全 文 ：第 36卷　第 1期 西 南 师 范 大 学 学 报(自然科学版) 2011年 2月
Vol.36　N o.1 　　Journal of Southwest China Normal University (Natural Science Edition) Feb. 2011
文章编号:1000-5471(2011)01-0088-04
防治枇杷花腐病室内药剂筛选①
王志宏 , 　董国菊 , 　窦彦霞 , 　陈国康 , 　马冠华
西南大学 植物保护学院 , 重庆 400715
摘要:采用菌丝生长速率法和孢子萌发法 , 室内测定了 12 种杀菌剂对枇杷花腐病 2 种病原菌拟盘多毛孢(Pestalo-
tiopsis eriobotri f olia)和灰葡萄孢(Botrytis cinerea)的抑菌效果.结果表明:30%苯醚甲·丙环唑乳油 、 50%异菌脲
可湿性粉剂 、 26%嘧胺·乙霉威可湿性粉剂 、 50%多菌灵可湿性粉剂和 70%甲基硫菌灵可湿性粉剂等 5 种杀菌剂
对 2种病原菌的菌丝生长和孢子萌发都具有强烈的抑制作用;70%嘧霉胺水分散粒剂和 50%嘧菌环胺水分散粒剂
对 2 种病原菌也有较好的抑制作用;其余药剂抑制作用相对较差.
关　键　词:枇杷花腐病;拟盘多毛孢;灰葡萄孢;药剂筛选
中图分类号:S436.6 文献标志码:A
枇杷原产于我国 , 是我国南方名贵特产果品之一 , 具有很高的营养价值和药用价值[ 1] .近年来 , 随着枇杷
种植面积的不断增加 , 生产规模的日益扩大 , 枇杷花腐病的发生也越来越严重.该病带来的后果是灾难性的 ,
严重时发病率可达 97.4%, 直接影响了枇杷的坐果率 , 产量损失严重的达到 70%～ 90%, 导致果园大幅减产
甚至绝收[ 2-3] , 严重挫伤了果农的种植积极性.目前控制该病害的药剂一直没有系统地筛选和评价.前期研究
表明 , 枇杷花腐病有干腐和湿腐 2种症状类型 , 分别由拟盘多毛孢(Pestalotiopsis eriobotri folia)和灰葡萄孢
(Botry tis cinerea)引起[ 4] .为了有效地控制该病害的发生与为害 , 增加果农收益 , 本文选择 12种市售杀菌剂对
2种病原菌进行了室内抑菌效果测定 , 为选择枇杷花腐病的田间防治药剂提供参考.
1　材料与方法
1.1　供试病原菌
拟盘多毛孢菌株 HG-01和灰葡萄孢菌株 LP-05由重庆西南大学植物生态病理研究所提供.
1.2　供试培养基
马铃薯琼胶培养基(PDA):马铃薯 200 g;琼胶 17 ～ 20 g;葡萄糖 20 g ;水 1 000 mL.
1.3　供试药剂
30%苯醚甲 ·丙环唑乳油(广西贵港市华丰农资有限公司)、 70%嘧霉胺水分散粒剂(北京北农绿亨科
技发展有限公司)、 50%异菌脲可湿性粉剂(武汉泽丰农资有限公司)、 50%嘧菌环胺水分散粒剂(浙江省台
州市农资有限公司)、26%嘧胺·乙霉威可湿性粉剂(山东寿光双星农药有限公司)、 20%噻森铜悬浮剂(浙
江东风化工有限公司)、 20 g/L 禾甲安水剂(山东三碘生化科技有限公司)、 50%多菌灵可湿性粉剂(曼哈顿
生物科技有限公司)、5%井冈霉素水剂(浙江省桐庐汇丰生物化工有限公司)、 80%代森锰锌可湿性粉剂
(山东玉成生化农药有限公司)、 70%甲基硫菌灵可湿性粉剂(浙江龙湾化工有限公司)、 97%甲霜灵原药
(南通润鸿生物化学有限公司).
① 收稿日期:2009-08-10
基金项目:重庆市自然科学基金资助项目(2006BB1314;2009BB1294).
