全 文 ：农药学学报 , 2004, 6( 4): 93-96
Chinese Journal o f Pesticide Science
h
·研究简报·
高效液相色谱法测定芦笋中多菌灵和吡虫啉残留
刘承兰 ,　刘丰茂 ,　李　莉 ,　兰瑞桦 ,　江树人*
(中国农业大学 理学院 应用化学系 ,北京 100094 )
摘　要: 建立了一种同时测定芦笋中多菌灵和吡虫啉农药残留的高效液相色谱法。以丙酮超声波提取 ,石油醚去除
脂类杂质 ,再用二氯甲烷萃取分离 ,浓缩后测定。用甲醇 -水 ( 40∶ 60,体积比 )为流动相 ,配备 Discover y ODS-C18柱、
紫外检测器的高效液相色谱 ( HPLC)仪对待测组份进行了分离和测定。实验证明 ,芦笋样品中多菌灵和吡虫啉添加
回收率分别在 81. 0% ～ 99. 6%和 79. 3% ～ 100. 2%之间 ,相对标准偏差 (RSD ,n= 3)分别小于 13. 4%和 8. 0% ,多菌
灵和吡虫啉在样品中的最低检出浓度为 0. 05 mg /kg。
关键词: 芦笋 ;多菌灵 ;吡虫啉 ;高效液相色谱 ;残留
中图分类号: O652. 63　　　文献标识码: A　　　文章编号: 1008-7303( 2004) 04-0093-04
The Determination of Carbendazim and Imidacloprid Residues
in Asparagus by High-Performance Liquid Chromatography
LIU Cheng-lan,　 LIU Feng-mao ,　 LI Li,　 LAN Rui-hua,　 JIAN G Shu-ren*
(Department of Applied Chemistry , College of Science, China Agricultural University , Beijing 100094, China)
Abstract: An analy tical method o f carbendazim and imidacloprid residues in asparagus by high-
perfo rmance liquid ch romatog raphy ( HPLC ) w as developed. Samples w ere ex t racted w ith
acetone by ul trasonic method, liquid-liquid ex t raction ( LLE) cleanup w ith petroleum ether to
remove some fat ty impuri ties and then wi th dichlo romethane to ex tract the samples further. The
HPLC condi tions w ere Discovery ODS-C18 co lumn, methanol-w ater= 40∶ 60 ( V /V ) as mobi le
phase, and UV detection at 280 nm. The fo rtified recoveries o f ca rbendazim and imidaclo rpid in
asparagus samples were 81. 0%～ 99. 6% and 79. 3%～ 100. 2% , respectiv ely. Rela tive standard
devia tion was less than 13. 4% fo r carbenda zim and 8. 0% fo r imidaclo rpid, and the limit of
detection o f tw o pesticides in aspa ragus samples w as 0. 05 mg /kg , respectiv ely.
Key words: asparagus; carbenda zim; imidacloprid; high-performance liquid chroma tog raphy
( HPLC) ; residue
　　多菌灵 ( carbenda zim ) ,化学名称 2-(甲氧基
氨基甲酰 )苯并咪唑 [ 2-( methoxy -carbanmoyl ) -
benzimidaxo le ] ,是一种高效低毒杀菌剂 ,可用于防
治多种植物病害 [1 ]。吡虫啉 ( imidacloprid)是一种吡
啶类杀虫剂 ,化学名称为 1-( 6-氯 -3-吡啶基甲基 ) -
N -硝基亚咪唑烷-2-基胺。吡虫啉具有广谱杀虫活
性 ,对飞虱、蚜虫、叶蝉等刺吸式口器害虫有特效 ,对
其他种类的害虫也有良好的防治效果 [2 ]。 多菌灵和
吡虫啉是芦笋栽培过程中常用的两种农药 [3, 4 ]。
我国芦笋产品出口量很大 ,农药残留是一个很重要
h 收稿日期 : 2004-07-06;修回日期: 2004-09-01.
作者简介 :江树人 ( 1944-) ,男 ,安徽全椒县人 ,教授 ,博士生导师 ,主要从事农产品安全、农药残留和环境毒理等方面的
研究 .
