全 文 :2012 年第 5 期(总第 184 期) 试验研究
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花椒叶驱除猫绦虫效果观察
龙永泉 (云南省蒙自市芷村镇畜牧兽医站 661102)
沈学文 (云南省红河州动物疫病预防控制中心 蒙自)
肖 啸* (云南农业大学动物科学技术学院 昆明)
摘要 试验采用云南昆明当地花椒叶晒干研磨成粉,挑选12只(3只为对照)实验猫,分为3个剂量组:高3g/kg,中
2g/kg,低1g/kg,掺合食物对病猫灌服,采集粪便,虫卵计数计算虫卵数比例,观察治疗效果,确定治疗的最有效用
量。以5d为一个观察周期,连续投喂2次,共10d,收集数据,确定治疗的投喂最佳次数。试验结果:低剂量组投喂第1
次虫卵数比例平均下降30.6%,投喂第2次的虫卵数比例平均下降57.9%;中剂量组投喂1次虫卵数比例平均下降52.3%;
投喂第2次的虫卵数比例平均下降83.9%;高剂量组投喂1次的虫卵数比例平均下降58.5%,投喂第2次的虫卵数比例平均
下降88.2%,对照组不投喂,第5天虫卵数比例平均升高40%,虫卵数比例平均升高94.6%。结果表明,花椒叶有驱除猫
绦虫的效果,驱除猫绦虫的有效剂量为2~3g/kg,投喂2次。
关键词 花椒叶 绦虫 效果观察
中图分类号:S853.92 文献标识码:A 文章编号:1007-1733(2012)05-0001-04
可感染犬猫的绦虫种类很多主要有犬复孔绦虫,泡
状带绦虫,多头绦虫,细粒棘球绦虫,孟氏迭宫绦虫,
豆状带绦虫,猫的带状泡尾绦虫等[1]。长期以来,人们曾
采用多种药物来治疗猫的绦虫病,但不是毒副作用大,
就是驱虫效果不理想。常用驱绦虫西药主要有吡喹酮、
氨硝柳胺、硫双二氯酚、丁萘脒、溴羟苯酰苯胺等。这
些西药,虽对绦虫有良好的驱除效果,但却对猫的危害
很大,出现体温升高,食欲减退,引起肝损伤和胃肠道
反应,毒性较大,严重时可引起死亡,因此,有些西药
就不在临床上使用。猫绦虫的驱除药物较少,治疗应用
范围也越来越窄[2]。这就使得兽医师在治疗猫绦虫病时就
转向使用中药药物。古老的抗绦虫天然植物中,花椒叶
对猫绦虫有驱除作用。
花椒叶(Leaf of Bunge Pricklyash)别名椒叶,为芸香科
植物花椒的叶。中兽医认为花椒叶辛,热,无毒,对神
经系统、消化系统等具有作用,并具有抑菌杀虫、温中
止痛、杀虫止痒效果,用于脘腹冷痛、呕吐泄泻、虫积
腹痛、蛔虫症;外治湿疹瘙痒等。可以内服,煎汤
3~9g。外用适量,煎汤洗浴,或鲜叶捣敷[2]。
花椒叶为奇数羽状复叶或散落的小叶,化学成分主
要有生物碱、酰胺、木脂素、香豆素及三萜、甾醇、烃
类和黄酮等成分等。花椒叶中挥发油化学成分主要有2,
5—1,1二甲基乙其噻吩和胡椒酮等,花椒中的生物碱
是指天然的含氮有机化合物,可分为喹啉衍生物类、异
喹啉生物类、苯并菲啶衍生物类。花椒叶中的酰胺类物
质,花椒叶属植物中的酰胺大多为链状不饱和脂肪酰胺
[3]。酰胺是花椒叶中驱除猫绦虫的主要成分,酰胺对猫绦
虫的头节、末成熟节段和成熟节段都有麻痹作用,对猫
泡尾绦虫、曼氏裂头绦虫都有驱虫效果[4]。治疗猫的绦虫
病,最常见的是南瓜籽与槟榔一起合用,效果显著,毒
副作用小[5, 6]。本试验用花椒叶对实验猫进行绦虫病的治
疗效果进行观察。
1 材料与方法
1.1 试验材料
1.1.1 试验器材 双目生物显微镜、托盘天平、锥形
瓶、电炉、载玻片、盖玻片、漏斗,漂浮瓶等。
1.1.2 试验药物 花椒叶,晒干搅碎成粉备用,饱和食
