全 文 ：　［收稿日期］　２０１２－０１－２５；２０１２－０３－３０修回
　［基金项目］　吉林省教育厅“十二五”规划项目“黄花忍冬主要活性成分的提取及活性研究”（２０１１－２７２）
　［作者简介］　王英臣（１９６７－），男，硕士，副教授，从事食品分析和天然产物的教学、科研工作。Ｅ－ｍａｉｌ：ｙｕｊｉａｐｉｎｇ０６０７＠ｔｏｍ．ｃｏｍ
［文章编号］１００１－３６０１（２０１２）０７－０３７９－００９２－０２
金银木果实中多糖的提取及其抗氧化性
王英臣
（吉林农业科技学院 食品工程学院，吉林 吉林１３２１０１）
　　［摘　要］为金银木药用价值的研究和开发奠定基础，采用超临界二氧化碳萃取法对金银木果实进行脱
脂脱色，然后通过水提醇沉法对其多糖进行提取、纯化，并研究金银木果实多糖对羟基自由基（·ＯＨ）、超氧
阴离子（Ｏ２－·）和ＤＰＰＨ·自由基的清除作用。结果表明：金银木果实多糖含量为０．３０３ｇ／ｇ，金银木果实
多糖对羟基自由基、超氧阴离子和ＤＰＰＨ·自由基具有明显的清除作用，是天然的抗氧化剂。
［关键词］金银木果实；多糖；抗氧化性
［中图分类号］Ｓ５６７．９ ［文献标识码］Ａ
Ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ　ｆｒｏｍ　Ｌｏｎｉｃｅｒａ　ｍａａｃｋｉ　ａｎｄ　Ｉｔｓ　Ａｎｔｉ－ｏｘｉｄａｔｉｏｎ
ＷＡＮＧ　Ｙｉｎｇ－ｃｈｅｎ
（Ｃｏｌｌｅｇｅ　ｏｆ　Ｆｏｏｄ　Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，Ｊｉｌｉｎ　Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅ　ａｎｄ　Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ　Ｃｏｌｌｅｇｅ，Ｊｉｌｉｎ，Ｊｉｌｉｎ１３２１０１，Ｃｈｉｎａ）
　　Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｏ　ｐｒｏｖｉｄｅ　ａ　ｂａｓｉｓ　ｆｏｒ　ｒｅｓｅａｒｃｈ　ａｎｄ　ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ　ｏｆ　ｍｅｄｉｃｉｎａｌ　ｖａｌｕｅ　ｏｆ　Ｌ．ｍａａｃｋｉｉ，ｉｔｓ　ｆｒｕｉｔ
ｗａｓ　ｄｅｇｒｅａｓｅｄ　ａｎｄ　ｂｌａｎｃｈｅｄ　ｂｙ　ｓｕｐｅｒｃｒｉｔｉｃａｌ　ｃａｒｂｏｎ　ｄｉｏｘｉｄｅ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ，ａｎｄ　ｐｕｒｉｆｉｅｄ　ｔｈｒｏｕｇｈ　ｗａｔｅｒ
ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ａｎｄ　ａｌｃｏｈｏｌ　ｐｒｅｃｉｐｉｔａｔｉｏｎ．Ｔｈｅ　ｓｃａｖｅｎｇｉｎｇ　ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ　ｔｏ　ｈｙｄｒｏｘｙｌ　ｒａｄｉｃａｌｓ，
ｓｕｐｅｒｏｘｉｄｅ　ａｎｉｏｎｓ　ａｎｄ　ＤＰＰＨ　ｒａｄｉｃａｌ　ｗｅｒｅ　ｓｔｕｄｉｅｄ　ａｓ　ｗｅｌ．Ｔｈｅ　ｒｅｓｕｌｔｓ　ｔｈａｔ　ｔｈｅ　ｙｉｅｌｄ　ｏｆ　ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ　ｗａｓ
