全 文 ：中国食品添加剂
China Food Additives
分析测试
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青刺尖中水解氨基酸含量测定分析
邵金良 1, 2 , 黎其万 1, 2 , 刘家富*1, 2 , 刘宏程 1, 2 , 董宝生 1, 2 ,
汪禄祥 1, 2 , 和丽忠 1, 2 , 束继红 1, 2
(1. 农业部农产品质量监督检验测试中心 , 昆明　650223;
2. 云南省农业科学院质量标准与检测技术研究所 , 昆明　650223)
　　摘　要:目的:分析研究新鲜及腌制青刺尖氨基酸组成。方法:采用日立 L - 8800型氨基酸自动分析仪 ,
色谱条件:标准分析柱 4.6mm ×60. 0mm , 反应柱温度:57. 0℃, 反应器温度:136.0℃, 测定了新鲜和腌制
青刺尖水解氨基酸。分析结果表明:新鲜和腌制样品均测定出 17种氨基酸 , 其中必需和半必需氨基酸有 12
种。新鲜青刺尖的水解氨基酸总量为 5.35%, 腌制品为 3.81%。结论:青刺尖氨基酸种类齐全 , 含量丰富 ,
是一种天然绿色 、 营养健康的食品。
关键词:青刺尖;水解氨基酸;含量;L - 8800型氨基酸自动分析仪
中图分类号:TS207. 3　　　文献标识码:A　　　文章编号:1006 - 2513 (2007) 05 -0148 - 05
Determ ination and analysis of hydrolyzed am ino
acids content inprinsepia utilis poyle
SHAO J in-liang1, 2 , LIQ i-wan1, 2 , LIU Jia-fu* 1, 2 , LIU Hong-cheng1, 2 ,
DONG Bao-sheng1, 2 , WANG Lu-xiang1, 2 , HE L i-zhong1, 2 ,
SHU Ji-hong1, 2 , WANG Q ing-ping1, 2
(1. Supe rv ision＆ Testing Center fo r Farm ProductsQuality, M inistry o fAg ricu lture,
Kunm ing　650223 , China;2. Institu te of Agricu ltureQ ua lity Standards＆ Testing
Technique, Yunnan Academy o fAg ricultu ra l Science, Kunm ing　650223 , China)
Abstrac t:O bjective:To investiga te the hydro ly zed am ino ac ids from the fresh and pick le Prinsepia utilis Poy le.
M ethods:To de term ine the content o f hyd ro lyzed am ino ac ids from fresh and pickle Prinsepia utilis Poy le by Am ino
Ac id M obile Ana ly zer, ch rom a tog raphic condition: standard co lumn is 4. 6mm ×60mm , tem pe ra ture o f reac tive co l-
um n and reactor par t from 57.0℃ and 136.0℃.Resu lts:17 kinds o f am ino ac ids we re assayed 12 of a ll was nece ssa ry
o r half-necessa ry am ino ac ids. The tota l con ten t of hydro ly zed am ino acids w as 5. 35% in fresh Prinsepia u tilis Poy le
and 3.81% in the pickles. Conclusion:The re are abundant am ino acids in the fresh Prinsepia utilis Poy le and pick le,
it is a na tural and nutritional food.
