全 文 ：收稿日期:2008-05-05
作者简介:王海龙(1983-), 男(汉族), 黑龙江牡丹江人 ,硕士研究生;屠鹏飞(1963-), 男(汉族), 浙江黄岩人 , 教授 ,
博士 , 主要从事天然产物的化学成分及其活性研究 , Tel.010-82802750, E-mailpengfeitu@vip.163.com。
文章编号:1006-2858(2009)04-0279-03
岗梅叶的化学成分
王海龙 1, 2 , 吴立军 1 , 雷　雨 1 , 周思祥2 , 屠鹏飞 2
(1.沈阳药科大学 中药学院 , 辽宁 沈阳 110016;2.北京大学 药学院 ,北京 100083)
摘要:目的 对岗梅叶的化学成分进行研究。方法 采用反复硅胶柱色谱 、凝胶柱色谱进行分离﹑
纯化 , 并通过其理化性质 ,结合光谱数据鉴定其化学结构。结果 分离得到 9个化合物 , 分别鉴定
为:rotundioicacid(1)、2α, 3β, 19α-三羟基乌索-12-烯-23, 28-二羧酸(2)、2α, 3β, 19α-三羟基齐墩果-
12-烯-23, 28-二羧酸(3)、山柰酚(4)、山柰酚-3-O-β-D-葡萄糖苷(5)、2(E)-2, 6-二甲基-2, 7-辛二
烯-6-羟基-1-醇苷(6)、2, 3-二羟基苯甲酸(7)、β-谷甾醇(8)、胡萝卜苷(9)。结论 化合物 1-7为从
该种植物中首次分离得到。
关键词:梅叶冬青;化学成分;结构鉴定
中图分类号:R284.1　　　文献标志码:A
　　岗梅叶为冬青科植物梅叶冬青 〔Ilexasprela
(Hook.etArn.)Champ.exBenth.〕的叶 ,主要产
地为广东 、广西 。其性味苦寒 ,具有清热解毒 、生
津止渴 、利咽消肿 、散瘀止痛等功效。临床上报道
治疗各种感染等[ 1] 。但对岗梅叶的化学研究少
有报道 。为深入研究该植物 ,作者对其叶的化学
成分进行了研究 ,采用多种分离方法 ,得到 9个化
合物 ,根据其理化性质和波谱学数据并结合文献
鉴定了它们的结构 ,分别鉴定为:rotundioicacid
(1)、2α, 3β, 19α-三羟基乌索 -12-烯 -23, 28-二羧酸
(2)、2α, 3β, 19α-三羟基齐墩果-12-烯-23, 28-二羧
酸(3)、山柰酚 (4)、山柰酚-3-O-β-D-葡萄糖苷
(5)、2(E)-2, 6-二甲基-2, 7-辛二烯 -6-羟基 -1-醇
苷(6)、2, 3-二羟基苯甲酸(7)、β-谷甾醇 (8)、胡
萝卜苷(9)。其中化合物 1-7为首次从该种植物
中分到 。
1　仪器与材料
X4数字显示显微熔点测定仪(温度未校正 ,
北京福凯仪器公司), JENLJNM-A300、Varian
Unity-500、 VarianINOVA-500 型核磁共振仪
(TMS为内标 ,美国 Varian公司), QSTAR型质
谱仪(美国 ABI公司)。
葡聚糖凝胶(SephadexLH-20,瑞典 Pharma-
cia公司),薄层色谱硅胶(GF254,青岛海洋化工
厂),柱色谱硅胶 (75 ～ 150 μm,青岛海洋化工
厂),色谱用试剂(分析纯 ,北京化工厂)。
岗梅叶采自广东省电白县 ,经北京大学药学
院屠鹏飞教授鉴定为梅叶冬青 〔Ilexasprela
(Hook.etArn.)Champ.exBenth.〕的干燥叶 ,标
本存放于北京大学中医药现代研究中心样品库 。
2　提取分离
岗梅叶 14.5 kg,用体积分数为 95%的乙醇
溶液和体积分数为 50%的乙醇溶液分别提取 3
次 。合并 3次提取液过滤 ,减压回收乙醇并浓缩
后依次用石油醚 、氯仿 、正丁醇萃取 ,得到石油醚
层(212 g)、氯仿层(832g)、正丁醇层(1 613 g)。
对氯仿层(308g)进行分离 ,氯仿-甲醇(体积比为
100∶1)洗脱 ,分离得到化合物 8(200 mg);氯仿 -
甲醇(体积比为 20∶1)洗脱 ,分离得到化合物 9
(400mg)、化合物 7(18 mg);氯仿 -甲醇(体积比
为 20∶1)洗脱 ,后经过凝胶再硅胶的方法 ,分离得
到化合物 1(2 g)、化合物 2(8 mg)、化合物 3
(7 mg);氯仿 -甲醇(体积比为 40∶1)洗脱 ,分离得
到化合物 4(300mg);氯仿 -甲醇(体积比为 10∶1)
洗脱 ,分离得到化合物 5(19 mg)、化合物 6(3
mg)。化合物 1-7的结构式见图 1。
3　结构鉴定
化合物 1:白色粉末;Libermann-Burchard反
应呈阳性 ,体积分数为 10%的硫酸乙醇溶液显色
第 26卷 第 4期
2 0 0 9 年 4 月
