全 文 ：Research & Information on Traditional Chinese Medicine
第7卷 第6期
2005年6月
Vol.7,NO.6
Jun. 2005
14 / R & I on TCM
陆英的GC指纹图谱研究
田晓玲1，毕开顺2
（1.辽宁省兽药饲料监察所,辽宁　沈阳　110016；
2.沈阳药科大学药学院,辽宁　沈阳　110016）
[摘要] 目的：建立陆英气相色谱（GC）指纹图谱的研究方法。方法：采用GC法，以HP-5石英毛细管
色谱柱，FID检测器，研究陆英的GC指纹图谱。结果：陆英的GC指纹图有 11个共有峰，精密度和稳定性
等均符合要求。结论：该方法准确、简单，为陆英的鉴别和质量检测提供了依据。
[关键词 ] GC；陆英；指纹图谱
陆英Sambucus chinensis Lindl.
为忍冬科接骨木属植物，又名八
棱麻、接骨木、八里麻等，多
年生草本，产于我国南北各地，
以根、茎、叶入药，是我国民
间常用草药，有活血散瘀，祛风
活络，发汗利尿之功效[1]。用于
治疗跌打损伤、风湿痛、脱臼、
肾炎水肿、脚气水肿、荨麻疹。
江西宜春应用陆英及其制剂治疗
肝炎取得了显著效果[2-4]。
由于中药材的药效不是来自
任何单一的活性成分，而基本上
是多种活性成分，甚至与“非活
性成分”的协同作用或“生克作
用”。天然药物质量评价方法是
对某一化学成分进行定性或定量
分析，而对大多数中药来说，任
何单一活性成分或指标成分都难
以准确地评价中药的真伪和优
劣，因而提出了指纹图谱检测标
准。本文采用GC法建立陆英药材
的指纹图谱，可作为其内在质量
控制的标准。
1　仪器与试剂
Agilent 6890N气相色谱仪
（配有 F I D 检测器、自动进样
器），C h e m S t a t i o n 工作站
（Agilent科技有限公司），R-205
型旋转蒸发仪（B U C H I 公司），
Sarturius-BS110S 分析天平（北
京赛多利斯天平有限公司），
KQ-250DB型超声波清洗器（昆
山超声仪器有限公司）。甲醇
（色谱纯，TE D I A）。β-谷甾
醇对照品β-sitosterol [DELTA
(甙尔塔)天然有机化合物(中药有
效成分标准品和对照品)研究中
心]。10个批次的陆英药材（来
源：1 贵州，2 湖南Ⅰ，3 江西
抚州Ⅰ，4江西抚州Ⅱ，5江西万
载，6 江苏Ⅰ，7 湖南Ⅱ，8 江
苏Ⅱ，9 江苏，10 云南，经沈阳
药科大学孙启时教授、江泽荣教
授鉴定）。
2 方法与结果
2.1 溶液的制备 对照品溶液的
制备：取β-谷甾醇对照品约
10mg，精密称定，置 50mL量瓶
中，加甲醇适量使溶解并定容至
刻度，摇匀，精密量取 5 m L 置
50mL量瓶中，加甲醇至刻度，摇
匀，得20ìg·mL-1的β-谷甾醇对
照品溶液。
样品供试液的制备：精密称
取于 60℃干燥 40 min的陆英药材
2.00g，加 95％乙醇 100mL，索
氏提取 3h，乙醇提取液置旋转蒸
发仪上减压蒸干后，残渣加甲醇
适量溶解并转移至 50mL量瓶中，
最后加甲醇至刻度，摇匀，作供
试液，进样前用 0. 45 ìm 滤膜滤
过，取续滤液，即得。
2 . 2指纹图谱检测条件 色谱
柱：HP-5(3m×0.32mm，0.25mm
膜厚)；进样口温度：28 0℃；检
测器温度：2 8 0℃；进样体积：
1.0ìL；炉温：200～280℃，程
序升温保持5min，以10℃·min-1的
速度升至 250℃，保持 5min，再
以3℃·min-1的速度升至280℃保
持 1 5 m i n；载气：纯氦；柱压
3 .5 P SI；分流比 2 0: 1；氢气流
速 4 5 m L · m i n - 1；空气流速
450mL·min-1。
2.3参照物峰的选择 将对照品溶
液和样品供试液分别进样 1 ì L，
记录色谱图，对照品色谱图见图
1（A），陆英样品色谱图见图 1
（B），对比保留时间可知 S 峰为
β-谷甾醇（tR为min）。在样品
供试液中加入对照品溶液，进
样，记录色谱图见图 1（C），色
