全 文 ：摘 要：对栽培胆木药材的性状进行鉴定，确立胆木最适种植环境和采收年限 .采集海南省10
个乡镇种植的胆木、五指山市水满乡不同株龄的胆木和野生胆木，利用显微鉴别、显色反应和薄层
鉴别鉴定药材性状，利用HPLC法测定异常春花苷内酰胺含量，分析不同产地、不同株龄的胆木中异
常春花苷内酰胺的含量差异 .结果显示：栽培胆木的药材性状、显微性状、药材粉末的显色反应、薄
层显色反应等均与野生药材相符；峰面积与异常春花苷内酰胺浓度的回归方程为Y = 73843X+
76394（R2 = 0.9999），来自 10个乡镇的胆木中异常春花苷内酰胺的质量百分比含量（%）为：南圣镇
1.355，水满乡 1.97，番阳镇 1.03，毛感镇2.052，什玲镇 2.097，响水镇 1.96，和平镇 2.453，乌什镇 1.86，
长征镇 1.26，红毛镇 2.015.种植于水满乡株龄 2～6年的胆木中异常春花苷内酰胺的含量分别为
（%）：0.472、0.876、1.690、1.936、1.783，而野生胆木异常春花苷内酰胺含量为1.679%.因此，环境对胆
木中异长春花苷内酰胺的积累有显著影响，种植时应选择适宜环境；株龄4年及其以的胆木质量达
到海南省地方标准，方可入药 .
关键词：胆木；异长春花苷内酰胺；质量标准；药材鉴定
中图分类号：R 284 文献标识码：A 文章编号：1674-4942（2016）03-0268-05
王德立 1，冯锦东 1，赖 潜 2
WANG Deli1，Feng Jindong1，Lai Qian2
栽培胆木的品质评价研究
Abstract：This research is to identify the Nauclea officinalis Pierre ex Pitard cultivated in plantion and make clear the opti⁃
mum environment for planting and the suitable harvest period. The material of Nauclea officinalis Pierre ex Pitard is collect⁃
ed in plantation in ten towns of four counties of Hainan province, and the materials with different ages are from Wuzhishan
county of Hainan province. The properties of medicine material are identified by the technologies of microholography, color
reaction and thin-layer chromatography. The contents of isovincoside lactone in medicinal materials are detected by HPLC to
differentiate between superior and inferior materials. The results of microholography, color reaction and thin-layer chromatog⁃
raphy of materials from plantation are the same to those of the wild; the equation is figured out according to the results of
peak area and the contents of isovincoside lactone. The isovincoside lactone mass concentrations in different materials from
ten townships are as follows: Nan Sheng 1.355%, Shui Man 1.97%, Fan Yang 1.030%, Mao Gan 2.052%, Shen Ling 2.097%,
Xiang Shui 1.96%, He Ping 2.453, Wu Shen 1.86%, Chang Zheng 1.26%, Hong Mao 2.015. The mass concentrations of iso⁃
vincoside lactone in materials with 2～6 ages are respectively 0.472%, 0.876%, 1.690%, 1.936% and 1.783%, and that in
wild material is 1.679%. The content of isovincoside lactone is affected remarkably by the environment, so this species is cul⁃
tivated in suitable plantation. The materials from the trees with 4 ages are up to the prescribed standard of Hai nan province.