K ey words:prinsepia utilis roy le;hydro ly zed am ino ac id; conten ts;L -8800am ino ac id mobile ana lyze r
收稿日期: 2007 - 07 - 03
作者简介:邵金良 (1979 -), 硕士 , 主要从事氨基酸 、 粗纤维 、 蛋白质等化学成分的分析检测和食品贮藏保鲜加工方面的技术研究。
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青刺尖 (Prinsepia utilis Roy le), 属蔷薇科植
物 [ 1] 。在西南地区有广泛分布 , 主要生长于海拔
2300m至 3200m 的山坡 、 溪边或灌木丛中。据
《滇南本草》记载:其种籽可榨取食用油 , 味香 、
口感好 , 当地人自古就有对青刺尖采种 、 榨油 、
食用的习惯 , 这种习惯一直保持到现在 [ 2] 。袁瑾
等人研究表明:青刺尖种籽油富含多不饱和脂肪
酸 , 如亚麻酸 、 亚油酸等 , 还含有维生素 E等成
分 , 是优质保健食用油 [ 3] 。除文献报道青刺尖果
实的生物学 、药学价值研究外 , 对其茎叶氨基酸
含量研究报道比较少。本文通过测定新鲜和腌制
青刺尖的氨基酸的含量 , 为进一步开发青刺尖的
食用价值提供参考。
1　材料与方法
1.1　供试材料
新鲜青刺尖 , 购自农贸市场 , 腌制品 , 实验
室腌制 。
1.2　试剂
酸解剂:盐酸溶液 , C (HC l) =6.0mo l /L:
优级纯盐酸与去离子水 (电阻率为 18.2MΨ
cm)等体积混合;稀释上机用盐酸冲液:C
(HC l) =0.02mol /L;不同 pH值和离子强度的洗
脱用缓冲溶液:按仪器说明书配制;茚三酮溶
液:按 仪 器 说 明 书 配 制;N aOH 溶 液:C
(N aOH) =6.0mo l /L;17种 L -氨基酸混合标样
(0.1mol /L HC l储备液):S igma公司出品。
1.3　仪器及设备
实验室用样品粉碎机;分析天平;酒精喷
灯;恒温箱;日立 L - 8800型氨基酸自动分析
仪 。
1.4　分析步骤
1.4.1　样品前处理
称取试样约 350mg (精确至 0.0001g)三份 ,
分别置于 20mL水解管中 , 加 10.00mL酸解剂 ,
抽真空 , 封口。将水解管放在 110±2℃恒温干燥
箱中 , 水解 22h[ 4] 。冷却 、 混匀 、开管 , 过滤至
25.0mL容量瓶中用 6.0mol /L的 NaOH溶液调 pH
值至中性 , 用去离子水定容。用 0.45μm滤膜过
滤 , 取 1mL滤液与上机用盐酸溶液等体积混合 ,
供上机使用。
1.4.2　测定
用相应的混合氨基酸标准工作液按仪器说明
书 , 调整仪器操作参数和洗脱用缓冲液的 pH值 ,
使各氨基酸分辨率≥85%, 自动进样 20μL制备
好的试样水解液分析测定 (氨基酸自动分析仪测
定流速:缓冲溶液为 0.400mL /m in, 茚三酮溶液
0.350mL /m in)。
1.4.3　结果计算
以峰面积测定结果 , 用外标法计算各氨基酸
含量 。
1.5　测定标准
氨基酸测定:GB /T 5009.124 - 2003;蛋白
质测定:GB /T 14771 -1993。
2　结果与讨论
2.1　方法学考察
采用 S igma公司生产的氨基酸标准品 , 其中
包括 2.50μmo l /mL的天门冬氨酸 (A sp)、 苏氨
酸 (Thr)、丝氨酸 (Ser)、 谷氨酸 (G lu)、甘氨
酸 (G ly)、丙氨酸 (A la)、缬氨酸 (Va l)、蛋氨
酸 (Met)、异亮氨酸 (Ile)、 亮氨酸 (Leu)、酪
氨酸 (Ty r)、苯丙氨酸 (Phe)、 赖氨酸 (Lys)、
组氨酸 (H is)、 精氨酸 (A rg)、 脯氨酸 (Pro)
和 1.25μmo l /mL的胱氨酸 (Cys)。进样 20μL稀
释好的氨基酸标准品 , 其色谱图见图 1。由图 1