作者简介:王志宏(1987-), 男 , 山西介休人 , 本科生, 主要从事植物保护研究.
通信作者:马冠华 , 副教授.
DOI :10.13718/j.cnki.xsxb.2011.01.038
1.4　试验方法
1.4.1　杀菌剂对 2种病菌菌丝生长的抑制作用
采用菌丝生长速率法测定药剂对菌丝生长的抑制百分率.将直径 4 mm 的菌饼接种于系列质量浓度的
含药 PDA培养基上 , 设不加药剂的 PDA 培养基为空白对照 , 每处理 3次重复.置于 28 ℃培养箱中培养 ,
于 4 d后用十字交叉法测量菌落直径 , 取平均值 , 按下列公式计算抑制百分率.求出毒力回归方程式 , 计算
各药剂对 2种病菌的有效抑制中质量浓度(EC50)及相关系数 r .
抑制百分率(%)=[ (对照菌落直径 -处理菌落直径)/(对照菌落直径 -菌饼直径)] ×100
1.4.2　杀菌剂对 2种病菌孢子萌发的抑制作用
用无菌水调节 2种病菌的孢子质量浓度(10×10倍下每视野 80 ～ 100个), 配成孢子悬浮液.吸 30 μL
孢子悬浮液于凹玻片内 , 再分别加入 30 μL 各系列质量浓度的药液 , 配成含系列药剂质量浓度的孢子悬浮
液[ 5-6] , 设不加药液处理为空白对照 , 每处理 3 次重复.将凹玻片置于培养皿内保湿培养 , 拟盘多毛孢
25 ℃, 灰葡萄孢20 ℃[ 7-8] , 24 h后镜检孢子萌发情况 , 每处理观察 3个视野 , 按下式计算孢子萌发率及药
剂对孢子萌发的抑制率.求出毒力回归方程式 , 计算出各药剂对 2 种病菌孢子萌发的抑制中质量浓度
(EC50)及相关系数 r .
孢子萌发率(%)=萌发孢子量 / 总孢子量 ×100
孢子萌发抑制率(%)=(1 -处理孢子萌发率 / 对照孢子萌发率)×100
2　结果与分析
2.1　杀菌剂对拟盘多毛孢菌丝生长的抑制作用
从表 1可知 , 不同杀菌剂对拟盘多毛孢菌丝生长的抑制程度不同.苯醚甲·丙环唑 、异菌脲 、嘧菌环
胺 、嘧胺 ·乙霉威 、多菌灵 、甲基硫菌灵 、嘧霉胺对拟盘多毛孢的抑制作用较好 , EC50分别为 0.163 6 ,
1.802 7 , 9.070 4 ,3.323 4 ,0.086 8 ,1.345 8 ,20.911 7 μg/mL ;噻森铜 、井冈霉素 、代森锰锌对拟盘多毛孢
的抑制作用较低 , EC50分别为237.411 6 ,290.904 9 , 142.737 7μg/mL;而禾甲安和甲霜灵对拟盘多毛孢的
菌丝生长几乎没有抑制作用.
2.2　杀菌剂对拟盘多毛孢孢子萌发的抑制作用
从表 1可知 , 不同杀菌剂对拟盘多毛孢孢子萌发的抑制程度不同.苯醚甲·丙环唑 、嘧霉胺 、异菌脲 、
嘧菌环胺 、嘧胺·乙霉威 、禾甲安 、多菌灵 、甲基硫菌灵的 EC50较低 , 对拟盘多毛孢的孢子萌发抑制作用
较强;井冈霉素和代森锰锌的 EC50分别为 392.427 4和 691.933 3 μg/mL , 对拟盘多毛孢孢子萌发的抑制
作用较差 , 但试验发现 , 在较低质量浓度下 , 代森锰锌能导致芽管畸形 、卷曲;噻森铜和甲霜灵对拟盘多毛
孢的孢子萌发几乎没有抑制作用.