Key words:Nauclea officinalis Pierre ex Pitard；isovincoside lactone；quality standard；identification of medicinal material
Identification and Quality Evaluation of
Nauclea officinalis Pierre ex Pitard Cultivated in Plantion
第29卷第3期 海南师范大学学报（自然科学版） Vol.29 No.3
2016年9月 Journal of Hainan Normal University（Natural Science） Sep.2016
（1.中国医学科学院药用植物研究所海南分所，海南 海口 571511；
2.海南制药厂有限公司，海南 五指山市 572200）
（1. Institute of Medicinal Plant Hainan Branch，Chinese Academy of Medical Sciences，Haikou 571511，China；
2. Hainan Pharmaceutical Factory，Ltd.，Wuzhishan 572200，China）
收稿日期:2016-05-08
基金项目:海南省中药现代化专项资金项目（2012ZY009，ZY201311）
胆木Nauclea officinalis Pierre ex Pitard为茜草科
乌檀属植物，又称熊胆树、乌檀、细叶黄棵木、黄羊
木，以干燥树干入药，树枝条、树皮也可供药用 .胆木
主产于海南、广东和广西，其中在海南主要分布于保
亭、琼中、五指山市等市县 .该植物是海南岛珍贵而
独特的黎药资源，为海南民间的常用药，也是著名的
南药[1].
现代研究表明胆木为一味常用消炎类中药，具
有清热解毒、消炎杀菌、消肿止痛等功效[2]，常用于治
疗急性黄疸、急性偏桃体炎、咽喉炎、泌尿系统感染、
肺炎、中耳炎等病 .胆木的消炎止痛作用与其所含的
成分有关，胆木树干中含多种生物碱，主要为吲哚生
物碱类物质[3]，如胆木碱甲（naucleficine I）、胆木碱乙
（naucleficine II）、胆木碱丙（naucleficine III）、胆木碱
丁（L-acetyl-β-carboline）、胆木碱戊（naucleidinal）、
胆木碱已（naucLefiline IV）、胆木碱庚（nauclecoside
V）、胆木碱辛（nauclecosidine VI）、胆木碱壬即喜果
甙（vincoside lactam），在众多生物碱类化合物中异常
春花苷内酰胺为重要活性成分，并成为品质评价的
指标性成分 [4]；还含有喹啉类生物碱，如 pumiloside
(66)和 3-epi-pumiloside (67)[5].此外还有三萜及其苷
类化合物 .
胆木主要用于生产胆木注射液和胆木浸膏片[6]，
胆木提取物是胆木注射液的主要成分，胆木注射液
是海南制药厂有限公司药物研究所研发的新一代植
物抗菌、抗病毒消炎药物，素有中药抗生素之称，因
此胆木注射液高新技术产业化改造具有长远的经济
效益和深远的社会效益 .随着注射液销量的迅速增
加，对胆木原料的需求亦迅速增加 .早期，胆木原料
主要来自野生，但由于砍伐不断加剧，加上植株需要
生长多年方可入药，种群更新较慢，因此野生资源逐
渐枯竭 .为解决资源短缺问题，海南制药厂有限公司
联合海南省多个乡镇农户开展了胆木规范化种植 .
在种植胆木过程中，进行了施肥、灌溉及其它基本的
农事操作，生长环境与野生条件相比差异显著，栽培
的胆木是否满足入药要求，其药材结构和品质与野
生资源差异性是否显著，何种环境条件及选择何种
生长年限的胆木更利于提高药材品质，均需明确 .基
于上述原因，本研究通过采集海南省不同地点和种
植不同生长年限的胆木，按照2010版中国药典方法
进行药材鉴定，利用HPLC法进行品质分析 .
1.1 材料
2014年 11月采集种植于海南制药厂有限公司
胆木生存基地中株龄 2、3、4、5、6年胆木树干，并在
五指山水满乡采集1份野生胆木材料；同月，在海南
十个乡镇（五指山市：南圣镇、番阳镇、水满乡；琼中
县红毛镇、和平镇、乌石镇及长征镇；保亭县毛感乡、
响水镇及什玲镇）胆木种植基地分别采集相似生长
年限的胆木植株10株，并将材料按种植地不同混合
后取2 kg，用于胆木质量研究 .野生材料来自2014年
10月份海南制药厂有限公司采购的野生胆木药材 .
凭证标本存于中国医学科学院药用植物研究所海南
分所，标本凭证号：2014DM0010.
