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［5］梁建成，汪春红． 维生素 C抗 DNA损伤作用的研究进展［C］． 武
汉:营养学会第十届学术会议论文摘要汇编，2004．
［6］龙宇红． 维生素 C、维生素 E对生长期大鼠铅中毒保护作用的实
验研究［D］． 杭州:浙江大学，2004．
［7］孙丕健． 维生素 C 对大鼠酒精性脑和肝损伤的保护作用研究
［D］． 苏州:苏州大学，2011．
［8］徐 琅，宋晓峰，钱志余． HPLC法测定野生蔬菜中维生素 C的含
量［J］． 安徽农业科学，2010，38(34):19277 － 19278．
［9］赵昕梅，远凌威，陈世锋，等． 高效液相色谱法测定果蔬中维生素C含
量［J］． 信阳师范学院学报:自然科学版，2013，26(1):49 －53．
［10］宁德生，梁小燕，方 宏． 高效液相色谱法对罗汉果中 VC 含量
的检测［J］． 食品科学，2010，31(20):311 － 313．
［11］裴云逸． 高效液相色谱法快速测定蔬菜中 Vc 含量的研究［J］．
食品与机械，2012，28(5):91 － 93，162．
［12］陈振健，许开国，涂杰峰，等． 几种果蔬抗坏血酸的高效液相色
谱分析［J］． 福建省农科院学报，1987，2(1):78 － 83．
［13］侯冬岩，回瑞华，刘晓媛，等． 苹果汁中 Vc的 HPLC 分析及抗氧
化性的测定［J］． 食品科技，2006，31(7):238 － 240．
［14］谷雪贤． 蔬果中维生素 C 含量的检测方法［J］． 广东化工，
2010，37(7):98．
［15］吴海燕． 微波提取高效液相色谱法测定花椰菜中的维生素 C
［J］． 江苏农业科学，2014，42(4):256 － 257．
［16］甘振威，武广恒，刘国良，等． 自动电位滴定法和高效液相色谱
法测定深颜色果蔬中维生素 C浓度的比较［J］． 吉林大学学报:
医学版，2014，40(2):441 － 445．
［17］Bergquist S A，Gertsson U E，Noadmark L Y，et al． Ascorbic acid，
carotenoids，and visual quality of baby spinach as affected by shade
netting and postharvest storage［J］． Journal of Agricultural ＆ Food
Chemistry，2007，55(21) :8444 － 8451．
［18］Shohag M J I，Wei Y Y，Yang X． Changes of folate and other poten-
tial health － promoting phytochemicals in legume seeds as affected by
germination［J］． Journal of Agricultural ＆ Food Chemistry，2012，60
(36) :9137 － 9143．
［19］赵文君． HPLC法检测有机酸和水溶性维生素的方法研究［D］．
南京:南京工业大学，2011．
［20］潘建国，王开发，郑尧隆，等． 高效液相色谱法同步测定花粉中
的水溶性维生素［J］． 同济大学学报:自然科学版，2001，29(5):
581 － 583．
曹剑锋，任朝辉，芦静波，等． 矮冷水花成分预试验及不同溶剂提取物的抗氧化活性［J］． 江苏农业科学，2016，44(7):307 － 311．