表 1　12 种杀菌剂对拟盘多毛孢菌丝生长和孢子萌发的抑制作用
药剂名称
菌丝生长
毒力回归方程
(y=a+bx) r
EC50
/(μg·mL-1)
孢子萌发
毒力回归方程
(y=a+bx) r
EC50
/(μg·mL-1)
30%苯醚甲·丙环唑乳油 y=5.598 9+0.761 8 x 0.985 4 0.163 6 y=5.567 2+2.052 0 x 0.994 5 0.529 1
70%嘧霉胺水分散粒剂 y=3.359 2+1.242 7 x 0.994 3 20.911 7 y=3.131 2+2.292 7 x 0.971 2 6.533 0
50%异菌脲可湿性粉剂 y=4.734 6+1.037 1 x 0.974 7 1.802 7 y=4.362 0+2.063 6 x 0.997 3 2.037 7
50%嘧菌环胺水分散粒剂 y=4.022 3+1.021 0 x 0.996 6 9.070 4 y=2.906 1+2.043 6 x 0.987 5 10.583 2
26%嘧胺·乙霉威可湿性粉剂 y=4.412 7+1.126 1 x 0.998 1 3.323 4 y=3.584 7+2.173 1 x 0.979 1 4.479 9
20%噻森铜悬浮剂 y=-2.643 0+3.217 4 x 0.989 4 237.411 6 - - -
20 g/ L禾甲安水剂 - - - y=3.217 5+1.305 4 x 0.996 9 23.197 3
50%多菌灵可湿性粉剂 y=7.815 3+2.652 3 x 0.980 3 0.086 8 y=6.821 5+2.116 0 x 0.986 4 0.137 8
5%井冈霉素水剂 y=-1.225 8+2.527 0 x 0.991 4 290.904 9 y=0.943 8+1.563 8 x 0.994 3 392.427 4
80%代森锰锌可湿性粉剂 y=-0.016 6+2.328 4 x 0.987 8 142.737 7 y=1.981 1+1.063 0 x 0.992 7 691.933 3
70%甲基硫菌灵可湿性粉剂 y=4.044 3+7.416 8 x 0.994 9 1.345 8 y=4.006 6+1.325 4 x 0.962 3 5.617 2
97%甲霜灵原药 - - - - - -
　　注:表中“ -”表示药剂质量浓度为 1 000μg/mL 时 , 测定结果与对照无差异 , 下同.
89第 1期　　　　　　　　　　　王志宏 , 等:防治枇杷花腐病室内药剂筛选
2.3　杀菌剂对灰葡萄孢菌丝生长的抑制作用
从表 2可知 , 不同杀菌剂对灰葡萄孢菌丝生长的抑制程度不同.苯醚甲·丙环唑 、嘧霉胺 、异菌脲 、嘧
菌环胺 、嘧胺 ·乙霉威 、多菌灵 、代森锰锌 、甲基硫菌灵对灰葡萄孢菌丝生长的抑制作用较好 , EC50分别为
1.129 6 ,3.277 5 ,1.030 5 ,11.118 1 , 1.101 0 , 0.077 8 ,18.002 5 ,2.094 1 μg/mL;噻森铜 、井冈霉素 、甲霜
灵对灰葡萄孢的抑制作用较低 , EC50分别为 443.789 2 ,149.186 7 ,228.602 1μg/mL;而禾甲安对灰葡萄孢
的菌丝生长几乎没有抑制作用.
2.4　杀菌剂对灰葡萄孢孢子萌发的抑制作用
从表 2可知 , 不同杀菌剂对灰葡萄孢孢子萌发的抑制程度不同.苯醚甲 ·丙环唑 、嘧霉胺 、异菌脲 、
嘧菌环胺 、嘧胺 ·乙霉威 、多菌灵 、甲基硫菌灵的 EC50均小于 10 μg/mL , 对灰葡萄孢的孢子萌发表现出
了很强的抑制作用;禾甲安和代森锰锌对灰葡萄孢孢子萌发的 EC50居中 , 分别为 56.879 2 μg/mL 和
91.962 0 μg/mL;甲霜灵对灰葡萄孢孢子萌发的 EC50较高 , 达 950.158 2 μg/mL ;而噻森铜和井冈霉素
对灰葡萄孢的孢子萌发几乎没有抑制作用.
