全 文 :基金项目:国家自然科学基金资助项目(编号:No 30960526)
作者简介:张 慧(1964-),女,副教授,研究方向:天然药物化学。
通信作者:海力茜·陶尔大洪,女(维吾尔族),教授,硕士生导师,研究方向:药物分析,E-mail:Hailiqian2471@sina.com。
阿育魏实化学成分的预试验研究
张 慧1,胡君萍2,牙克浦江·莫民1,海力茜·陶尔大洪3
(新疆医科大学药学院1化学教研室,2天然药物化学教研室,3药物分析教研室,乌鲁木齐 830011)
摘要:目的 研究阿育魏实所含化学成分。方法 采用化学成分系统预试验辅助专项预试验法。结果
阿育魏实中生物碱、黄酮、糖类、氨基酸、皂苷、挥发油、酚性成分、有机酸、油脂、甾体类成分的系统预试实验结果为
阳性,生物碱和黄酮的辅助专项预试实验结果为阳性。结论 阿育魏实中含有生物碱、黄酮、糖类、氨基酸、皂苷、
挥发油、酚性成分、有机酸、油脂、甾体类等成分。
关键词:阿育魏实;化学成分;系统预试验;辅助专项预试验
中图分类号:R284 文献标识码:A 文章编号:1009-5551(2012)03-0306-04
Pretest study on the chemical constituents of Trachyspermum
ammi(L.)Sprgaue
ZHANG Hui 1,HU Jun-ping2,Ykefujiang Momin1,Hailiqian Taoerdahong3
(1 Department of Chemistry,2 Department of Natural Medicinal Chemistry,3 Department of
Pharmaceutical Analysis,College of Pharmacy,Xinjiang Medical University,Urumqi 830011,China)
Abstract:Objective To study the chemical constituents of Trachyspermum ammi(L.)Sprgaue.Met-
hods The methods of systematic pretest and assist individual pretest were adopted.Results The system-
atic pretest on alkaloids,flavone,carbohydrates,amino acid,saponins,essential oils,phenols,organic
acids,lipids and steroids were positive.The assist individual pretest on alkaloids and flavone were posi-
tive.Conclusion Trachyspermum ammi(L.)Sprgaue contain alkaloids,flavone,carbohydrates,amino
acid,saponins,essential oils,phenols,organic acid,lipids and steroids.
Key words:Trachyspermum ammi(L.)Sprgaue;chemical components;systematic pretest;assist individu-
al pretest
阿育魏实为伞形科糙果芹属(Trachyspermum)
植物阿育魏[Trachyspermum ammi(L.)Sprgaue]