1.2 仪器
SHIMADZU SPD-10A高效液相色谱仪，包括
UV-Vis检测器，LC- 10A输液泵，SHIMADZU C-
R7Ae pLus 积分仪；WondaSILTM- C18（4.6 × 150mm，
5um）色谱柱；电热恒温水浴锅（北京中兴伟业仪器
有限公司）；KQ-500DV型数控超声波清洗器（昆山
市超声仪器有限公司）；DHG-905SA型电热恒温鼓
风干燥箱（上海医用恒温设备厂）.
1.3 试剂
异常春花苷内酰胺对照品（经中国药品生物制
品检定所提供）；乙腈（高效液相色谱专用，江苏汉邦
科技有限公司）；甲醇（高效液相色谱专用，广东光华
化学厂）；磷酸（分析纯，广东光华化学厂）；超纯水
（自制）；其他试剂均为分析纯 .
2.1 药材性状观察及鉴别
2.1.1 根据中国药典2005版中药材性状鉴别方法鉴
定，包括显微鉴别、荧光鉴别、显色反应和成分定性
检测 .
2.1.1.1 显微鉴别
在体视镜和显微镜下观察胆木横切面，记录木
质结构和细胞排列等情况 .
2.1.1.2 荧光鉴别
本品粉末约3 g，加水40 mL，煮沸10 min，放冷，
滤过，滤液加醋酸乙酯10 mL振摇提取 .取醋酸乙酯
液，点于滤纸上，置紫外光灯（365 nm）下观察，加碱
液后荧光增强 .
2.1.1.3 显色反应
取鉴别2.1.1.2项下剩余的醋酸乙酯液，蒸干，残
渣加乙醇 2 mL使溶解，再加质量分数为 5%亚硝酸
钠溶液与质量分数为 10%硝酸铝溶液各 3滴及氢氧
化钠试液1 mL，观察溶液颜色 .
2 实验方法
1 材料、仪器及试剂
第3期 王德立等：栽培胆木的品质评价研究 269
2.1.1.4 成分定性检测
取本品粉末3 g，加水40 mL，加稀盐酸使成酸性
后，煮沸10 min，滤过 .取滤液分置三支试管中，每管
2 mL，一管中加硅钨酸试液 3滴，即产生黄色沉淀；
一管中加碘化汞钾试液3滴，即产生橙黄色沉淀；另
一管中加碘化铋钾试液3滴，观察产生沉淀情况 .
2.1.2 薄层鉴别
薄层色谱法：取胆木注射液 2 mL，加水 8 mL与
浓氨试液 0.5 mL，摇匀，用氯仿振摇提取 3次，每次
10 mL，合并氯仿液，蒸干，残渣加乙醇1 mL使溶解，
作为供试品溶液 .另取胆木对照药材 6 g，加水煎煮
30 min，滤过，滤液浓缩至 20 mL，加浓氨试液 0.5
mL，摇匀，用氯仿振摇提取 3次，每次 20 mL，合并氯
仿液，蒸干，残渣加乙醇1 mL使溶解，作为对照药材
溶液 .照薄层色谱法（中国药典 2010年版一部附录
Ⅵ B）实验，吸取上述两种溶液各10 μL，分别点于同
一硅胶G薄层板上，以 v（氯仿）∶v（甲醇∶v（醋酸乙
酯）= 8∶1∶3为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯
（365 nm）下检视 .
2.2 异常春花苷内酰胺的含量测定
2.2.1 色谱条件
以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈与
质量浓度0.1%磷酸溶液的体积比为30∶70的溶液为
流动相，检测波长为 226 nm，流速为 1.0 mL/min，柱
温室温，理论塔板数应不低于2000.
2.2.2 对照品溶液的制备
精密称取异长春花苷内酰胺对照品 0.0088 g于
25 mL容量瓶中，加入流动性超声溶解，并用流动相
稀释至刻度，摇匀，制成每 1 mL含异长春花苷内酰
胺0.352 mg.
