全 文 ：第25卷 第1期 浙 江 林 业 科 技 Vol. 25 No.1
2 0 0 5年 1月 JOUR. OF ZHEJIANG FOR. SCI. & TECH. Jan., 2 0 0 5

文章编号：1001-3776（2005）01-0031-04

苦丁茶黄酮类化合物的提取与分析

李建法，胡六江，吕金红，唐晶晶
（浙江省绍兴文理学院化学系，浙江 绍兴 312000）

摘要：采用不同浓度的乙醇溶液提取苦丁茶中的黄酮类化合物，通过提取效果的对比，确定了合理的乙醇浓度为
70% ~ 80%。研究表明，与单纯采用溶剂提取相比，采用超声振荡辅助提取对黄酮类化合物的相对提取率影响较
小，但是可以缩短提取时间、降低提取温度，有利于提取过程中生物活性成分的保持。与小叶苦丁茶（粗壮女贞）
相比，在相同提取和分析条件下，浙江本地产的大叶苦丁茶（大叶冬青）中黄酮类化合物含量较多。
关键词：苦丁茶；黄酮；提取；紫外分光光度法
中图分类号：R284.2 文献标识码：A

苦丁茶是浙江山区一种重要的经济林用植物资源。研究表明，苦丁茶及其提取物具有降低血压、调节血脂、
改善心脑血管的血液循环、杀菌消炎等诸多功效[1 ~ 4]，是一种具有良好开发利用前景的饮用植物。
苦丁茶实际上是一类代茶用植物的统称，目前市场上销售的苦丁茶制成品有大叶苦丁茶和小叶苦丁茶之分，
两者的原植物品种有较大差异。例如，浙江苦丁茶原植物主要为冬青科冬青属的大叶冬青（Ilex latifolia），而
云南、贵州一带的小叶苦丁茶植物来源则为木犀科女贞属植物 [5 ~ 7]。
目前，在苦丁茶植物资源、化学组成、药理作用等方面的研究已经取得了一些进展，但是在不同品种的苦
丁茶化学成分对比、化学成分与药理作用的关联研究等方面的研究报导甚少。黄酮类化合物是广泛分布于各种
植物的一类次生代谢产物，是药用植物的主要活性成分之一。本文研究了苦丁茶中黄酮类化合物的提取方法，
并对不同品种苦丁茶中的黄酮类化合物含量进行了对比研究。
1 材料与方法
1.1 苦丁茶
大叶苦丁茶：产自浙江，植物学鉴定为大叶冬青，分别取炒制成品和新鲜叶；小叶苦丁茶：植物学鉴定为
粗壮女贞（Ligustrum robustrum），取产自云南的炒制成品；上述样品分别经烘干、粉碎，置干燥器中备用。
芦丁标准品：购自陕西慧科公司。
1.2 试剂
甲醇，乙醇，氢氧化钠，亚硝酸钠，硝酸铝等均为分析纯。
1.3 黄酮类化合物的提取
1.3.1 溶剂提取 准确称取 3.00 g研细的苦丁茶末，每次加入 30 ml乙醇水溶液，回流浸提 3次，抽滤，合并
滤液，再用 0.45μm滤膜过滤，滤液减压浓缩得膏状提取物，称重。
1.3.2 超声振荡辅助提取 准确称取 3.00 g研细的苦丁茶末，每次加入 30 ml乙醇水溶液，在 40℃下超声振荡
辅助提取 3次，抽滤，合并滤液，再用 0.45μm滤膜过滤，滤液减压浓缩得膏状提取物，称重。