* 通讯作者 ; 联系电话: 010-62736343; E-mail: sh uren@ cau. edu. cn
基金项目 :中德科学基金研究交流中心 [ GZ051-7 ( 151) ]资助 .
的限制指标。国内外对水果蔬菜中多菌灵及吡
虫啉残留量的单独检测已有许多报道 [5～ 12 ] ,如
Rangaswamy
[8 ]用比色法 , Alfonso等 [9 ]采用高效液
相色谱 ( HPLC)法 , Amadeo[10 ]等报道了用液谱-质
谱 ( LC-M S)法来测定水果蔬菜中多菌灵的残留 ,有
关吡虫啉在水果蔬菜上的农药残留检测有气谱-质
谱 ( GC-M S) [11 ]法和 HPLC[12 ]法等。但关于在芦笋上
同时测定多菌灵和吡虫啉残留量的分析方法尚未见
报道。 作者采用超声波提取 ,液液萃取净化 , HPLC
测定 ,方法简便、快速 ,净化效果很好 ,各项技术指标
均满足残留检测的要求。
1　仪器和试剂
Agi lent 1100高效液相色谱仪 ; KQ 3200超声
波提取仪 ; EYELA旋转蒸发仪。
多菌灵标准品 ( carbenda zim ,纯度 99% ) ,吡虫
啉标准品 ( imidacloprid,纯度 98. 5% ) ,均由中国农
业大学农药残留室提供。盐酸、氢氧化钠、石油醚、丙
酮、无水硫酸钠 (使用前于 150℃条件下烘 5 h)、氯化
钠等均为分析纯 ,甲醇 (色谱纯 ) ,高纯水。
2　实验方法
2. 1　样品前处理
准确称取 20 g芦笋样品 ,经组织捣碎匀浆后置
于 250 mL三角瓶内。加入 40 mL丙酮 ,超声波提取
30 min,加入 16 g无水硫酸钠 ,抽滤 ,再用少量丙酮
清洗容器 ,合并滤液。 滤液在 40℃恒温水浴内旋
转蒸发浓缩至 1 0mL左右 ,移入分液漏斗中 ,加
入 30 mL饱和氯化钠溶液 ,摇匀后加 20 mL 2 mol /L
盐酸溶液 ,然后用 20 mL石油醚萃取。 弃去石油醚
相 ,水相用 2 mol /L氢氧化钠调 pH至 6. 5～ 7. 5,再
用二氯甲烷萃取 3次 ( 30、 15、 15 mL)。合并萃取液 ,
在 40℃水浴下浓缩至近干 ,用氮气吹干 ,再用甲醇定
容至 1 mL,经 0. 2μm的薄膜过滤 ,待测。
2. 2　高效液相色谱测定条件
Agi lent 1100高效液相色谱仪 (带紫外检测器
及 Aglient化学工作站 ) ,色谱柱: Discovery ODS-
C18不锈钢柱 ( 250 mm× 4. 6 mm , 5μm) ,流动相为
甲醇 -水 = 40∶ 60 (体积比 ) ,柱温为室温 ,流速
0. 5 mL /min,进样量 20μL,检测波长 280 nm ,外标
法定量。
2. 3　标准曲线绘制
配制浓度为 40 mg /L的混合标准溶液 ,再稀释
成 0. 25～ 20 mg /L的系列浓度溶液 ,进样测定。以峰
面积为纵坐标 ,样品浓度为横坐标绘制标准曲线。
3　结果与讨论
3. 1　提取、净化方法的选择
按文献方法 [5～ 7 ] ,分别采用甲醇、丙酮、石油醚
作提取剂 ,石油醚去脂净化 ,二氯甲烷萃取分离。 结
果表明 ,采用丙酮振荡提取芦笋样品中的多菌灵和
吡虫啉农药残留、石油醚去脂净化、二氯甲烷萃取分
离可缩短提取时间 ,而且多菌灵和吡虫啉的添加回
收率在 79. 3%～ 100. 2% ,相对标准偏差小于
13. 4% ,符合农药残留分析要求。
3. 2　流动相的选择与色谱分离效果
实验中分别对流动相甲醇 -水的不同配比进行
了选择 ,结果表明 ,甲醇-水的体积比为 40∶ 60条件
下 ,色谱分离效果最好 ,杂质峰与多菌灵和吡虫啉的
峰能完全分开。在检测波长的选择上 ,根据紫外扫描
结果 ,选择多菌灵和吡虫啉均有较大吸收的 280 nm