2.2.3 线性关系考察
精密吸取异长春花苷内酰胺对照品溶液 0.00、
0.25、0.50、0.75、1.00、1.5 mL于10 mL容量瓶中，加流
动相制成标准系列，上述各溶液20 uL注入液相色谱
仪，分别以异长春花苷内酰胺对照品溶液的浓度X
（mg/L）与异长春花苷内酰胺峰面积Y进行线性回
归，以浓度X（mg/L）自变量，峰面积Y为因变量得标
准曲线方程Y = 73843x + 76394（R2 = 0.9999）.
2.2.4 精密度试验
取异长春花苷内酰胺对照品溶液配制成 35.2
mg/L的工作溶液，取上述溶液20 uL注入液相色谱仪
中，连续5次，测定峰面积，其RSD为1.25%.
2.2.5 稳定性试验
精密称取干燥粉碎的供试品 0.5 g，加入 70%的
乙醇溶液50 mL，回流提取40 min，放冷，用70%的乙
醇补足减失重量，混匀，静置，精密吸取上清液10 mL
于 50 mL容量瓶中用流动相定容至刻度，摇匀，即
得 .于 0、2、4、6、8、24、48 h分别上述溶液 20 uL注入
液相色谱仪中，测定异长春花苷内酰胺峰面积，供试
品48 h的RSD值为0.89%.
2.2.6 重复性试验
精密称取供试品约 0.5 g六份，各加入 70%的乙
醇溶液50 mL，回流提取40 min，放冷，用70%的乙醇
补足减失重量，混匀，静置，精密吸取上清液 10 mL
于 50 mL容量瓶中用流动相定容至刻度，摇匀，即
得 .分别上述溶液 20 uL注入液相色谱仪中，测定异
长春花苷内酰胺峰面积，RSD值为2.1%.
2.3 供试品溶液的制备方法
2.3.1 药材供试品溶液的制备方法考察
2.3.1.1 提取溶剂的考察
拟用回流法考察胆木药材的提取溶剂 .实验方
法：精密称取胆木药材粗粉 5份，每份 1.0 g，分别用
水及体积分数为 30％、50％、70％、100％的甲醇 40
mL回流提取0.5 h，滤过，滤液置50 mL量瓶中，用少
量相应溶剂分次洗涤容器和残渣，洗液滤入同一量
瓶中，加相应溶剂至刻度，摇匀，测定，结果发现70%
的甲醇提取效果较好 .
2.3.1.2 提取方法的考察
精密称取胆木药材粗粉2份，每份1.0 g，分别用
70％甲醇溶液40 mL超声和回流0.5 h，滤过，滤液置
50 mL量瓶中，用少量 70％甲醇溶液分次洗涤容器
和残渣，洗液滤入同一量瓶中，加70％甲醇溶液至刻
度，摇匀，测定，结果表明回流提取此超声效果较好 .
2.3.1.3 提取时间的考察
精密称取胆木药材粗粉3份，每份0.5 g，用体积
分数 70％甲醇溶液 40 mL分别回流 30、50、70 min，
过滤，滤液置 50mL量瓶中，用少量 70％甲醇溶液分
次洗涤容器和残渣，洗液滤入同一量瓶中，加70％甲
醇溶液至刻度，摇匀，测定，结果表明提取时间为 70
min，效果较佳 .
2.3.2 供试品溶液的制备
通过以上方法学考察得出供试品溶液的制备
为：精密称取干燥粉碎的供试品0.5 g，加入体积分数
70%的乙醇溶液50 mL，精密称定，回流提取70 min，
放冷，用体积分数70%的乙醇溶液补足减失重量，混
匀，静置，精密吸取上清液 10 mL于 50 mL容量瓶中
用流动相定容至刻度，摇匀，即得 .
