全 文 :正交试验法优选沙枣花精油提取条件
郭珍,阎娥,戚小姣
(青海师范大学 化学系,西宁 810008)
摘要:以挥发油得率为指标,优选沙枣花精油的提取工艺。采用水蒸气蒸馏,正交试验和单因素试验相
结合。最佳提取条件为沙枣花阴干捏碎后,料液比1∶10,浸泡4h,提取6h,蒸馏速度150mL/h,氯化
钠浓度2%。蒸馏速度和提取时间为最主要影响因素,其次是料液比、氯化钠浓度,最后是浸提时间。
关键词:沙枣花;精油;正交实验;提取
中图分类号:TS202.2 文献标志码:A doi:10.3969/j.issn.1000-9973.2015.10.009
文章编号:1000-9973(2015)10-0034-04
Optimization of Extraction Process of Elaeagnus angustifolia L.
Flowers Essential Oil by Orthogonal Design
GUO Zhen,YAN E,QI Xiao-jiao
(Department of Chemistry,Qinghai Normal University,Xi'ning 810008,China)
Abstract:To optimize the extraction process of essential oil fromElaeagnus angustifolia L.flowers,
the orthogonal experiment and single factor experiment are carried out and the essential oil is obtained
by steam distilation.According to the yield of essential oil,the experimental results show that the
optimum extraction conditions are as folows:flowers are dried and crumbled,solid-liquid ratio is
1∶10,soaking time is 4h,extraction time is 6h,distilation speed is 150mL/h and sodium chloride
concentration is 2%.The distilation speed and extraction time are the most important factors,
folowed by solid-liquid ratio,concentration of sodium chloride and soaking time.
Key words:Elaeagnus angustifolia L.;essential oil;orthogonal experiment;extraction
沙 枣 花 是 胡 颓 子 科 属 的 落 叶 小 乔 木 沙 枣
(Elaeagnus angustifolia L.)的花,沙枣树在我国北方大
多数地区均有分布,尤以西北地区分布面积最广,资源
储量大。沙枣花期5~6月,花呈漏斗形,银白色,下垂,
长5~7mm,具有浓郁悠长的特殊香味,香味类型人群
接受度高[1,2],并据《中药大辞典》记载:沙枣花具有止咳
平喘的功能,可用于治疗慢性气管炎[3,4]。沙枣花香气
主要来自于精油,沙枣花精油可作为天然的香料当作食
品添加剂,既可以使食品有特殊风味,还具有保健价值。
青海沙枣花精油的提取工艺未见文献报道,本文采用正
交试验和单因素试验相结合的方法[5-7],筛选出青海沙
枣花精油提取的最佳条件,为开发利用青海沙枣花资源
提供一些基础资料和科学依据。
1 材料与方法
1.1 材料与仪器
收稿日期:2015-05-22
基金项目:教育部春晖计划项目(Z2011025)
作者简介:郭珍(1971-),女,教授,研究方向:植物资源开发与利用。
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基础研究 第40卷 第10期
2015年10月
中 国 调 味 品
China Condiment
沙枣花,采自青海省贵德县;所用试剂均为分析纯
(北京化工厂)。
AL204-型电子天平 梅特勒-托利多(上海)有限
公司;RE-52A旋转蒸发仪 上海亚荣生化仪器厂;优
普超纯水制造系统 北京同泰联科技发展有限公司;
调温加热提取装置 自制。
1.2 方法
沙枣花超纯水冲洗,阴干后,置于干燥器中备用。
准确称取50g,用表1的因素和水平,根据表2的试验
条件,用自制的挥发油提取装置,进行水蒸气蒸馏,馏
出液经无水乙醚萃取两次(V液∶V醚 为8∶1),分出乙
醚层,用无水 Na2SO4 干 燥24h[8],干燥后的萃取液
减压旋转蒸发,脱去溶剂,得油状物,称量。
2 结果与分析
2.1 正交试验设计
根据预备试验结果,选定对提取结果有较大影响
的5种因素(见表1),以精油得率为指标,选用L25(55)
正交试验表进行试验,结果见表2。
表1 因素水平表
Table 1Factors and levels
水平
因素
A浸提时间
(h) B
料液比 C氯化钠浓度(%)
D提取时间
(h)
E蒸馏速度
(mL/h)
1 1 1∶6 0 3 100
2 2 1∶8 2 4 150
3 3 1∶10 3 5 200
