全 文 ：文章编号 :1 01 一 7 4 2 l( 2 03 )3 0一 0 20一 0 4
二氢杨梅树皮素的抑菌作用研究
孙志良` , 刘 自过` ,杨伟丽 “ , 熊皓平“
( 1
.湖南农业大学动物科学技术学院 ,湖南 长沙 410 璐 ;2 .湖南农业大学食品科学技术学院 ,湖南长沙 410璐 )
摘 要 :采用二倍稀释法对显齿蛇葡萄中主要成分二氮杨梅树皮素的体外抗菌活性
进行浏定 , 并与相同实验条件下盐酸黄连素的抑菌活性相比较 ; 同时还研究了培养
基不同声及药物州对二氮杨梅树皮素抑菌效果的影响 。 结果表明 : 二氮杨梅树
皮素对动物的 7 种致病菌株均有较强的抑菌作用 , 与盐酸黄连素的抑菌效果相当或
略强 。 培养基在酸性 、 碱性条件下 , 二氮杨梅树皮素的抑菌作用显著增强 , 酸性二氮
杨梅树皮素和碱性二氮杨梅树皮素的抑菌效果比中性二氢杨梅树皮素的抑菌效果
显著增强 。
关键词 :二氮杨梅树皮素 ;显齿蛇葡萄 ; M I C ; M BC
中图分类号 泪夕4 9 . 75 6 . 3 ;留59 . 7 文献标识码 : A
葡萄科蛇葡萄属野生藤本植物显齿蛇葡萄 ( A l扮P el 勿见 15 9 代川改众 n at at w . T . w an g . )主要
分布于我国长江流域以南的广东 、广西 、湖南 、湖北 、 江西 、 福建 、 云南 、贵州等省区 , 民间将其幼
嫩茎叶制成保健茶 ,味甘淡 、性凉 ,具清热解毒 、 祛风湿 、强筋骨之功效 ;用于治疗感冒发热 、 咽
喉肿痛 、黄疽型肝炎 、 疮疖等症 ,具有 “ 神茶 ” 之称 。 近年来有关学者研究了显齿蛇葡萄水提物
的抑菌消炎镇痛作用 z1[ ,研究了其有效组分总黄酮的抗血小板凝聚 , 降血脂 、抗氧化及抗肿瘤
等作用阎 。 二氢杨梅树皮素 (口妙d or m y r i ic n) 为显齿蛇葡萄中的主要黄酮类成分闭 , 是藤茶中
发挥药理效应的主要化学成分之一 。 目前对显齿蛇葡萄进行了初步开发利用 ,其产品有“ 茅岩
葡茶 ” 、 “ 消炎含片 ” 、 “ 宁化藤茶 ” 、 “ 含化片” 等 l5[ ,但尚未见显齿蛇葡萄在兽医临床应用及药理
研究的报道 。 本文研究了二氢杨梅树皮素对动物常见致病菌的抑菌作用 ,并就培养基不同 PH
及二氢杨梅树皮素不同出对抑菌效果的影响 ,为显齿蛇葡萄应用于兽医临床提供依据 ,现将
结果报道如下 。
1 材料和方法
1
.
1 材料
1
.
1
.
1 菌株 金黄色葡萄球菌 ( S at 神 ) l~ cu
: a u
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:
)
、 溶血性链球菌 (价功。沙 i ` st 探夕t~
-
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)
、 大肠杆菌 ( E “ 汽群￡认故 col ` ) 、 副伤寒沙门氏菌 ( & l伽” 亡l纽 aP ar 勺州i、 ) 、 绿脓杆菌 (几翻 -
成盯叨an : ae ur g i八.or 刃 ) 、 枯草芽胞杆菌 (压“ “ us sab ilt 钻 ) 、 白色念珠菌 (伍dn 汕 al 压 ca n : ) , 由湖
南省生物制药厂惠赠 。
1
.
1
.