270 海南师范大学学报（自然科学版） 2016年
3.1 药材性状观察与鉴别
3.1.1 胆木药材性状特征
本品为不规则的小块或片，黄色或棕黄色 .有的
带皮部，其外皮黄褐色，粗糙，易剥落 .皮部断面棕褐
色或棕黄色，纤维性 .质坚硬，无臭，味苦 .
3.1.2 胆木药材鉴别
3.1.2.1 显微鉴别
皮层较窄，由 4～6列类长方形细胞构成，排列
紧密，细胞直径 14.2～33.5 μm；韧皮部细胞皱缩成
不规则形状；形成层成环，木质部发达，由导管、木纤
维、木薄壁细胞组成，射线较密，放射状，导管多单个
散在，少数成群，直径50～210 μm.射线细胞1~2列，
长方形，木化，具纹孔 .木薄壁细胞为外层的基本组
织，内层的纤维群中亦有少数，壁木化，具纹孔 .
粉末金黄色或淡黄色 . 导管形状多样，大小不
一，长 180～600 μm，宽 40～220 μm，均为具缘纹孔
导管；纤维众多，有的两端渐尖，有的一端稍钝，长
560～1240 μm，宽 25～44 μm，壁厚薄不一，纹孔斜
向裂隙状，少数细胞孔沟较宽；木薄壁细胞形状多
样，有窄长方形、类三角形、纺锤形等；石细胞呈多角
形，长30～50 μm，宽15～50 μm.
3.1.2.2 荧光鉴别
显蓝紫色荧光，加碱液后荧光增强 .
3.1.2.3 显色反应
按2.1.2.3要求处理后溶液显橙红色 .
3.1.2.4 成分定性鉴定
按2.1.2.4要求处理后产生棕褐色沉淀 .
3.1.3 薄层鉴别
供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置
上，显相同颜色的荧光斑点 .
3.2 异常春花苷内酰胺的含量测定结果
3.2.1 不同产地胆木中异常春花苷内酰胺的含量测
定结果
不同产地相似株龄的胆木中异常春花苷内酰胺
的含量见表1，五指山市水满乡所产胆木中异常春花
苷内酯含量为 1.97%，显著高于本市其他乡镇材料 .
保亭县什玲镇胆木中该成分含量最高为2.11%，其次
为毛感乡，2.056%.琼中县和平镇胆木中该成分含量
2.45%，显著高于本县其它乡镇材料 .
3.2.2 不同株龄栽培胆木与野生胆木中异常春花苷
内酰胺的含量比较
种植 2年至 5年的胆木中异常春花苷内酯酰胺
的质量分数逐年升高，由0.463%升高至1.936%，第6
年和第 5年该成分含量差异不显著，且显著高于野
生胆木（见表2）.
