全 文 ：基金项目：湖南省教育厅重点项目（编号：０９Ｃ１２９４）
作者简介：王文渊（１９６９－），男，湖南永州职业技术学院副教授。
Ｅ－ｍａｉｌ：ｗｗｙ０７＠１６３．ｃｏｍ
收稿日期：２０１１－０５－０１
第２７卷第６期
２　０　１　１年１　１月
Ｖｏｌ．２７，Ｎｏ．６
Ｎｏｖ．２　０　１　１
１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００３－５７８８．２０１１．０６．０２４
超临界ＣＯ２流体萃取苦瓜叶中黄酮的研究
Ｓｔｕｄｙ　ｏｎ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ｆｌａｖｏｎｅｓ　ｆｒｏｍ　ｍｏｍｏｒｄｉｃａ　ｃｈａｒａｎ　ｔｉａ
ｌｅａｖｅｓ　Ｌ．ｂｙ　ｓｕｐｅｒｃｒｉｔｉｃａｌ　ＣＯ２ｆｌｕｉｄ
王文渊１
ＷＡＮＧ　Ｗｅｎ－ｙｕａｎ１
　
唐守勇１
ＴＡＮＧ　Ｓｈｏｕ－ｙｏｎｇ１
　
龙红萍２
ＬＯＮＧ　Ｈｏｎｇ－ｐｉｎｇ２
（１．湖南永州职业技术学院，湖南 永州　４２５０００；２．中南大学药学院，湖南 长沙　４１００１３）
（１．Ｈｕｎａｎ　Ｙｏｎｇｚｈｏｕ　Ｖｏｃａｔｉｏｎａｌ　Ｔｅｃｈｎｉｃａｌ　Ｃｏｌｌｅｇｅ，Ｙｏｎｇｚｈｏｕ，Ｈｕｎａｎ４２５０００，Ｃｈｉｎａ；
２．Ｓｃｈｏｏｌ　ｏｆ　Ｐｈａｒｍａｃｙ，Ｃｅｎｔｒａｌ　Ｓｏｕｔｈ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｃｈａｎｇｓｈａ，Ｈｕｎａｎ４１００１３，Ｃｈｉｎａ）
摘要：研究超临界流体萃取苦瓜叶黄酮的影响因素，并对提
取工艺进行优化设计。在单因素试验和正交试验的基础上，
得到超临界萃取工艺的最优化条件：以用量为１∶１（Ｖ∶ｍ）
的９５％乙醇浸润１ｈ，夹带剂体积与原料质量比２∶１，ＣＯ２流
量２２Ｌ／ｈ、萃取压力２８ ＭＰａ、萃取温度４４ ℃，萃取时间
１５０ｍｉｎ。该工艺条件下，黄酮的提取率可达到３．６９％。
关键词：超临界；苦瓜叶；黄酮；提取
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｈｅ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ　ｏｆ　ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ　ｆｒｏｍ　ｍｏｍｏｒｄｉｃａ
ｃｈａｒａｎｔｉａｌｅａｖｅｓ　Ｌ．ｂｙ　ｓｕｐｅｒｃｒｉｔｉｃａｌ　ＣＯ２ｆｌｕｉｄ　ｗａｓ　ｓｔｕｄｉｅｄ　ａｎｄ　ｔｈｅ
ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ　ｐａｒａｍｅｔｅｒｓ　ｗｅｒｅ　ｏｐｔｉｍｉｚｅｄ．Ｂａｓｅｄ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｓｉｎｇｌｅ　ｅｘｐｅｒｉ－
ｍｅｎｔｓ　ａｎｄ　ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ　ｔｅｓｔｓ，ｔｈｅ　ｏｐｔｉｍａｌ　ｐｒｏｃｅｓｓ　ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ　ｗｅｒｅ　ａｓ
ｆｏｌｏｗｓ：ｓｏａｋ　ｔｈｅ　ｍａｔｒｉｘ　ｂｙ　９５％ｅｔｈａｎｏｌ（ｃｏｎｔｒａｓｔ　ｔｏ　ｍａｔｒｉｘ　１∶１）