doi:10． 15889 / j． issn． 1002 － 1302． 2016． 07． 090
矮冷水花成分预试验及不同溶剂提取物的抗氧化活性
曹剑锋1，2，任朝辉3，芦静波4，朱 磊4，梁志远1，夏丽莎1
(1．贵州师范学院贵州省生物资源开发利用特色重点实验室，贵州贵阳 550018;2．贵州师范学院转化与分离研究所，贵州贵阳 550018;
3．贵州师范大学，贵州贵阳 550001;4．皖南医学院，安徽芜湖 241002)
摘要:通过对 1，1 －二苯基 － 2 －三硝基苯肼(DPPH)自由基、·OH的清除活性、还原力、螯合能力、总抗氧化能力
的测定，评价矮冷水花水提取物、95%乙醇提取物及其石油醚相、乙酸乙酯相和水溶性 3 个不同极性部位的抗氧化活
性;测定总黄酮、总酚含量;采用化学反应鉴别法对矮冷水花提取物进行化学成分预试验。预试验结果表明:矮冷水花
可能含有酚类、鞣质、黄酮类、挥发油或油脂、氨基酸、多肽、蛋白质、还原糖、多糖、苷类、甾体、萜类内酯、香豆素及其苷
类化学成分。试验结果表明:水提取物、95%乙醇提取物以及其石油醚相、乙酸乙酯相、水溶性部位提取物均表现出一
定抗氧化活性，其中乙酸乙酯部位的黄酮、总酚含量最高，分别为 28． 43%、2． 16%，清除 DPPH自由基、·OH的能力、
还原力、螯合力及总抗氧化能力的 IC50值分别为 0． 142、0． 598、0． 328、1． 008、0． 298 mg /mL，并且随着浓度的增加，清除
活性增强。综合试验结果可知，矮冷水花提取物具有很好的抗氧化活性，乙酸乙酯部位抗氧化活性最强。
关键词:矮冷水花;化学成分;提取物;抗氧化活性;药用价值
中图分类号:S132 文献标志码:A 文章编号:1002 － 1302(2016)07 － 0307 － 05
收稿日期:2016 － 01 － 05
基金项目:贵州省科技厅自然科学基金(编号:黔科合 J 字［2013］
2233);贵州师范学院博士基金(编号:12BS032);贵州省应用化学
特色重点学科建设项目(编号:黔教科研发［2012］442);教育部生
物资源科学专业综合改革试点项目(编号:2012287)。
作者简介:曹剑锋(1971—)，男，甘肃天水人，博士，副教授，主要从事
天然药物研究。Tel:(0851)85816647;E － mail:cjf266@ 126． com。
矮冷水花［Pilea peploides (Gaudich．)Hook． et Arn．］属荨
麻科，为一年生草本，别称地油仔、苔水花。矮冷水花分布于
我国华东、西南等地，常被作为蔬菜食用，因具有清热解毒、祛
痰止痛、消炎、褪肿、通便、利尿等功效，民间用于清热解毒祛
瘀止痛、跌打损伤、无名肿毒、毒蛇咬伤、疮疖等症［1］。陈谢
生等研究矮冷水花并制成了适合防治多种毒蛇的蛇伤草
药［2］;张浩等对矮冷水花进行了生药学鉴定研究［3］。有关矮
冷水花的研究报道较少，本研究对矮冷水花的化学成分和对
水提物、乙醇提取物不同萃取物抗氧化活性进行初步研究，以
期为矮冷水花植物药用价值的开发应用提供一定参考。
1 材料与仪器
1． 1 试验材料
矮冷水花，采自贵阳市乌当区，经贵州师范学院朱富寿教
授鉴定为荨麻科植物矮冷水花［Pilea peploides (Gaudich．)
—703—江苏农业科学 2016 年第 44 卷第 7 期
Hook． et Arn．］。
1． 2 主要药品及试剂
石油醚、乙醇、乙酸乙酯、盐酸、茚三酮、三氯化铁、溴甲酚
绿、乙酸、碘化汞钾、碘、碘化铋钾、硅钨酸、碱性苦味酸、3，5 －
二硝基苯甲酸、氢氧化钠、1，1 － 二苯基 － 2 － 三硝基苯肼