谱峰增益结果也证明了上述推断
的正确性。测得β-谷甾醇理论塔
板数为 165495。由于β-谷甾醇
峰与其他峰分离较好，保留时间
DOI:10.13313/j.issn.1673-4890.2005.06.006
Research & Information on Traditional Chinese Medicine
第7卷 第6期
2005年6月
Vol.7,NO.6
Jun. 2005
R & I on TCM / 15
适中，而且在样品色谱图中相对
稳定，所以，选定β-谷甾醇为
参照峰建立指纹图谱。
2.4 精密度试验 以湖南Ⅰ药材
制备的样品为供试品，1d内连续
进样 5 次，记录色谱图。记录各
色谱峰的保留时间和积分面积。
以β-谷甾醇的保留时间和积分面
积为参照，换算出各共有峰的相
对保留时间和相对积分面积，结
果显示，样品供试液的分析结果
稳定，共有峰的相对保留时间和
相对积分面积相当一致，RSD均
小于 3%，表明仪器等整个检测系
统的精密度良好。
2.5 溶液稳定性试验 取湖南Ⅱ
样品，按 2.1中方法制备供试液，
分别在制备样品后的 0，2，4，
6，12 h进样测定，记录色谱图。
计算各峰的相对保留时间和相对
图1 参照峰选择
(A) β-谷甾醇对照品的色谱图 (B) 陆英样品色谱图
(C) 陆英样品加对照溶液的色谱图
图2 陆英对照指纹图谱
峰面积，各峰的相对保留时间的
RSD小于 1. 0%，相对峰面积的
RSD均小于5%。结果证明样品在
12 h内基本稳定。
2.6 重复性试验 精密称取湖南
Ⅱ样品，按2.1中方法制备供试液
表1 陆英对照指纹图谱数据
序号 T RT A RA
1 11.098 0.569 37.388 0.120
2 17.732 0.909 75.000 0.241
3 18.388 0.943 95.807 0.308
4 19.499 1.000 310.666 1.000
5 19.822 1.017 71.185 0.229
6 20.181 1.035 67.839 0.218
7 20.644 1.059 288.332 0.928
8 21.935 1.125 29.916 0.096
9 22.803 1.169 100.69 0.324
10 24.931 1.279 90.642 0.292
11 25.514 1.308 57.998 0.187
5份，并进行检测，记录色谱图，
计算相对保留时间和相对峰面积
的 R S D，各峰相对保留时间的
RSD均小于 1.5%，相对峰面积的
RSD均小于5%，结果表明方法重
复性较好。
2.7 陆英对照指纹图谱的建立
按照指纹图谱的建立方法，取已
收集到的 10个不同产地的陆英药
材制备供试液，将供试液在气相
色谱仪上进样分析，记录色谱
图，将各色谱文件以*.AIA格式的
文件导出，在《中药色谱指纹图
谱相似度评价系统》(国家药典委
员会)软件中导入，得到陆英对照
指纹图谱见图 2，共有 11个共有
峰，以β-谷甾醇的保留时间和峰
面积为参照，得到 11个峰的保留
时间(T)、相对保留时间(RT)、峰
面积(A)和相对峰面积(RA)，见表
1 。
2.8 不同产地陆英GCFP与对照
指纹图谱的相似度 将“2.7”项
下测得的各产地的陆英的GCFP导
入《中药色谱指纹图谱相似度评价
系统》软件，计算出各批次的陆英
与对照指纹图谱的相似度，分别
为 0.9 3，0.9 5，0.74，0.97，
0.98，0.98，0.96，0.97，
0.92，0.85。其中 3号样品和 10
号样品与标准CEF P相似度较低
（相似度为 0.85和 0.74）。
3 讨论
3.1 色谱柱的选择 分别试验了
DB-1，HP-5，HP-35等不同极
Research & Information on Traditional Chinese Medicine
第7卷 第6期
2005年6月
Vol.7,NO.6
Jun. 2005
16 / R & I on TCM
GC fingerprinting of Sambucus chinensis Lindl.
