作用，其强弱顺序为：水饱和正丁
醇提取物＞乙酸乙酯提取物＞氯仿提取物＞水提取物＞
石油醚提取物，水饱和正丁醇提取物清除 DPPH自由基
效果最好，石油醚提取物清除DPPH自由基的效果最差。
4 讨论
香樟叶不同溶剂提取物对 DPPH自由基均有一定的清
除作用，其中水饱和正丁醇提取物清除 DPPH自由基效果
最好。作者在后续研究中对香樟叶正丁醇提取部分进行了
成分分析，发现香樟叶正丁醇提取物中含有大量不同种类
的黄酮类化合物。水饱和正丁醇提取物具有较强的抗氧化
活性可能与这些黄酮类化合物有关。为了更好的探讨香樟
叶在抗氧化方面的作用机制，作者将对分离得到的黄酮类
化合物进行单体抗氧化性研究，探讨其抗氧化活性的构效
关系，为更好的开发香樟叶奠定理论基础。

参考文献
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裸花紫珠提取物预防大鼠术后腹腔粘连的实验研究
颜冬兰，夏德艳，袁莉，朱丽，谷陟欣 * （九芝堂股份有限公司，长沙 410021）
摘要：目的　探讨裸花紫珠提取物抗大鼠术后腹腔粘连的作用。方法　将SD大鼠 60只，随机分为模型对照组，
玻璃酸钠（阳性药物）组，裸花紫珠低、中、高剂量组共 5组，采用纱布法进行造模。术后观察大鼠一般情况，
各组于术后 14 d观察粘连情况，采用 Phillips评分法对腹腔粘连进行分级。结果　各组分级评分与对照组比较，
裸花紫珠高、中、低剂量组和阳性药物组均能显著降低大鼠术后腹腔粘连（P＜ 0.05，P＜ 0.01），尤其以
裸花紫珠高剂量组和阳性药物组预防粘连作用最强。 结论　裸花紫珠提取物具有较好的抗术后腹腔粘连作用。
关键词： 裸花紫珠提取物；腹腔粘连；Phillips评分
中图分类号：R965　　　　文献标识码：A　　　　文章编号：1672-2981(2014)03-0225-03
doi:10.7539/j.issn.1672-2981.2014.03.009
Preventive effect of extract from Callicarpa nudifl ora on
postoperative peritoneal adhesion in rats

基金项目：国际科技合作项目（No.2006DFA33270）；湖南省科技计划项目（No.2012ZK4003）。
作者简介：颜冬兰，女，硕士研究生，主要从事中药的研究与开发，Tel/Fax：（0731）85506387，E-mail：sws@hnjzt.com * 通讯作者：
谷陟欣，男，硕士研究生，高级工程师，主要从事中药新药开发研究，Tel：（0731）85353897，E-mail：gzx@hnjzt.com