(DPPH)、水杨酸、过氧化氢、硫酸亚铁、铁氰化钾、三氯乙酸、
三氯化铁、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、菲咯嗪(ferrozine)、硫
酸、磷酸钠、钼酸铵、芸香苷、亚硝酸钠、硝酸铝、没食子酸、碳
酸钠等，均为分析纯。
1． 3 试验仪器
722 分光光度计，上海精密科学仪有限公司;旋转蒸发
仪，上海亚荣生化仪器厂;冷冻干燥机，河南兄弟仪器设备有
限公司;电子天平，赛多利斯科学仪器有限公司;恒温水浴锅，
上海梅香仪器有限公司。
1． 4 不同提取物的制备
1． 4． 1 水提物的制备 称取 100 g 矮冷水花干燥粉末(全
草)，按料液比 1 g ∶ 10 mL 加入蒸馏水，浸泡 24h，然后于
40 ℃ 超声 2 h，过滤、浓缩冻干，即得水提物，冷藏备用。
1． 4． 2 乙醇提取物、石油醚提取物、乙酸乙酯提取物及水溶
性提取物的制备 称取 500 g 矮冷水花干燥粉末(全草)，按
料液比 1 g ∶ 10 mL加入乙醇(95%)，不时振荡，浸泡 24 h;然
后于 40 ℃超声 2h，过滤，从滤液中回收乙醇至无醇味;取 1 /4
量浓缩液作为乙醇提取物，浓缩冻干，冷藏备用;剩余 3 /4 浓
缩液先用石油醚萃取 3 次，过滤，回收石油醚，浓缩冻干，即得
到石油醚提取物，冷藏备用。取上述剩余的浓缩液，加入
500 mL 5%盐酸，充分搅拌、过滤，将过滤部分做酸水试验。
酸水不溶部分加 500 mL 乙酸乙酯溶解，乙酸乙酯液用
500 mL 5%NaOH溶液振摇洗涤 2 次，弃去碱水层;乙酸乙酯
层再用蒸馏水洗 2 次，至水洗液呈中性反应，弃去水洗液，回
收乙酸乙酯，浓缩冻干，即得乙酸乙酯提取物，不溶于乙酸乙
酯的部分为水溶性提取物，将其冷藏备用。
1． 5 试验方法
1． 5． 1 化学成分预试验 (1)用石油醚提取物分别做挥发
油、油脂、甾体的预试验，方法见表 1。(2)用乙醇、乙酸乙酯
提取物做酚类、鞣质、植物甾体、三萜类、蒽醌类、黄酮类、生物
碱、香豆素与内脂、强心苷等预试验，方法见表 2、表 3。(3)
用酸水提取物做生物碱预试验，方法见表 4。(4)用水提取物
做氨基酸、多肽、蛋白质、糖、多糖、苷类、鞣质、有机酸、皂苷等
预试验，方法见表 5。
1． 5． 2 黄酮含量的测定 取 100 μL 样品原液于试管中，加
30%乙醇补齐到 5 mL;然后加入 0． 3 mL 5%亚硝酸钠溶液，
摇匀;放置 6 min后，加 0． 3 mL 10%硝酸铝溶液，摇匀;放置
6 min 后，再加入 4 mL 1 mol /L氢氧化钠溶液;加 0． 4 mL蒸馏
水，摇匀，放置 10 ～ 15 min 后，在 515 nm 波长处测定上述标
准溶液的吸光度［4］。
标准曲线的制作。精确配制浓度为 0． 1 mg /mL 的对照
品芸香苷的标准液，分别精确吸取 0、1、2、3、4、5 mL标准液于
6 支具塞试管中，加 30%乙醇补齐到 5 mL;然后加入 0． 3 mL
5%亚硝酸钠溶液，摇匀;放置 6 min后，加 0． 3 mL 10%硝酸铝溶
液，摇匀;放置 6 min后，再加入 4 mL 1 mol /L氢氧化钠溶液;加
0． 4 mL蒸馏水，摇匀，放置 10 ～15 min后，在 515 nm波长处测定
上述标准溶液的吸光度，制作标准曲线，得到回归方程:
y = 0． 270 8x － 0． 001 5，r2 = 0． 990 1。
式中:y为吸光度 D515 nm;x为芸香苷浓度，mg /mL。
1． 5． 3 总酚含量的测定 取 100 μL 原液样品于试管中，加