盐水。
1.1.3 试验动物 试验所需要的猫只均来自于昆明市康
大妈流浪猫爱心救助站。首先进行猫绦虫自然感染状况
调查,调查内容包括品种、年龄、性别、体重、临床症
状,所感染绦虫及虫卵数。根据猫的临床症状:出现呕
吐,慢性肠卡他,贪食,异嗜,渐进性消瘦,营养不
良,精神不振,有的发生痉挛或四肢麻痹,多数猫都呈
慢性经过。由于救助站的环境,使得所有猫只都患有猫
绦虫病,所以选取消瘦、腹泻、粪便排虫比较严重的猫
试验研究
云南省高端科技人才引进计划项目子项目:PHA 复合物对猪瘟疫苗和猪蓝耳病疫苗免疫效果影响。
项目编号:2009C1125-6。云南省教委基金项目:苦楝皮提取物对犬蛔虫驱虫效果的研究
*通讯作者
山东畜牧兽医 2012 年第 33 卷
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只进行试验。
1.2 试验方法
1.2.1 粪样的采集 在救助站里,由于不可能随时都能
采到新鲜粪便样品,所以采用棉棒采集每只实验猫肛门
周围及直肠少量粪便直接涂片观察,并编号记录被检猫
的年龄、营养状况、品种、性别等,并保存待检。本次
试验粪样采集时间为0d(2011年4月22日)、5d(2010年4月
27日)、10d(2011年5月2日)。
试验用饱和食盐水漂浮法进行粪便虫卵检查。饱和
食盐水漂浮法:这是一种利用比重大小而使虫卵浓集以
提高检出率的方法。取粪便适量(1~5g)放入一容器内,注
加饱和食盐水适量(10~15ml),可酌情加入,进行搅拌,
调匀;再加饱和食盐水至满。静置20~40min后,取一洁
净载玻片平放其上,使与液面接触,并快速取下,同时
载玻片上的液面朝上。将盖玻片轻轻覆盖在液面上。每
个粪样检查2次。
1.2.2 虫卵鉴定与计算 (1)虫卵鉴定:主要根据虫卵
的大小、形状、颜色、卵壳和内容物等特征,结合饲养
人员所描述猫所排出虫体的形状、大小、颜色等,参照
文献资料[7, 8]鉴定虫卵。(2)虫卵计数:根据绦虫虫卵鉴
定,用在一个视野中能看见的虫卵数计数的方法计算出
每只猫感染绦虫数。
1.2.3 分组 将12只试验犬按编号分为低 (1g/kg)、中
(2g/kg)、高(3g/kg)3个不同剂量组和1个对照组,每组3
只,对照组饲喂正常料,试验动物给药,按3个组不同剂
量投喂,记录、观察。试验猫给药数据见表1。
表1 试验猫给药数据收集 (g/kg、kg、g)
剂量组 低剂量组 中剂量组 高剂量组 对照组
猫编号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
给药剂量 1 1 1 2 2 2 3 3 3 0 0 0
体重 2.2 5.4 4.1 4.7 5.1 4.5 5.0 5.8 2.7 4.2 5.6 3.3
投喂量 2.2 5.4 4.1 9.4 10.2 9 15 17.4 6.1 0 0 0
1.2.4 试验期限及临床观察 试验观察期限为10d。给药
后,每隔5d进行以下项目的观察:有无毒副反应、精神
状态、饮食欲、活动性及是否排虫等。收集粪便,对排
出的虫体或节片并进行鉴定。分别于给药后的第0、5、
10d的早上,未喂食、未投药,收集粪便用饱和食盐水漂
浮法观察,检查样品中有无绦虫卵,在显微镜下镜检计
数,并做记录。
1.2.5 药效判定标准 根据给药前及给药后不同时间犬
粪便中的虫卵数变化情况,按下列公式计算受试药物组
与对照组每只猫虫卵数比例,从而判定药物驱除效果。
虫卵数比例=[驱虫后(第5d、第10d)虫卵数/驱虫前(第1d)
