全 文 ：人参研究 GINSENG RESEARCH 2011 年第 4 期
不同采收期辽东丁香枝中黄酮和多糖含量的比较研究
韩佳宏 张 晶＊ 杨文华 周姗姗 梁彩霞 周 娇 陈秋莲 王 红
（吉林农业大学中药材学院·吉林 长春·130118）
摘 要： 目的 测定不同采收期辽东丁香枝中黄酮及多糖的含量，对辽东丁香枝的质量进行综合评价。 方
法 采用比色法测定黄酮及多糖含量，以芦丁和葡萄糖为对照品，在 500nm波长下测定吸光度，测
定黄酮的含量，在 620nm波长下测定总多糖吸光度，分别测定可溶性多糖和粗多糖的含量。 结果
在 0.15mg～1.5mg 范围内，芦丁质量与吸光度 A 值线性关系良好，R2=0.9999；在 0.04mg～0.20mg
范围内， 葡萄糖质量与吸光度 A 值线性关系良好 R2=0.9974。 黄酮在 3 月 25 日含量最高为
8.52%，总多糖在 9月 4日含量最高为 12.67%。结论 通过 T-TEXT比较不同采收期辽东丁香枝中
的总黄酮和多糖含量，差异显著，黄酮随着多糖的增加呈上升的趋势。 本方法简便、快速、可靠、适
合辽东丁香黄酮及多糖的含量测定。
关键词：辽东丁香；黄酮；多糖；比较研究
Comparative Studies on the flavonoids and polysaccharides from
branch of Syringa L.wolfi schneid.in different harvest
Han Jia-hong, Zhang-Jing＊，Wang Hong ,Yang Wen-hua,Zhou Shan-shan, Liang Cai-xia,Zhou Jiao, Chen Qiu-lian
（College of Chinese Medicinal Material, Jilin Agricultural University, ChangChun 130118）
Abstract: Purpose: To determine the contents of flavonoids and polysaccharides form branch of Syringa L.wolfi schneid. in different
harvest, and evaluates quality control the branch of Syringa L.wolfi schneid. Method: Determination of flavonoids and
polysaccharides by chromatometry. The reference standards are rutin and glucose, and determined contents of flavonoids at
500nm wavelength, and determined of total polysaccharides which content soluble polysaccharide and crude polysaccharide at
620nm wavelength?. Result: Rutin quality and value of the absorbance A has a good linear relationship within 0.15mg-1.5mg,
R2 = 0.9999; in the range of 0.04mg ~ 0.20mg of glucose and the absorbance value A has a good linear relationship, R2 =?
0.9974. Flavonoid content of the highest in the March 25 up to 8.52%, the total polysaccharide content in the September 4 up
to 12.67%. Conclusion: The differences of the polysacharides and total flavonoid in the branch of Syringa L.wolfi schneid. is