沈　阳　药　科　大　学　学　报
JournalofShenyangPharmaceuticalUniversity
Vol.26 　No.4
Apr.2009 p.279
DOI :10.14066/j.cnki.cn21-1349/r.2009.04.004
呈蓝色斑点;ESI-TOF-MS:501.3066 [ M-1 ] ;
1H-NMR(500 MHz, C5D5N)δ:0.97、1.10、 1.43、
1.63、1.67(3H, s, — CH3)、1.11(d, J=6.5 Hz,
30-CH3)、4.67(1H, dd, J=10.0 Hz, H-3)、 3.03
(1H, s, H-18)、5.59(1H, br, s, H-12);13C-NMR
(125 MHz;C5D5N)数据见表 1。以上数据与文
献 [ 2]中化合物 rotundioicacid的谱学数据相一
致 ,故鉴定化合物 1为 rotundioicacid。
Fig.1　Thestructuresofcompounds1-7
　　化合物 2:白色粉末;Libermann-Burchard反
应阳性 ,体积分数为 10%的硫酸乙醇溶液显色呈
蓝色 斑 点;ESI-TOF-MS:517.4141 [ M- 1 ] ;
13C-NMR(125MHz, C5D5N)数据见表 1。以上数
据与文献 [ 3]中化合物 2α, 3β, 19α-三羟基乌索 -
12-烯 -23, 28-二羧酸的谱学数据相一致 ,故鉴定为
2α, 3β, 19α-三羟基乌索 -12-烯 -23, 28-二羧酸 。
化合物 3:白色粉末;Libermann-Burchard反
应阳性 ,体积分数为 10%的硫酸乙醇溶液显色呈
蓝色 斑 点;ESI-TOF-MS:517.4140 [ M- 1 ] ;
13C-NMR(125MHz, C5D5N)数据见表 1。以上数
据与文献 [ 4]中化合物 2α, 3β, 19α-三羟基齐墩
果 -12-烯 -23, 28-二羧酸的谱学数据相一致 ,故鉴
定其为 2α, 3β, 19α-三羟基齐墩果-12-烯-23, 28-二
羧酸。
Table1　13C-NMRchemicalshiftsdata(δ)ofcompounds1-3
No. 1 2 3 No. 1 2 3
1 39.1 48.1 48.1 16 26.4 26.4 28.7
2 27.8 68.6 68.8 17 48.3 48.5 46.0
3 75.5 81.0 81.1 18 54.4 54.8 44.1
4 54.4 54.8 54.5 19 72.7 72.7 81.7
5 52.0 52.3 52.6 20 42.4 42.6 36.7
6 21.8 21.5 21.5 21 26.9 27.2 29.2
7 33.4 33.3 33.3 22 38.5 38.4 33.7
8 40.7 40.1 40.5 23 180.6 180.5 180.5
9 43.0 48.2 48.2 24 12.2 13.5 13.4
10 36.8 38.7 38.4 25 16.0 17.5 17.5
11 24.0 24.3 24.6 26 17.0 17.2 17.3
12 127.8 127.8 123.1 27 24.7 24.8 24.6
13 140.0 139.9 144.8 28 180.6 180.0 180.7
14 42.1 42.2 42.4 29 27.1 27.0 28.9
15 29.3 29.2 29.1 30 16.8 16.8 25.0
280 沈　阳　药　科　大　学　学　报 第 26卷　
　　化合物 4:黄色粉末 (甲醇 ), mp273 ～
275℃,盐酸镁粉反应呈阳性 ,表明为黄酮类化合
物 。 1H-NMR(500 MHz, DMSO-d6)δ:12.47(5-
OH, s)、10.76(3-OH)、10.08(4′-OH)、9.36(7-
OH)、6.18(H-6)、6.42(H-8)、6.91(2H, H-3, H-
5)、8.03(2H, H-2′, H-6′);13C-NMR(125 MHz,
DMSO-d6)δ:146.3(C-2)、135.1(C-3)、175.4(C-
4)、155.6(C-5)、97.7(C-6)、163.3(C-7)、93.0
(C-8)、160.2(C-9)、102.5(C-10)、121.1(C-1′)、
114.9(C-2′, C-6′)、128.9(C-3′, C-5′)、158.7(C-
4′)。以上数据与文献 [ 5-8]中化合物山柰酚的
谱学数据相一致 ,鉴定其为山柰酚。
