全 文 ：东北刺人参茎对免疫力低下小鼠免疫功能的影响
胡彦武　(通化师范学院制药与食品科学系 ,吉林通化 134002)
摘要　[目的 ] 观察东北刺人参(OplopanaxelatusNakai)茎对免疫抑制模型小鼠免疫功能的影响。 [方法]采用环磷酰胺(CY)造模法制
作小鼠免疫抑制模型 ,观察东北刺人参茎对其免疫器官脏器指数、碳粒廓清能力、迟发型超敏反应(DTH)的影响。 [结果]东北刺人参茎
提取物 5.2、2.6、1.3g/kg剂量组均能显著提高小鼠免疫脏器指数、单核巨噬细胞的吞噬功能及小鼠DTH。 [结论]东北刺人参茎有提高
免疫抑制小鼠免疫功能的作用。
关键词　东北刺人参;免疫功能;环磷酰胺
中图分类号　S567.5+1;R284.1　　文献标识码　A　　文章编号　0517-6611(2011)02-00780-02
EffectofOplopanaxelatusNakaiStemontheImmuneFunctionsofImmunosuppressedMice
HUYan-wu　 (DepartmentofPharmaceuticsandFoodScience, TonghuaTeachersColege, Tonghua, Jilin134002)
Abstract　 [ Objective] TheaimwastoobservetheefectsofthestemsofOplopanaxelatusNakaiontheimmunefunctionsofimmunosup-
pressedmice.[ Methods] Immunosuppressedmicemodelwasestablishedthroughtheintraperitonealinjectionwithcyclophosphamideandthe
dailyintragastricadministrationofextractsfromO.elatusNakai.AndthentheeffectsofO.elatusNakaiontheimmuneorganweightindex,
carbonparticleclearancecapabilityofmacrophageanddelayedtypehypersensitivityofmicewereobserved.[ Results] Treatmentoftheimmu-
nosuppressedmicewithextractsfromO.elatusatthedailydoseof5.2, 2.6and1.3g/kgalsignificantlyincreasedtheweightoftheimmune
organs, carbonparticleclearancecapabilityofmacrophageanddelayedtypehypersensitivityofmice.[ Conclusion] O.elatusNakaicoulden-
hancetheimmunefunctionsofimmunosuppressedmice.
Keywords　 StemsofOplopanaxelatusNakai;Immunefunction;Cyclophosphamide
基金项目　吉林省教育厅 “十一五 ”科学技术研究项目(吉教科合字
[ 2009]第 465号)。
作者简介　胡彦武(1980-),男 ,吉林四平人 ,讲师 ,从事生药有效成分
的分离鉴定及生物活性研究。
收稿日期　 2010-11-02
　　五加科植物东北刺人参(OplopanaxelatusNakai)主要分
布于我国东北长白山区及朝鲜 、俄罗斯远东山区 ,民间以其
根 、茎入药 ,具有补气 、助阳和类似人参之功效 ,主治神经衰
弱 、精神抑郁 、低血压和糖尿病等症 [ 1] 。近年来 ,国内学者对
东北刺人参的研究主要集中在化学成分方面 ,对其有效成分
