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杨梅核仁提取液对胃癌(803;823)细胞的杀伤抑制作用初步研究



全 文 :杨梅核仁提取液对胃癌(803 ,823)细胞的
杀伤抑制作用初步研究
哈尔滨医药集团公司 刘 川
哈尔滨中药二厂   李 伟
摘要 首次发现杨梅核仁对胃癌(803 , 823)细胞在体外培养条件下 , 具有明显的杀伤和抑制作用。
1 样品制备与材料
1.1 样品经刘中申鉴定为杨梅科植物 Myrica rubra 的
果核。
1.2 将干燥果核砸开 , 取果仁 2.0g , 经研磨 、过滤灭
菌 ,制成 4%半澄明之水溶液。
1.3 胃癌(803 , 823)细胞系;日本产 RPMI1640 10%小
牛血清 , 37℃, 5%CO 2温箱内培养 。
2 培养方法
2.1 取长成单层的 803 , 823细胞 ,经胰酶消化 , 分别制
成 3.6×105 分装到 25ml细胞培养瓶中 , 每瓶 1ml , 每
组 2 瓶 ,另取 3 瓶为细胞对照。
2.2 试验组用含有杨梅核仁提取液的 1640 培养液 ,
每组按 1∶0.5 倍比稀释 , 每瓶 3ml , 总量 4ml , 细胞对照
组每瓶 3ml 1640 培养液 , 最终浓度 803 为 5000、2500、
1250μm/ml , 823 为 10000 、5000 、2500 、1250、625μg/ ml ,
37℃:5%CO2 温箱孵育 4 小时后 , 弃去培养液 , 各加 0.
5ml胰酶消化计数 , 计数贴壁细胞数(万/ml)比较各组
细胞死亡率 ,求出 LD50。
3 结 果
杨梅核仁对 803 , 823(胃癌)细胞有明显的抑制作
用 ,随浓度增高杀伤率也增高(见表 1 、表 2)。
表 1 杨梅核仁提取液对 802
细胞的杀伤作用比较
μg/ml X 死亡率% logD
对照
5000
2500
1250
18.3
6.5
9.25
11.5
64.48
49.45
37.16
3.7
3.4
3.1
表 2 杨梅核仁提取液对 823
细胞的杀伤作用比较
μg/ml X 死亡率% logD
对照
10000
5000
2500
1250
625
31.75
11.75
19
25
26.25
31.5
62.99
40.16
21.26
17.32
0.79
4
3.7
3.4
3.1
2.8
4 讨 论
体外抑瘤试验是筛选抗癌药物的常用方法之一, 计
数细胞死亡率与观察形态变化是判断药物细胞毒性的
可靠客观指标 , 一般具有直接细胞毒性作用的抗癌药,
体外实验结果与体内抑瘤试验一致 , 通过试验, 结果表
明 ,杨梅核仁提取液对 803、823 细胞(胃癌)均有明显的
杀伤抑制作用。进一步肿瘤动物实验是有希望的。
7 供试品溶液测定
精密吸取对照品溶液 10μl、供试品溶液 20μl , 分别
注入 HPLC 仪 ,测得结果见表 2。
表 2 供试品含量测定结果
批 号 含量(mg/ g) RSD(%) 批 号 含量(mg/g) RSD(%)
951019
951020
951021
951022
951023
951024
2.83
2.85
2.84
3.0
2.90
2.86
1.2
0.9
0.5
1.1
0.9
1.0
951025
951026
952017
951028
951029
951030
2.83
2.87
2.89
2.88
2.89
2.78
0.8
0.7
0.6
0.7
0.5
0.3
8 稳定性试验
将样品三批放置室温(25℃)3 个月 , 每 15 天测定
1 次含量 ,结果无明显变化是比较稳定的。
9 讨 论
供试品甲醇液不稳定 , 应当天配制 ,阿魏酸对照品
溶液室温放置 24 小时 ,含量无明显变化。
本品喷粉时 , 温度对阿魏酸含量影响很大 , 温度控
制在 140℃以下为好 ,粉末呈淡黄色。
10 参考文献
1 中草药成份化学.
2 药学学报 , 1980;15:321
3 李增标 ,等.药物分析杂志 , 1990;10(B):138~ 142
  收稿日期:1997-10-05
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              中 医 药 信 息
INFORMATION ON TRADIT IONAL CHINESE M EDICINE
           
1998年 第 1期