4 4 1∶12 4 6 250
5 5 1∶15 5 7 300
表2 正交试验结果分析
Table 2Results of orthogonal test
序号
因素
A B C D E
得油率
(%)
1 1 1 1 1 1 0.27
2 1 2 2 2 2 0.65
3 1 3 3 3 3 0.58
4 1 4 4 4 4 0.52
5 1 5 5 5 5 0.44
6 2 1 2 3 4 0.42
续 表
序号
因素
A B C D E
得油率
(%)
7 2 2 3 4 5 0.38
8 2 3 4 5 1 0.87
9 2 4 5 1 2 0.53
10 2 5 1 2 3 0.32
11 3 1 3 5 2 0.71
12 3 2 4 1 3 0.24
13 3 3 5 2 4 0.39
14 3 4 1 3 5 0.38
15 3 5 2 4 1 0.94
16 4 1 4 2 5 0.42
17 4 2 5 3 1 0.56
18 4 3 1 4 2 0.98
19 4 4 2 5 3 0.65
20 4 5 3 1 4 0.27
21 5 1 5 4 3 0.42
22 5 2 1 5 4 0.38
23 5 3 2 1 5 0.36
24 5 4 3 2 1 0.63
25 5 5 4 3 2 0.72
K1 2.46 2.24 2.33 1.67 3.27
K2 2.52 2.21 3.02 2.41 3.59
K3 2.66 3.18 2.57 2.66 2.21
K4 2.88 2.71 2.77 3.24 1.98
K5 2.51 2.69 2.34 3.05 1.98
R 0.084 0.194 0.138 0.314 0.322
表3 方差分析表
Table 3Variance analysis
变异来源 偏差平方和 自由度 方差 F值 Fa 显著水平
因素 A 0.023 4 0.006 F0.01(4,8)=7.006
因素B 0.128 4 0.032 5.505 F0.05(4,8)=3.838 **
因素C 0.069 4 0.017 2.989 F0.1(4,8)=2.806 *
因素D 0.303 4 0.076 13.083 F0.25(4,8)=1.664 ***
因素E 0.47 4 0.117 20.271 ***
误差e 0.023 4 0.006
修正误差e 0.046 8 0.006
总和 1.017
注:“***”为非常显著差异;“**”为显著差异;“*”为
比较显著差异。
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第40卷 第10期
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中 国 调 味 品
China Condiment 基础研究
以挥发油得率为考虑依据,由表2可知,以水为溶
剂,最佳工艺为A4B3C2D4E2,即浸提时间4h,料液比
1∶10,提取时间6h,蒸馏速度150mL/h,氯化钠浓度
2%。各因素影响挥发油提取率的大小顺序为:蒸馏速
度>提取时间>料液比>氯化钠浓度>浸提时间。由
表3可知,蒸馏速度和提取时间对沙枣花精油提取有
着显著影响。
2.2 花和茎叶精油提取比较
根据上述正交试验结果,对沙枣花干花、鲜花以及
茎和叶的精油提取率作一比较,结果见表4。
表4 沙枣花和茎叶出油率比较(n=3)
Table 4Comparison of yields of essential oils
from flower,stem and leaf
种类 得油率(%) 色泽 气味
干沙枣花 1.58 接近无色 甜香
鲜沙枣花 1.46 接近无色 甜香
沙枣花叶 0.43 淡黄 甜香
沙枣花茎 0.24 淡黄 甜香
由表4可知,干沙枣花出油率比鲜沙枣花略高,沙
枣花本身含水较少,所以干沙枣花和鲜沙枣花差异不
大,沙枣花的叶和茎中也含有少量精油,色泽和气味与
花中的精油类似,所以提取时,花中混有少量叶或茎不
影响色泽和气味。
2.3 单因素试验
通过单因素试验对各因素的影响作进一步深入探
讨。将蒸馏速度、提取时间、料液比、氯化钠浓度作为
考察因素,设计如下:蒸馏速度分别为100,150,200,
250,300mL/h;提取时间分别为3,4,5,6,7h;料液比
分别为1∶6,1∶8,1∶10,1∶12,1∶15;氯化钠浓度
分别为0,2%,3%,4%,5%。在每个单因素试验中,
除了变动的单因素外,其它都选择正交试验中选出的
最佳条件。
2.3.1 蒸馏速度对精油提取率的影响
由图1可知,挥发油提取率随蒸馏速度的增大
而减小,150mL/h的蒸馏速度较好,因为沙枣花花
蕾早期,细胞质浓厚,花初放期,分泌表皮具角质
层[9],溶剂分子撞破植物细胞壁,浸出挥发油,需要
一定的时间。
0 100 200 300 400
蒸馏速度(mL/h)
1.8
1.6
1.4
1.2
1
0.8
0.6
0.4
0.2
0
挥
发
油
得
率
( %
)
图1 蒸馏速度对出油率的影响
Fig.1Effect of distilation speed on yield of essential oil
2.3.2 提取时间对精油提取率的影响
0 2 4 6
提取时间(h)
1.8
1.6
1.4
1.2
1
0.8
0.6
0.4
0.2
0
挥
发
油
得
率
( %
)
图2 不同提取时间对出油率的影响