收稿日期：2004-11-05
作者简介：李建法（1968－ ），男，山东苍山人，副教授，博士，从事天然植物资源的化学加工与利用研究。

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1.4 黄酮类化合物的含量测定
以芦丁标准品为参照，采用紫外分光光度法[6,8]进行测定。经波谱扫描，发现芦丁标准液在λ= 352 nm处有
最大吸收，因此本实验以λ= 352 nm为检测波长。线性回归方程为 C = 0.06A－0.008 0（C为样品液中芦丁浓度,
mg/mL；A为吸光度），相关系数 r = 0.995 7。
2 结果与讨论
2.1 乙醇溶液浓度对提取效果的影响
乙醇水溶液价廉无毒，因而成为黄酮类化合物提取
中最常用的一种溶剂。本文采用不同浓度的乙醇水溶液
对小叶苦丁茶成品进行提取，乙醇水溶液的浓度依次为：
0（纯水）、50%、70%、80%、90%。单纯采用溶剂提
取，提取效果见表 1。
从表 1中数据可以看出，在小叶苦丁茶的溶剂提取
中，随着乙醇水溶液浓度的提高，苦丁茶提取物重量有
明显下降趋势，而提取物中的黄酮含量却明显提高。特别是在乙醇溶液浓度较低时，如纯水和 50%乙醇溶液，
提取物中黄酮含量仅 2.20%和 2.86%，相对提取率不足 70%，说明低浓度乙醇溶液对黄酮的提取效果较差，所
得到的提取物中其他非黄酮成分较多。从提取物中的黄酮含量和相对提取率看，当乙醇溶液的浓度为 70%和 80%
时，提取效果较好。进一步提高乙醇浓度，提取物重量下降，影响了总的提取效果。
2.2 超声振荡辅助提取的影响
超声波可以提高植物原料中有效物质的溶出率和溶出速度、降低提取温度、加快提取进程，本文采用超声
振荡辅助提取黄酮类化合物，并与单纯溶剂提取的效果进行对比，结果见图 1和图 2。
在超声振荡辅助提取时，采用的乙醇溶液浓度仍为 50% ~ 90%。从图 1可以看出，在相同的乙醇溶液浓度
下，超声振荡辅助提取所得到的提取物重量更高，说明超声振
荡提高了可溶性成分的溶出率。但是从图 2 中发现，超声振荡
对相对提取率的影响不明显，说明溶剂的组成仍然是黄酮类化
合物溶出的决定因素，超声振荡提高了其他非黄酮类化合物的
溶出，使提取物中的非黄酮类成分提高，降低了提取物中的黄
酮含量（表 2）。
在实验研究中还发现，超声振荡可以显著提高黄酮类化合
物的溶出速度，同样分 3次提取，普通溶剂提取每次需要 60 min，而超声提取只需要 20 min就可以得到相近的
提取率。另外，超声振荡辅助提取可以显著降低提取温度，普通溶剂提取需要在回流温度（80℃左右）下进行，
表 1 不同溶剂提取效果比较
乙醇溶液
浓度/%
提取物
重量/g
提取物黄酮
含量/%
样品黄酮
含量/%
相对提取率*
/%
0 1.02 2.20 0.75 50.0
50 1.10 2.86 1.05 69.9
70 0.97 4.14 1.34 89.3
80 0.91 4.58 1.39 92.6
90 0.83 4.29 1.19 85.6
*相对提取率指提取物中黄酮量占苦丁茶中总黄酮量的百分比，以
80%乙醇连续回流浸提 6次为 100%计算。
表 2 超声振荡对提取物黄酮含量的影响
提取物重量/g 提取物黄酮含量/ %乙醇溶液
浓度/% 溶剂提取 超声提取 溶剂提取 超声提取
50 1.10 1.28 2.86 2.51
60 0.95 1.25 3.57 2.74
70 0.97 1.19 4.14 3.35
80 0.91 1.23 4.58 3.27
90 0.83 1.06 4.29 3.70
图1 超声振荡对提取物重量的影响
0.00
0.30
0.60
0.90
1.20
1.50
50.0 60.0 70.0 80.0 90.0
乙醇溶液浓度 /%提
取
物
重
量
/g
超声提取 溶剂提取
图2 超声振荡对相对提取率的影响
60.0
65.0
70.0
75.0
80.0
85.0
90.0
95.0
50.0 60.0 70.0 80.0 90.0
乙醇溶液浓度/%相
对
提
取
率
/%
超声提取 溶剂提取

1期 李建法，等：苦丁茶黄酮类化合物的提取与分析 33

而超声振荡只需要在 40℃下就可以得到较好的提取效果。因此，采用超声振荡辅助提取有利于苦丁茶叶中某些
对温度敏感的活性成分的保持。
不论是溶剂提取还是超声振荡辅助提取，黄酮的相对提取率都是在乙醇溶液浓度为 70%和 80%时达到最高，
说明乙醇浓度在 70% ~ 80%时对黄酮类化合物的提取效果最好。
2.3 不同品种苦丁茶中的黄酮含量比较
以 80%乙醇溶液为溶剂，分别对成品大叶
苦丁茶、新鲜大叶苦丁茶叶、成品小叶苦丁茶
中的黄酮类化合物进行提取，分析不同品种苦
丁茶中的黄酮含量，结果见表 3。
从表 3 可知：在相同的提取分析条件下，成品大叶苦丁茶中的黄酮含量比成品小叶苦丁茶的含量高。原因
在于两种苦丁茶的原植物种属不同，本文分析的小叶苦丁茶为女贞属植物，而大叶苦丁茶为冬青属植物，其叶
片中的黄酮含量也有比较明显的差异。
研究同时发现，采用现行的黄酮含量分析方法，新鲜苦丁茶叶中的黄酮含量比成品叶少，而且差距比较大。
产生这种差别的原因尚有待深入研究，但作者推测，原因可能在两个方面，一是苦丁茶炒制加工过程中，叶片
中的活性成分包括黄酮类化合物发生了变化；另外，现行分析方法造成的误差。应该说，采用紫外分光光度法
分析苦丁茶中的黄酮含量虽然比较简便，但是，容易带来分析误差的因素很多，如标准对照品的选择、样品的
前处理、苦丁茶叶中其他成分的干扰等。所以，苦丁茶中黄酮含量的测定方法尚有待进一步研究。
3 结论
（1）采用不同浓度的乙醇溶液提取苦丁茶中的黄酮类化合物，结果表明，当乙醇浓度为 70%~80%时，提
取物的黄酮含量较高，而且黄酮类化合物的相对提取率较高，提取效果较好。
（2）与单纯溶剂提取比较，采用超声振荡辅助提取可以提高提取物重量，但是对苦丁茶中黄酮类化合物的
相对提取率影响不大。
（3）采用超声振荡辅助提取苦丁茶中的黄酮类化合物可以明显降低提取温度、缩短提取时间，有利于提取
过程中苦丁茶中生物活性成分的保持。
（4）对不同品种苦丁茶的黄酮含量分析表明，浙江本地产的大叶苦丁茶（大叶冬青）中的黄酮类化合物含
量高于小叶苦丁茶（粗壮女贞）。

