全 文 ：疗失败［8］，如上颌第一磨牙近颊第 2 根管 ( MB2 ) 因
根管口隐蔽且根管细小 ，治疗中容易遗漏。本研究对
象中大多数上颌第一磨牙均遗漏了 MB2，造成术后持
续冷热刺激痛 ，或根尖周暗影长期存在。下颌前牙、
下颌前磨牙可能存在第 2、第 3 根管 ，治疗难度较高
，也易遗漏根管。冠部充填体或修复体的折裂、脱落
或继发龋可使根管内充填物与口腔内微生物接触 ，即
使根管充填严密 ，仍不能避免冠渗漏的发生 ，因此 ，
这类患牙即使没有临床症状 ，也应归于治疗失败 ，建
议进行再治疗。本文有 3 颗前牙 X 线片显示充填无
明显缺陷 ，冠部充填物完好 ，根尖暗影持续存在 ，再
治疗时发现根管内糊剂所占比例较大 ，由于多数糊剂
在硬固后会发生体积收缩 ，能溶解于水或组织液，因
此糊剂比例大易发生根管微渗漏 ，造成治疗失败。综
上所述 ，因预备、消毒和充填不完善等因素造成的根
管清理不彻底、封闭不严密使根管系统再感染或持续
感染是根管治疗失败的主要原因 ，遗漏根管、冠部渗
漏等也可造成治疗失败。
【参考文献】
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( 收稿日期: 2011-01-07)
作者单位: 610083 成都军区总医院临床药学科( 姜云平) ，PET中心( 孙伟张) ; 646000 四川，泸州医学院 2001 级药学实习生( 胡庭刚)
竹节人参提取工艺的正交设计试验
姜云平，孙伟张，胡庭刚
［摘要］ 目的 探讨竹节人参的最佳提取条件。方法 以正交试验对竹节人参的提取条件进行优化，以 Rb1 为
参考指标，考察乙醇的浓度( A) ，提取时间( B) ，提取剂的量( C) ，硫酸的比例( D) 对提取效率的影响。结果 竹节人参
的最佳提取工艺是加 15 倍量 25%的乙醇，硫酸的比例为 7%，提取 3 个小时。结论 该工艺合理，可为竹节人参提取
工艺的确定提供实验依据。
［关键词］ 竹节人参; 正交试验; 高效液相色谱法
［中图分类号］ R 282. 71 ［文献标识码］ A
［文章编号］ 1672 － 7193( 2011) 02-0203-02 Doi: 10. 3969 / j. issn. 1672 － 7193. 2011. 02. 006
The Extracting Conditions of Panax Japonicus by Orthogonal Design Test
Jiang Yunping，Sun Weizhang，Hutinggang，Department of Pharmacy，Chengdu Military General Hospital，Chengdu，Sichuan
Province，P． R． China 610083
Abstract Objective To explore the best extracting conditions of Panax Japonicus．Methods The extracting conditions of Pa-
nax Japonicus were optimized by orthogonal design test，Rb1was set as reference index and the effect of the density of alcohol
( A)，the time of extraction ( B)，the volume of extracting agent ( C) and the ratio of sulfuric acid on extracting efficiency was
observed． Result The best extracting conditions of Panax Japonicus were reached Panax Japonicus were decocted for 3 hours in
15 times volume of alcohol of 25% and the ratio of sulfuric acid at7% ． Conclusions The test provides experimental evidence
for the extracting process of Panax Japonicus．
KEYWORDS Panax Japonicus orthogonal design test HPLC
竹节人参系五加科植物竹节人参( Panax Japoni-
cus C. A. Meyer) 的根茎，具有活血化瘀、消肿止痛、止
血健胃等多种功效，为民间常用中药。有研究表明竹
节人参具有抗疲劳［1］，抗脑缺血损伤［2］，抗胃缺血再
灌注损伤［3］等作用，但对竹节人参的提取工艺方面的
研究不多，笔者以竹节人参的主要成分人参皂甙 Rb1
·302·西南军医 2011 年 3 月 第 13 卷 第 2 期 Journal of Military Surgeon in Southwest China，Vol． 13，No． 2，Mar．，2011
为考察指标，使用正交试验优化了提取工艺，具有较
好的实用价值。
1 仪器与药品
1. 1 仪器 HP1100 高效液相色谱仪( G1311A Quat-