０．３０３ｇ／ｇ　ａｎｄ　ｔｈｅ　ｆｒｕｉｔ　ｏｆ　Ｌ．ｍａａｃｋｉｉ　ｗａｓ　ａ　ｎａｔｕｒａｌ　ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ　ｗｉｔｈ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ　ｓｃａｖｅｎｇｉｎｇ　ｅｆｆｅｃｔｓ　ｔｏ
ｈｙｄｒｏｘｙｌ　ｒａｄｉｃａｌｓ，ｓｕｐｅｒｏｘｉｄｅ　ａｎｉｏｎｓ　ａｎｄ　ＤＰＰＨ　ｒａｄｉｃａｌ．
Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：Ｌｏｎｉｃｅｒａ　ｍａａｃｋｉｉ　ｆｒｕｉｔ；ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ；ａｎｔｉ－ｏｘｉｄａｔｉｏｎ
　　忍冬属是忍冬科中较大的属之一，现知全世界
约有２００种，我国约有１００种，广泛分布于各省区，
以西南、华中地区种类最多［１］。忍冬属活性成分主
要有黄酮、多糖、绿原酸和异绿原酸［２］。金银木
（Ｌｏｎｉｃｅｒａ　ｍａａｃｋｉｉ（Ｒｕｐｒ．）Ｍａｘｉｍ．）是忍冬属的一
个种，别名金银忍冬，在我国资源非常丰富。目前，
金银木主要用于观赏和绿化［３］，其果大部分被废弃，
是一种尚未被开发利用且很有价值的药用资源。前
人对金银木的研究主要是绿原酸［４］，而对其中多糖
的研究鲜见报道。近年来，大量的药理和临床研究
表明，多糖是一种免疫调节剂，它能激活免疫细胞，
提高机体的免疫能力，具有抗肿瘤、抗病毒、抗氧化、
抗衰老、降血压，治疗糖尿病等作用［５－９］。笔者于
２０１１年１１月进行了金银木果实中多糖的提取、纯
化，并通过多糖对羟基自由基（·ＯＨ）、超氧阴离子
（Ｏ２－·）和ＤＰＰＨ·自由基的清除作用来评价该多
糖的抗氧化活性，以期为金银木药用价值的研究和
开发奠定理论基础。
１ 材料与方法
１．１ 材料
１．１．１ 金银木果实 采于吉林农业科技学院左家
校区，经阴干、低温烘干处理为干品。
１．１．２ 试剂 无水乙醇，浓硫酸，苯酚，水杨酸，葡
萄糖，Ｔｒｉｓ，盐酸，邻苯三酚，Ｈ２Ｏ２，硫酸亚铁，氯仿，
正丁醇，ＤＰＰＨ，氢氧化钠，以上试剂均为分析纯，购
于沈阳市新宇化工试剂厂。
１．１．３ 仪器 紫外－可见分光光度计（ＵＶ－１６００
型，北京普析），ＨＡ１２１－５０－０１超临界二氧化碳流体
萃取装置，ＨＨ－Ｓ型恒温水浴锅（江苏省金坛市正基
仪器有限公司），电子天平（北京赛多利斯天平有限
公司），ＳＨＢ－ＩＩＩＡ型循环水真空泵（郑州长城科工贸
易有限公司）。
１．２ 方法
１．２．１ 金银木果实粉末的前处理 用超临界二氧
化碳流体处理金银木果实粉末，准确称取一定量的
金银木果实粉末装入料筒，保证料筒顶隙度在５ｃｍ
以上。按压力３０Ｍｐａ、温度３５℃、时间４ｈ、二氧化
碳流量２５Ｌ／ｈ进行萃取。达到萃取时间后取出料
筒，得脱脂脱色的金银木果实粉末。
１．２．２ 金银木果实中多糖的提取及纯化 准确称
取处理后的金银木果实粉末１００ｇ于５００ｍＬ烧杯
中，加蒸馏水５００ｍＬ，在水浴锅中加热浸提３ｈ，间