的成熟果实,秋季采收干燥。为一年生草本,高30
~100cm。果实卵形,长约2mm。在我国新疆和
田和喀什地区普遍种植[1],是一种传统的维吾尔药
物,在民间已有很长的用药历史。具有驱风散寒、健
第35卷 第3期 新 疆 医 科 大 学 学 报 Vol.35 NO.3
2012年3月 Journal of Xinjiang Medical University Mar.2012
胃消食、杀菌利尿的作用,用于食欲不振、胃寒作痛、
小便不利、尿路结石、偏瘫及皮肤病。阿育魏实所含
麝香草酚,对口腔粘膜有杀细菌和真菌的作用,对龋
齿有防腐和局麻作用,还用于皮肤化脓性感染及真
菌和放线菌病,其醇提物(10%)对葡萄球菌、大肠杆
菌有抑制作用,其稀释液可作祛痰剂[2-3]。目前相
关文献报道阿育魏实中含有挥发油、油脂 、黄酮及
其苷等[4-7]。
为了进一步探讨阿育魏实化学成分,本研究采
用系统预试验辅助专项预试验法[8-9],确定阿育魏
实中所含各类化学成分,为今后系统研究阿育魏实
的药理作用及开发利用新疆的阿育魏实资源提供有
意义的参考。
1 材料与方法
1.1 材料、试剂与仪器 阿育魏实采自新疆喀什地
区,经新疆医科大学药学院天然药物化学教研室帕
丽达·阿布利孜教授鉴定为伞形科糙果芹属植物阿
育魏实[Trachyspermum ammi(L.)Sprgaue]的成
熟果实。
石油醚(60~90℃)、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇、
95%乙醇、甲醇等(天津市致远化学试剂有限公司)
均为分析纯,碘化汞钾试剂,碘化铋钾试剂,硅钨酸
试剂,磷钼酸试剂,氯化钠明胶溶液,三氯化铁溶液,
1%三氯化铝溶液,乙醇溶液,1%碳酸钠溶液,0.2%
茚三酮溶液,10%氢氧化钠溶液,硫酸铜溶液,醋酐
-浓硫酸(19∶1)溶液,1%溴酚蓝溶液,1mol/L盐
酸羟胺甲醇溶液,香草醛-60%浓硫酸溶液,5%磷
钼酸溶液,3,5-二硝基苯甲酸乙醇溶液,3%亚硝酰
铁氰化钠溶液,碱性苦味酸试剂,5%α-萘酚乙醇溶
液,碱性酒石酸钾钠,异羟肟酸铁试剂,盐酸,镁粉,
澄清石灰水溶液,碘,pH 试纸等。ZF-20C暗箱式
紫外分析仪(上海宝山顾村电光仪器厂),DK-S24
型电热恒温水浴锅(上海精宏实验设备有限公司),
EYELA SB-1;000型旋转蒸发仪(上海爱朗仪器有
限公司),DHG-9123A型电热恒温鼓风干燥箱,HS-
3C型酸度计 (上海精宏实验设备有限公司),
SK2510HP超声波清洗仪(上海科导超声清洗仪有
限公司),AB104-N 型多功能电子天平(TOLEDO
INSTR.SHANG HAI LTD.)等。
1.2 方法
1.2.1 阿育魏实预试验样品的制备 (1)水浸液:
称取阿育魏实6.0g,适当粉碎,室温浸泡过夜,加
去离子水80mL,30℃超声提取45min,滤取10mL
提取液,得冷水提取液(A);冷水提取液滤取后的残
渣,在70℃水浴浸泡45min,过滤得热水提取液
(B)。(2)95%乙醇提取液:称取阿育魏实6.0g,加
95%乙醇80mL,70℃水浴回流45min,过滤,将残
渣用95%乙醇50mL重复提取1次,合并2次提取
液,浓缩至约60mL,取30mL作为乙醇提取液
(C);剩余部分继续浓缩至糖浆状,用30mL 1%硫
酸加热溶解,得酸性乙醇提取液(D)。(3)甲醇提取
液:将乙醚冷浸过的阿育魏实6.0g,加入30mL甲
醇,70℃水浴回流25min,趁热过滤,得甲醇提取液
(E)。(4)石油醚提取液:称取阿育魏实6.0g,加石
油醚(60~90℃)60mL,水浴回流35min,过滤,浓
