全 文 :西南民族大学学报·自然科学版第 32卷第 6期
Journal of Southwest University for Nationalities⋅Natural Science Edition Nov. 2006___________________________________________________________________
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收稿日期:2006-06-09
作者简介:马彦芳(1966-), 女, 青海民族学院化学系讲师.
文章编号:1003-2843(2006)06-1179-02
沙枣叶中总黄酮的含量测定
马彦芳
(青海民族学院化学系,青海西宁 810007)
摘 要:目的:沙枣叶中总黄酮的含量测定. 方法:用 721 分光光度计测其吸光度. 结果:沙枣叶在 19.5~117.1µg/ml
线性关系良好,平均回收率 97.844%,RSD=3.56%. 结论:本方法简便易行,重现性良好.
关键词:沙枣叶;黄酮;芦丁
中图分类号:O623.54 文献标识码:A
沙枣(Elaeagnus angustifolia L.)属胡颓子科胡颓子属,落叶乔木[1],在我国分布于北纬 34度以北起辽宁,西
至新疆的各省均有分布. 沙枣树又因抗风沙, 耐盐碱,耐干旱,耐瘠,易繁殖,适应性强而成为沙荒盐碱地造林
的优良树种[2].
沙枣树的干叶含蛋白质 15.7%, 粗脂肪 6.5%, 糖 15.7%,无氮浸出物 17.4%,脂肪和糖含量高于洋槐和苜蓿,
营养高于刺槐叶,可为畜牧业提供饲料[3, 4].
至今沙枣叶中黄酮的含量还没有测定, 为此本文采用索氏提取器从沙枣叶中提取黄酮类化合物, 并建立了
沙枣叶中总黄酮的光谱分析方法对沙枣叶中总黄酮进行了测定.
1 实验部分:
1.1 仪器与试剂
721分光光度计(上海第三仪器制造厂), 索氏提取器,HH-4数显恒温水浴锅,TGS-14全自动电光分析天平,
芦丁标准品(中国药品生物制品检定所).
芦丁标准品储备液(0.198mg/ml): 称取 0.0198克芦丁标准品,置于 100 ml 容量瓶中,加入 50%的乙醇使其
溶解定溶至刻度备用.
沙枣叶样品:购于青海西宁.
1.2 索氏提取沙枣叶贮备液
称取沙枣叶(经粉碎过 40目筛)1.0072克,滤纸包裹后置索氏提取器以 50ml无水乙醇热浸提取至无色, 用无
水乙醇定容至 100ml容量瓶.
1.3 吸收曲线的绘制及测定波长的确定
从沙枣叶贮备液中,移取试液 2.0ml,置于 25ml容量瓶,加水至 10ml,加入 5%NaNO2 1ml,摇匀,放置 6
分钟,加入 10% Al(NO3)3 1ml摇匀, 放置 6分钟,加入 1mol/L NaOH10ml定容,摇匀,放置 15分钟. 在 420-640nm
间测其吸光度,得到其吸收光谱,最大吸收波长为 510nm,由以上实验可知,索氏提取沙枣叶贮备液中可用芦
丁做黄酮标准品测定波长为 510nm.
2 结论与讨论
2.1 标准曲线的绘制
分别移取 1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0ml的芦丁标准储备液于 25ml容量瓶中,按 1.3步骤在其波长为 λ
=510nm,分别测定其吸光度并且给出值,求得 Y与质量浓度关系的回归方程为:Y=0.3955X-0.0013
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根据 Y 与浓度的关系可绘制出线性很好的标准曲线, 求得相关系数 r=0.9999, 经查表得到临界相关系数
r(99%, n-2)=0.9170, r> r(99%, n-2). 说明黄酮的质量浓度在 19.5~117.1µg/ml范围内, Y与质量浓度 X之间呈良好的线
形关系,可按标准曲线法进行定量分析.
2.2 稳定性考察
用与绘制吸收曲线相同的配制方法配制的样品进行稳定性实验,结果表明样品放置 3小时以上测其吸光度
基本不变. RDS为 2.805%.
2.3 精密度考察
用同上方法每隔 30分钟测其在 510nm吸光度 6次,其吸光度基本不变. RDS为 2.117%.
2.4 重复性实验
取 5份适量药材,按“吸收曲线的绘制及测定波长的确定”项下测定:RSD=2.748%.
2.5 样品回收率实验
加入前 加入量 测定值 回收率 RSD
0.198 0.1402 0.3421 102.78 %
0.396 0.1356 0.5343 101.99%
0.594 0.07201 0.6607 92.63% 3.56%
0.792 0.04298 0.8326 94.46%
0.990 0.05125 1.0399 97.36%
2.6 样品含量测定
精密称取沙枣叶药样 1克,按 1.2项下制备样品,显色. 以空白液对照,在 510nm处测定,平行测定 5次,
按回归方程计算含量,结果样品中总黄酮的含量为 1.937%.
实验结果表明,沙枣叶中含有丰富的黄酮类化合物,在黄酮类化合物定量分析中采用光谱分析法可在特定
的碱性条件下加入显色剂显现特征颜色,进行测定时,可加入 NaNO2,Al(NO3)3,NaOH 作为显色剂,可排除
其他物质的干扰,从而提高测定准确度.
参考文献:
[1] 袁宝才, 单巧铃. 沙棘树经济价值与栽培技术[J]. 林业科技通讯社, 2001(8): 36-38.
[2] 李文贵. 沙棘的开发与利用[J]. 商业科技开放, 1994(4):33-34.
[3] 常兆丰, 方峨天. 沙棘饲料的开发和利用[J]. 饲料研究, 1992(4):38-40.
[4] 李银芳, 阿迪力. 吾彼尔, 等. 沙棘林产品的开发利用现状[J]. 防护林科技, 2005(1): 80-81.
Determination of total flavonoids in leaf of Elaeagnus angustifolia L.
MA Yan-fang
(Department of Chemistry, Qinghai University for Nationalities, Xining 810007, P. R. C. )
Abstaract: Objective: Determination Of total flavonoids in leaf of Elaeagnus angustifolia L. Methods: The
contents of total flavonoids in the samples are determined by spectrophotometric method. Results: The
standard curve of total flavonoids are linear in the range of 19.5~11ug/ml. The average recoveries of total
flavonoids is 97.844% (RSD=3.56%). Conclusion: The method is simple, feasible , effective and
reproducible.
Key words: leaf of Elaeagnus angustifolia L.; total flavonoid; rutin