化合物 5:黄色簇晶 (甲醇 ), mp178 ～
180℃。盐酸-镁粉及 Molish反应均为阳性 ,薄层
酸水解只检测到葡萄糖。 1H-NMR(DMSO-d6 ,
500MHz)δ:8.02(2H, d, J=9 Hz, H-2′, H-6′)、
6.87(2H, d。 J=9 Hz, H-3′, H-5′)、6.12(1H, d, J
=1.5 Hz, H-6)、6.42(1H, d, J=1.5 Hz, H-8)、
5.42(1H, d, J=7.5Hz, H-1″);13C-NMR(DMSO-
d6 , 125 MHz)δ:155.8(C-2)、132.7(C-3)、176.9
(C-4)、 163.6(C-5)、98.1(C-6)、 160.6(C-7)、
93.1(C-8)、155.7(C-9)、103.3(C-10)、120.4(C-
1′)、130.4(C-2′, C-6′)、114.6(C-3′, C-5′)、159.4
(C-4′)、100.4(C-1″)、73.7(C-2″)、76.0(C-3″)、
69.4(C-4″)、77.0(C-5″)、60.3(C-6″)。以上数据
与文献 [ 7 -8]化合物山柰酚-3-O-β-D-葡萄糖苷
的谱学数据相一致 ,故鉴定其为山柰酚-3-O-β-D-
葡萄糖苷。
化合物 6:无色油状物 ,体积分数为 10%的硫
酸乙醇溶液显色呈红色斑点 。 ESI-MS给出准分
子离子峰 355.2658 [ M+Na] +,确定其分子式
C16H28O7。 13C-NMR(CD3OD, 125 MHz)δ:69.0
(C-1)、 132.2(C-2)、128.8(C-3)、 23.0(C-4)、
42.8(C-5)、72.3(C-6)、147.0(C-7)、111.3(C-
8)、 14.1(C-2′)、28.4(C-6′)、103.5(C-1″)、75.2
(C-2″)、78.4(C-3″)、 71.8(C-4″)、 78.6(C-5″)、
62.9(C-6″)。以上数据与文献 [ 6-9]中化合物 2
(E)-2, 6-二甲基-2, 7-辛二烯-6-羟基 -1-醇苷的谱
学数据相一致 ,故坚定为 2(E)-2, 6-二甲基-2, 7-
辛二烯 -6-羟基 -1-醇苷 。
化合物 7:无色针晶(石油醚), UV254nm有
暗斑 , 体积分数为 10%的硫酸乙醇溶液显灰黑
色 。 EI-MS:156 , 分 子 式 为 C7O4H6。 1NMR
(CD3OD, 500 MHz)δ:6.66(H-5, t, J=8 Hz)、
6.93(H-4, dd, J=8 Hz, 1.5 Hz)、7.28(H-6, dd,
J=8 Hz, 1.5 Hz);13C-NMR(CD3OD125 MHz)
δ:173.8(—COOH)、151.6(C-1)、 146.8(C-2)、
114.2(C-3)、119.6(C-4)、121.4(C-5)、121.8(C-
6)。以上数据与文献 [ 10]中化合物 2, 3-二羟基
苯甲酸的谱学数据相一致 ,故鉴定为 2, 3-二羟基
苯甲酸 。
化合物 8:无色针晶 (石油醚 、丙酮), mp
134 ～ 136 ℃, LibermannBurchard反应呈阳性 ,体
积分数为 10%的硫酸乙醇溶液显色为紫色。与
标准品 β-谷甾醇共薄层 Rf值一致 ,故鉴定其为 β-
谷甾醇 。
化合物 9:白色粉末 , mp110 ～ 300 ℃。与标
准品胡萝卜苷对照品共薄层 Rf值一致 ,混合测熔
点不下降 ,故鉴定其为胡萝卜苷 。
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(下转至第 298页)
281第 4期 王海龙等:岗梅叶的化学成分
EvaluatingthenormalizedHPLC fingerprintsof
Qingrejieduinjection
SUNGuo-xiang, SHIXiang-fen, ZHAOXin
(SchoolofPharmacy, ShenyangPharmaceuticalUniversity, Shenyang110016, China)
Abstract:ObjectiveToestablishthenormalizedchromatographicfingerprints(NCFP)ofQingrejiedu(tra-
ditionalChinesemedicine)injectionandtoevaluatethembyusingthe25relativelynormalizedparameters.
