全 文 ：2010 年 11 月第 6 期
No． 6 Nov． 2010
中 医 学 报
JOURNAL OF CHINESE MEDICINE
第 25 卷 总第 151 期
Vol． 25 Serial No． 151
炎可宁片中土大黄苷的定性分析
Rhaponticin Qualitative Analysis of Yankening tablets
王世清 Wang Shiqing
濮阳市药品检验所，河南 濮阳 457000
medicine check institute of puyang city，Puyang，Henan，China 457000
摘要:目的:检测炎可宁片成分。方法:采用薄层色谱法、薄层扫描法、高效液相色谱法对炎可宁片中的土大黄苷进行定性分
析。结果:3 种方法均能清晰检出土大黄苷成分。结论:用薄层色谱快速筛查出样品中含有土大黄苷后，使用薄层扫描法进行
验证，可作为炎可宁片的成分定性鉴别方法。
Abstract:Objective:To look for qualitative identification of Rhaponticin composition method． Methods:TLC，TLC，HPLC，on Yan-
kening tablets Rhaponticin qualitative analysis． Results:Of the three methods are clearly detected in Rhaponticin． Conclusion:The
rapid TLC screening out samples containing Rhaponticin，you can use to verify TLC．
关键词:炎可宁片;土大黄苷;薄层色谱法;薄层扫描法;高效液相色谱法
Key words:yankening tablets;rhaponticin;TLC;thin layer chromatography;HPLC
中图分类号 CLC number:R284． 2 文献标识码 Document code:A 文章编号 Article ID:1674 － 8999(2010)06 － 1134 － 02
炎可宁片收载于《卫生部药品标准中药成方制剂》第七
册，由黄柏、大黄、黄芩、板蓝根、黄连等组成。由于该标准质
量控制不高，一些生产单位在生产时以非正品大黄(华北大
黄、藏边大黄、河套大黄、天山大黄等，它们一般均含有土大
黄苷)投料。为此，国家食品药品监督管理局药品检验补充
检验方法和检验项目批准件(2008015)针对炎可宁片增加了
土大黄苷的检查。我们在使用该方法的同时，又采用薄层扫
描法验证，结果良好。现报告如下。
1 仪器与试药
1． 1 仪器
高效液相色谱仪 包括 Waters515 型泵、Waters2487 检测
器、77251 手动进样器(美国) ;浙大 N2000 色谱工作站;CA-
MAG TLCSCANNER3 薄层扫描仪 (瑞士) ;Precisa 92SM202
A － DR电子天平;KQ2200 型超声波清洗器(昆山市超声仪
器有限公司) ;DZKW － 4 电子恒温水浴锅;硅胶 G 薄层板
(100 mm × 100 mm，青岛海洋化工分厂) ;定量毛细管(CA-
MAG，瑞士)。
1． 2 试药
土大黄苷对照品(批号:794 － 200103，中检所供) ;炎可
宁片(批号:090301，四川省三星堆制药有限公司) ;炎可宁片
(批号:20070803，河南辅仁堂制药有限公司) ;液相流动相使
用的甲醇、乙腈为色谱纯，水为重蒸馏水;其余试剂均为分析
纯。
2 方法与结果
2． 1 薄层色谱法(检出)
取炎可宁片(三星堆)5 片，去糖衣，研细，置锥形瓶中，
加甲醇 20 mL，超声提取 15 min，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇
2 mL溶解，作为供试品溶液。另取炎可宁片(辅仁堂)5 片，
同法制成阴性对照样品溶液。再取土大黄苷对照品，加甲醇
制成每 1 mL含 1 mg的溶液，作为对照品溶液。按照薄层色
谱法(中国药典 2005 年版一部附录Ⅵ B)实验。吸取供试品
溶液 1μl、阴性对照样品溶液 1 μL、对照品溶液 2 μL，分别点
于同一硅胶 G薄层板上，以醋酸乙酯 －丁酮 －甲酸 －水(10:
7:1:1)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外灯(365 nm)下观
察。结果供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显
相同持久蓝紫色的荧光斑点;阴性对照样品溶液则无相应斑
点(见图 1)。
图 1 三种试药 TLC图