缩,剩余约10mL,得提取液(F)。(5)水蒸气蒸馏
提取液:称取阿育魏实6.0g,水蒸气蒸馏提取,得提
取液(G)。
1.2.2 化学反应试管预试验 (1)检查生物碱:碘
化汞钾试验、碘化铋钾试验、硅钨酸试验;(2)检查酚
性成分及鞣质:氯化钠明胶试验、三氯化铁试验;(3)
检查黄酮及其苷类:三氯化铝试验、盐酸-镁粉试
验、氨熏试验;(4)检查蛋白质、多肽、氨基酸:茚三酮
试验、加热或沉淀试验、缩二脲试验;(5)检查甾体及
萜类成分:醋酸酐-浓硫酸试验、碘蒸气试验(6)检
查有机酸:pH试纸检查、酸度计测定、溴酚蓝试验;
(7)检查内酯、香豆素及其苷:异羟肟酸铁试验、荧光
试验、开闭环反应试验;(8)检查皂苷:泡沫试验、醋
酐-浓硫酸试验;(9)检查挥发油或油脂和甾类:水
蒸气蒸馏试验、油斑试验、香草醛-60%浓硫酸试
验、磷钼酸试验;(10)检查强心苷:3,5-二硝基苯甲
酸试验、碱性苦味酸试验、亚硝酰铁氰化钠试验;
703 第3期 张 慧等:阿育魏实化学成分的预试验研究
(11)检查还原糖、多糖:molish紫色环反应、班乃德
反应、银镜试验。
1.2.3 辅助专项预试验 (1)生物碱的检查:样品
粉末用0.5%盐酸乙醇加热提取3次,提取液减压
浓缩至糖浆状,稀酸溶解,过滤,残渣用酸水洗涤2
次,合并滤液和洗液,用石油醚萃取以除去色素、树
脂等杂质。萃取后的酸水液用碳酸钠碱化至pH 9
~10,用氯仿萃取3次,合并萃取液并浓缩至一定体
积,提取5mL浓缩液,挥干溶剂,加1%硫酸5mL
溶解残渣,过滤得滤液。(2)黄酮类的检查:样品
粉末用70%乙醇加热提取3次,提取液用石油醚
萃取除掉色素、树脂等杂质,减压浓缩至无醇味,
趁热过滤,滤渣用水反复热浸,合并滤液和洗液,
放冷后用乙酸乙酯萃取3次,回收乙酸乙酯,残渣
用甲醇溶解。
2 结果
阿育魏实中生物碱、黄酮、糖类、氨基酸、皂苷、
挥发油、酚性成分、有机酸、油脂、甾体类成分的系统
预试实验结果为阳性,生物碱和黄酮的辅助专项预
试实验结果为阳性,结果见表1~5。
表1 阿育魏实水提取液(A,B)化学成分预试验结果
预试项目 预试样 反应试验名称 标准反应现象 实验现象 结果
氨基酸 ⅰ茚三酮试验 溶液变蓝或蓝紫色 变蓝紫 ++
蛋白质 A ⅱ缩二脲试验 呈紫色或紫红色 变紫红 ++
或多肽 ⅲ沉淀试验 加热产生沉淀 加热沉淀 +
ⅰmolish试验 两界面处紫红色环 紫红色环 ++
糖类 A/B ⅱ班乃德试验 棕红色沉淀 棕红色沉淀 ++
ⅲ 银镜试验 银褐色沉淀 银褐色沉淀 ++
ⅰ泡沫试验 振摇后产生大量泡沫,10min泡沫不明显消失 泡沫不易消失 +
皂苷 A/B ⅱ醋酐-浓硫酸试验 呈现黄-红-紫-蓝-绿变化,最后褪去 黄-红-紫-蓝-绿变化,最后褪去 ++
ⅲ碘蒸气试验 滤纸上呈棕色斑点 滤纸上呈棕色斑点 +
ⅰ三氯化铁试验 呈绿、蓝或暗紫色 暗紫色 ++
鞣质 A ⅱ氯化钠明胶试验 出现白色沉淀或浑浊 无变化 -
ⅲ澄清石灰水试验 石灰水浑浊 无变化 -
有机酸 A/B
ⅰpH试纸试验 试纸颜色在pH7以下 pH=5.5 +
ⅱ 溴酚蓝试验 蓝色背景显黄色斑点 蓝色背景显黄色斑点 ++
注:“+”表示阳性反应,“-”表示阴性反应,“+”的数目越多表示反应现象越明显
表2 阿育魏实水提取液(C,D)化学成分预试验结果
预试项目 预试样 反应试验名称 标准反应现象 实验现象 结果
ⅰ三氯化铝试验 荧光变黄或加深 黄色荧光 +
黄酮类 C ⅱ盐酸-镁粉试验 呈红色 呈红色 +
ⅲ 氨熏试验 黄色荧光 黄色荧光 +
ⅰ异羟肟酸铁试验 呈紫色 无变化 -
香豆素或内酯类 C ⅱ开闭环反应试验 酸化后,溶液变浑浊 无变化 -
