全 文 ：［收稿日期］ 20101025(009)
［基金项目］ 吉林省教育厅“十一五”科学技术研究项目(吉教
科合字［2009］第 465 号)
［第一作者］ 胡彦武，硕士，讲师，从事生药有效成分的分离鉴
定及生物活性研究，Tel:13844545298，E-mail:
hywcz@ 163. com
东北刺人参茎叶提取物对环磷酰胺致
免疫抑制小鼠免疫功能的影响
胡彦武
(通化师范学院制药与食品科学系，吉林 通化 134002)
［摘要］ 目的:评价东北刺人参茎叶提取物对免疫抑制模型小鼠免疫功能的影响。方法:实验小鼠分为空白对照组、环磷
酰胺(CTX)模型组、东北刺人参茎叶提取物高、中、低剂量组(按生药量计为 5. 2，2. 6，1. 3 g·kg － 1)，空白对照组与模型组给予
等量生理盐水，连续给药 7 d，观察东北刺人参茎叶提取物对实验动物免疫器官脏器指数、碳粒廓清能力、迟发型超敏反应
(DTH)的影响。结果:与模型组比较，东北刺人参茎叶提取物各剂量组均能显著提高小鼠免疫脏器指数、单核巨噬细胞的吞噬
功能及小鼠 DTH(P < 0. 05 ～ P < 0. 01)。结论:东北刺人参茎叶提取物有提高免疫抑制小鼠免疫功能的作用。
［关键词］ 东北刺人参茎叶;免疫功能;环磷酰胺
［中图分类号］ R285. 5 ［文献标识码］ A ［文章编号］ 1005-9903(2011)07-0156-03
Efftect of Extracts from Stems and Leaves of Oplopanax elatus on Immune
Functions in Immuno-suppressed Mice Induced by Cyclophosphamide
HU Yan-wu
(Department of Pharmaceutics and Food Science，Tonghua Normal College，Tonghua 134002，China)
［Abstract］ Objective:To evaluate the effects of the extracts from stems and leaves of Oplopanax elatus on
the immune functions of immune-suppressed mice by cyclophosphamide. Method:Mice were randomly divided into
5 groups:control group，model group，low，moderate and high dose groups (1. 3，2. 6，5. 2 g·kg － 1) of the
extracts from stems and leaves of O. elatus. The mice were examined for immune organ weight index，carbon
particle clearance capability of macrophage，delayed type hypersensitivity. Result:Compared with model group，all
dose groups could significantly increase the weight of the immune organs，carbon particle clearance capability of
macrophage and delayed type hypersensitivity(P < 0. 05-P < 0. 01). Conclusion:The extracts from stems and
leaves of O. elatus can enhance the immune functions in immune-suppressed mice.
［Key words］ stems and leaves of Oplopanax elatus;immune function;cyclophosphamide
东北刺人参 Oplopanax elatus Nakai 是五加科刺
人参属植物，主要分布于我国长白山地区及朝鲜、俄
罗斯远东山区，民间以其根和茎入药，主治神经衰
弱、精神抑郁、低血压、糖尿病等症，具有补气、助阳
和类似人参之功效［1］。近年来，国内学者对东北刺
人参的研究主要集中在化学成分方面，对其有效成
分的药理学研究较少，在对动物的免疫功能影响及
作用机制方面未曾有资料报道。本文评价了东北刺
人参茎叶提取物对环磷酰胺致免疫抑制小鼠免疫功
能的影响，为开发利用东北刺人参地上可再生部位
药用资源提供了科学依据。
1 材料
1. 1 药物与试剂 东北刺人参茎叶，2010 年 7 月采
于长白山南坡，经通化师范学院于俊林教授鉴定为
·651·