Fig.2Effect of extraction time on yield of essential oil
由图2可知,在1h时间里,挥发油的提取率是比
较低的。因为时间太短,溶剂对挥发油还没有充分作
用,随着提取时间的延长,提取率不断提高,3h以后
提取率增加速度快,6h最大,提取时间大于6h,挥发
油的提取率随着提取时间的增加而减少。原因可能是
挥发油性质不稳定,在长时间的加热情况下易分解,为
防止挥发油在提取过程中发生化学变化,提取时间定
为5~6h为宜,时间不宜过长。
2.3.3 料液比对精油提取的影响
6 8 10 12 15
料液比
1.8
1.6
1.4
1.2
1
0.8
0.6
0.4
0.2
0
挥
发
油
得
率
( %
)
图3 不同料液比对出油率的影响
Fig.3Effect of solid-liquid ratio on yield of essential oil
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基础研究 第40卷 第10期
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China Condiment
由图3可知,料液比是提取过程中一个比较重要
的影响因素。先是随着溶剂量的增加,挥发油的提取
量逐渐上升,这说明溶剂量增大,溶剂对挥发油的浸提
越充分。但是溶剂量过大,挥发油提取量下降,可能是
溶剂比例过大,其它成分在溶剂中的溶解量也随之增
大,而且从经济的角度考虑,溶剂量增大会导致生产成
本的增加,能源的浪费,所以在实际生产中应选取合适
的料液配比。可以看出1∶10,1∶12的差异不甚显
著,试验发现如果沙枣花单独提取,1∶10的料液比效
果最好,如果混合有少量茎叶(茎叶不超过1/5)提取,
1∶12料液比较好。
2.3.4 氯化钠浓度对精油提取率的影响
0 2 4 6
氯化钠浓度(%)
挥
发
油
得
率
( %
)
2
1.5
1
0.5
0
图4 氯化钠浓度对出油率的影响
Fig.4Effect of sodium chloride concentration
on yield of essential oil
由图4中可知,挥发油提取率随氯化钠浓度的
增大而增大,使用氯化钠浓度2%的溶剂时,提取率
提高最大,此后,随着氯化钠浓度的增大,提取率增
加趋势变小,因为氯化钠可以减少精油在水中的少
部分溶解。
2.4 提取次数及粉碎程度对精油提取率的影响
挥发油在第一次提取时已大部分提出,所以提
取一次即可。沙枣花花朵较小,提取时捣碎与整花
提取差异不大。沙枣花轻度捣碎比原花朵出油率
略高,可能是许多沙枣花呈半开放状态,水蒸气不
能与花瓣充分接触,在适当捣碎后,蒸馏时油细胞
更容易胀破表皮细胞壁,使出油率有所增加,但完
全捣碎,可能使部分包裹油细胞的细胞壁破碎,蒸
馏时,部分不稳定组分更容易挥发或分解而消失,
而使出油率略有下降。
3 结论
正交试验和单因素试验相结合,对影响沙枣花精
油提取率的主要因素进行分析。结果表明:水提取沙
枣花精油的最佳工艺参数为浸提时间4h,料液比
1∶10,提取时间6h,蒸馏速度150mL/h,氯化钠浓度
2%。实际操作中,各影响因素可以控制为一定范围,
蒸馏速度100~150mL/h,提取时间5~6h,料液比
1∶10~1∶12,氯化钠浓度2%~3%,浸提时间3~
4h。
蒸馏速度和提取时间为最主要影响因素,对沙枣
花精油提取有着影响显著,其次是料液比、氯化钠浓
度,最后是浸泡时间;粉碎状况对提取率无显著影响,
干花手捏碎或整花提取均可;沙枣花阴干后提取精油
或鲜沙枣花提取精油,提取率差异不大;挥发油主要存
在于花中,茎和叶中精油含量较少,茎和叶的精油颜色
和气味与花相似,花中混有少量茎叶可混合提取,不需
挑拣特别干净,混有茎叶时,料液比提高至1∶12;提
取次数一次即可。
参考文献:
[1]黄馨瑶,马晖,王小明,等.沙枣花香气的人气调查及化学成
分分析[J].天然产物研究与开发,2009(3):480-488,464.
[2]黄俊华,买买提江,杨昌友,等.沙枣研究现状与展望[J].中
国野生植物资源,2005,24(3):26-28.
[3]南京中医药大学.中药大辞典第二版(上册)[M].上海:上
海科学技术出版社,2006:1630.
[4]管文轲,徐娜.沙枣资源利用研究与开发现状述评[J].安徽
农学通报,2012,18(19):119-120.
[5]徐皓,杨培君,柳亚辉.紫参薯中花色苷提取工艺研究[J].
中国调味品,2013,38(6):71-74.
[6]廉宜君,李元元,李敏,等.超临界CO2 萃取和水蒸气蒸馏法
萃取沙枣花挥发油工艺的比较研究[J].中国中医药信息杂
志,2010,17(1):51-53.
[7]陈志慧.正交试验法优选姜花精油提取工艺条件[J].中国
调味品,2004(12):17-19.
[8]吕金顺,朱巧军,王亚军,等.合欢果挥发油化学成分的研
究[J].兰州大学学报(自然科学版),2003,39(1):59-62.
[9]邓彦斌,刘忠渊,姜彦成,等.沙枣花蜜腺的发育解剖学研
究[J].植物研究,1998,18(1):34-37.
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第40卷 第10期
2015年10月
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