ｆｏｒ　ｏｎｅ　ｈｏｕｒ，９５％ｅｔｈａｎｏｌ（ｃｏｎｔｒａｓｔ　ｔｏ　ｍａｔｒｉｘ　２∶１）ｓｅｒｖｅ　ａｓ　ｅｎｔｒａｉ－
ｎｅｒ．ＣＯ２ｆｌｏｗ　ｒａｔｅ　２２Ｌ／ｈ，ｅｘｔｒａｃｔｉｎｇ　ｐｒｅｓｓｕｒｅ　２８ＭＰａ，ｅｘｔｒａｃｔｉｎｇ
ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ　４４℃，ａｎｄ　ｅｘｔｒａｃｔｉｎｇ　ｔｉｍｅ　１５０ｍｉｎ．Ｔｈｅ　ｙｉｅｌｄ　ｏｆ　ｆｌａ－
ｖｏｎｏｉｄｓ　ｗａｓ　３．６９％ｕｎｄｅｒ　ｔｈｅ　ｏｐｔｉｍａｌ　ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ．
Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ＳＦＥ；ｍｏｍｏｒｄｉｃａ　ｃｈａｒａｎｔｉａｌ　ｌｅａｖｅｓ；ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ；ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ
苦瓜又名癞葡萄、凉瓜，因有特殊苦味而得名，研究［１－４］
表明，苦瓜的果实和茎叶中富含黄酮；苦瓜黄酮具有抗癌防
癌、降血糖、血脂、抗心律失常和增强免疫力等有多种生理和
药理功效，因其独特的功效可作为治疗心脑血管疾病的药
物［５］。苦瓜黄酮还具有清除自由基抗氧化和抗衰老作用［６］，
是一种天然的抗氧化剂，可用作为食品中的天然添加剂［７］，
在医药和食品领域中有着广泛的用途。目前，对苦瓜中的多
糖、皂苷等生物活性成分研究的较多，而对苦瓜茎叶中黄酮
类物质研究报道的较少。
超临界ＣＯ２萃取作为近年来发展的一种集萃取、分离于
一体的新兴提取技术，具有提取条件温和、活性成分不易被
破坏、消耗少、传质速率快、溶剂残留少等优点［８］，且最终的
提取效率和经济性同水提法、有机溶剂提取法、微波法、超声
波法等常规方法相比也有很大提高，被广泛应用在天然产物
有效成分的提取中［９］。本试验以苦瓜叶为原料，先用乙醇进
行浸润预处理，然后采用超临界流体萃取技术提取其中黄酮，
并与固体直接进料方式的试验结果进行比较，以期得到更高
效的提取苦瓜叶中黄酮类化合物的工艺。为充分利用苦瓜叶
中的生物活性物质－苦瓜黄酮，提供一定的理论基础和指导。
１　试验部分
１．１　试剂与仪器
苦瓜叶，采自永州市农科所蔬菜园区，干燥粉碎，过４０
目筛，装瓶备用；
ＣＯ２（纯度≥９９．５％）：食品级，永州市医用氧气厂；
芦丁对照品：批号１０００８０，中国药品生物制品检定所；
无水乙醇、硝酸铝、亚硝酸钠、氢氧化钠等试剂：均为国
产分析纯；
二次蒸馏水：本实验室自制；
超临界萃取装置：ＨＡ２２１－４０，江苏南通华安超临界萃取
有限公司；
紫外－可见分光光度计：ＵＶ－９１００，上海民仪电子有限
公司；
高速万能粉碎机：ＦＷ－１００型，天津市泰斯特仪器有限
公司；
电子天平：ＡＥＵ－２１０，湘仪天平仪器设备有限公司；
１．２　方法
１．２．１　工艺流程
苦瓜叶→干燥→粉碎→称量→乙醇浸润→超临界萃取
→合并萃取物→减压浓缩→黄酮提取液
８９
１．２．２　操作要点
（１）原料预处理：新鲜苦瓜叶经漂洗、阴干，于６５℃烘
箱内干燥１２ｈ后取出，粉碎，过４０目筛。称取５０．０ｇ苦瓜
叶粉于２５０ｍＬ三角瓶中，按用量为１∶１（Ｖ∶ｍ）加入９５％
乙醇浸润１ｈ。
（２）超临界ＣＯ２流体萃取：将经过乙醇浸润的苦瓜叶粉