作为检测波长 ,以实现两种化合物的同时测定。在上
述色谱条件下 ,测得多菌灵和吡虫啉的保留时间分
别为 10. 887 min和 18. 406 min,见图 1、 2、 3。
Fig. 1　 HPLC chroma tog ram o f aspa ragus
blank sample
Fig . 2　 HPLC ch roma tog ram of carbendazim
and imidacloprid standard
94 农　药　学　学　报 Vo l. 6
Fig. 3　 HPLC chromato g ram o f ca rbenda zim and imidacloprid spiked in a spara gus
A. fo r tified lev el: 1 mg /kg ; B. for tified lev el: 0. 05 mg /kg
3. 3　标准校正曲线的线性回归方程
在选定的色谱条件下 ,配制一系列不同浓度的
标准溶液进行色谱分析 ,绘制样品浓度与峰面积的
标准曲线。线性回归分析 (见图 4)表明 ,当多菌灵和
吡虫啉浓度在 0. 25～ 20 mg /L之间时 ,两种农药残
留的标准校正曲线线性良好 ,可满足定量分析的需要。
Fig. 4　 Standard curv e of ca rbendazim and imidaclo rpid
3. 4　方法的回收率、精密度及最低检出限
选芦笋空白样品 ,添加多菌灵和吡虫啉混合标
准品 ,添加水平为 0. 05、 0. 25、 0. 50、 1. 00 mg /kg。按
2. 1步骤处理 ,重复 3次测定其残留量 ,并计算回收
率 ,结果见表 1。
结果表明 ,芦笋样品中多菌灵的平均回收率在
81. 0% ～ 99. 6%之间 ,相对标准偏差 ( RSD ) <
13. 4% ;吡虫啉的平均回收率在 79. 3%～ 100. 2%之
间 , RSD < 8. 0% 。多菌灵和吡虫啉的最小检出量
为 5× 10- 9 g,芦笋中多菌灵与吡虫啉的最低检出浓
度为 0. 05 mg /kg。
4　结论
本实验以丙酮振荡提取 ,石油醚去除脂类杂质 ,
二氯甲烷萃取分离 ,建立了芦笋中多菌灵和吡虫啉
Table 1　 Fo rti fied recoveries o f ca rbendazim and
imidaclorpid in asparagus
Pesticide
For tified
concentra tion
/mg· kg- 1
Ave rage
recover y
(% )
R SD
(% )
ca rbenda zim 1. 00 83. 9 7. 6
0. 50 95. 6 7. 1
0. 25 81. 0 13. 4
0. 05 99. 6 10. 2
imidaclorpid 1. 00 79. 3 3. 0
0. 50 82. 3 8. 0
0. 25 87. 7 6. 9
0. 05 100. 2 4. 6
No 95. 4 刘承兰等: 高效液相色谱法测定芦笋中多菌灵和吡虫啉残留
残留量同时测定的高效液相色谱法。 在选定的最佳
条件下 ,该分析方法对芦笋中两种农药的添加回收
率在 79. 3% ～ 100. 2%之间 ,最低检出浓度为
0. 05 mg /kg。欧盟规定多菌灵在蔬菜中的最高残留
限量 ( M RL)为 0. 1 mg /kg ,日本规定吡虫啉在蔬菜
中的 M RL为 0. 5 mg /kg。本研究方法符合残留分析
试验要求 ,能够用于同时检测芦笋等蔬菜中多菌灵
和吡虫啉的农药残留。
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(责任编辑:唐　静 )
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