歇搅拌，过滤，减压浓缩至２００ｍＬ。ｓｅｖａｇ法除蛋
白，用离心机离心后留滤液，将滤液用流动水透析
４８ｈ，透析液加无水乙醇使含醇量达８５％以上，于冰
箱中静止过夜醇沉，再离心分离，沉淀用无水乙醇洗
２次，真空干燥至恒重，即得纯化的金银木果实多
　贵州农业科学　２０１２，４０（７）：９２～９３
　Ｇｕｉｚｈｏｕ　Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅｓ
糖。
１．２．３ 金银木果实多糖含量的测定
１）标准曲线的绘制。采用苯酚－硫酸法［８］，参
照文献［９］的方法进行。在４９０ｎｍ处测定吸光度，
绘制标准曲线，得回归方程：Ｃ＝０．６２４Ａ－０．０２１，
ｒ＝０．９９９　６７（ｎ＝５）。
２）计算换算因子（ｆ）。称取纯化的金银木果实
多糖１ｇ，定容到２５０ｍＬ，使浓度为Ｃｓ＝４ｍｇ／ｍＬ。
精确量取１ｍＬ按标准曲线的绘制方法测定吸光
度，Ａ＝０．６４１，代入回归方程得Ｃｆ＝０．３７９ｍｇ／ｍＬ，
换算因子ｆ＝Ｃｓ／Ｃｆ＝１０．５５。
３）金银木果实多糖含量的测定。参照文献［９］
的方法进行。
１．２．４ 金银木果实多糖的抗氧化性 参照文献
［９］的方法测定金银木果实多糖对 Ｏ２－·和·ＯＨ
的清除率。参照文献［９］的方法略有改动（即ＤＰＰＨ
溶液３ｍＬ，以８０％乙醇为空白）测定金银木果实多
糖对ＤＰＰＨ·的清除率。
１．２．５ 金银木果实多糖的回收率测定 为了考察
试验方法的可靠性，需进行回收率试验。取金银木
果实粉末１．０００ｇ，再加入一定量纯化多糖，参照标
准曲线的绘制方法测定吸光度，根据回归方程及换
算因子求出多糖的含量。
２ 结果与分析
２．１ 金银木果实多糖的含量
经测定，金银木果实的多糖含量为０．３０３ｇ／ｇ。
２．２ 金银木果实多糖的抗氧化性
由表１可知，金银木果实多糖对Ｏ２－·、·ＯＨ
和ＤＰＰＨ·均有较好的清除作用，随着多糖浓度的
增加其清除作用越明显，其中，对Ｏ２－·和ＤＰＰＨ·
的清除作用较强。
表１ 金银木果实多糖的抗氧化性
　　　Ｔａｂｌｅ　１　Ａｎｔｉ－ｏｘｉｄａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ　ｆｒｏｍ
Ｌ．ｍａａｃｋｉｉ　ｆｒｕｉｔ
多糖浓度／（ｍｇ／ｍＬ）
Ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ　ｏｆ
ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ
清除率／％
Ｓｃａｖｅｎｇｉｎｇ　ｒａｔｅ
Ｏ２－· ·ＯＨ　 ＤＰＰＨ·
０．０ ０．００ ０．００ ０．００
０．２　 ５８．１３　 １５．２９　 ４３．５３
０．４　 ６９．１２　 １６．２４　 ６２．４３
０．６　 ７２．７５　 ２３．２４　 ７７．６１
０．８　 ７５．１３　 ３１．３２　 ８９．７２
表２ 金银木果实多糖含量测定的加标回收率（ｎ＝５）
Ｔａｂｌｅ　２　Ｔｈｅ　ｓｐｏｔｔｉｎｇ　ｒｅｃｏｖｅｒｙ　ｒａｔｅ　ｏｆ　ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ　ｆｒｏｍＬ．ｍａａｃｋｉｉ　ｆｒｕｉｔ
编号
Ｎｏ．
粉末样品／ｇ