Pump，G1313A ALS，G1315A DAD，G1316A Colcom，
G1322A Degasser，HP ChemStation Plus ) 。METTLER
AE －200 型分析天平( 瑞士)
1. 2 药品 竹节人参( 成都中医药大学惠康药业有
限公司) ，人参皂甙 Rb1( 中国药品生物制品检定所) ，
乙醇为化学纯，甲醇为色谱纯。
2 实验方法与结果
2. 1 色谱条件 分析柱: StableBond SB － C18 ( 5μm
，4. 6 × 150mm) 。流动相: 乙晴—水 0 ～ 15min ( 20: 80
→40: 60) 平衡 3min，流速 1. 0ml. min －1二元线性梯度
洗脱。柱温:室温。检测波长: 203 nm。
2. 2 标准曲线的绘制 精密称取人参皂甙 Rb12. 0mg，
加甲醇溶解，定溶到 10ml( 0. 2mg. ml － 1) 。在上述色
谱条件下进样 1，2，4，6，10，20，40μl，以浓度( x) 和峰
面积 ( y ) 进行直线回归，得到回归方程为 y =
2230. 346x + 7. 832253 r = 0. 9998，结果表明在 20 ～
800( μg. ml － 1) 范围线性关系良好。
2. 3 提取工艺 根据竹节人参中皂甙提取的主要影
响因素有乙醇的浓度( A) 、提取时间( B) 、提取剂的量
( C) 和硫酸的比例( D) 制定因素水平表( 见表 1) 。
表 1 因素水平表
水平 乙醇的浓度( % ) ( A)
提取时间
( h) ( B)
提取剂的量
( 倍) ( C)
硫酸的比例
( % ) ( D)
1 25 1 5 3
2 50 2 10 5
3 75 3 15 7
称取竹节人参的粉末 20g，一共 9 份，按照正交设
计方案，进行 L9( 34 ) 正交实验，煎煮后进行抽滤，体
积分别为 62. 5、160. 0、239. 0、140. 0、245. 0、50. 0、
278. 0、135. 0、145. 0ml，取抽滤后的溶液 25ml 于分液
漏斗中，用三氯甲烷萃取三次，合并萃取液，将萃取液
超声 20 秒，分液漏斗分液，所得产物中加入适量无水
硫酸钠吸水，直到澄清，抽滤，蒸干，溶于甲醇，定溶到
10ml。
2. 4 含量测定 用 2. 1 的色谱条件将样品依次进
样，每个进样 10μl，记录 Rb1 峰面积，通过回归方程计
算得到结果，见表 2。
表 2 正交试验设计及结果
实验号 A B C D 实验结果含量( μg)
1 1 1 1 1 696. 84
2 1 2 2 2 2809. 186
3 1 3 3 3 4602. 411
4 2 1 2 3 1382. 653
5 2 2 3 1 2977. 672
6 2 3 1 2 135. 475
7 3 1 3 2 7. 012
8 3 2 1 3 231. 649
9 3 3 2 1 51. 171
K1 8115. 449 2079. 453 1063. 964 3725. 683 总和
K2 4495. 780 6018. 507 4243. 009 2944. 660 12894. 069
K3 282. 821 4796. 069 7587. 095 6223. 725
A1 2705. 150 693. 151 354. 655 1241. 894 2607. 876
A2 1498. 593 2006. 169 1414. 336 981. 553 1313. 018
A3 97. 274 1598. 687 2529. 032 2074. 575R 2174. 377
1093. 022 * ［A1 = K1 /3; A2 = K2 /3; A3 = K3 /3; R =离均差］
3 讨 论
3. 1 由表 2 可见，乙醇的比例为 A1 = 25%，提取时间
B2 =2h，提取剂的量为 C3 = 15 倍，硫酸的比例为 D4 =
7%时的提取效率最高，故最优条件为 A1B2C3D3，由极
差 R值的大小可知，因素 A的极差最大( 2607. 876) ，为
主要因素;因素 D 的极差最小( 1093. 022) 为最次要因
素。因素的主次顺序为:
主———→次
A C B D
3. 2 有机溶剂在萃取皂甙的过程中，易产生比较严
重的乳化现象，得不到较好的分离效果。笔者曾尝试
多种方法，如: 多次分液［4］，加入乙醇，加入氯化钠等
分离效果都不理想，后来尝试将乳化层全部分离出
来，超声，再次分液，加入适量的无水硫酸钠就可以得
到澄清的溶液。
3. 3 竹节人参中 Rb1 的 HPLC 含量的测定方法采用
梯度洗脱分离效果比等度洗脱好，操作简便，实用性
强。
【参考文献】
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院学报 . 医学版，2001; 18( 3) : 4．
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北民族学院学报 . 医学版，2002; 19( 2) : 1．
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( 收稿日期: 2010-12-29)
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