水补齐到 0． 5 mL;加入 2． 5 mL 0． 2 mol /L Folin － Ciocalteu 试
剂，振荡 20 s后反应 5 min;再加入 2 mL7． 5%碳酸钠溶液，振
荡 20 s后反应 1 h，于 760 nm测定吸光度 D760 nm
［5］。
标准曲线的制作。配制浓度为 100 μg /mL 的没食子酸
溶液，分别取 0、0． 1、0． 2、0． 3、0． 4、0． 5 mL，共 6 支试管，加水
补齐到 0． 5 mL;加入 2． 5 mL 0． 2 mol /L Folin － Ciocalteu 试
剂，振荡 20 s后反应 5 min;再加入 2 mL7． 5%碳酸钠溶液，振
荡 20 s后反应 1 h，在 760 nm 处测定吸光度 D760 nm。空白对
照用蒸馏水代替样品，制作标准曲线，得到回归方程:
y = 34． 799x + 0． 002 2，r2 = 0． 999 1。
式中:y为吸收光度 D760 nm;x为没食子酸浓度，mg /mL。
1． 5． 4 不同部位的抗氧化活性测定 (1)DPPH·清除活
性。以 95%乙醇为溶剂，配制浓度 0． 2 mmol /L 的DPPH·溶
液。加样品后于试管中补齐至 1 mL，加入 1 mL DPPH 溶液，
使总体积为 2 mL，摇匀。室温放置 30 min 后记录 517 nm 处
吸光度 D517 nm(样品)
［6 － 7］;向 1 mL DPPH·溶液中加入 1 mL 蒸
馏水，记录吸光度 D517 nm(空白)，即为空白对照;以维生素 C为阳
性对照。根据以下公式计算样品 DPPH·清除率:
DPPH·清除率 =(D517 nm(空白)－D517 nm(样品))/D517 nm(空白)×100%。
(2)·OH清除活性。分别在试管中加入 1 mL 3 mmol /L
硫酸亚铁溶液、1 mL 3 mmol /L 水杨酸 － 乙醇溶液、1 mL
0. 05%过氧化氢溶液，立即混匀，然后加入不同体积的样品溶
液并补齐至 1 mL。以等体积的蒸馏水作为空白对照，于
37 ℃ 反应 30 min，在 510 nm 下测量吸光度 D510 nm(样品)、
D510 nm(空白)
［8］。以 1 mL 3 mmol /L 硫酸亚铁溶液、1 mL
3 mmol /L水杨酸 －乙醇溶液、2 mL 蒸馏水作为本底吸收(调
零管)。相应公式为:
清除率 =(D510 nm(空白)－ D510 nm(样品))/D510 nm(空白)× 100%。
(3)还原力测定。加入不同体积的样品后补齐至 1 mL，
再加入 2． 5 mL 0． 2 mol /L、pH 值为 6． 6 的磷酸盐缓冲液和
2. 5 mL 1%铁氰化钾溶液，于 50 ℃水浴 20 min;加入2. 5 mL
10%三氯乙酸溶液，3 000 r /min离心 10 min;取 2． 5 mL上清
液，加入 2． 5 mL蒸馏水、0． 5 mL三氯化铁(0． 1%)，于700 nm
处测定吸光度 D700 nm
［9 － 10］，以维生素 C为阳性对照。
(4)螯合能力测定。加入不同体积的样品后补齐至
1 mL，再加入 3． 7 mL 蒸馏水、0． 1 mL 2 mmol /L 氯化亚铁
(FeCl2)溶液，振荡 30 s，混合均匀;然后加入 0． 2 mL
0． 5 mmol /L ferrozine 启动反应，室温放置 30 min;接下来于
3 000 r /min 离心 5 min，取上清液在 562 nm 处测定吸光度
D562 nm，以 EDTA为对照
［11］。
