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内蒙古地产紫沙参的药效及毒性研究——1.紫沙参对免疫功能的影响



全 文 :内蒙古地产紫沙参的药效及毒性研究
1. 紫沙参对免疫功能的影响
杨 伦 陈友地 毛新伟 李秀玲
(中国林业科学研究院林产化学工业研究所 南京  210042)
  摘 要 以紫沙参多糖及水提取物作为受试物 ,观察其连续多次经口给药对免疫功能的影
响。结果显示能显著地增加碳粒廓清指数 K及吞噬指数α,增强单核巨噬细胞的吞噬功能 ;能显著
地增加小鼠耳肿胀度 ,提示沙参能够增强二硝基氟苯诱导的小鼠迟发型变态反应 ( DT H)。 沙参多
糖在 0. 4 g . kg- 1和 0. 8 g. kg- 1的剂量下能增加脾脏及胸腺的重量 ,而水提取物仅在 0. 6 g . kg- 1剂
量下能增加胸腺重量。 试验采用国家中药二类新药云芝多糖作为阳性对照。
该试验说明紫沙参多糖能提高机体的细胞免疫和非特异性免疫。
关键词 紫沙参多糖 ;免疫 ;碳粒廓清法 ; DTH
  紫沙参是桔梗科沙参属植物的根。性甘 ,
微寒 ,归肺、胃经。 具有养阴清肺、化痰、益气
之功 ,属中药补益类、补阴药。我国内蒙沙区
及其周边地区沙参的野生资源十分丰富〔 1〕。
依据“九五”林业科技攻关子专题“沙参培育
与产业化技术研究”实施计划 ,对筛选出的内
蒙地产沙参优良品种紫沙参 ( Adenophora
paniculata )开展提取活性物质的应用研究 ,
以期开辟紫沙参应用的新途径。
多糖类是近十多年来研究较热门的一类
植物成分 ,由于它具有调节免疫功能、抗肿
瘤、抗溃疡、抗衰老、保肝、降血糖、降血脂等
药理作用 ,它是各种天然药品、保健食品的主
要成分 ,其研究受到国内、外广泛重视。但紫
沙参多糖在国内、外至今尚无研究的报道。本
文针对内蒙沙区地产紫沙参开展沙参多糖免
疫功能药效实验研究。
1 材料与方法
1. 1 药品
紫沙参多糖 取干燥紫沙参根细末
1000 g ,先采用 80%工业乙醇 ,经 90℃热回
流提取 2次 ,回收溶剂后凉干得干燥滤渣。加
入蒸馏水 , 90℃热浸 4次 ,每次 2 h。合并 4次
滤液 ,真空浓缩得粘稠状的水提物 340 g。加
蒸馏水稀至 1000 ml ,再用氯仿萃取 2次 ,每
次加入 100 ml氯仿 ,萃取后用分液漏斗分离
去除氯仿部分。加 95%工业乙醇稀释至浓度
80% ,置于冰箱中过夜。次日进行过滤 ,滤渣
用 95%乙醇洗脱 2次 ,再过滤 ,收集滤渣。在
真空干燥器中 , - 760 mmHg、 60℃条件下真
空干燥得多糖 115 g ,再经研磨过筛 ( 40目 )
得多糖制品。颜色棕黄色 ,易溶于水 , p H5. 8。
云芝多糖 南京老山制药厂生产 ,批号:
970122。
1. 2 动物
昆明种小鼠 体质量 (体质量 ) 18~ 22
g ,雌雄各半 ,由中国药科大学实验动物室提
供。
ICR小鼠 体质量 (体质量 ) 18~ 22 g ,
雌雄各半 ,由中国药科大学实验动物室提供。
1. 3 试剂
印度墨汁 WIN SO R AND N EWTON
IN K, BDH LIM ITED Pode, BH12, 4NN ,
England,使用前用生理盐水稀释 3倍 ,超声
波处理后离心 ,弃去沉淀物。
二 硝 基 氟 苯 ( Dinit rof luorobenzene,
·9·林产化工通讯   1999年第 33卷第 2期
药效及毒性实验由中国药科大学季晖与龚晓键完成。
DN FB)吴江市青云精细化工厂生产。使用前
配制 1% DN FB溶液 ,称取 DN FB 50 mg溶
于预先配好的丙酮、麻油 (丙酮∶麻油= 1∶
1)溶液 5 m l中。
1. 4 方法
1. 4. 1 对非特异性免疫功能的影响—— 碳
粒廓清法:将昆明种小鼠随机分为 6组 ,每组
12只。 紫沙参多糖给药量为 400 mg . kg- 1、
800 mg. kg
- 1 ;紫沙参水提取物给药量为 600
mg. kg- 1、 1200 mg. kg- 1 ;用云芝多糖作阳性
对照组 ,剂量为 1000 mg. kg- 1;阴性对照组
给予等量 0. 5% CMC-Na溶液。上述各组均
灌胃给药 ,每日 1次 ,连续 7日。第 7d(天 )给
药后 30 min,各鼠尾静脉注射经稀释的印度
墨汁 0. 05 m l· 10 g- 1 ,于 1( t1 )和 5( t 5 ) min
后 ,分别从眼眶静脉取血 20μl,加到 2 ml