参考文献：
[1] T FUKUDA, Y KITADA, X CHEN, et al. Two new monoterpene glycosides from Kudingcha. Inhibitors of acyl-CoA: cholesterol acyltransferase
(ACAT) [J]. Chem Pharm Bull, 1996, 44（11）：2 171－2 176.
[2] K NISHIMURA, T FUKUDA, T MIYASE, et al. Activity-guided isolation of triterpenoid acyl CoA cholesteryl acyl transferase (ACAT)
inhibitors from Ilex kudincha [J]. J Nat Prod 1999，62（7）：1 061－1 064.
[3] 朱莉芬，罗集鹏，李美珠，等. 苦丁茶的心血管药理作用研究[J]. 中药材，1994，17（3）：37－40.
[4] 蒋建敏，王兵，许实波，等. 苦丁茶的抗菌作用研究[J]. 中药药理与临床，2001，17（1）：18－19.
[5] 陈亮，周智修，舒爱民，等. 3种苦丁茶与茶叶的感官与化学成分比较[J]. 浙江林学院学报，2000，17（3）：298－300.
[6] 周永红，王立升，韦藤幼. 苦丁茶化学成分研究[J]. 广西大学学报（自然科学版），1999，24（3）：203－204.
[7] 郁建平. 贵州苦丁茶植物资源及化学成分分析[J]. 植物资源与环境，1997，6（2）：22－25.
[8] 潘慧娟，应奇才. 苦丁茶中黄酮类化合物的提取、鉴定与含量分析[J]. 杭州医学高等专科学校学报，2003，24（2）：72－74.



表 3 不同品种苦丁茶中的黄酮含量
项目 成品大叶苦丁茶 新鲜大叶苦丁茶叶 成品小叶苦丁茶
提取物黄酮含量/ % 5.06 3.72 4.58
样品黄酮含量/% 1.56 0.98 1.39

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Extraction and Analysis of Flavonoids from Kuding Tea

LI Jian-fa，HU Liu-Jiang，LU Jin-hong，TANG Jing-jing
(Department of Chemistry, Shaoxing College of Arts and Sciences, Shaoxing 312000, China)

Abstract: The proper concentration of ethanol solution for extracting flavonoids from Kuding tea should be 70% ~ 80%
according to the comparison on extraction performance of different solutions. There was no evident effect of extraction
rate of flavonoids by solely solvent extraction and the supersonic-aided, but the extraction temperature and duration
could be reduced, which could be favorable for the preservation of bioactive substances. Under the same extraction and
analysis conditions, the content of flavonoids in local large-leaved Kuding tea (Ilex latifolia) was higher than that in
small-leaved Kuding tea (Ligustrum robustum).
Key words: Kuding tea; flavonoids; extraction; ultraviolet spectrophotometry

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信息

国家林业局“948”项目“高效肥药两用植物
大荨麻的引进”通过现场查定

2004年 12月 25日，国家林业局“948”项目 “高效肥药两用植物大荨麻的引进”在杭州通过现场查定。
专家组一致认为：该项目已完成合同规定的各项考核指标，并在生物肥料的药效学研究、植物药研制等方面超
额完成合同指标。
项目组在浙江省进行了多点栽培试验，在浙江省天台县建立大荨麻种子园 0.67 hm2，完成了大荨麻的生长
与繁殖栽培技术研究，生产的种子品质优于原产地；测定了大荨麻有效成分，比较了引种地与原产地大荨麻有
效成分的种类与含量差异，完成其有效成分的提取工艺流程研究和生物肥料、生物农药的研制；测定大荨麻申
报三类新药所需的药理学、毒理学、药效学等相关项目，在实验室研究的基础上，进行小批量药用原料的制备；
在天台、丽水、庆元等县（市）推广营造了生物肥料和植物药原料栽培基地 202 hm2，年生物产量达到 7 650 kg
干重/hm2。试制生物肥料 10.5 t，试验表明其肥效与药效明显。
以大荨麻为原料的多效微生物肥料和生物农药产品的研制和开发，其市场前景将十分广阔。大荨麻作为世
界公认的治疗良性前列腺肥大（BPH）及风湿病的有效植物药，具有高效低毒的优点，引进该药用植物资源，
进行自主知识产权的产品开发研究，可以解决我国在该领域植物药研究方面的薄弱环节，提高祖国医药的科技
含量。
本刊讯