全 文 ：第 32 卷 第 1 期 浙 江 林 业 科 技 Vol. 32 No.1
2 0 1 2年 1月 JOUR. OF ZHEJIANG FOR. SCI. & TECH. Jan., 2 0 1 2

文章编号：1001-3776（2012）01-0047-03

加拿利海枣叶斑病抑菌试验

冯福娟，佘德松
（丽水职业技术学院，浙江 丽水 323000）

摘要：对加拿利海枣叶斑病的病原进行分离鉴定和农药抑菌试验。结果表明：加拿利海枣叶斑病病原为半知菌亚
门黑盘孢目的掌状拟盘多毛孢（Pestalotiosis palmarum）；6种杀菌剂的抑菌效果为 10%苯醚甲环唑水分散粒剂 >
450 g/L咪鲜铵水乳剂 > 80%代森锰锌可湿性粉剂 > 40%百菌清悬浮剂 > 70%甲基硫菌灵可湿性粉剂 > 80%乙蒜
素乳油，且 6种杀菌剂在生产上对加拿利海枣叶斑病菌都有较好的抑制作用。
关键词：加拿利海枣；叶斑病；掌状拟盘多毛孢；抑菌试验
中图分类号：S763.1 文献标识码：B

Bacteriostatic Test on Leaf Spot of Phoenix canariensis

FENG Fu-juan，SHE De-song
（Lishui Vocational & Technical College, Lishui 323000, China）

Abstract: Pathogen separated and identified from Phoenix canariensis leaf sport was Pestalotiosis palmarum. Bactoeriostatic tests indicated that the
order of inhibition effect to the pathogen of P. canariensis leaf sport was 10% difenoconazole WG>450g/L prochloraz EW>80% mancozeb WP>40%
chlorothalonil SC>70% thiophanate-methyl WP>80% ethylicin EC.
Key words: Phoenix canariensis; leaf sport; Pestalotiosis palmarum; bactoeriostatic test

加拿利海枣（Phoenix canariensis）原产于非洲西岸的加拿利岛，其树形张开呈半圆形，远观如同撑开了的
罗伞，富有热带风情，是国际著名的景观树种。该树种于 20世纪 80 年代开始引入我国，现在长江流域及以南
地区广泛应用于园林绿化，以烘托热带韵味。但由于生长环境的变化和管理方面的原因，许多栽种的加拿利海
枣出现了生长不良的现象，叶斑病就是其中普遍而且严重的一种现象。加拿利海枣叶斑病主要危害叶片，其症
状为叶局部变淡黄至棕褐色，叶尖病斑多，形状大小不一[1]。有些地区由于叶斑病的危害，导致叶片枯死，甚
至植株死亡，严重影响绿化效果。苗期为害更重，严重影响了种苗的商品价格，对花农造成严重的经济损失。
为了提高加拿利海枣叶斑病的防治效果，我们开展了对加拿利海枣叶斑病病原的分离培养和农药抑菌试验。
1 材料与方法
1.1 病原菌的分离培养
1.1.1 材料选取 采集丽水职业技术学院校园绿化带的加拿利海枣叶斑病的新鲜病叶，带回室内作分离材料。
1.1.2 培养基配制 病菌分离培养所用培养基为马铃薯蔗糖琼脂培养基（PSA）。制作方法：将马铃薯洗净去
收稿日期：2011-07-25；修回日期：2011-11-17
基金项目：温州市 2008年第二期科技计划项目（N20080035）；2008年平阳县第一批科技发展计划项目（农业）（2008001）
作者简介：冯福娟（1963－），女，浙江云和人，高级实验师，从事植物病虫害防治教学与研究。