Tian Xiaoling1, Bi Kaishun2
（1.Liaoning supervising agency of veterinary drug and feed ,shenyang 110016, China； 2.School of pharmacy,
Shenyang Pharmaceutical University, Shenyang 110016, China）
[Abstract] Objective：To establish the GC fingerprinting of Sambucus chinensis Lindl..Method：The measure-
ment conditions applied are as follows: HP-5column;detector:FID. Result：Fingerprint of Sambucus chinensis
Lindl..consisted of 11 peaks . RSD of precision and reproducibility is in the range of 5%.Conclusion：The method
can be used for quality control of Sambucus chinensis Lindl..
[Key words] GC; Sambucus chinensis Lindl.; Fingerprinting
性的毛细管色谱柱。DB-1，HP-
35色谱柱在不同的温度下均出现
较大的宽峰，色谱峰分离不理
想，而HP-5柱的分离效果理想，
所以选择HP-5柱。
3.2 柱温的选择 由于陆英成分复
杂，各组分难于分离，恒定柱温
达不到理想的分离，因此，选择
程序升温。实验中共选择了6种升
温程序，最终确定本实验条件。
3.3 药材提取溶剂的选择 分别
以 95%，75%，50%，25%乙醇
为溶剂，按“2 . 1”项下方法制
备陆英供试液，进样分析。发现
以 95％乙醇为溶剂制备样品所得
的色谱图的峰数较多，各峰的分
离情况较好，因此选择 95％乙醇
作提取溶剂。
参考文献
[1]《全国中草药汇编》编写组.全国中草
药汇编（上册）[M].北京：人民卫生
出版社，1983.437.
[2]江西省宜春地区陆英临床研究协作
组.陆英冲剂治疗急性病毒性肝炎304
例疗效观察[J].中草药通讯，1978，7:
25-27.
[3] 陈武，熊筱娟，李开泉，等．鸟索
酸治疗急性病毒性肝炎的临床研究
——附102例报告[J]．宜春医专学
报，2001， 3(1):1-3.
[4] 陈武，李开泉，熊筱娟，等.陆英抗
肝炎活性成分的研究[J].南昌大学
学报，2001，25(2):165-167.
（收稿日期　2005-5-8）
(上接第10页)理作用和作用机
理，这对中医药走向现代化、走
向国际市场都具有潜在的社会意义
和经济价值。
关于药物有效性的一般研究，
目前国内中药新药的有效性研究尚
存在着一些问题，主要表现在：
（1）不理解一些常规要求外尚应
根据具体药物的特点，进行有针
对性的研究，在具体某一受试物
的研究中不能做到具体问题具体分
析，僵化地套用以往指导原则中
的技术要求；（2）没有从药物开
发的整体来考虑有效性研究的目的
与意义，实验设计和结果往往与
其它研究缺少有机联系；（3）重
实验、轻评价，在药物开发的过
程中仅是机械地按照技术要求进
行，对研究结果和药物开发的前
景缺少自觉和主动评价的意识。
许多申报者认为自己的任务只是按
照指导原则完成实验，而完成后
的评价是药品审评人员的任务。
其实，全面、准确、客观地对药
理毒理学研究内容进行评价，尤
其是药物研究者本身的自我评价至
关重要。这里所谓的“自我评
价”是指与药物开发相关的研究
者对实验设计、实验内容、实验
结果等项目进行的综合评价，只
有通过这种综合评价，研究者才
能对药物的安全性、有效性和质
量可控性做出准确地判断，明确
药物开发的前景。
以上只是简要分析了中药新
药非临床有效性研究中的一些问
题，还有很多方面没有涉及。因
为中药药理研究是新发展起来的
学科，所以有很多问题需要探
索、讨论，中药新药有效性研究
特别是中药复方研究是一个非常
复杂的系统工程，应当尽快建立
中医药实验方法体系，使中药新
药有效性研究在已有的研究基础
上能得到突破性进展。
参考文献
[1]刘建勋．中药新药药效学实验研究方
法与要求[J]．中药新药与临床药
理，1998，9(2):114-117．
(收稿日期 2005-5-20)