的药理学研究较少 ,在其对动物的免疫功能影响及作用机制
方面未见有报道。为此 ,笔者拟采用东北刺人参茎提取物为
原料 ,观察其对免疫抑制小鼠免疫功能的影响 ,以期为开发
利用东北刺人参药用资源提供科学依据。
1　材料与方法
1.1　材料
1.1.1　供试药材。东北刺人参茎 ,采于长白山南坡 ,经通化
师范学院于俊林教授鉴定为正品。
1.1.2　供试动物。 ICR小鼠 , 18 ～ 22 g,雌雄各半 ,合格证
号:(吉)2003-0004,由长春高新医学动物实验中心提供 。
1.1.3　主要试剂。 2, 4二硝基氯苯(DNCB),由天津光复精
细化工研究所生产;环磷酰胺(CY),由江苏恒瑞医药股份有
限公司生产;印度墨水 ,由上海中泰化学试剂有限公司生产。
1.1.4　主要仪器 。FA1104型电子分析天平 ,由上海天平仪
器厂生产;H723型可见分光光度计 ,购自天津普瑞斯仪器有
限公司。
1.2 　方法
1.2.1　东北刺人参茎提取物的制备。将东北刺人参茎粉碎
成粗粉 ,取粗粉 100 g,用纱布包裹置于烧杯中 ,加水过液面 5
cm,浸泡 4 h后 ,用文火煎煮 2次 ,每次 30 min,合并 2次滤
液 ,浓缩至 200ml,加入 3倍体积的体积分数为 95%乙醇 ,置
于冰箱静置 12h,减压过滤 ,回收滤液中乙醇 ,提取物浓缩至
无醇味 。将提取物加入水 ,分别配制成浓度为 0.065、0.130、
0.260 g/ml的系列溶液 ,置于 4 ℃冰箱中保存备用。
1.2.2　分组与给药。小鼠随机分组 ,设空白对照(生理盐
水)组和模型(CY)组 ,东北刺人参茎提取物设高剂量(5.2
g/kg)、中剂量(2.6 g/kg)及低剂量(1.3 g/kg)组 ,每组 10
只。空白对照组与模型组灌胃生理盐水 ,给药体积均为 0.2
ml/10 g,连续给药 7 d。
1.2.3　动物模型的建立 [ 2] 。在给药后第 2、3、4、5天 ,除空白
对照组外 ,其余各组小鼠均腹腔注射 CY75mg/kg各 1次 ,共
4次 ,诱导小鼠免疫功能低下小鼠模型。
1.2.4　东北刺人参茎对 DNCB致小鼠迟发型超敏反应
(DTH)的影响 [ 3] 。分组同 “1.2.2”,用脱毛剂(硫化钡加水调
成稀糊状)脱去各鼠背部颈毛。翌日于脱毛处皮肤上滴
50.0%DNCB丙酮溶液 2 μl/只致敏。致敏后第 4天 ,各组小
鼠分别灌胃给药 ,连续给药 7d后 ,在各组小鼠右耳两侧均匀
涂抹 2.5%DNCB丙酮溶液 20 μl/只进行攻击 , 24 h后 ,处死
小鼠 ,用直径 8mm打孔器在左右耳同一位置打下圆耳片 ,电
子天平称重 ,以左右耳片重量差(肿胀度)表示 DTH的强度。
1.2.5　东北刺人参茎对小鼠碳粒廓清能力的影响 [ 4] 。分组
及给药同 “1.2.2” ,末次给药 24h后称重 ,经小鼠尾静脉注射
稀释的印度墨汁各 0.2 ml,即刻计时 ,分别于 5、10 min时眼
眶静脉取血 20μl,各加入 0.1%Na2CO3 2ml,摇匀 ,用分光光
度计在波长 680 nm处测定吸光度值 (A),计算廓清指数
(K)。之后将小鼠脱颈椎处死 ,分别取肝 、脾 ,用滤纸吸干血
迹后称重 ,计算吞噬指数 α。廓清指数(K)=(lgA1 -lgA2)/t2
-t1;吞噬指数 α=K1/3 ×体重 /(肝重 +脾重)。
1.2.6　东北刺人参茎对小鼠免疫器官脏器指数的影响。分
组及给药同 “1.2.2”,末次给药 24 h后称重 ,脱颈椎处死小
鼠 ,迅速取出脾 、胸腺 ,用滤纸吸干血迹后称重 ,计算脾和胸
腺指数 。脾或胸腺指数为 10g体重的脾或胸腺毫克数。
1.3　数据处理　试验数据用平均值 ±标准差(x±s)表示 ,
责任编辑　姜丽　责任校对　马君叶安徽农业科学 , JournalofAnhuiAgri.Sci.2011, 39(2):780-781