虫卵数]×100%(设:计算时设驱虫前虫卵数为100%)。
2 试验记录
2.1 给药前试验猫临床表现及绦虫感染状况
经过对流浪猫爱心救助站试验猫进行猫绦虫自然感
染状况调查,选择了自然感染绦虫的猫作为本试验的试
验用猫。经过粪便的检查,符合本试验要求的猫均有不
同程度的感染,出现了感染的临床症状,如消瘦,被毛
不光滑及蓬乱、腹泻等。各组猫都有绦虫的感染状况。
与感染其它寄生虫不同,如弓首蛔虫、狮弓蛔虫、猫钩
口线虫、毛首线虫不同,猫感染绦虫后,只能根据粪便
中排出的虫体孕卵节片来进行诊断,所以增加了诊断与
试验难度。因为即使在发现猫患病,发现较多典型绦虫
孕卵节片的粪便中,仍然不能检查到绦虫虫卵。对绦虫
孕卵节片进行显微镜检查发现,绦虫虫卵均被完整包被
于虫体孕卵节片的卵袋中,孕卵节片均保持完整,虫卵
没有被释放。所以对于猫绦虫病的诊断均根据粪便中发
现的孕卵节片或者少数卵来进行诊断,观察和记录。
2.2 给药后实验猫临床表现
各组猫给药后不同时间均出现排出虫卵现象。其中
超高剂量组在第一次给药后约2h开始腹泻并排出虫卵,
排虫高峰在给药后5h。高剂量组于第一次给药后约5h开
始排出虫卵。排虫高峰在给药后10h,排虫持续时间约至
给药后60h。中剂量组于第一次给药后约8h开始排出虫
卵,排虫高峰在给药后12h,排虫时间持续到54h。低剂
量组于第一次给药后约10h,排虫高峰在给药后15h,排
虫时间持续到48h。3组试验猫均出现排粪次数较平时增
多。第二次给药的排虫时间、高峰期、持续时间较第一
次有所推后。
3 结果与分析
表2 试验猫治疗效果观察记录
组别 虫卵数(0d)
虫卵
数(5d)
虫卵数例
下降(%)
平均下
降(%)
虫卵
数(10d)
虫卵数
下降(%)
平均下
降(%)
16 11 31.2 7 56.2
22 16 27.3 9 59.1
低
剂
量
组 12 8 33.4
30.6
5 58.2
57.9
26 15 42.3 5 80.8
23 12 47.8 4 82.6
中
剂
量
组 17 8 51.9
52.3
2 89.2
83.9
34 14 58.2 5 85.3
26 11 57.7 3 88.5
高
剂
量
组 22 9 59.1
58.5
2 90.9
88.2
18 27 -50 36 -100
15 21 -40 31 -106.7
对
照
组
22 30 -36
-40
39 -77.2
-94.6
3.1 各试验组均于开始给药后的第0、5、10天的上午采
2012 年第 5 期(总第 184 期) 试验研究
3
样,回来进行饱和食盐水漂浮法观察,镜检、计数、记
录,计算各组给药后不同时间猫绦虫虫卵数,及计算每
组每只猫试验投药前后的虫卵数比例,驱虫结果见表2。
表2的试验结果可以看出,3个剂量组(低、中、高)都
对猫绦虫有驱除作用。对照组观察记录的虫卵数比例没
有减少反而增高。中剂量和高剂量组对猫绦虫的驱除作
用效果显著。
3.2 给药前试验猫的临床表现
除常见猫排出成熟节片并不时舔蹭肛门之外 ,通常
无明显症状,这也是不引人注意的原因。严重感染时,
患猫经常出现不明原因的腹部不适,食欲反常(贪食或异
食),呕吐慢性肠炎;大量感染时,造成猫的贫血、消
瘦 、腹泻 、消化不良,甚至便秘和腹泻交替发生;高
度衰弱时猫常痴睡,有的还出现神经症状 ,兴奋扑人或
沉郁,四肢痉挛或麻痹,虫体成团时,亦能堵塞肠管,
导致肠梗阻、肠套叠、肠扭转,甚至肠破裂等急腹症。
3.3 给药后试验猫的临床表现
对试验猫进行试验治疗后,病猫表现精神状态有所