Significant difference at different growth stages when texted by T-TEXT . Polysaccharide increased with the flavonoids were
rising.This method is simple, fast, reliable and suitable for determination of flavonoids and polysaccharides.
Keyword: Syringa L.wolfi schneid.; flavonoids; polysaccharide; comparative study
辽东丁香（Syringa L.wolfi schneid.）为木樨科（Ole
aceae）丁香属（Syringa）植物 [1]。 在我国主要分布吉林
省至河北省, 喜光,多散生于林缘、溪流两岸、山谷平
地[2]，是城市绿化极好的观赏物种。 据研究表明，丁香
属植物具有抗菌消炎、抗病毒、降压、镇咳祛痰、保肝
利胆、退热和抗氧化等药理作用[3～10]。 但目前对辽东丁
香化学成分及药理作用的研究还没有开展。
研究表明，黄酮类化合物能防治心脑血管系统的
疾病和呼吸系统的疾病，具有抗炎抑菌，降血糖，抗氧
化，抗辐射，抗癌，抗肿瘤以及增强免疫能力等药理作
作者简介：韩佳宏(1988—)，女，在读硕士，主要从事天然产物化学成分研究。 E-mail：caienbo8251@163.com。
＊通讯作者：张晶(1971—)，女，教授，主要从事天然产物化学成分研究。
24
人参研究 GINSENG RESEARCH 2011 年第 4 期
用[11]。 自 20 世纪 60 年代以来，人们陆续发现多糖具
有更多的药理作用， 不仅可以作为广谱免疫促进剂，
具有免疫调节功能，还可以在抗肿瘤、抗病毒、抗炎、
降血糖、降血脂、抗辐射等方面具有广泛的药理作用
[12]。
为了更好地研究、开发和利用辽东丁香，本文对
辽东丁香枝中黄酮和多糖的含量进行分析研究，以综
合评价辽东丁香的质量。
1 材料、仪器与试剂
药材：药材采自吉林农业大学植物园，由吉林农
业大学园艺学院胡全德教授鉴定为木樨科(Oleaceae)
丁香属 (Syringa) 植物辽东丁香 （Syringa L.wolfi
schneid.）的枝。
仪器：T6 新世纪紫外可见分光光度计（北京普析
通用仪器有限责任公司）；KQ-250DB 型超声波清洗
器（昆山市超声仪器有限公司）；百灵 LAI14 型电子天
平(110g/0.0001g，常熟市百灵天平仪器有限公司)。
药品：芦丁标准品；无水乙醇（分析纯）；亚硝酸
钠；硝酸铝；氢氧化钠；葡萄糖标准品；蒽酮；乙醇等均
为分析纯。
2实验方法与结果
2.1 供试液的制备
2.1.1 标准品溶液的制备
2.1.1.1 芦丁标准品溶液的制备
将芦丁标准品于烘箱中 105℃恒重 6h，精密称取
30.00mg，80%乙醇 50mL 溶解后定容至 100mL 容量
瓶中，摇匀，备用。
2.1.1.2 葡萄糖标准液的制备
将葡萄糖于烘箱中 60℃烘 1h， 再逐渐升温至
105℃干燥至恒重。 精密称取 20.00mg，置 100mL容量
瓶中,用蒸馏水溶解并稀释至刻度，摇匀，备用。
2.1.2 样品待测液的制备
2.1.2.1 黄酮待测液的制备
精密称定干燥的辽东丁香的样品 (过 40 目筛)各
2.000g，置 50mL 具塞锥形瓶中,分别精密加入 75%乙
醇 30mL，30mL，30mL，密塞超声 30min(共 3 次)，合并
提取液，摇匀，过滤，转移至 100mL 容量瓶中定容，备
用。
2.1.2.2 可溶性多糖待测液的制备
精密称定干燥的辽东丁香样品 (过 40 目筛 )各
2.000g，置 50mL 具塞锥形瓶中,分别精密加入 75%乙
醇 30mL，30mL，30mL，密塞超声 30min(共 3 次)，合并
提取液，摇匀，过滤，转移至 100mL 容量瓶中定容，备
用。
2.1.2.3 粗多糖待测液的制备
将提取过可溶性多糖后的滤渣蒸干， 加 2％的盐
酸 30mL，置沸水浴中提取 lh，充分放冷，于 100mL 容
量瓶中滤过，重复提取 2 次，过滤，洗涤滤纸，以 2%
HCL定容至刻度，备用。
2.2 含量测定
2.2.1 标准曲线的绘制
2.2.1.1 黄酮标准曲线的绘制
分别精密量取芦丁标准品溶液 0.0、0.5、1.0、2.0、