第 17 卷第 7 期
2011 年 4 月
中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae
Vol. 17，No. 7
Apr.，2011
DOI:10.13422/j.cnki.syfjx.2011.07.055
五加科植物东北刺人参 O. elatus Nakai 的带叶茎
枝;2，4 二硝基氯苯(DNCB)，天津光复精细化工研
究所，批号 20090522;环磷酰胺(CTX)，江苏恒瑞医
药股份有限公司，批号 09040221;印度墨水，上海中
泰化学试剂有限公司，批号 20080820。
1. 2 动物 ICR 小鼠，雌雄各半，体重(20 ± 2)g，
由长春高新医学动物实验中心提供，动物合格证号
SCXK(吉)2003-2004。
1. 3 仪器 FA1104 型电子分析天平，上海天平仪
器厂;H723 型可见分光光度计，天津普瑞斯仪器有
限公司。
2 方法
2. 1 东北刺人参茎叶提取物的制备 将干燥东北
刺人参带叶茎枝粉碎成粗粉，取粗粉 100 g，纱布包
裹，加水过液面 5 cm 于烧杯中，浸泡 4 h 后，文火煎
煮 2 次，每次 30 min，合并两次滤液，浓缩至 200 mL，
加 3 倍量 95%乙醇，放冰箱静置 12 h，减压过滤，回
收滤液中乙醇，浓缩至无醇味的提取物。将提取物
加水分别配制成相当生药质量浓度为 0. 065，0. 130，
0. 260 g·mL － 1的不同溶液，置 4 ℃的冰箱保存备用。
2. 2 分组与给药 取小鼠 50 只，随机分为 5 组，即
空白对照(生理盐水)组，模型(CTX)组，东北刺人
参茎叶提取物按生药剂量 5. 2，2. 6，1. 3 g·kg － 1高、
中、低 3 个剂量组，每组 10 只。空白对照组与模型
组 ig 生理盐水，给药体积均为 0. 02 mL·g － 1，连续给
药 7 d。
2. 3 动物模型建立［2］ 在给药第 2，3，4，5 天，除空
白对照组外，其余各组小鼠均 ip CTX 75 mg·kg － 1，
连续 4 d，建立小鼠免疫抑制模型。
2. 4 东北刺人参茎叶提取物对 DNCB 致小鼠迟发
型超敏反应(DTH)的影响［3］ 分组同 2. 2，用脱毛
剂(硫化钡加水调成稀糊状)脱去各鼠背部颈毛。
次日于脱毛处皮肤上滴 50% DNCB 丙酮溶液 2 μL /
只致敏。致敏后第 4 天，各组小鼠分别 ig 1 次 / d，连
续给药 7 d，在各组小鼠右耳两侧均匀涂抹 2. 5%
DNCB 酮溶液 20 μL /只进行攻击，24 h 后，处死小
鼠，用直径为 8 mm 的打孔器分别在左右耳同一位
置打下圆耳片，电子天平称质量，以左右耳片质量差
(肿胀度)表示 DTH 的强度。
2. 5 东北刺人参茎叶提取物对小鼠碳粒廓清能力
的影响［4］ 分组及给药同 2. 2，末次给药 24 h 后称
重，经小鼠尾 iv 稀释的印度墨汁各 0. 2 mL，即刻计
时，分别于 5，10 min 时眼眶静脉取血 20 μL，各加入
0. 1% Na2CO3 2 mL，摇匀，用分光光度计在波长 680
nm 处测吸光度，记录 A，计算廓清指数 K。后将小鼠
脱颈椎处死，分别取肝、脾，用滤纸吸干血迹后称质
量，计算吞噬指数(α)。
K = (logA l － logA2)/ t2 － t1
α = K1 /3 × 体重 /(肝质量 + 脾质量)
2. 6 东北刺人参茎叶提取物对小鼠免疫器官指数
的影响 分组及给药同 2. 2，末次给药 24 h 后称体
重，脱颈椎处死小鼠，迅速取出脾、胸腺，用滤纸吸干
血迹后称质量。计算脾和胸腺指数。
脾或胸腺指数 = 脾或胸腺质量(mg)/ 体重(g)
2. 7 统计学分析 各组数据用 珋x ± s 表示，统计学
处理采用 SPSS13. 0 统计软件，组间比较用方差分
析，q 检验。P < 0. 05 有统计学意义。
3 结果
3. 1 东北刺人参茎叶提取物对 DNCB 致小鼠 DTH
的影响 从表 1 可以看出，DNCB 能不同程度地导
致各组小鼠产生 DTH。模型组小鼠的耳廓肿胀程度
显著低于空白对照组(P < 0. 05)，说明造模成功;东
北刺人参茎叶提取物 3 个剂量组对 DNCB 致小鼠
DTH 有不同程度增强作用，耳廓肿胀程度显著高于
模型组(P < 0. 05 ～ P < 0. 01)。
表 1 东北刺人参茎叶提取物对小鼠 DTH 的影响(珋x ± s，n = 10)
组别 剂量 / g·kg － 1 耳肿胀度 /mg
空白对照 － 4. 131 ± 0. 1191)
模型 － 3. 109 ± 0. 122
东北刺人参茎叶 1. 3 3. 376 ± 0. 3011)
2. 6 3. 427 ± 0. 2991)
5. 2 3. 558 ± 0. 2952)