改善,被毛状况改善,状态良好;饮食欲望增强,食量
有所增加;肠炎症状减轻,腹泻与便秘停止,大便正
常,肛门瘙痒减轻;贫血与衰弱改善,有的出现增重;
病猫表现活力。
4 讨论与分析
4.1 猫绦虫种类及驱除原理
患病猫体内绦虫主要为猫复孔绦虫和猫泡尾绦虫。
虫体以其小钩和吸盘损伤宿主的肠黏膜,常引起炎症。
虫体吸收营养,给宿主生长发育造成障碍;虫体分泌的
毒素引起宿主中毒;虫体聚集成团;可堵塞小肠腔,导
致腹痛、肠扭转甚至肠破裂,从而引起了猫患病的临床
症状[7]。花椒叶中的酰胺。酰胺对猫绦虫的头节、末成熟
节段和成熟节段有麻痹作用,所以有驱虫效果。
在对试验猫试验前后的采样观察中,被鉴定出的绦
虫种类主要是犬复孔绦虫[Dipylidium caninum]。犬复孔
绦虫成虫寄生于猫的小肠内,中间宿主是猫、蚤、虱。
孕卵自猫的肛门逸出或随粪便排出体外,破裂后,虫卵
散出,被蚤类幼虫食入,六钩蚴在其肠内孵出,移行至
血腔内发育,待蚤幼虫经蛹蜕化为成虫时,发育为成
虫。被犬复孔绦虫感染,无明显季节性,宿主范围广
泛,猫感染率较高[8]。所以在试验过程中根据样品检验鉴
定和临床症状判断诊断出试验猫患有犬复孔绦虫病。
4.2 猫绦虫的患病因素及驱虫最适剂量
从试验结果可以看出,花椒叶对猫绦虫的驱除效果3
个剂量组(高、中、低)都呈现出效果,虫卵数比例都有下
降,但驱除率没有达到100%。
4.2.1 地区差异与季节 外界环境条件对某些寄生虫能
否流行及流行的具体情况起着决定性作用。因为寄生虫
病的流行常有明显的地方性,这种特点与当地的气候条
件,中间宿主或媒介节肢动物的地理分布有关。如犬钩
口线虫属土源性线虫,生活简单,其发育不需要中间宿
主参与,虫卵随粪便排到外界,只有在适宜的温度和湿
度条件下,幼虫经两次蜕化才能发育为感染的幼虫。但
在干燥的条件下,钩虫的发育受阻,所以钩虫病在我国
淮河及黄河以南地区广泛流行,但在气候干寒的西北地
带,则很少流行。猫绦虫就与犬钩口虫不同,分布于世
界各地,我国广大地区均有猫绦虫感染报道,云南省也
不例外。而且猫绦虫病流行无明显的季节性,宿主范围
非常广泛,猫感染猫绦虫病的病率也较高[9, 10]。所以猫绦
虫病是随时可能被感染,即使是在进行体内绦虫驱除使
也可能发生二次感染。
4.2.2 驯养方式 不同的驯养方式往往决定了猫能否接
触到传染源。试验调查显示救助站卫生条件相对较差,
自由散养和圈养结合饲养。救助站处城市郊区农村,猫
大多时间都是散养,食物和水摆放在露天活动地方,无
防蚊蝇灭鼠防灰措施,使得猫绦虫的传染媒介得以传
播,从而整个救助站的猫患绦虫病几率很高[11]。
根据以上原因分析,确定花椒叶驱除猫绦虫的最适
用量为2~3g/kg,2次连续投喂就起到良好效果,亦可连续
驱除3次。如果病情较重,使用3g/kg以上剂量,多次连续
驱虫。再结合防蚊蝇灭鼠防灰尘,食物安全,全面进行
传染源、传播途径、寄生宿主的清扫清除,保持场地的
干净,则可达到阻止绦虫传播、感染的效果。
5 结论
试验结果表明,用云南昆明本地花椒叶对猫绦虫的
驱除,通过不同剂量组对猫绦虫进行驱除效果观察,确
定花椒叶具有驱除猫绦虫作用,驱除剂量2~3g/kg为最适
治疗剂量,连续投喂2次,间隔时间为5d。如果病情较
重,使用3g/kg以上剂量,可多次连续驱虫。
参考文献
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山东畜牧兽医 2012 年第 33 卷
4
滨州地区鸡大肠杆菌的分离鉴定及药敏试验