3.0、4.0、5.0mL，分别移入 25mL 容量瓶中，分别加入
75%乙醇至 5mL， 加入质量分数为 5%的亚硝酸钠溶
液 1.0mL，摇匀，静置 6min；加入质量分数为 10%的硝
酸铝溶液 1.0mL，摇匀，静置 6min，加入质量分数为
4% 的氢氧化钠溶液 10mL， 再加体积分数为 75%的
乙醇至刻度，摇匀，放置 15min。 以 75%乙醇为空白对
照液，分别于 500nm波长处测定吸光度。 以吸光度值
（A）对质量(m)进行线性回归，将所得数据进行统计处
理，其回归方程为 y=0.5145x+0.0102﹙R2﹦0.9999﹚,结
果表明， 芦丁检测质量在 0.15~1.5mg 范围内线性关
系良好。
2.2.1.2 多糖标准曲线的制备
取 16支试管，除空白试液外，其余 5 组都做 3 次
平行实验，按表 1 加试剂，于 620nm 处测定吸光度，
记录数据，见表 1。
表 1 标准曲线试液的制备(单位: mL)
Table 1 Preparation of standard curve (mL)
以吸光度值（A）对质量(m)进行线性回归，将所得
数据进行统计处理， 其回归方程为 y=5.917x-0.0039
﹙R2＝0.9974﹚, 结果表明， 葡萄糖检测质量在 0.04~
0.20mg 范围内线性关系良好。
2.2.2 方法学考察
2.2.2.1 稳定性实验
取样品按样品溶液的制备方法分别制备黄酮和
多糖待测溶液， 每隔 10min 测一次吸光度， 记录在
60min内的吸光度值，计算 RSD值。得 RSD值分别为
1.32%和 1.11%。
2.2.2.2 精密度实验
韩佳宏等：不同采收期辽东丁香枝中黄酮和多糖含量的比较研究
试剂名称 0 1 2 3 4 5
葡萄糖标准液 0.0 0.2 0.4 0.6 0.8 1
蒸馏水 1.0 0.8 0.6 0.4 0.2 0.0
蒽酮－浓硫酸 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0
吸光度（A） 0.000 0.219 0.466 0.737 0.947 1.162
25
人参研究 GINSENG RESEARCH 2011 年第 4 期
(1)黄酮精密度实验：称取已知黄酮含量的辽东丁
香枝粉末 1g，按样品测定操作连续测 5 次，测得吸光
度并计算含量，RSD为 0.128%。
(2)多糖精密度实验：称取已知总多糖含量样品粉
末 1g，精密称定，按样品测定方法，连续测 5 次，测得
吸光度并计算含量，RSD为 0.206%。
2.2.2.3 回收率实验
(1)黄酮回收率实验：称取已知黄酮含量的样品
1g，5份， 置于磨口锥形瓶中分别加入 0.3mg/mL的芦
丁标准品溶液 30mL，按前面样品处理法提取，并按样
品测定项操作，计算黄酮含量和回收率，平均回收率
为 99.58%，RSD为 0.74%。
(2)多糖回收率实验：称取已知总多糖含量的样品
1g，5 份， 精密称定， 置于磨口锥形瓶中分别加入
0.2mg/mL 的葡萄糖对照品溶液 50mL，按前面样品处
理法提取，并按样品测定项操作，计算平均回收率为
101.25%，RSD为 0.182%。
2.2.3 样品的测定
2.2.3.1 黄酮的测定
分别吸取供试品液 1ml 于 25ml 容量瓶中, 再用
75%乙醇定容至刻度。 加入质量分数为 5%的亚硝酸
钠溶液 1.0mL，摇匀，静置 6min；加入质量分数为 10%
的硝酸铝溶液 1.0mL，摇匀，静置 6min，加入质量分数
为 4% 的氢氧化钠溶液 10mL， 再加体积分数为 75%
的乙醇至刻度，摇匀，放置 15min。 以 75%乙醇为空白
对照液， 分别于 500nm 波长处测定吸光度。 重复 3
次。 见表 1。
2.2.3.2 可溶性多糖的测定
各取可溶性多糖提取液 5mL，分别置于 25mL 容
量瓶中， 用 75％的乙醇定容至刻度， 混匀。 分别取
1.0mL 可溶性多糖提取液加入具塞试管中， 加入蒽
酮-浓硫酸试剂 5.0mL，混匀，重复 3 次，同时另取一
支具塞试管加 75％EtOH1.0ml，加入蒽酮-浓硫酸试剂
5.0mL，作为空白实验。 置沸水浴中加热 10min，冷却
至室温。 于 620nm处测定吸光度，记录数据。 见表 1。
2.2.3.3 粗多糖的测定
各取粗多糖提取液 2.5mL， 分别置于 25mL 容量