0. 1% Na2 CO3溶液中摇匀 ,用分光光度计在
680 nm下比色 ,测定 t1和 t5的光密度 ( OD1
和 OD5 )。之后 ,把小鼠放血处死 ,取肝脏、脾
脏、胸腺称重。 按如下公式计算指数 K、T和
脏器系数 ,进行组间 t检验。
廓清指数 K = logOD1- logO D5
t5- t1
=
logOD1- logO D5
4
吞噬指数 T= 体质量 (体质量 )肝重+ 脾重 3 K
脏器系数= 器官重 /体质量 (体质量 )
1. 4. 2 对特异性细胞免疫功能的影响——
二硝基氟苯诱导的小鼠迟发型变态反应试验
法 ( DTH)。
将 ICR小鼠随机分为 6组 ,每组 10只 ,
各组用药剂量同 1. 4. 1。仍采用灌胃给药 ,每
日 1次 ,连续 5日。首次给药 ,在每鼠腹部去
毛 ,范围为 3× 3 cm2 ,将 1% DN FB均匀搽抹
于上。DN FB为一种小分子半抗原 ,将其涂于
皮肤上 ,可透过上皮与角蛋白及胶原蛋白结
合成为全抗原并刺激 T淋巴细胞转化为致
敏淋巴再分布于全身皮肤 ,数日后动物对此
类物质便产生过敏反应。第 5日给药后 30
min,将 1% DN FB均匀涂抹于小鼠右耳进
行攻击 ,使局部产生迟发型变态反应 (水肿 )。
23 h后 ,将小鼠脱颈椎处死剪下左、右耳壳。
用打孔器取下直径 8 mm的耳片称重。以左、
右耳片重量之差作为肿胀度 ,进行组间 t检
验。
2 结果
2. 1 紫沙参对非特异性免疫功能的影响
试验结果见表 1、表 2。
2. 2 紫沙参对特异性细胞免疫功能的影响
二硝基氟苯诱导小鼠迟发型变态反应
( DT H)试验结果见表 3。
表 1 紫沙参提取物对小鼠碳粒廓清试验的作用  ( n= 12, X± SD)
组 别 剂  量
( mg· kg- 1 )
廓清指数
( K)
P值 吞噬指数
(α) P值
阴性对照 0. 0117± 0. 00465 4. 139± 0. 612沙参水提物 600 0. 0175± 0. 00785 > 0. 05 4. 852± 0. 703 < 0. 05
沙参水提物 1200 0. 0189± 0. 00983 > 0. 05 4. 762± 0. 684 < 0. 05
沙参多糖 400 0. 0174± 0. 00841 > 0. 05 4. 608± 0. 915 > 0. 05
沙参多糖 800 0. 0220± 0. 00524 < 0. 01 5. 093± 0. 426 < 0. 01
云芝多糖 1000 0. 0227± 0. 00912 < 0. 01 5. 419± 0. 877 < 0. 01
    注: P值为与阴性对照组相比较。
表 2 紫沙参提取物对小鼠免疫器官重量的影响  ( n= 12, X± SD)
组 别 剂  量
( mg. kg- 1)
脾脏指数
( mg. 10g- 1 )
P值 胸腺指数
( mg. 10g- 1)
P值
阴性对照 38. 75± 7. 54 38. 50± 9. 49
沙参水提物 600 44. 08± 7. 59 > 0. 05 52. 52± 8. 06 < 0. 01
沙参水提物 1200 35. 42± 7. 33 > 0. 05 41. 36± 6. 98 > 0. 05
沙参多糖 400 50. 66± 9. 77 < 0. 01 49. 65± 9. 37 < 0. 05沙参多糖 800 51. 41± 15. 23 < 0. 05 58. 3± 11. 05 < 0. 01
云芝多糖 1000 60. 56± 17. 04 < 0. 01 59. 52± 12. 88 < 0. 01
    注: P值为与阴性对照组相比较。
·10· 林产化工通讯   1999年第 33卷第 2期
表 3 紫沙参提取物对小鼠耳肿胀度的影响 ( n= 10)
组别 剂量
( mg. kg- 1 )
小鼠耳肿胀度
(mg ,X± SD) P值阴性对照 4. 13± 0. 60
沙参水提取 600 4. 13± 0. 73 > 0. 05
沙参水提取 1200 4. 88± 0. 43 < 0. 01沙参多糖 400 4. 85± 0. 78 < 0. 05
沙参多糖 800 4. 78± 0. 68 < 0. 05
云芝多糖 1000 5. 44± 0. 72 < 0. 001
注: P值为与阴性对照组相比较。
3 讨论
试验结果看出 ,紫沙参多糖在 800 mg·
kg
- 1剂量下具有十分显著地提高碳粒廓清指
数 K和吞噬指数T的作用 ,相当于阳性对照