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皮切块称取 200 g，将其切成正方形小块，放入铝锅中加水 1 000 mL煮沸 20 ~ 30 min，直至马铃薯酥而不烂，
用纱布过滤，定容至 1 000 mL，加入琼脂 18 g、蔗糖 20 g，加热并用玻璃棒不停搅拌至琼脂完全溶化后分装到
锥形瓶中，封口包装，高压蒸汽灭菌后备用。
1.1.3 病原菌的分离与纯化 病原菌分离采用植物组织分离法。将加拿利海枣叶斑病病叶用清水洗净，用刀片
从加拿利海枣叶斑病典型病斑的病健交界处切取 5 mm×5 mm的小组织块若干。在消毒后的超净工作台上无菌
操作制作培养基平板。将病组织块先用 70%酒精浸 2 ~ 3 s，再用 0.1%升汞消毒 1 min，然后用灭菌水冲洗 3次
洗净药液。用镊子将消毒过的组织块移接到平板培养基上，每皿放 5 块呈梅花状排列。在培养皿上贴上标签，
然后倒置于 26℃的培养箱中培养。菌落长成后，用接种针或环挑取分离培养出的菌落边缘的菌丝，转接到试管
斜面培养基中，置于 26℃的培养箱中培养得到纯菌种。
1.1.4 病原菌的鉴定 观察菌落菌丝特征，并将纯化得到病菌制成临时玻片标本，置于显微镜下观察镜检其形
态，依据菌落、菌丝和孢子特征，对照有关文献确定病原菌种类。
1.2 病原菌的农药抑菌试验
1.2.1 供试农药及浓度 本试验选用了 6种农药。80%代森锰锌可湿性粉剂，郑州志信农化有限公司生产；10%
苯醚甲环唑水分散粒剂，绩溪农华生物科技有限公司生产；40%百菌清悬浮剂，东莞市瑞德丰生物科技有限公
司生产；450 g/L咪鲜胺水乳剂，陕西恒田化工有限公司生产；80%乙蒜素乳油，南阳卧龙农药厂生产；70%甲
基硫菌灵可湿性粉剂，北京达世丰生物科技有限公司生产。
供试农药浓度以说明书上的有效使用浓度为依据，每种农药选 3种浓度，代森锰锌、百菌清、甲基硫菌灵、
乙蒜素分别配制了 800、900和 1 000倍液；苯醚甲环唑和咪鲜胺分别配制了 1 000、1 500、1 800倍液。
1.2.2 试验方法 采用水平扩散法中的滤纸片法[2]，并作了一定改进。操作方法如下：
1.2.2.1 菌液制备 将培养好的有大量孢子的病原菌移入带玻璃珠已灭菌的无菌水中，振荡摇匀，高倍镜下镜
检每视野 20 ~ 30个孢子为度。
1.2.2.2 PSA培养基平板制备 在灭菌培养皿中倒入 15 mL左右的 PSA培养基，等冷却凝固后备用。
1.2.2.3 抑菌试验 将制备的菌悬液取 1 滴，移入培养平板表面，用玻璃涂捧涂布均匀；将圆滤纸片浸入农药
药液中 1 min，再将圆滤纸片移入带菌平板中，每培养皿移入 3片，均匀排列。每种农药每个浓度 3个重复，以
清水对照，贴上标签，将制好的培养皿倒置恒温箱 26℃培养，随时观察抑菌圈大小及变化。
1.2.2.4 抑菌圈的测量 以通过圆滤纸片中心的两次相互垂直的抑菌圈的平均值作为该药纸片的抑菌直径。将
同一个培养皿内的 3个药纸片的抑菌直径作为该培养皿的平均抑菌圈直径。
2 结果与分析
2.1 加拿利海枣叶斑病病原
分离培养后 3 d出现菌落，菌落平展，表面长绒毛状，菌丝白
色，边缘整齐，培养基淡黄色。第 5天菌落中心出现黑色液滴，为
病菌分生孢子堆，聚成黑色焦油状。培养过程，未发现有性阶段。
镜检特征：菌丝有隔，分枝多，无色。分生孢子大，纺锤形
或梭形，直，极少弯曲；中间有 4个分隔，多数 5个细胞，中部
3个褐色，两端细胞无色；顶端有 3根附属丝，少数 2根或 4根[3]
（图 1）
根据以上特征鉴定其为半知菌亚门、黑盘孢目、拟盘多毛孢
属的掌状拟盘多毛孢（Pestalotiosis palmarum）。
2.2 抑菌试验结果
抑菌试验在培养 36 h后，出现明显的抑菌圈，抑菌圈大小见表 1。
图 1 病原菌分生孢子的形态特征
Figure 1 Characteristic of conidia

1期 冯福娟，等：加拿利海枣叶斑病抑菌试验 49

从表 1可以看出，选择的 6种农药对加拿利海枣叶斑病菌都有较好的抑制作用。对菌丝生长的抑制能力由
强到弱依次为 10%苯醚甲环唑水分散粒剂、450 g/L咪鲜铵水乳剂、80%代森锰锌可湿性粉剂、40%百菌清悬浮
剂、70%甲基硫菌灵可湿性粉剂、80%乙蒜素乳油，其 EC50依次为 0.167 2、0.283 2、2.946 4、4.138 9、5.978 6、
9.2409 mg/L。
表 1 6 种杀菌剂抑制菌丝生长毒力测定结果
Table 1 The toxicity test of 6 fungicides against the mycelia
农药种类 浓度
/mg·L－1
抑菌率
/%
毒力方程 相关系数 EC50
/mg·L－1
80%代森锰锌可湿性粉剂 1.000 0 98.00 Y = 8.1206+89.2382x 0.964 9 2.946 4
0.948 8 91.43
0.903 1 89.43
10%苯醚甲环唑水分散粒剂 0.000.0 69.43 Y = 70.1019+25.8828x 0.869 6 0.167 2
－0.176 1 67.71
－0.255 3 62.00
40%百菌清悬浮剂 0.699 0 72.29 Y =－102.5294+247.2564x 0.956 6 4.138 9
0.647 8 53.43
0.602 1 48.57
450g/L咪鲜铵水乳剂 0.653 2 99.14 Y = 72.4554+40.9853x 0.998 9 0.283 2
0.477 1 92.29
0.397 9 88.57
80%乙蒜素乳油 1.000 0 63.71 Y =－230.6545+290.6181x 0.898 5 9.240 9
0.948 8 37.14
0.903 1 36.00
70%甲基硫菌灵可湿性粉剂 0.942 0 89.43 Y =－133.5260+236.3211x 0.998 5 5.978 6
0.890 9 76.29
0.845 1 66.57
3 小结与讨论
用加拿利海枣叶斑病新鲜病叶经分离培养、纯化、鉴定，其病原为半知菌亚门、黑盘孢目、拟盘多毛孢属
的掌状拟盘多毛孢（Pestalotiosis palmarum）。6种杀菌剂从 EC50上看，抑菌效果为 10%苯醚甲环唑水分散粒剂
> 450 g/L咪鲜铵水乳剂 > 80%代森锰锌可湿性粉剂 > 40%百菌清悬浮剂 > 70%甲基硫菌灵可湿性粉剂 > 80%
乙蒜素乳油，最小值为 0.167 2 mg/L，最高值为 9.240 9 mg/L。因此，6种杀菌剂生产上都可用于防治加拿利海
枣叶斑病。

参考文献：
[1] 金亮，丁印龙. 厦门地区主要棕榈植物病害种类普查鉴定及其防治[J]. 热带农业科学，2000（4）：12－19.
[2] 丁爱云. 植物保护学实验[M]. 北京：高等教育出版社，2004：83.
[3] 陆家云. 植物病原真菌学[M]. 北京：中国农业出版社，2001.：476.