瓶中，用 2%的盐酸定容至刻度，混匀，分别取 1.0mL
粗多糖提取液加入具塞试管中， 再加入蒽酮-浓硫酸
试剂 5.0mL，混匀，重复 3 次，同时另取一支具塞试管
加入 2％的盐酸 1.0mL， 再加入蒽酮-浓硫酸试剂
5.0mL，混匀，作空白实验。 置沸水浴中加热 10min，冷
却至室温，于 620nm 处测定吸光度，记录实验数据，
见表 1。
表 1 辽东丁香枝样品中黄酮及多糖含量 （%）测
定结果
Tab. 1 measured results of flavonoids and
polysaccharides content (%)
In skin of Syringa Pubescens Turcz. samples
2.3 结果分析
实验数据采用 SPSS16.0进行分析。
2.3.1 描述统计量分析及 S-W 正态检验 （Tests of
Normality）
对不同采收期样品中黄酮及多糖含量进行描述统
计量分析，统计量包括平均值 (mean)和标准偏差 (std
deviation)。 标准偏差表示变量值的变异情况或离中趋
势，标准偏差越大，资料间的差异、离散程度均越大；标
准偏差小表示变异小，数值较集中。 Shapiro-Wilk正态
检验是将某一组观测量的累积分布函数 (即经验分布
函数)与理论正态分布函数相比较，以检验一个样本是
否来自正态分布的样本 ， 当双尾渐进显著性概率
[AsymP.sig.(2-tailed)]大于 0.05，则接受假设，即所检验
部位 采收日期 黄酮
可溶性
多糖（％）
粗多糖
（％）
总多糖
（％）
枝 09.03.19 4.41 4.70 3.77 8.47
枝 09.03.25 8.52 6.30 3.35 9.65
枝 09.04.01 5.64 6.25 2.84 9.09
枝 09.04.15 3.93 4.70 3.32 8.02
枝 09.05.06 1.68 6.30 2.87 9.17
枝 09.05.13 3.82 6.25 1.62 7.87
枝 09.05.21 5.15 3.29 1.38 4.67
枝 09.05.27 3.69 3.58 4.17 7.75
枝 09.06.02 1.82 2.32 2.21 4.53
枝 09.06.22 1.54 2.48 4.17 6.65
枝 09.07.02 1.73 2.23 5.20 7.43
枝 09.07.07 2.02 0.76 3.07 3.83
枝 09.09.01 2.37 1.88 4.94 6.82
枝 09.09.08 1.52 3.40 7.85 11.25
枝 09.09.16 4.11 5.48 6.04 11.52
枝 09.09.24 4.98 6.20 6.47 12.67
枝 09.09.30 1.99 4.49 6.10 10.59
枝 09.10.05 3.80 4.72 6.90 11.62
枝 09.10.12 7.09 7.30 4.98 12.28
枝 09.10.27 3.27 5.23 3.40 8.63
26
人参研究 GINSENG RESEARCH 2011 年第 4 期
样本服从于指定的分布。将样品中不同采收期的黄酮及
多糖含量的描述统计量分析及 S-W检验结果见表 2。
表 2 描述统计量分析及 S-W检验结果
Tab.2Results of descriptive statistics andTests ofNormality
Tests of Normality
a. Lilliefors Significance Correction
*. This is a lower bound of the true significance.
由表 2 可以看出，辽东丁香因采收期不同，黄酮
和多糖含量的 S-W 检验的显著性概率(Asmyp.sig.)均
大于 0.05，可以认为其总量均服从于正态分布。 各组
样本的标准偏差都很高，说明含量因采收期不同差异
较大。
2.3.2 T检验（T-test for Equality of Means）
为了判断不同时期辽东丁香中黄酮与多糖的含
量差别是否显著，我们需要进行 T 检验， T 检验结果
见表 3。
Kolmogorov-Smirnova Shapiro-Wilk
Statistic df Sig. Statistic df Sig.