注:与模型组比较1)P < 0. 05，2)P < 0. 01(表 2 ～ 3 同)。
3. 2 东北刺人参茎叶提取物对小鼠碳粒廓清能力
的影响 从表 2 可以看出，模型组小鼠廓清指数、吞
噬指数均显著低于空白对照组(P < 0. 05)，说明造
模成功;东北刺人参茎叶提取物 3 个剂量组均能不
同程度的提高小鼠单核巨噬细胞的吞噬功能，廓清
指数及吞噬指数均显著高于模型组(P < 0. 05 ～ P <
0. 01)。
3. 3 东北刺人参茎叶提取物对小鼠免疫器官指数
的影响 从表 3 可以看出，模型组小鼠胸腺和脾脏
指数显著降低，与空白对照组比较差异显著(P <
0. 01)，说明造模成功;东北刺人参茎叶提取物 3 个
剂量组均能提高小鼠胸腺指数和脾脏指数，与模型
组比差异显著(P < 0. 05 ～ P < 0. 01)。
·751·
胡彦武:东北刺人参茎叶提取物对环磷酰胺致免疫抑制小鼠免疫功能的影响
表 2 东北刺人参茎叶提取物叶对小鼠碳廓清
能力的影响(珋x ± s，n = 10)
组别 剂量 / g·kg － 1 K α
空白对照 － 0. 038 7 ± 0. 018 11) 5. 246 ± 1. 0071)
模型 － 0. 021 9 ± 0. 007 9 4. 306 ± 0. 649
东北刺人参茎叶 1. 3 0. 034 1 ± 0. 012 11) 4. 896 ± 0. 8661)
2. 6 0. 034 8 ± 0. 013 81) 4. 899 ± 0. 6081)
5. 2 0. 036 9 ± 0. 014 92) 4. 914 ± 0. 5711)
表 3 东北刺人参茎叶提取物对小鼠免疫器官
指数的影响(珋x ± s，n = 10) mg·g － 1
组别 剂量 / g·kg － 1 脾指数 胸腺指数
空白对照 － 6. 098 ± 0. 5582) 3. 269 ± 0. 2282)
模型 － 5. 805 ± 0. 211 2. 951 ± 0. 128
东北刺人参茎叶 1. 3 5. 978 ± 0. 1021) 3. 051 ± 0. 171
2. 6 6. 042 ± 0. 0912) 3. 135 ± 0. 1741)
5. 2 6. 089 ± 0. 1082) 3. 263 ± 0. 2452)
4 讨论
CTX 是一种作用较强的免疫抑制剂，常用于制
备免疫抑制动物模型。本实验中，空白对照组和模
型(CTX)组实验指标差异显著，说明免疫抑制小鼠
模型造模成功。
DNCB 是一种小分子半抗原，能与皮肤蛋白结
合成完全抗原，从而刺激 T 淋巴细胞转化为致敏淋
巴细胞。当再次以抗原攻击皮肤，就可致攻击部位
出现 DTH［5］。东北刺人参茎叶提取物能增强 DNCB
引起的免疫抑制小鼠 DTH，可能与其促进经 T 淋巴
细胞增殖成致敏淋巴细胞有关。
脾和胸腺是人体重要的免疫器官，两者相对重
量的变化在免疫评价中占有重要地位。东北刺人参
茎叶提取物能使小鼠脾和胸腺指数显著高于模型
组，表明其能改善 CTX 引起的脾和胸腺萎缩，对免
疫器官有一定的免疫促进作用。
单核巨噬细胞的吞噬能力是衡量机体非特异性
免疫功能的标志之一。印度墨汁作为一种颗粒状异
物静脉注入小鼠血循环后，迅速被单核吞噬细胞所
清除，主要被定居在肝和脾脏的巨噬细胞所吞噬，若
印度墨汁量恒定，则从血流中清除的速率可反映单
核吞噬细胞的吞噬功能［5］。东北刺人参茎叶提取物
能够明显激活、增强 CTX 所致免疫抑制小鼠单核巨
噬细胞的吞噬功能，表明其对 CTX 所致免疫抑制模
型小鼠的非特异性免疫功能有增强作用。
上述实验说明东北刺人参茎叶提取物能够提高
免疫抑制动物的免疫功能，但其具体的免疫学物质
基础及机制尚有待于进一步研究。
［参考文献］
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MS 分析［J］.特产研究，2008，2:58.
［2］ 阿不都热依木·玉苏甫 .异黑成熟颗粒对免疫抑制小鼠
免疫功能的调节作用［J］.科技导报，2010，28(3):82.
［3］ 刘文洲，滕有明，谭志鑫，等 .杨梅茎皮镇痛和免疫作用
的实验研究［J］.时珍国医国药，2010，21(6):1416.
［4］ 刘宝剑，郭延生，曲亚玲，等 .红车轴草总黄酮对小鼠免
疫功 能 的 影 响 ［J］. 安 徽 农 业 科 学，2009，37
(33):16410.
［5］ 张大方 .药理与中药药理实验［M］. 上海:上海科学技
术出版社，2002:89，91.
［责任编辑 聂淑琴］
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第 17 卷第 7 期
2011 年 4 月
中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae
Vol. 17，No. 7
Apr.，2011