Ｓａｍｐｌｅ
ｗｅｉｇｈｔ
样品多糖含量／ｇ
Ｃｏｎｔｅｎｔ　ｏｆ
ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ
加入纯化多糖／ｇ
Ａｄｄｉｎｇ　ａｍｏｕｎｔ　ｏｆ　ｐｕｒｉｆｉｅｄ
ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ
测定量／ｇ
Ｍｅａｓｕｒｅｄ
ｖａｌｕｅ
回收率／％
Ｒｅｃｏｖｅｒｙ
ｒａｔｅ
１　 １．０００　 ０．３０３　 ０．１００　 ０．４０４　 １００．３２
２　 １．０００　 ０．３０３　 ０．１００　 ０．３９３　 ９７．５３
３　 １．０００　 ０．３０３　 ０．１００　 ０．３８４　 ９５．１７
４　 １．０００　 ０．３０３　 ０．１００　 ０．４０５　 １００．４７
５　 １．０００　 ０．３０３　 ０．１００　 ０．３９７　 ９８．５６
２．３ 金银木果实多糖的回收率测定
由表２看出，回收率在９５．１７％～１００．４７％，相
对标准偏差（ＲＳＤ）为０．４７３％。说明，该方法测定
金银木果实多糖有较高的准确度和精密度。
３ 结论
采用苯酚－硫酸法测定金银木果实多糖，其含
量为０．３０３ｇ／ｇ。金银木果实多糖对超氧阴离子自
由基、羟基自由基和ＤＰＰＨ·自由基均有较好的清
除作用，其中，对超氧阴离子自由基和ＤＰＰＨ·自由
基的清除作用较强。表明，金银木果多糖是一种天
然抗氧化剂，对疾病的治疗、食品领域及化妆品产业
均有开发利用价值。
［参 考 文 献］
［１］ 李会军，李 萍．忍冬花蕾的化学成分研究［Ｊ］．林产
化学与工业，２００５，２５（３）：２９－３２．
［２］ 邢俊波，李 萍．忍冬属化学成分研究概况及展望
［Ｊ］．中药材，１９９９，２２（７）：３６６－３７０．
［３］ 杨和军．优良观赏绿化树种———金银忍冬［Ｊ］．农村
百事通，２００９（８）：３０．
［４］ 于加平，李海燕，孙 博．ＨＰＬＣ法测定金银木花和叶
中绿原酸的含量［Ｊ］．吉林农业科技学院学报，２００９，
１８（１）：１－２．
［５］ 董爱文，赵虹桥，施立毛，等．爬山虎多糖提取与含量
的测定［Ｊ］．中国野生植物资源，２００４，２３（１）：５５－５７．
［６］ 张 玉，马 力，陈 文，等．醇析水提法提取金银花
多糖［Ｊ］．医药导报，２００６，２５（１１）：１１１８－１１２０．
［７］ 张晓静，刘会东．植物多糖提取分离及药理作用的研
究进展［Ｊ］．时珍国医国，２００３，１４（８）：４９５－４９６．
［８］ 徐 斌，董 英，林 琳，等．改良苯酚－硫酸法测定
苦瓜多糖含量［Ｊ］．食品科技，２００５（７）：８１－８４．
［９］ 于加平．水蜡树果中多糖的提取纯化及其抗氧化性
［Ｊ］．贵州农业科学，２０１１，３９（１２）：２２６－２２８．
（责任编辑：冯　卫）
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　王英臣 　金银木果实中多糖的提取及其抗氧化性
　ＷＡＮＧ　Ｙｉｎｇ－ｃｈｅｎ　ｅｔ　ａｌ　Ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ　ｆｒｏｍＬｏｎｉｃｅｒａ　ｍａａｃｋｉｉ　ａｎｄ　Ｉｔｓ　Ａｎｔｉ－ｏｘｉｄａｔｉｏｎ