注:1．土大黄苷对照品;2．样品溶液;3．阴性样品溶液
2． 2 高效液相色谱法(验证 1)
2． 2． 1 色谱条件 色谱柱:Kromasil C18 柱(250 mm ×
4． 6 mm，5 μm) ;流动相:乙腈 －甲醇 －水(7:30:63) ;流速:
0． 8 mL /min;检测波长:320 nm;柱温:室温;进样量:20 μL
(20 μL定量环)。
2． 2． 2 对照品溶液的制备 精密称取土大黄苷对照品
1 mg，置 100 mL的容量瓶中，加 50%甲醇溶解并稀释至刻
度，作为对照品溶液。
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DOI:10.16368/j.issn.1674-8999.2010.06.083
2010 年 11 月第 6 期
No． 6 Nov． 2010
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JOURNAL OF CHINESE MEDICINE
第 25 卷 总第 151 期
Vol． 25 Serial No． 151
2． 2． 3 供试品溶液与阴性对照样品溶液的制备 取炎可宁
片(三星堆)10 片，去糖衣，研细，混匀。取 0． 2 g，加甲醇
25 mL，加热回流 1 h，放冷，滤过，取续滤液 5 mL，加水 5 mL，
摇匀，滤过，滤液作为供试品溶液。另取炎可宁片(辅仁堂)
10 片，同法制成阴性样品溶液。
2． 2． 4 测定法 分别吸取经过 0． 45 μm 微孔滤膜过滤的 3
种溶液各 20 μL，依次注入高效液相色谱色谱仪。结果供试
品溶液色谱中，出现与对照品溶液色谱保留时间相同的色谱
峰，阴性样品溶液则无(见图 2)。
图 2 炎可宁片 HPLC图谱
注:A．土大黄对照品;B．样品溶液;C．阴性样品溶液
2． 3 薄层扫描法(验证 2)
2． 3． 1 扫描条件 轨道扫描 :单波长，荧光线性扫描，波
长:366 nm，狭缝:6． 00 mm ×0． 30 mm。光谱扫描:多波长，波
长:200 － 700 nm，狭缝:6． 00 mm ×0． 30 mm。
2． 3． 2 供试品溶液的制备 取 2． 1 项下的供试品溶液，蒸
干，残渣加水 30 mL使溶解(必要时微热使溶解) ，滤过，滤液
置分液漏斗中，用氯仿洗涤 3 次，每次 15 mL，弃去氯仿液，水
液用乙酸乙酯提取 2 次，每次 20 mL，合并乙酸乙酯液，蒸干，
残渣加甲醇 1 mL使溶解，作为供试品溶液。
2． 3． 3 测定结果 取 2． 1 项下的对照品溶液，作为对照品
溶液。按照薄层色谱法(中国药典 2005 年版一部附录Ⅵ B)
试验［1］。吸取对照品溶液、供试品溶液各 2 μL，分别点于同
一硅胶 G薄层板上，以醋酸乙酯 －丁酮 －无水甲酸 －水(10:
7:1:1)为展开剂，展开，取出，晾干。照薄层扫描法(中国药
典 2005 年版一部附录Ⅵ B)测定，先进行轨道扫描，然后指
定组分，进行光谱扫描。结果样品成分通过同一性(r s，a =
0． 999 919，)检查(见图 3)。
图 3 本品薄层扫描光谱图
3 讨论
TLC具有简单、快速的特点，经常用于化合物的分离、鉴
定。
HPLC的分离效果要比 TLC 好的多，在使用 HPLC 定性
时经常会出现保留时间不完全一致的情况，此时可以采用阴
性样品对照或者在样品溶液加入对照品的方法，观察在相应
保留时间色谱峰的有无与多少，以确认是否为一种成分。
土大黄苷具有荧光，故在轨道扫描时采用荧光扫描(波
长 366 nm) ，轨道扫描的目的是指定成分。同一性中 r s，a 指
当前供试品轨道上组分与相邻对照品轨道上的组分的光谱
相关性。
从扫描结果可以看到土大黄苷的最大吸收为 322 nm附
近，与 HPLC采用的 320 nm相符，这也是寻找化合物最大吸
收的一种方法。
采用薄层扫描定性时应注意排除其他成分的干扰，保证
样品斑点的纯一性，同时，薄层板的质量也是关键因素。否
则，很难通过同一性检查。如我们使用自己制备的手工板同
一性中 r s，a = 0． 81。
因薄层扫描同时具备色谱法和光谱法，其结果更具说服
力。因此，用 TLC查出样品含有土大黄苷后，可以使用薄层
扫描进行验证作为炎可宁片的成分定性鉴别的标准方法。
参考文献:
［1］国家药典委员会．中华人民共和国药典(一部) ［S］．北京:化学
工业出版社，2005:附录 32．
收稿日期:2010 － 06 － 20
作者简介:王世清(1966 －) ，男，河南滑县人，大学本科，副主
任药师，主要从事中药检验。Email:pywangshiqing @ 163．
com;Tel:86 － 393 － 4422490
编辑:韦大文
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