组云芝多糖 1000 mg· kg- 1所产生的作用。
说明紫沙参多糖能够增强单核巨噬细胞的吞
噬作用 ,提高机体的非特异性免疫。紫沙参多
糖在 400 mg· kg- 1和 800 mg· kg- 1剂量下
均能显著地增加脾脏和胸腺重量 , 800 mg·
kg
- 1剂量组的胸腺增重相当于云芝多糖
1000 mg· kg- 1组的作用。胸腺分泌胸腺素 ,
作为 T淋巴细胞的成熟器官在免疫系统中
发挥关键作用。试验结果还看出紫沙参多糖
两个试验组均具有显著地增加小鼠耳肿胀度
作用 ,说明紫沙参多糖能够增强二硝基氟苯
诱导小鼠迟发型变态反应 ,提高机体细胞免
疫功能。已知 ,单核巨噬细胞系统是机体最重
要的防御系统 ,也是机体保持体内环境衡定
的一个最重要的系统 ,它在抗肿瘤免疫、抗感
染免疫及免疫调节中均起重要作用。 T淋巴
细胞则是介导机体细胞免疫的重要细胞。 通
过本试验紫沙参多糖在提高单核巨噬细胞吞
噬能力和提高 T细胞免疫水平两方面都有
显著作用。紫沙参是药食两用植物 ,本试验为
紫沙参应用产品紫沙参系列保健品的开发提
供了实验依据。
参考文献
1 杨 伦等 . 沙参培育与产业化技术研究 . 林产化工通
讯 . 1997, ( 3): 19~ 21
2 陈 奇主编 . 中药药理研究方法学 . 人民卫生出版
社 . 1994
3 郑鹏然等主编 . 食品卫生全书 .红旗出版社 , 1996
4 卫生部药政局 ,新药 (西药 )临床前研究指导原则汇编 ,
1993
STUDY ON TOXICITY AND PHARM ACODYNAM ICS OF
ADENOPHORA PAN ICULA TA GROWN IN THE
INN ER MONGOLIA
1. EFFECT O F A . PAN ICUL A TA ON IMMUN E FUN CT ION
Yang Lun  Chen Youdi  Mao Xinw ei  Li Xiuling
( Research Inst itute of Chemical Processing and Util izat ion of
Forest Products , CAF N anjing  210042)
Abstract The effects of polysaccharide and wa ter ex t ract o f A . paniculata on immune function w ere studied.
The results sh ow ed that the clea rance r ate K of cha rcoal par ticles and the w eightαo f spleen in mice w ere
markedly inc reased, and the spleen func tion of monocyte macrophage raised. In addition, ma rkedly incr eased
sw elling deg r ee of mice ea r show ed tha t the mice DTH induced by dinitr ofluo robenzene could rise with A .
paniculata . The w eigh ts of thymus and spleen w ere increased at the doses 0. 4 g· kg- 1 and 0. 8 g· kg- 1 of
polysaccha ride of A . paniculata , but at the do se 0. 6 g· kg- 1 of w ater ex t ract of A . Paniculata only the
w eigh t of thym us was incr ea sed. The r esults a lso show ed tha t the polysaccha ride of A . paniculata could raise
the cell and nonidiosyncra sy immune function of o rg anism.
Key words  Polysaccha ride o f nanshashen; Immune; Clea ranee ra te of char coal pa rticles; DT H
(收稿: 1998-10-30)
·11·林产化工通讯   1999年第 33卷第 2期