MethodsThechromatographicfingerprints(CFPs)of11 herbaldrugs, oneintermediatesandpreparationof
Qingrejieduinjection(QRJDI)wereobtainedbyinjecting5-10 μLofthesamplesolutioneachtimeina
CenturySILC18 BDScolumn(250mm×4.6mm, 5μm)withthelowpresuregradientelutionsolventcom-
posedof1%(φ)aceticacidwaterand1%(φ)aceticacidacetonitrile.Theflowratewas1.0 mL·min-1.
Thecolumntemperaturewasmaintainedat(30.00±0.15)℃, andthedetectionwavelengthwassetat254-
300nm.The13CFPswereassesedbythe25 relativelynormalizedindexcalculatedbythesoftwareofDigi-
talizedevaluationsystem ofsuper-informationcharacteristicfortraditionalChinesemedicinefingerprints
3.0, whichwasinventedbySunGuo-xiang.ResultsThebestfingerprintswereS9RadixOphiopogonisand
S11 RadixScrophulariae, secondlywereS1 FlosLonicerae, S3FructusForsythiae, S7 RadixIsatidis, S8Ra-
dixRehmannia, S10 HerbaGueldenstaedtiae, S12intermediateandS13 QRJDI.ConclusionsTheNCFPcan
reflectthefulviewofTCMfingerprints.The25 parameterscanbeusedtoobjectively, authenticalyand
thoroughlyrevealhowbeterarethefoundationoftheCFPsanditsnormalizedcharacteristicsoftheNCFP
ofTCM.
Keywords:Qingrejieduinjection(QRJDI, traditionalChinesemedicine);normalizedchromatographicfinger-
prints(NCFP);chromatographicfingerprintindexfixedpointFa/t;chromatographicfingerprintequalsignalin-
dexFt/a.
(上接第 281页)
ChemicalconstituentsoftheleavesofIlexasprela
WANGHai-long1, 2 , WULi-jun1 , LEIYu1 , ZHOUSi-xiang2 , TUPeng-fei2
(1.SchoolofTraditionalChineseMateriaMedica, ShenyangPharmaceuticalUniversity, Shenyang110016,
China;2.SchoolofPharmaceuticalSciences, PekingUniversity, Beijing100083, China)
Abstract:ObjectiveTostudythechemicalconstituentsoftheleavesofIlexasprelainordertorevealthe
activecomponentsfortheirfurtherdevelopment.MethodsThecompoundswereisolatedbychromatography
onsilicagelcolumnsandidentifiedonthebasisofphysico-chemicalpropertiesandspectralanalysis.Results
Ninecompoundswereobtainedandidentifiedasrotundioicacid(1), 2α, 3β, 19α-trihydroxy-urs-12-ene-23,
28-dioicacid(2), 2α, 3β, 19α-trihydroxyolean-12-ene-23, 28-dioicacid(3), kaempferol(4), kaempferol-3-
O-β-D-glucoside(5), colorlessoil(6), balanophonin(7), β-sitosterol(8), daucosterol(9).Conclusions
Compounds1-7 areisolatedfromthisplantforthefirsttime.
Keywords:Ilexasprela;chemicalconsitutent;structureidentification
298 沈　阳　药　科　大　学　学　报 第 26卷