黄酮 .150 20 .200* .901 20 .043
可溶性多糖 .139 20 .200* .950 20 .362
粗多糖 .130 20 .200* .969 20 .733
总多糖 .097 20 .200* .962 20 .588
表 3方差齐性检验及 T（T’）检验结果
Tab.6 Results of homogeneity of variance test and t-test for Equality of Means
One-Sample Test
Test Value = 0
95% Confidence Interval
of the Difference
t df Sig. (2-tailed) Mean Difference Lower Upper
黄酮 8.421 19 .000 3.65400000 2.7457862 4.5622138
可溶性多糖 10.793 19 .000 4.39455821 3.5423697 5.2467468
粗多糖 10.595 19 .000 4.23320659 3.3969398 5.0694734
总多糖 15.051 19 .000 8.62776480 7.4279796 9.8275500
由表 3可以看出，不同生长环境各指标的 T 检验
的双尾渐进显著性概率 [AsymP.sig.(2-tailed)]均小于
0.05，接受假设，可以认为不同时期辽东丁香中黄酮
和多糖的含量差异显著。
2.3.3相关性分析（test of Correlations）
通过描述统计量分析及 S-W 正态检验， 我们知
道辽东丁香中黄酮和多糖的含量均随采收期的不同
而呈正态分布，但如果想了解黄酮和多糖之间是否因
采收期的不同而呈现某种相关性，就需要进行多个变
量之间的相关性分析（test of Correlations）。 这里我们
采用统计学中的 Pearson 积距相关系数 （product-
moment correlation coefficient）来描述二者之间的相关
性，简称相关系数。相关系数 ρ是一个无量纲的数值，
且-1≤ρ≤1，ρ>0 为正相关，ρ<0 为负相关，ρ 的绝对
值接近于 1， 说明相关性越好，ρ 的绝对值接近于 0，
说明相关性越差。 检验结果见表 4。
表 4相关性分析结果
Tab.4 Results of test of Correlations
Correlations
3讨论
3.1由表 1可知， 随着采收期的不同总黄酮的含量不
同，从 3 月到 10 月黄酮含量出现过俩次高峰期，3 月
黄酮含量最高， 从 4 月起含量逐渐下降，9 月含量最
黄酮 总多糖
黄酮 Pearson Correlation 1 .401
Sig. (2-tailed) .080
N 20 20
总多糖 Pearson Correlation .401 1
Sig. (2-tailed) .080
N 20 20
27
人参研究 GINSENG RESEARCH 2011 年第 4 期
参 考 文 献
[1] 傅沛云.东北植物检索表（第二版）[M].沈阳:科学出版社, 1995:512.
[2] 王晓娟,朴志勇,田树文.辽东丁香嫩枝扦插育苗试验[J].黑龙江生态工程职业学院学报，2006.8(2):22.
[3] 胡桂清,李建志,张春艳，等.五种地产中药抗菌作用的实验研究[J].中医药学报，1993，20(5)：40～41.
[4] 卢丹,李平亚.丁香属植物的化学成分和药理作用研究进展[J].长春中医学院学报,2001,17(4)：58～59.
[5] Hee-Juhn Park,Myung-Sun Lee,Kyung-Tae Lee.Studies onconstituents with cytotoxic activity from the Stem
bark of Syringa velutina[ J ].Chem Pharm Bull,1999,47(7):1029～1031.
[6] 国家中医药管理局《中华本草编委会》.中华本草[M].上海:科学技术出版,1999第 6分册,16卷 5515页.
[7] 吴鸣建,赵天增,张海艳，等.小叶丁香化学成分的研究(Ι)[J].中草药,2003,34(1):7～9.
[8] 王峰,文玉晶,牛俊奇，等.丁香叶片药理和毒理的实脸研究[J].临床肝胆病杂志,2000,16(2)：94～96.
[9] 白求恩医科大学传染科.丁香叶片剂的制备及其对急性黄疸型肝炎 434 例的临床效果[ J ].中草药通讯,
1978,16(1):9～18.
[10] 周丽光.关东丁香化学成分的分离 [D].长春:吉林大学,2008.
[11] 曹纬国，刘志勤，邵云.黄酮类化合物药理作用的研究进展[ J ].西北植物学报：2003.23 (12)：2241.
[12] 邓小云,丁登峰,戴美红，等. 植物多糖药理作用研究进展[ J ].中医药导报:2006.12 (9):86～88.
低，10月中旬含量又出现高峰。 不同采收期辽东丁香
枝中的多糖含量也不同， 从 3 月中旬多糖含量较高，
5 月到 7 月含量较低， 从 9 月中旬到 10 月中旬含量
最高。 所以综合黄酮和多糖为指标，辽东丁香枝的最
佳采收期为 3月中旬或 10月中旬。
3.2从数据我们不难看出随着采收期的不同， 辽东丁
香枝的化学成分含量差异明显，推断辽东丁香枝中化
学成份的积累应该是每年的 3月前或 7月后。
3.3由于辽东丁香枝中其主要有效成分为皂苷类、 黄酮
类化合物和多糖，所以不能只通过黄酮和多糖的含量来
评价药材质量，应以多指标综合评价药材的质量。
3.4实验应用紫外分光光度法测定辽东丁香枝中的黄
酮含量， 采用蒽酮－硫酸比色法测定辽东丁香枝中的
多糖含量，从回收率和精密度可看出，本方法简便、快
速、可靠、适合辽东丁香枝黄酮和多糖的含量测定，以
控制其质量，为更好地研究开发辽东丁香提供依据。
28