1：胆木对照药材；2-4：胆木注射液(100101，100102，100201)
图1 胆木注射液薄层色谱图
Fig.1 The chromatography TLC of injection and
standard material of Nauclea officinalis Pierre ex Pitard
1.354±0.052 de
1.971±0.067 cd
1.031±0.031 e
2.056±0.033 b
2.110±0.043 b
1.967±0.078 cd
1.862±0.020 de
1.269±0.029 e
2.014±0.06 c
2.455±0.036 a
南圣镇
水满乡
番阳镇
毛感乡
什玲镇
响水镇
乌石镇
长征镇
红毛镇
和平镇
五指山市
保亭县
琼中县
所属辖区 产地 （%）
注 a，b，c，表示在0.05水平有显著差异
表1 10批胆木药材中异常春花苷内酰胺含量测定结果
Tab.1 The contents of isovincoside lactone in
10 samples of nauclea officinalis
种植年限 异长春花苷内酰胺含量（%）
0.463±0.021c
0.876±0.039b
1.690±0.075ab
1.936±0.087a
1.783±0.068a
1.679±0.051ab
2
3
4
5
6
野生
表2 不同株龄栽培胆木与野生胆木中异长春花
苷内酰胺含量比较
Tab.2 A comparative study of the Isovinciside
lactone of cultivated and wild nauclea officinalis
in different growth age
注 野生材料株龄约 10年；a，b，c表示在 0.05水
平有显著差异
3 结果
1 2 3 4
第3期 王德立等：栽培胆木的品质评价研究 271
胆木为特色南药，海南当地居民以干燥树干和
树枝为原料治疗呼吸道炎症 .但由于胆木野生资源
逐渐枯竭，目前生产胆木注射液的原料主要来自栽培
胆木 . 据初步统计在海南胆木种植面积约 666.67
hm2，种植年限1～6年不等 .为确保栽培胆木和野生
胆木在药材性状和品质方面具有一致性，有必要开
展性状鉴定 .本研究通过利用《中国药典》中实验方
法进行性状描述、显微鉴别、显色反应及薄层鉴别
（见图1），结果发现栽培胆木和野生胆木在性状方面
无显著差异 .由此可见在种植时只要选择指定品种，
按照常规的种植方式，生产出原料在性状方面均符
合要求 .
胆木中含有多种化学成分，只分析其生物碱含
量不够严密，选择正确的活性成分对胆木品质评价
至关重要 .有关胆木化学成分的研究已较多，陈家全
等[8]从胆木中分离出 6个化学成分，朱粉霞等[9]从胆
木中分离出 9个化合物，但并未指出可以用于质量
评价的指标性成分 .李海龙等[10]研究了胆木药材的
指纹图谱，为胆木质量标准的制订提供了参考 .有研
究指出胆木中芬酸和生物碱类物质，如中原儿茶酸、
短小舌根草苷、3-表短小舌根草苷及异长春花苷内
酰胺的可用于质量评价[11].张俊清[12]等也以异长春花
苷内酰胺为指标成分比较胆木植株茎、皮和叶的品
质差异 .本研究总结前人研究经验，以异长春花苷内
酰胺为指标成分进行品质比较和评价 .且通过HPLC
方法学考察，该成分可以被准确测定，可以用于胆木
品质评价 .在确定评价指标和测定方法的基础上，研
究了不同产地和不同生长年限对胆木品质的影响 .
在尚未实施胆木规模化种植之前，其原料来自
全国各地的野生胆木，特别是海南生产的胆木注射
液主要原料来自海南全省，以五指山、保亭、琼中、白
沙等市县为主 .这些地区环境差异明显，在土质、降
雨量、光照强度、大气温湿度方面均有较大差异，这
可能对药材品种有影响，为了寻找较为合适的种植
环境，本研究测定了海南主要分布种植的胆木药材
品质 .结果发现不同市县种植的胆木品质差异较大，
即使同一市县不同乡镇种植的胆木品质差异也极显
著（表1），以琼中和平镇胆木品质最好，高达2.455%，
其次是保亭县什玲镇和毛感乡分别为 2.11%和
2.056%，因此琼中县和平镇、保亭县什玲镇和毛感乡
生态环境更适宜种植胆木 .
一般对野生药材难以明确其株龄，对其药物活
性成分的积累动态难以弄清，这可能会造成原料浪
费和资源破坏 .本研究通过测定种植于五指山市2~
6年株龄的胆木茎干中异长春花苷内酰胺含量，结果
发现种植4年的胆木中该成分含量已达1.69%，已符
合海南省地方标准 1.0%[13]，即达到采收要求（表 2），
但是否具有最好的收益还需要结合胆木的生物量积
累情况进行综合分析 .
参考文献:
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图2 异常春花苷内酰胺标准品HPLC图谱
Fig.2 HPLC chromatography of
Isovinciside lactone standard substance
图3 胆木药材HPLC图谱
Fig.3 HPLC chromatography of Nauclea officinalis
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责任编辑：刘 红
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