表 2　12 种杀菌剂对灰葡萄孢菌丝生长和孢子萌发的抑制作用
药剂名称
菌丝生长
毒力回归方程
(y=a+bx) r
EC50
/(μg·mL-1)
孢子萌发
毒力回归方程
(y=a+bx) r
EC50
/(μg·mL-1)
30%苯醚甲·丙环唑乳油 y=4.943 4+1.069 3 x 0.986 8 1.129 6 y=4.100 5+1.362 7 x 0.987 6 4.571 7
70%嘧霉胺水分散粒剂 y=4.478 9+1.010 8 x 0.986 9 3.277 5 y=4.769 5+1.755 2 x 0.998 8 1.353 1
50%异菌脲可湿性粉剂 y=4.982 6+1.334 4 x 0.969 4 1.030 5 y=4.194 0+2.583 8 x 0.976 8 2.050 9
50%嘧菌环胺水分散粒剂 y=4.358 5+0.613 3 x 0.976 8 11.118 1 y=4.352 1+2.260 4 x 0.969 8 1.934 9
26%嘧胺·乙霉威可湿性粉剂 y=4.915 2+1.872 5 x 0.987 1 1.101 0 y=4.707 3+1.859 7 x 0.981 7 1.436 9
20%噻森铜悬浮剂 y=-0.107 0+1.929 2 x 0.991 7 443.789 2 - - -
20 g/ L禾甲安水剂 - - - y=2.885 5+1.204 9 x 0.974 3 56.879 2
50%多菌灵可湿性粉剂 y=7.413 1+2.175 9 x 0.964 3 0.077 8 y=7.178 0+2.356 2 x 0.968 3 0.119 0
5%井冈霉素水剂 y=3.485 1+0.696 9 x 0.982 4 149.186 7 - - -
80%代森锰锌可湿性粉剂 y=3.367 8+1.300 2 x 0.981 1 18.002 5 y=2.461 7+1.292 6 x 0.979 6 91.962 0
70%甲基硫菌灵可湿性粉剂 y=4.152 0+2.641 9 x 0.997 3 2.094 1 y=3.317 3+1.988 0 x 0.971 7 7.021 3
97%甲霜灵原药 y=2.864 8+0.905 1 x 0.992 8 228.602 1 y=1.955 1+1.022 6 x 0.982 9 950.158 2
3　讨　　论
本研究筛选出来有较好抑菌效果的杀菌剂 , 其作用机制各有特点[ 9] .苯醚甲·丙环唑是由苯醚甲环唑
和丙环唑混配而成的三唑类内吸性杀菌剂 , 具有保护和治疗作用 , 其作用机理为影响甾醇类生物合成 , 使
菌体细胞膜功能受到破坏 , 导致病原菌死亡;异菌脲属酰胺类杀菌剂 , 作用机制可能是干扰细胞核功能及
使细胞破裂;多菌灵和甲基硫菌灵均属苯并咪唑类 , 主要作用是干扰有丝分裂中纺锤体的形成 , 影响细胞
分裂从而抑制病菌生长繁殖;嘧霉胺属苯胺基嘧啶类 , 能有效抑制病原菌侵染酶的产生;嘧菌环胺为嘧啶
胺类内吸性杀菌剂 , 通过抑制蛋氨酸的生物合成和水解酶的生物活性 , 导致病菌死亡.以上杀菌剂作用机
制及作用方式的多样性为田间试验筛选出多种有效药剂奠定了基础 , 从而避免长期单一用药引起病原菌迅
速产生抗药性而导致防效下降.同时所筛选出的药剂多数为广谱性杀菌剂 , 且已在生产上广泛用来防治多
种作物病害 , 因此这些药剂有可能在田间试验中表现出很好的防治效果.