2 实验药品 二氢杨梅树皮素由湖南金农生物资源股份有限公司提供 , 采用逆流色谱
收稿日期 : 20() 3 一 05 一 2 8
甚金项目 :湖南省教育厅项目 ( l0 C 130 )
作者简介 :孙志良( 19 65 一 ) ,男 , 湖南省南县人 , 副教授 ,从事中草药药理研究 。
DOI : 10. 16720 /j . cnki . tcyj . 2003. 03. 008
第 3期 孙志良等 :二组杨梅树皮素的抑菌作用研究
分离系统提纯 ,其纯度为 9 . 3% ;盐酸黄连素由湖南农业大学动物药业有限公司生产 ,其含量
为 2% ,批准文号为湘兽药字 ( 20 2) 20 38 224 。
1
.
2 方法
1
.
2
.
1 最低抑菌浓度 ( M IC )和最低杀菌浓度 ( M BC )的测定 参照文献【6 〕方法进行 。 以二
倍稀释法测定二氢杨梅树皮素的 M IC , 取完全抑菌培养物涂布肉汤平板 , 没有细菌生长的最
低药物浓度即为其最低杀菌浓度 (N旧C ) 。
1
.
2
.
2 培养基 pH 条件时二氮杨梅树皮素抑菌效果的影响 将培养基用盐酸或氢氧化钠分
别调 p H S , 0 、 7 . 0 和 9 . 0 ,同样采用二倍稀释法测定不同 PH 条件下二氢杨梅树皮素的抑菌效
果 。
1
.
2
.
3 二氮杨梅树皮素不同州 条件对抑菌效果的影响 用盐酸或氢氧化钠分别将一定浓
度的二氢杨梅树皮素溶液调 p H 为 5 . 0 、 7 . 0 和 9 . 0 ,采用二倍稀释法测定药物不同声条件下
二氢杨梅树皮素的抑菌效果 。
2 结果
2
.
1 二氮杨梅树皮素对各实验菌株的最低抑菌浓度 《M IC )和最低杀菌浓度【M】蛇 )
二氢杨梅树皮素对各实验菌株均有不同程度的抑菌和杀菌作用 ,其效果与盐酸黄连素的
抑菌效果相当或略强 , 见表 1 。
表 1 二氮杨梅树皮素对各实验菌株的抑菌和杀菌效果 (mg ]/ 的L )
菌 株 二氢杨梅树皮素
M IC 加fI蛇
盐酸黄连索
h旺犯
525
5.25L0气
ù哎口,白ù、ù咤ù门`ōà佗一ō6,臼,`6J
.…`:0
,
IJ
劝`五
0
,i1,`金黄色葡萄球菌
溶血性 链球菌
大 肠 杆 菌
副伤寒沙门氏菌
绿 脓 杆 菌
枯 草芽胞 杆 菌
白 色 念 珠 菌
0
.
3 12 5
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1
.
2 5
0
.
6 25
0
.
6 25
0
.
6 2 5
0
.
62 5
0
.
6 25
2
.
5
2
.
5
1
.
2 5
1
.
2 5
2 0
2
.
5
2
.
2 培养基州 条件对二氢杨梅树皮素抑菌效果的影响
培养基不同的 PH 条件 ,使细菌的生长受到一定的影响 , 中性条件下有利于细菌的生长 ,
而酸性和碱性积极条件下不利于细菌的生长 , 因此 ,二氢杨梅树皮素在酸性和碱性条件下的抑
菌活性比中性条件有很大的增强 ,见表 2 。
表 2 培养基州 条件对二氮杨梅树皮素抑菌效果的影响 (mg l/ 的歹.)
价诬 5 . 0 PH 7 . 0 PH g . 0
菌 株 M lc M氏二 M IC 入任〔 M lc M BC
佗ù一、à口勺气
256
,几嘴且nU0
金黄色葡萄球菌
溶血 性链 球菌
大 肠 杆 菌
副伤寒沙门氏菌
绿 脓 杆 菌
枯草芽胞 杆菌
白 色 念 珠 菌
一 ”表示无细菌生长 。
0
.
3 1 2 5
0
.
0 0 9
0
. 加 9
0
.
1 5
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1
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2 5
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0
.
0 7 5 0
.
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.
7 5 0
.
1 5
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1 5 0
.
3 12 5
0
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0 7 5 0
.
62 5
0
.
032 5 0
.
07 5
2
.