通过料筒装入萃取釜，以９５％乙醇为夹带剂，按预定的设计
调节ＣＯ２流量、萃取釜的压力和温度，设定分离釜Ｉ压力
８ＭＰａ，温度４０℃，分离釜Ⅱ压力６ＭＰａ，温度４５℃，萃取
一定的时间，每隔３０ｍｉｎ收集萃取物，合并萃取物，减压浓
缩得样品溶液。
１．２．３　黄酮提取的单因素试验
（１）夹带剂及其用量的确定：使用加夹带剂可提高苦瓜
黄酮的提取率，根据前期预试验结果，并考虑安全性、成本等
因素，确定以９５％的乙醇作为夹带剂。再固定 ＣＯ２流量
２０Ｌ／ｈ，萃取压力 ２５ ＭＰａ，萃取温度 ５０ ℃，萃取时间
１５０ｍｉｎ，夹带剂的用量分别控制为１∶１，１．５∶１，２∶１，
２．５∶１，３∶１（Ｖ∶ｍ），以黄酮提取率为评价指标，考察夹带
剂用量对黄酮提取率的影响。
（２）萃取压力对黄酮提取率的影响：以９５％的乙醇作为
夹带剂，固定 ＣＯ２流量２０Ｌ／ｈ，温度 ５０℃，夹带剂用量
２∶１（Ｖ∶ｍ），萃取时间１２０ｍｉｎ，萃取压力分别控制为１６，
１８，２０，２２，２４，２６，２８，３０，３２ＭＰａ，以黄酮提取率为评价指标，
考察萃取压力对黄酮提取率的影响。
（３）萃取温度对黄酮提取率的影响：以９５％的乙醇为夹
带剂，固定ＣＯ２流量２０Ｌ／ｈ，压力２２ＭＰａ，时间１２０ｍｉｎ，夹
带剂用量２∶１（Ｖ∶ｍ），萃取温度分别控制为３２，３４，３６，３８，
４０，４２，４４，４６，４８，５０℃，以黄酮提取率为评价指标，考察萃取
温度对黄酮提取率的影响。
（４）萃取时间对黄酮提取率的影响：以９５％的乙醇为夹
带剂，固定ＣＯ２流量２０Ｌ／ｈ，温度４４℃，压力２８ＭＰａ，夹带
剂用量２∶１（Ｖ∶ｍ），萃取时间分别控制为６０，９０，１２０，１５０，
１８０，２１０，２４０ｍｉｎ，以黄酮提取率为评价指标，考察萃取时间
对黄酮提取率的影响。
（５）ＣＯ２流量对黄酮提取率的影响：以９５％的乙醇作为
夹带剂，固定温度４４，压力２８ＭＰａ，时间１５０ｍｉｎ，夹带剂用
量２∶１（Ｖ∶ｍ），ＣＯ２流量分别控制为１５，１８，２１，２４，２７，３０，
３３Ｌ／ｈ，以黄酮提取率为评价指标，考察ＣＯ２流量对黄酮提
取率的影响。
１．２．４　正交试验设计方案　根据各单因素试验结果确定正
交试验的因素及水平取值范围，再设计Ｌ９（３４）正交试验，以
黄酮提取率为评价指标，进一步优化苦瓜叶黄酮的超临界
ＣＯ２流体萃取工艺参数。
１．２．５　总黄酮含量的测定
（１）标准曲线的绘制：采用 ＮａＮＯ２－Ａｌ（ＮＯ３）３化学络
合分光光度法［１０］，以芦丁对照品溶液做标准曲线，求得回归
方程：
Ａ＝０．９４３　７Ｙ－０．０８５　７（Ｒ２ ＝０．９９９　６） （１）
式中：
Ａ——— 吸光度；
Ｙ——— 芦丁浓度，ｍｇ／ｍＬ；
（２）样品中总黄酮含量的测定：精密取适量黄酮提取液
于２５ｍＬ容量瓶中，其余步骤与标准曲线的绘制方法相同，
测定吸光度值，照标准曲线法计算总黄酮的含量，按式（２）计
算提取率：
Ｙ ＝ ｃ×Ｖ×２５Ｍ×Ｖ１×１０００×
１００％ （２）
式中：
Ｙ——— 黄酮提取率，％；
Ｃ——— 被测液黄酮浓度，ｍｇ／ｍＬ；
Ｖ１——— 测定时吸取的黄酮提取液体积，ｍＬ；
Ｖ——— 黄酮提取液的总体积，ｍＬ；
Ｍ——— 原料粉质量，ｇ；
２　结果与分析
２．１　单因素试验结果分析
２．１．１　夹带剂用量对黄酮提取率的影响　由图１可知，随
着夹带剂用量的增加，黄酮提取率先增加后减少。这是因为
夹带剂的加入，改善了超临界流体对黄酮的溶解性和选择
性，但用量过多，反而会使超临界ＣＯ２流体的渗透力减弱。
因此，只有夹带剂量适当，才能达到理想的萃取效果，可以看