齐凤云①② 孙少丽② (①山东农业大学动物科技学院 271018 ②山东省滨州第二高级技师学院)
摘要 从滨州地区各养鸡场的发病鸡中分离出大肠杆菌,经常规方法培养、纯化、镜检及生理生化鉴定,分离出的
18株鸡致病性大肠杆菌12株分离株被鉴定出血清型,血清型主要有078、035、036、01、02、05、018。药敏试验结果表明:
分离的大肠杆菌对氟苯尼考,丁胺卡那霉素,新霉素,庆大霉素敏感,对环丙沙星,强力霉素,诺氟沙星中度敏感,而
对红霉素,青霉素,链霉素产生了耐药。
关键词 鸡 大肠杆菌 分离鉴定 耐药
中图分类号:S858.31 文献标识码:A 文章编号:1007-1733(2012)05-0004-03
大肠杆菌病是由大肠埃希氏菌(Escherchia Coli)的某
些血清型菌株所引起的一类传染病的总称。此试验是采
集滨州地区鸡的病料进行分离鉴定和耐药试验,从而为
当地农户提供帮助,提高经济效益。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 病料来源 病料来源于滨州地区各养殖场及养殖
户送检的病、死鸡,临床剖检有典型心包炎、肝周炎、
气囊炎或卵黄性腹膜炎,疑似为大肠杆菌病。
1.1.2 培养基 营养琼脂、营养肉汤、麦康凯琼脂均购
于上海伯奥生物科技有限公司。微量生化发酵管,购于
杭州天和微生物试剂有限公司。
1.1.3 药敏试纸 红霉素、环丙沙星、青霉素、氟苯尼
考、链霉素、庆大霉素、氟呱酸、丁胺卡那霉素、强力
霉素、新霉素等10种药敏试纸片购自杭州天和微生物试
剂有限公司。
1.1.4 试验动物 小鼠购自山东省医学实验动物中心。
1.1.5 主要仪器 超净工作台,上海市跃进医疗器械一
厂;培养箱,上海市跃进医疗器械一厂;高压蒸汽灭菌
器,山东新华医疗股份有限公司;光学显微镜、电子天
平,上海市跃进医疗器械一厂。
1.2 方法
1.2.1 培养基的制备 血琼脂平板的制备:按常规法(谢
正肠等,1994)制备,加入5%的绵羊血,冷却后置于4℃
冰箱中备用。营养琼脂平板和麦康凯琼脂平板的制备:
按常规法(谢正肠等,1994)制备,冷却后于37。C温箱培养
16~24h,检查无菌后置于4℃冰箱备用。营养肉汤的制
备:按常规法(谢正肠等,1994)制备,冷却后于4℃冰箱
中备用。
1.2.2 细菌分离鉴定 选择疑似大肠杆菌病死鸡的病料
接种于普通营养琼脂平板上,经过37℃培养16~24h,然
后对可疑菌株再进行操作。
1.2.3 染色镜检 按常规步骤进行染色。
1.2.4 病原菌的分离纯化及生化试验 取病料无菌接种
于普通营养琼脂平板上,经过37℃培养18~24h后,观察
结果。选取具有隆起、圆形、光滑、湿润、半透明的近
无色的菌落,分别划线接种于麦康凯琼脂和伊红美兰琼
脂平板上,置37℃培养18~24h,4℃保存备用。分别作各
种糖发酵试验吲哚试验、三糖铁试验、尿素酶试验、
MR、V-P。
1.2.5 致病力测定 随机抽取麦康凯上纯培养的菌落,
接种于营养肉汤中,取24h内培养物作注射液,腹腔接种
于健康1日龄小鸡,每只小鸡注射0.2ml,每株菌注射2只
小鸡,并作对照。24h内发病并死亡者,判定为高致病力
菌株。24~48h内发病并死亡者,判定为中致病力菌株记
录死亡数,48h后死亡者判定为低致病力菌株。然后,从
死亡鸡的心、肝中回收接种菌。
1.2.6 分离菌的血清型鉴定 (1)抗原的制备。将纯培
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(收稿日期:2012–02–18)