ⅲ 荧光试验 有绿、蓝色荧光 无变化 -
ⅰ3,5-二硝基苯甲酸试验 呈红色或紫色 无变化 -
强心苷 C ⅱ 碱性苦味酸试验 呈红色或橙色 无变化 -
ⅲ 亚硝酰铁氰化钠试验 显红色且红色逐渐消失 无变化 -
ⅰ碘化碘钾试验 出现棕色沉淀 棕色沉淀 ++
生物碱 C/D ⅱ碘化铋钾试验 出现橘红色沉淀 橘红色沉淀 ++
ⅲ 硅钨酸试验 出现淡黄色或白色沉淀 白色沉淀 ++
ⅰ三氯化铁试验 呈绿、蓝或暗紫色 呈暗紫色 ++
酚性成分 D ⅱ氯化钠明胶试验 出现白色沉淀或浑浊 出现白色浑浊 +
ⅲ铁氰化钾-氯化铁试验 滤纸上呈蓝色斑点 呈蓝色斑点 ++
注:“+”表示阳性反应,“-”表示阴性反应,“+”的数目越多表示反应现象越明显
803 新 疆 医 科 大 学 学 报 第35卷
表3 阿育魏实水提取液(E,F)化学成分预试验结果
预试项目 预试样 反应试验名称 标准反应现象 实验现象 结果
ⅰ3,5-二硝基苯甲酸试验 呈红色或紫色 无变化 -
强心苷 E ⅱ 碱性苦味酸试验 呈红色或橙色 无变化 -
ⅲ 亚硝酰铁氰化钠试验 显红色,且红色逐渐消失 无变化 -
ⅰ羟肟酸铁试验 呈紫色 无变化 -
香豆素或内酯类 E ⅱ开闭环反应试验 酸化后,溶液变浑浊 无变化 -
ⅲ 荧光试验 有绿、蓝色荧光 无变化 -
ⅰ水蒸气蒸馏试验 水蒸气蒸馏提取液液面上有油滴并有特殊香味 提取液有油滴并有特殊香味 +
挥发油或油脂 F/G ⅱ油斑试验 出现持久性的透明斑点,加热不消失 出现持久性的透明斑点加热不消失 +
ⅲ香草醛-60%硫酸试验 呈紫、蓝、黄、红色 呈紫、蓝、黄、红色 +
ⅰ醋酸酐-浓硫酸试验 颜色由黄→红→紫青→污绿色 颜色由黄→红→紫青→污绿色 +
甾体或三萜类 F ⅱ氯仿-浓硫酸试验 氯仿层显红或青色,硫酸层有绿色荧光 氯仿层显红或青色,硫酸层有绿色荧光 +
ⅲ磷钼酸试验 变蓝色背景为黄绿色 变蓝色背景为黄绿色 +
注:“+”表示阳性反应,“-”表示阴性反应,“+”的数目越多表示反应现象越明显
表4 生物碱类成分专项预试验结果
方法 实验现象 判定结果
硅钨酸试验 白色沉淀 +
碘化铋钾试验 橘红色沉淀 +
饱和苦味酸试验 黄色沉淀 +
碘 -碘化钾试验 棕红色沉淀 +
纸色谱 层析后喷碘化铋钾显色,有橙红色斑点 +
注:“+”表示阳性反应,“-”表示阴性反应
表5 黄酮类成分专项预试验结果
方法 实验现象 判定结果
盐酸镁粉反应 橘红色 +
三氯化铝 橘黄色 +
醋酸镁试验 黄色荧光明显加强 +
纸色谱 乙酸∶水 (15∶85)展开,三氯化铝显色呈现蓝紫色 +
3 结论
从天然植物中提取天然活性成分开发高效低毒
的新药已成为当前的研究热点之一。近年来,民间
用药、民族用药也在逐渐成为人们关注的焦点。
本研究采用系统预试验辅助专项预试验法对阿
育魏实水提液、乙醇提取液、甲醇提取液、石油醚提
取液等进行化学成分定性分析,考察阿育魏实的化
学成分,结果显示阿育魏实化学成分复杂多样,主要
为生物碱、黄酮、糖类、氨基酸、皂苷、挥发油、酚性成
分、有机酸、油脂、甾体类等成分,不含内酯或香豆
素、强心苷、鞣质、蒽醌等。与文献[8-9]报道结果基
本一致。
本研究通过对阿育魏实化学成分的系统预试验
辅助专项预试验,对其化学成分有了一个总体的了
解,对新发现的化合物类型尚需进一步进行色谱分
离、光谱和质谱的鉴定,以寻求其单体化合物,以便
为今后深入研究与开发利用该资源提供一定的物质
基础。
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[收稿日期:2011-08-21]
903 第3期 张 慧等:阿育魏实化学成分的预试验研究