可知:17种氨基酸在 32m in内得到很好的分离 ,
分离度大于 1.5。 (注:图 1为通道 1的标准图
谱 , 通道 2只有脯氨酸一种 , 其标准图谱未列
出。)
2.2　精密度试验
配制好的氨基酸标准品 (S igma公司生产 ,
编号为 AA - S - 18), 连续进样 6针 , 将测试数
据按以下公式计算 。
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图 1　氨基酸标准品色谱分离图
x =x1 +x2 +…xn
n
=∑n
i=1
xi /n (1)⋯⋯⋯⋯
SD = ∑n
i=1
(xi - x)2 /n - 1 (2)⋯⋯⋯⋯⋯
RSD =SD
x
×100 (3)⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯
其中 x:n次进样的峰面积 (或保留时间 )
的算术平均值;xi:第 i次进样的峰面积或保留
时间;n:测定次数;SD:标准偏差;RSD:相对
标准偏差 。
表 1　精密度试验 (n=6)
氨基酸名称
RSD /%
峰面积 保留时间
氨基酸名称
RSD /%
峰面积 保留时间
天门冬氨酸 (Asp) 1. 03 0. 05 蛋氨酸 (M et) 0. 82 0. 03
苏氨酸 (Th r) 1. 07 0. 07 异亮氨酸 (Ile) 1. 15 0. 08
丝氨酸 (S er) 1. 28 0. 06 亮氨酸 (Leu) 1. 09 0. 13
谷氨酸 (G lu) 0. 82 0. 05 酪氨酸 (Ty r) 1. 08 0. 07
胱氨酸 (C ys) 0. 88 0. 05 苯丙氨酸 (Phe) 1. 17 0. 08
甘氨酸 (G ly) 1. 01 0. 08 赖氨酸 (Lys) 1. 32 0. 19
丙氨酸 (A la) 0. 87 0. 09 组氨酸 (H is) 1. 23 0. 11
缬氨酸 (V al) 0. 87 0. 05 精氨酸 (A rg) 0. 78 0. 09
脯氨酸 (Pro) 0. 58 0. 06 ——— ——— ———
表 1可知 , 标准物质连续进样 6针的峰面积和保留时间的相对偏差均小于 1.38%, 说明该方法精
密度高 , 适合青刺尖水解氨基酸的测定。
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2.3　新鲜和腌制青刺尖水解氨基酸测定结果
表 2　新鲜和腌制青刺尖水解氨基酸测定 (n=3)
氨基酸名称
新鲜样 腌制品
含量 /% RSD /% 含量 /% RSD /%
天门冬氨酸 (A sp) 1. 16 0. 52 0. 63 0. 79
苏氨酸 (Th r) 0. 24 1. 22 0. 17 1. 68
丝氨酸 (S er) 0. 27 1. 85 0. 16 1. 95
谷氨酸 (G lu) 0. 76 0. 87 0. 62 0. 55
甘氨酸 (G ly) 0. 26 0. 98 0. 23 0. 42
丙氨酸 (A la) 0. 30 0. 58 0. 35 0. 08
胱氨酸 (C ys) 0. 06 0. 09 0. 05 0. 08
缬氨酸 (Va l) 0. 29 0. 98 0. 23 0. 38
蛋氨酸 (M et) 0. 07 0. 00 0. 06 0. 05
异亮氨酸 (Ile) 0. 25 0. 00 0. 19 0. 26
亮氨酸 (Leu) 0. 41 0. 42 0. 29 0. 28
酪氨酸 (Tyr) 0. 16 1. 37 0. 08 1. 58
苯丙氨酸 (Phe) 0. 23 1. 48 0. 18 0. 38
赖氨酸 (Lys) 0. 32 0. 00 0. 16 1. 42
组氨酸 (H is) 0. 11 0. 95 0. 07 1. 86
精氨酸 (A rg) 0. 25 0. 26 0. 12 0. 68
脯氨酸 (Pro) 0. 21 0. 16 0. 19 0. 15
氨基酸总量 /% 5. 35 ——— 3. 81 ———