统计学处理方法采用组间 t检验 。
2　结果与分析
2.1　东北刺人参茎对 DNCB致小鼠 DTH的影响　由表 1
可知 , DNCB能不同程度地导致各组小鼠产生 DTH。模型组
小鼠的耳廓肿胀程度显著低于空白对照组 ,说明造模成功;
东北刺人参茎提取物 3个剂量(1.3、2.6、5.2 g/kg)组对
DNCB致小鼠 DTH有不同程度的增强作用 ,耳廓肿胀程度显
著高于模型组(P<0.05或 P<0.01),使 CY抑制的反应趋
于恢复正常 ,提示东北刺人参茎提取物可增强 CY所致免疫
抑制模型小鼠的免疫反应能力。
表 1　东北刺人参茎对小鼠DTH的影响(x±s,n=10)
Table1　TheeffectofthestemsofO.elatusontheDTHinmice(x±s,
n=10)
组别
Group
剂量∥g/(kg·d)
Dose
耳肿胀度∥mg
Earswelling
空白对照组 Blanrcontrol-group - 4.13±0.12aa
模型组 Cymodelgroup - 3.11±0.12
低剂量组 Low-dosegroup 1.3 3.38±0.30＊
中剂量组 Medium-dosegroup 2.6 3.43±0.30＊＊
高剂量组 High-dosegroup 5.2 3.56±0.29＊＊
　注:＊、＊＊表示与模型组比 , 差异有统计学意义(P<0.05, P<
0.01);a、aa表示与空白组比 ,差异有统计学意义(P<0.05, P<
0.01)。
　Note:＊and＊＊Indictethatthediferenlefromthemodelgrouphassta-
tisticalsrgnificanle(P<0.05, P<0.01);aandaameanlthatthe
diferenlefromthecontolgrouphasstatisticalsense(P<0.05, P<
0.01).
2.2　东北刺人参茎对小鼠碳粒廓清能力的影响　由表 2可
知 ,模型组小鼠廓清指数 、吞噬指数均显著低于空白对照组
(P<0.05),说明造模成功;东北刺人参茎提取物 3个剂量组
均能不同程度地提高小鼠单核巨噬细胞的吞噬功能 ,廓清指
数及吞噬指数均显著高于模型组(P<0.05),提示东北刺人
参茎提取物具有提高 CY所致免疫抑制模型小鼠免疫功能
的作用。
表 2　东北刺人参茎对小鼠碳廓清能力的影响(x±s, n=10)
Table2　TheefectofthestemsofO.elatusoncarbclearanceinmice
(x±s,n=10)
组别Group 廓清指数(K)Clearanceability 吞噬指数(α)Phagocyticindex
空白对照组 Blanrcontrol-group 0.039±0.018a 5.25±1.01a
模型组 Cymodelgroup 0.022±0.008 4.31±0.65
低剂量组Low-dosegroup 0.034±0.012＊ 4.90±0.87＊
中剂量组Medium-dosegroup 0.035±0.014＊ 4.90±0.61＊
高剂量组High-dosegroup 0.037±0.015＊＊ 4.91±0.57＊
　注:＊、＊＊表示与模型组比 , 差异有统计学意义(P<0.05, P<
0.01);a、aa表示与空白组比 ,差异有统计学意义(P<0.05, P<
0.01)。
　Note:＊and＊＊Indictethatthediferenlefromthemodelgrouphassta-
tisticalsrgnificanle(P<0.05, P<0.01);aandaameanlthatthe
diferenlefromthecontolgrouphasstatisticalsense(P<0.05, P<
0.01).