禾甲安是所选药剂中一种生物源农药 , 主要成分是壳聚糖 , 其作用机理是在附着体表面形成一个低氧
高二氧化碳的密闭环境 , 抑制呼吸作用[ 10] .本研究发现 , 禾甲安虽对拟盘多毛孢和灰葡萄孢的菌丝生长几
乎没有抑制作用 , 但对孢子萌发有较强烈的抑制作用.因此 , 禾甲安有望作为保护剂来防治枇杷花腐病以
降低化学农药用量 , 为枇杷的无公害生产提供保障.
杀菌剂的室内抑菌作用与田间防效之间存在一定的内在联系.因此 , 本研究通过室内测定筛选出对 2
90 西南师范大学学报(自然科学版)　　　　　http://xbbjb.sw u.cn　　　　第 36卷
种病原菌有较好毒力作用的多种杀菌剂 , 可进一步运用到田间防治试验 , 检验其实际应用效果 , 为有效防
治枇杷花腐病寻找合适药剂.
近年来 , 枇杷花腐病在各种植区逐年加重发生 , 损失严重.肖宇等[ 2-3]对其病原菌及生物学特性进行了
研究 , 但对该病害的发生流行规律和防治方法等方面的研究还未见报道.药剂防治要与基础理论相结合才
能取得好的效果 , 因此对该病害的发生发展规律及综合控制措施等方面还需深入研究.
参考文献:
[ 1] 郑少泉.枇杷品种与优质高效栽培技术原色图说 [ M] .北京:中国农业出版社 , 2005.
[ 2] 　肖　宇 , 崔远超 , 曾祥渝.重庆地区枇杷花腐病的初步调查 [ J] .中国南方果树 , 2007 , 36(1):47-49.
[ 3] 　肖　宇 , 崔远超 , 曾祥渝 , 等.枇杷花腐病病原菌的初步研究 [ J] .西南园艺 , 2006 , 34(5):9-12.
[ 4] 　瞿付娟 , 窦彦霞 , 肖崇刚 , 等.枇杷花腐病病原物的初步鉴定 [ J] .植物保护 , 2008 , 34(1):119-122.
[ 5] 　陈年春.农药生物测定技术 [ M] .北京:北京农业大学出版社 , 2001.
[ 6] 　方中达.植病研究方法 [ M] .北京:中国农业出版社 , 1998.
[ 7] 　窦彦霞 , 瞿付娟 , 于晓东 , 等.枇杷花腐病病原生物学特性研究 [ J] .中国南方果树 , 2009 , 38(1):47-50.
[ 8] 　祁之秋 , 纪明山 , 陆　田 , 等.黄瓜褐斑病防治药剂的离体活性筛选 [ J] .植物保护 , 2009 , 35(2):140-143.
[ 9] 　高希武 , 郭艳春 , 王恒亮 , 等.新编实用农药手册 [ M] .郑州:中原农民出版社 , 2002.
[ 10] 董　涛 , 张志刚 , 尚庆茂.水杨酸和壳聚糖对黄瓜幼苗耐盐性的共诱导作用 [ J] .中国蔬菜 , 2009(2):46-50.
Screening for Fungicides of Flower Rot Disease of Loquat
WANG Zhi-hong , 　DONG Guo-ju , 　DOU Yan-xia ,
CHEN Guo-kang , 　MA Guan-hua
School of Plant Protection , Southwest University , Chonging 400715 , China
Abstract:Twelve fungicides w ere cho sen to investig ate thei r effectiv eness against Pestalot iopsis eriobotri-
folia and Botry tis cinerea in vit ro by the method o f colonial g row th-rate and spo re germinat ion.The re-
sults showed that the fungicides wi th st rong activi ty against mycelial g row th and spo re germination o f the
tw o pathogens we re difenoconaxole+propiconazole , iprodione , py rimethanil +die thofencarb , carbendazim
and thiophanate-methy l.T he fung icides w ith activity against the tw o pathogens w ere py rime thanil and
cyprodinil.Rest of the fungicides had w eak activity ag ainst the tw o pathogens.
Key words:f low er ro t disease of loquat ;P.eriobotri f olia;B.cinerea;fungicide screening
责任编辑　夏　娟　　　　
91第 1期　　　　　　　　　　　王志宏 , 等:防治枇杷花腐病室内药剂筛选