蛋白质总量 /% 6. 19 ——— 4. 58 ———
合成蛋白质是氨基酸重要的生理功能之一 。
从表 2测定结果看 , 新鲜和腌制处理过的青刺尖
中均含有 17种氨基酸 , 有 7种为人体必需氨基酸
(因色氨酸未测定 ), 即亮氨酸 、 异亮氨酸 、 赖氨
酸 、蛋氨酸 、 苯丙氨酸 、苏氨酸及缬氨酸。其中
天门冬氨酸含量最高 。
2.4　氨基酸的配比
必需氨基酸除数量以外 , 还应具备适当比例
的搭配模式 , 模式越接近人体蛋白质的氨基酸模
式 , 越易被吸收利用 , 其营养价值也就越高 。现
就新鲜和腌制青刺尖所含人体必需氨基酸与
FAO W/ HO 1973年修正的理想蛋白质人体必需氨
基酸的模式谱进行比较 [ 5] , 结果见表 3。
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表 3　新鲜及腌制青刺尖人体必需氮基酸占总氨基酸的质量分数　　单位: /%
种类 亮氨酸 异亮氨酸 赖氨酸 蛋氨酸 苯丙氨酸 苏氨酸 缬氨酸
籽粒 7. 7 4. 7 6. 0 1. 3 4. 3 4. 5 5. 4
须 7. 6 5. 0 4. 2 1. 6 4. 7 4. 5 6. 0
模式谱 4. 0 7. 0 5. 5 2. 7 4. 5 4. 0 5. 0
氨基酸　新鲜 192. 5 67. 1 109.1 48. 1 95. 6 112.5 108. 0
得分*　腌制 190. 0 71. 4 76.4 59. 2 104. 4 112.5 120. 0
*注:氨基酸得分是采用各种必需氨基酸测得值占氨基酸总量的百分数与标准谱比较后的百分数。
从表 3可以看出 , 除异亮氨酸 、 赖氨酸 、 蛋
氨酸含量偏低于标准模式谱外 , 其余 4种氨基酸
的含量接近或高于标准模式谱 , 其中 , 亮氨酸为
FAO W/ HO建议值的 1.900倍 , 其余的与 FAO /
WHO建议值基本接近 。
3　结论
氨基酸在人体中具有重要的生理功能 , 尤其
是必需氨基酸。人体缺乏一种或几种必需氨基
酸 , 就不能维持正常的生长发育[ 6] 。新鲜或腌制
青刺尖含 17种氨基酸 , 其人体必需氨基酸 、半必
需氨基酸种类齐全 , 其中必需氨基酸占总氨基酸
的比例较高 (新鲜青刺尖 27.8%, 腌制品为
27.9%)。所以青刺尖正好可供给人体丰富的氨
基酸 , 特别是其中必需氨基酸含量 , 能够平衡膳
食中的不足 。
本研究明确了新鲜青刺尖或腌制品中氨基酸
的含量和种类 , 尤其青刺尖中必需氨基酸占总氨
基酸含量的比例高 , 这对于进一步研究开发青刺
尖食品 , 具有一定的指导作用。
参考文献:
[ 1] 袁瑾 , 钟惠民 , 刘国靖 , 等. 野生植物滇刺枣的营养成分
[ J] . 植物资源与环境 , 1998, 7 (2): 63 -64
[ 2] 兰茂. 滇南本草 (第 2卷) [M ] . 昆明:云南人民出版社 ,
1975:426
[ 3] 袁瑾 , 李风起 , 钟惠民. 野生植物青刺尖和火棘果实的营养
成分 [ J] . 植物资源与环境学报 , 2002, 11 (2):63 - 64
[ 4] 王建清 , 张玉. 吊瓜籽中氨基酸质量分数的测定 [ J] . 氨基
酸和生物资源 , 2006, 28 (2):76 - 77
[ 5] 中国医学科学院卫生研究所. 食物成分表 [M ] . 北京:人
民卫生出版社 , 1977:132
[ 6] 高春华 , 杨维旭. 玉米中氨基酸含量的液相色谱分析 [ J] .
淀粉与淀粉糖 , 1998, (3):43 - 45
2007中国 (广州 )秋季食品添加剂和配料展览会
FIC2007 -Autumn
2007年 11月 7 9日　　广州进出口商品交易会流花路展馆
主办单位:中国食品添加剂生产应用工业协会
电话:010 -82290623　82290624　　传真:010 -82290625　82290789
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