2.3　东北刺人参茎对小鼠免疫器官脏器指数的影响　由表
3可知 ,模型组小鼠胸腺和脾脏指数显著降低 ,与空白对照组
比较差异显著(P<0.01),说明造模成功;东北刺人参茎提取
物 3个剂量组均能提高小鼠胸腺指数和脾脏指数 ,与模型组
比较 ,高 、中剂量组差异显著(P<0.05或 P<0.01),提示东
北刺人参茎提取物对 CY诱发的免疫功抑制模型小鼠胸腺
和脾脏指数的下降有显著的保护作用。
表 3　东北刺人参茎对小鼠免疫器官脏器指数的影响(x±s, n=10)
Table3　TheeffectofthestemsofO.elatusontheorganindexofim-
muneorganinmice(x±s,n=10)
组别Group 脾指数∥gSpleenindex 胸腺指数∥gThymusindex
空白对照组 Blanrcontrol-group 6.10±0.56aa 3.27±0.23aa
模型组Cymodelgroup 5.81±0.21 2.95±0.13
低剂量组 Low-dosegroup 5.98±0.10＊ 3.05±0.17
中剂量组 Medium-dosegroup 6.04±0.09＊＊ 3.14±0.17＊
高剂量组 High-dosegroup 6.09±0.11＊＊ 3.26±0.25＊＊
　注:＊、＊＊表示与模型组比, 差异有统计学意义(P<0.05, P<
0.01);a、aa表示与空白组比, 差异有统计学意义(P<0.05, P<
0.01)。
　Note:＊and＊＊Indictethatthedifferenlefromthemodelgrouphassta-
tisticalsrgnificanle(P<0.05, P<0.01);aandaameanlthatthe
differenlefromthecontolgrouphasstatisticalsense(P<0.05, P<
0.01).
3　结论与讨论
DNCB是一种小分子半抗原 ,能与皮肤蛋白结合成完全
抗原 ,从而刺激 T淋巴细胞转化为致敏淋巴细胞。当再次以
抗原攻击皮肤 ,就可致攻击部位出现 DTH[ 5] 。该试验中 ,东
北刺人参茎提取物能增强 DNCB引起的免疫抑制小鼠 DTH,
可能与其促进经 T淋巴细胞增殖成致敏淋巴细胞有关 。
脾和胸腺是人体重要的免疫器官 ,两者相对重量的变化
在免疫评价中有重要地位。该试验中 ,东北刺人参茎提取物
使小鼠脾和胸腺指数显著高于模型组 ,表明其能改善 CY引
起的脾和胸腺萎缩 ,对免疫器官有一定的免疫促进作用。
单核巨噬细胞的吞噬能力是衡量机体非特异性免疫功
能的标志之一。印度墨汁作为一种颗粒状异物静脉注入小
鼠血循环后 ,迅速被单核吞噬细胞所清除 ,主要被肝和脾脏
中的巨噬细胞所吞噬 ,若印度墨汁量恒定 ,则从血流中清除
的速率可反映单核吞噬细胞的吞噬功能 [ 5] 。该试验中 ,东北
刺人参茎提取物能够明显激活 、增强 CY所致免疫抑制小鼠
单核巨噬细胞的吞噬功能 ,表明其对 CY所致免疫抑制模型
小鼠的非特异性免疫功能有增强作用。
综上 ,东北刺人参茎提取物能够提高动物的免疫功能 ,
但其具体的免疫学物质基础及机制尚有待于进一步研究。
参考文献
[ 1] 刘昕,陈滴 ,李清民 ,等.东北刺人参根挥发油成分GC-MS分析 [ J] .特
产研究 , 2008(2):58-59.
[ 2] 阿不都热依木·玉苏甫.异黑成熟颗粒对免疫抑制小鼠免疫功能的调
节作用 [ J] .科技导报 , 2010, 28(3):82-86.[ 3] 刘文洲,滕有明 ,谭志鑫, 等.杨梅茎皮镇痛和免疫作用的实验研究
[ J].时珍国医国药, 2010, 21(6):1416-1417.
[ 4] 刘宝剑 ,郭延生 ,曲亚玲,等.红车轴草总黄酮对小鼠免疫功能的影响
[ J].安徽农业科学, 2009, 37(33):16410-16411.
[ 5] 张大方.药理与中药药理实验 [ M] .上海:上海科学技术出版社, 2002:
89, 91.
78139卷 2期　　　　　　　　　　　　　　胡彦武等　东北刺人参茎对免疫力低下小鼠免疫功能的影响