出，当夹带剂用量为２∶１（Ｖ∶ｍ）时黄酮提取率最高。
3.0
2.5
2.0
1.5
1.0
黄
酮
提
取
率
Ex
tra
ct
io
n
ra
te
of
fla
vo
no
id
s/%
夹带剂体积/原料质量
Cosolvent volume/weight of raw materials（V∶m）
1.0∶1 1.5∶1 2.0∶1 2.5∶1 3.0∶1
图１　夹带剂用量对黄酮提取率的影响
Ｆｉｇｕｒｅ　１　Ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ａｍｏｕｎｔ　ｏｆ　ｅｎｔｒａｉｎｅｒ　ｏｎ
ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｒａｔｅ　ｏｆ　ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ
２．１．２　萃取压力对黄酮提取率的影响　由图２可见，随着
萃取压力的提高，溶剂的溶解能力增强，黄酮提取率增大。
当压力增大到一定程度时，继续增加压力，超临界流体的黏
度增加，使得流体的传质速率下降，影响萃取效果，当压力＞
２８ＭＰａ时，提取率呈降低趋势。
２．１．３　萃取温度对黄酮提取率的影响　由图３可知，在其
它条件恒定的情形下，黄酮提取率先随温度的升高而增大，
４４℃时达到最大值，而后开始下降，这是因为密度变化引起
的溶解能力占主导所致［１１］。
２．１．４　萃取时间对黄酮提取率的影响　由图４可知，随着
萃取时间的延长，溶剂的传质能力逐步达到良好状态，萃取
９９
提取与活性 　 ２０１１年第６期
量逐渐增加，萃取率增大，至１５０ｍｉｎ时达到较大值。当黄
酮基本溶出，继续延长萃取时间，萃取率增幅不大。
3.0
2.5
2.0
1.5
16
黄
酮
提
取
率
Ex
tra
ct
io
n
ra
te
of
fla
vo
no
id
s/%
压力
Pressure/MPa
18 20 26 28 30
1.0
22 24
◆
◆
◆
◆
◆
◆ ◆
◆ ◆
32
图２　萃取压力对黄酮提取率的影响
Ｆｉｇｕｒｅ　２　Ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ｅｘｔｒａｃｔｉｎｇ　ｐｒｅｓｓｕｒｅ　ｏｎ
ｔｈｅ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｒａｔｅ　ｏｆ　ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ
3.5
2.5
2.0
1.5
34
黄
酮
提
取
率
Ex
tra
ct
io
n
ra
te
of
fla
vo
no
id
s/%
温度
Temperature/℃
36 38 44 46 48
1.0
40 42
◆
◆
◆
◆ ◆
◆ ◆
◆ ◆
50
3.0
图３　萃取温度对黄酮提取率的影响
Ｆｉｇｕｒｅ　３　Ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｅｘｔｒａｃｔｉｎｇ　ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ　ｏｎ
ｔｈｅ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｒａｔｅ　ｏｆ　ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ
4.0
2.5
2.0
1.5
60
黄
酮
提
取
率
Ex
tra
ct
io
n
ra
te
of
fla
vo
no
id
s/%
时间
Time/min
90 210
◆
◆
◆
◆ ◆
◆ ◆
3.0
3.5
180150120 240
图４　萃取时间对黄酮提取率的影响
Ｆｉｇｕｒｅ　４　Ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ｅｘｔｒａｃｔｉｎｇ　ｔｉｍｅ　ｏｎ　ｔｈｅ
ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｒａｔｅ　ｏｆ　ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ
２．１．５　ＣＯ２流量对黄酮提取率的影响　由图５可知，随着
ＣＯ２流量的增加，流体的湍流和扰动加强，增加了流体分子
与溶质间的碰撞机会，萃取速率提高。但流量过大，会使超
临界流体与待萃取组分接触时间减少，影响萃取效果。ＣＯ２
流量对黄酮提取率的影响呈抛物线形，流量为２１Ｌ／ｈ时，黄
酮提取率最高。
２．２　正交试验
根据单因素的试验结果确定用量为２∶１（Ｖ∶ｍ），选取
萃取温度、压力、时间、ＣＯ２流量四因素进行正交试验优化研
究，以确定超临界流体萃取的最优化工艺，正交试验的因素
及水平取值见表１，结果见表２。
3.5
2.5
2.0
1.0
15
黄
酮
提
取
率
Ex
tra
ct
io
n
ra
te
of
fla
vo
no
id
s/%
CO2流量
CO2 flow/（L·h-1）
18 30
◆
◆
◆ ◆ ◆
◆
◆
3.0
272421 33
1.5
图５　ＣＯ２流量对黄酮提取率的影响
Ｆｉｇｕｒｅ　５　Ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ＣＯ２ｆｌｏｗ　ｏｎ　ｔｈｅ
ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｒａｔｅ　ｏｆ　ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ
表１　正交试验因素水平表
Ｔａｂｌｅ　１　Ｆａｃｔｏｒｓ　ａｎｄ　ｌｅｖｅｌｓ　ｏｆ　ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ　ｔｅｓｔ
水平
Ａ压力／
ＭＰａ
Ｂ温度／
℃
Ｃ　ＣＯ２流量／
（Ｌ·ｈ－１）
Ｄ时间／
ｍｉｎ
１　 ２６　 ４２　 ２０　 １２０
２　 ２８　 ４４　 ２１　 １５０
３　 ３０　 ４６　 ２２　 １８０
表２　超临界流体萃取苦瓜叶总黄酮
正交试验结果与极差分析
Ｔａｂｌｅ　２　Ｔｈｅ　ｒｅｓｕｌｔｓ　ａｎｄ　ａｎａｌｙｓｉｓ　ｏｆ　ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ　ｔｅｓｔ
试验号 Ａ　 Ｂ　 Ｃ　 Ｄ 黄酮提取率／％
１　 １　 １　 １　 １　 １．８３
２　 １　 ２　 ２　 ２　 ２．８４
３　 １　 ３　 ３　 ３　 ２．３８
４　 ２　 １　 ２　 ３　 ３．３７
５　 ２　 ２　 ３　 １　 ３．７６
６　 ２　 ３　 １　 ２　 ３．０４
７　 ３　 １　 ３　 ２　 ３．４３
８　 ３　 ２　 １　 ３　 ３．２４
９　 ３　 ３　 ２　 １　 ２．８９