3 二氮杨梅树皮素不同 p H条件对抑菌效果的影响
将二氢杨梅树皮素制成州不同的酸性药物 、 中性药物及碱性药物 ,抑菌试验结果表明 ,
酸性药物的抑菌效果强于碱性药物 ,碱性药物的抑菌效果强于中性药物 ,见表 3 。
表 3 二氮杨梅树皮素不同 PH 条件对抑菌效果的影响
闭 5 . 0 p H 7 . 0
( m g l/ 爪 L )
PH 9
.
0
菌 株 lM c MB C M lc M B C lM c M B C
金黄色葡萄球菌
溶血 性链 球 菌
大 肠 杆 菌
副伤寒沙门氏菌
绿 脓 杆 菌
枯草 芽胞 杆菌
白 色 念 珠 菌
0
.
0 7 5 0
.
1 5
0
.
0 7 5 0
.
1 5
0
.
0 3 7 《 0 . 0 7 5
0
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.
037 5
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.
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0
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0 3 7 5 0
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1
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2 5
1
.
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2
.
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2
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5
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0 7 5
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.
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.
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.
07 5
l 0
0
.
6 2 5
3 讨论
3
.
1 显齿蛇葡萄植物中 ,总黄酮含量高达 38 . 965 % ,其中二氢杨梅树皮素单体占黄酮总含量
的 31 % ,属黄酮类化合物在植物中分布的特例 v[] 。 黄酮类天然产物是近年来天然药物和人类
健康产品研究开发的热点 ,具有清除自由基 、抗氧化 、抗血栓 、抗肿瘤 、 消炎抗菌等多种功效 。
二氢杨梅树皮素系黄酮类化合物 , 除具以上功能外 ,还具有保肝护肝功能 81[ 。 通过从二氢杨
梅树皮素的抑菌试验结果可以看出 , 该单体化合物对动物致病菌具有较强的抑制作用 , 与盐酸
黄连素的抑菌作用相当或较强 ,在酸性或碱性条件下的抑菌作用比中性条件下强 , 酸性二氢杨
梅素或碱性二氢杨梅素的抑菌作用比中性二氢杨梅素的抑菌作用强 。 主要原因是 : 一方面酸
性或碱性条件下 ,细菌对外界不良环境的抵抗力减弱 ,增加了二氢杨梅树皮素的抑菌效果 ;另
一方面 ,从二氢杨梅树皮素 ( 3 , 5 , 7 , 3 ’ , 4 ’ , 5 ’ 一六经基 2 , 3一双氢黄酮 9[] )化学结构可 以看出 ,
该分子中的化学基团在酸碱性条件下电离程度改变 ,使二氢杨梅树皮素的溶解性能增加 ,导致
有效药物浓度增加 。 至于抗菌作用的机理有待进一步研究 。
3
.
2 随着养殖集约化和产业化规模的发展 , 动物病原性疾病的暴发和流行也呈现新的特点 ,
对动物病原性疾病的预防措施提出了更高的要求 。 目前 , 免疫接种的方法虽然取得了较好的
效果 ,但有效率不过 60 %左右 , 采取药物防治仍是目前进行疾病预防的主要措施之一 。 大量
抗生素和合成化学药品的使用对病原性疾病的防治起到了应有的疗效 ,但兽药在动物肉品及
副产品的残留 ,对人类健康造成了威胁 ,大量兽药以原形或代谢物的形式排出体外 ,破坏人类
生存的环境 [`” 〕。 因此 ,寻求高效 、 安全 、 健康的中草药制剂是 21 世纪绿色药品发展的需要 。
显齿蛇葡萄为天然植物 ,保留了原有成分结构的自然状态和生物活性 ,又具有对人和动物有益
的外源性物质精华 [川 ,不但含有多种无机营养元素 、 氨基酸和蛋白质 , 而且多酚总黄酮类含
量 、特别是黄酮中二氢杨梅树皮素含量极高 [’ 2 1 ,可作为集动物营养 、 防腐防霉剂 [’ 3〕、 动物保健
品及抗感染兽药多功能于一体的中草药资源加以开发 , 以绿色药品来保证绿色食品的安全性 。
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K即 讯川如 :以h y dr 的州 cet ;in A争两钾枷奴 5 g or 服介刀 a 奴 ; M CI ; M B C
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