ｋ１ ２．３５　 ２．８８　 ２．７１　 ２．

８３
ｋ２ ３．３９　 ３．２８　 ３．０３　 ３．１０
ｋ３ ３．１９　 ２．７７　 ３．１９　 ３．００
Ｒ　 １．０４　 ０．５１　 ０．４９　 ０．２７
由表２可知，萃取温度、压力、时间、ＣＯ２流量四因素对
黄酮提取率影响的主次顺序：萃取压力＞温度＞ＣＯ２流量＞
萃取时间。苦瓜叶中黄酮的超临界流体萃取最佳工艺条件
是：Ａ２Ｂ２Ｃ３Ｄ２，即萃取压力２８ＭＰａ，温度４４℃，ＣＯ２流量
２２Ｌ／ｈ，萃取时间１５０ｍｉｎ。
（下转第１３０页）
００１
第２７卷第６期 王文渊等：超临界ＣＯ２流体萃取苦瓜叶中黄酮的研究 　
４．４　检出限的确定
根据美国环境保护所（ＥＰＡ）相关标准［１０］，在置信水平
为９９％时，重复测定浓度与方法检出限接近的样品ｎ次，计
算出标准偏差ＳＴＤ。检出限（ＭＤＬ）计算公式：
ＭＤＬ＝２．８２１×ＳＴＤ （５）
对标准样品１＃重复测定１０次，４种指标１０次测定结
果的标准偏差分别为２．５７３，０．２９７，０．００１　３２，０．１０５，４种指
标的方法检出限分别为７．２５９，０．８３７，０．００３　７２，０．２９６。
４．５　验证性实验
将发酵过程中的样品取样（发酵９６ｈ），采用国标方法进
行各指标测定，并对测定结果进行比较，结果见表３。
表３　验证实验结果
Ｔａｂｌｅ　３　Ｒｅｓｕｌｔｓ　ｏｆ　ｖａｌｉｄａｔｉｏｎ　ｔｅｓｔ
指标 国标方法 仪器结果 偏差／％
还原糖 ２４３０　 ２４７６　 １．８９
氨基氮 ３５　 ３５　 ０．００
二氧化碳 ０．４２　 ０．４３　 ２．３８
酒精度 ３６　 ３５ －２．７８
由表３可知，采用连续流动化学分析仪测定的试验结果
同采用国家标准规定的方法测定的结果相差较小。
５　结论
使用定时控制器控制进样泵，配合连续流动化学分析仪
自动、定时测定发酵液样品中还原糖、氨基氮、二氧化碳和酒
精度的含量，采用进样６０ｓ，冲洗９０ｓ，检测波长分别为４６０，
５７０，５５０，５９０ｎｍ，每隔２ｈ自动测定标准品和样品。在该条
件下测定结果较好，具有较好的重复性、较稳定的加标回收
率及较低的检出限。
采用该方法能自动、快速、准确的测定发酵系统中多种
物质的含量是可行的，并能有效减少化学药品的用量，减少
相应的污染。这些优点是传统测定方法所不具备的，但该方
法针对的准确测定范围有一定限度，对于发酵过程中物质变
化过大的发酵液需进一步改进。
参考文献
１　赵长新，窦少华，张亮，等．啤酒发酵过程中电导率在线监测方
法：中国，ＣＮ２００５１００４７０１４．Ｘ［Ｐ］．２００６－０２－１５．
２　李代禧，吴智勇，徐端钧，等．啤酒主要成分的近红外光谱法测
定［Ｊ］．分析化学，２００４（８）：１　０７０～１　０７３．
３　高月华，吕霞付．超声波啤酒酵母浓度在线检测仪［Ｊ］．压电与
声光，２００７，２９（１）：１１２～１１４．
４　Ｖｉｒｐｉ　Ｔａｒｋｉａｉｎｅｎ，Ｔａｐｉｏ　Ｋｏｔｉａｈｏ，Ｉｓｍｏ　Ｍａｔｔｉｌａ，ｅｔ　ａｌ．Ｏｎ－ｌｉｎｅ
ｍｏｎｉｔｏｒｉｎｇ　ｏｆ　ｃｏｎｔｉｎｕｏｕｓ　ｂｅｅｒ　ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ　ｐｒｏｃｅｓｓ　ｕｓｉｎｇ　ａｕｔｏ－
ｍａｔｉｃ　ｍｅｍｂｒａｎｅ　ｉｎｌｅｔ　ｍａｓｓ　ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｉｃ　ｓｙｓｔｅｍ ［Ｊ］．Ｔａｌａｎｔａ，
２００５，６５（５）：１　２５４～１　２６３．
５　彭军仓，张迎新，胡喜怀．用流动化学分析仪测定烟用香料中的
还原糖［Ｊ］．烟草科技，２００３（５）：２４～２５，４２．
６　谢笔钧，何慧．食品分析［Ｍ］．北京：科学出版社，２００９．
７　宗绪岩，李丽，罗惠波，等．连续流动化学分析仪快速检测啤酒发
酵液中二氧化碳方法研究［Ｊ］．四川理工学院学报：自然科学版，
２０１２，２５（２）：１２５～１２８．
８　胡云良，王慧燕，张立，等．改良乙醇脱氢酶法测定血清中微量
乙醇［Ｊ］．中国卫生检验杂志，２００８，１８（１）：４７～４８，１０６．
９　Ｂｅｒｎｏｗｓｋｙ　Ｃ，Ｓｗａｎ　Ｍ．Ａｎ　ｉｍｐｒｏｖｅｄ　ｃｙｃｌｉｎｇ　ａｓｓａｙ　ｆｏｒ　ｎｉｃｏｔｉｎ－
ａｍｉｄｅ　ａｄｅｎｉｎｅ　ｄｉｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ ［Ｊ］．Ａｎａｌ　Ｂｉｏｃｈｅｍ．，１９７３，５３：
４５２～４５８．
１０　宗绪岩，罗惠波，黄治国，等．自动化学分析仪快速检测大曲糖
化力方法研究［Ｊ］．中国酿造，２０１０（２）：１６２～１６４．
（上接第１００页）
２．３　验证实验
按正交试验确定的最佳提取工艺条件，进行３次重复试
验，黄酮提取率分别为３．７０％，３．６５％，３．８１％，平均提取率
为３．７２％，与理论预测值的相对误差为１．０６％，表明正交试
验得出的最优工艺是符合实际的。
３　结论
（１）前期预试验发现，在相同条件下对原料进行乙醇浸
润预处理以后进行超临界萃取，比直接固体进料进行超临界
萃取黄酮平均提取率高２８％以上。
（２）超临界流体萃取苦瓜叶中总黄酮的最佳工艺条件
为：以用量为１∶１（Ｖ∶ｍ）的９５％乙醇对原料进行浸润１ｈ（预
处理），用量为２∶１（Ｖ∶ｍ）的９５％乙醇为夹带剂，控制ＣＯ２流
量２２Ｌ／ｈ，压力２８ＭＰａ，温度４４℃，循环萃取１５０ｍｉｎ。
参考文献
１　申湘忠，杨民生．苦瓜植株各部分黄酮的提取与粗黄酮含量的测
定［Ｊ］．食品与生物技术学报，２００７，２６（１）：６０～６４．
２　计红芳，张令文，孙科祥．苦瓜总黄酮的提取工艺［Ｊ］．食品研究与
开发，２００９，３０（５）：７７～８１．
３　杨恩昌，张玉军，王清路．苦瓜有效成分及其功能的研究进展［Ｊ］．
河北农业科学，２００９，１３（１）：１６２～１６４．
４　邓俭英，方锋学，程亮．苦瓜的药用价值及其利用［Ｊ］．中国食物与
营养，２００５（１）：４８～４９．
５　吴德雨，黄荣清，骆传环，等．苦瓜中活性成分及药理药效［Ｊ］．科
学技术与工程，２００５，１７（５）：１　２８２～１　２８５．
６　刘苇芬，文良娟．苦瓜抗氧化活性成分的研究［Ｊ］．现代食品科技，
２００６，２２（２）：９５～９７．
７　张炳桢，彭艳丽，李亮．苦瓜的现代研究进展［Ｊ］．食品与药品，
２００６，８（４）：２７～３０．
８　梁健钦，杨焕琪，熊万娜，等．超临界ＣＯ２萃取砂糖桔叶挥发油及
其ＧＣ－ＭＳ分析［Ｊ］．食品与机械，２０１０，２６（３）：２８～３０．
９　张瑞菊，张国英，孙海波，等．苦参中黄酮类组分的提取及抗氧化
性的研究［Ｊ］．食品与机械，２００９，２５（４）：６８～７１．
１０　王敏，高锦明，王军，等．苦荞茎叶粉中总黄酮酶法提取工艺研究
［Ｊ］．中草药，２００６，３７（１１）：１　６４５～１　６４８．
１１　岳红，赵晓莉，张颖．超临界二氧化碳萃取柿叶黄酮的工艺研究
［Ｊ］．化学研究与应用，２００５，１７（３）：４２１～４２３．
０３１
安全与检测 　 ２０１１年第６期