(5)总抗氧化能力的测定。加入不同体积的样品后补齐
至 1、4 mL，试剂中含 0． 6 mol /L 硫酸、28 mmol /L 磷酸钠、
4 mmol /L钼酸铵，混匀后于 95 ℃ 水浴中恒温 90 min，在
695 nm 波长下测其吸光度 D695 nm。空白用 1 mL 蒸馏水代替
样品液，以维生素 C作为阳性对照［12］。
1． 5． 5 数据统计 数据以均值 ±标准差(x ± s)表示，采用
SPSS 11． 5 软件进行 t检测处理 。
—803— 江苏农业科学 2016 年第 44 卷第 7 期
2 结果与分析
2． 1 化学成分预试验结果
石油醚提取物、乙醇提取物、乙酸乙酯提取物、酸水提取
物、水提取物化学鉴别试验结果分别见表 1 至表 5。
表 1 石油醚提取物化学鉴别试验结果
检查
物质
试验方法 试验现象
试验
结果
挥发油 石油醚提取液点于滤纸上 有油斑，加热油斑消失 +
油脂 石油醚提取液点于滤纸上 有油斑，加热油斑不消失 +
甾体 25%磷钼酸试验 蓝色 +
注:“ +”表示结果为阳性，“ －”表示结果为阴性。下表同。
2． 2 矮冷水花不同提取物黄酮、酚类含量
由表 6 可以看出:矮冷水花乙酸乙酯提取物的总黄酮含
量最高，为 28． 43%;其次是乙醇提取物中的含量，为
21. 76%;水溶性、水提取物中黄酮含量分别为 1． 83%、
1. 92%。因此，矮冷水花黄酮主要集中在乙酸乙酯、乙醇部
分，矮冷水花乙酸乙酯提取物的总酚含量为 2． 16%，含量最
高;乙醇提取物、水溶性、水提取物总酚含量分别为 0. 77%，
0． 59%、0． 27%，因此可知，矮冷水花总酚含量主要集中在乙
酸乙酯部分，其次是乙醇部分。
2． 3 DPPH· 清除活性
从图 1 可以看出，矮冷水花不同提取物对 DPPH·均具
有一定的清除作用，且随着提取物浓度的增加，清除能力逐渐
表 2 乙醇提取物化学鉴别试验结果
检查物质 试验方法 试验现象 试验结果
酚类 1%三氯化铁反应 暗紫色 +
鞣质 氯化钠明胶试验 白色浑浊 +
植物甾体或三萜类 乙酸 －浓硫酸试验 黄 －红 －紫 －青 －污绿色 +
三氯甲烷 －浓硫酸试验 三氯甲烷层呈青色 +
蒽醌类 碱性 加碱变红，加酸后红色褪去 －
1%乙酸镁反应 红色 －
黄酮类 1%三氯化铝反应 荧光加深 +
盐酸 －锌粉试剂反应 红色 +
氨熏试验 黄色 +
生物碱 碘化汞钾试剂反应 黄白色沉淀 +
碘 －碘化试剂反应 棕红色沉淀 +
硅钨酸试液反应 黄白色沉淀 +
香豆素与内脂 开环 －闭环反应(1%NaOH +2%HCl) 先浑浊后澄清 +
异羟肟酸铁试验 紫色 +
偶合反应 紫红色 +
强心苷 亚硝酰铁氰化钠试验 红色逐渐褪去 －
碱性苦味酸试验 橙红色 －
3，5 －二硝基苯甲酸试验 红紫色 +
表 3 乙酸乙酯提取物化学鉴别试验结果
检查物质 试验方法 试验现象 试验结果
酚类 1%三氯化铁反应 红色沉淀 +
氯化钠明胶试验 白色沉淀或浑浊 +
植物甾体或三萜类 乙酸 －浓硫酸 黄 －红 －紫 －青 －污绿色 +
三氯甲烷 －浓硫酸 三氯甲烷层呈红色或青色，硫酸层呈绿色荧光 +
蒽醌类 碱性试验 加碱变红，加酸后红色褪去 －
1%的乙酸镁试液 红色 －
黄酮类 1%三氯化铝试液 荧光加深 +
盐酸 －锌粉反应 红色 +
1%硼酸钠 +
生物碱 碘化汞钾试剂 黄白色沉淀 －
碘 －碘化试剂 棕红色沉淀 －
硅钨酸试液 黄白色沉淀 －
香豆素与内脂 开环 －闭环反应(1%NaOH +2%HCl) 先浑浊后澄清 －
异羟肟酸铁试验 蓝紫色 +
偶合反应 紫色 －
荧光反应 蓝紫色 +
强心苷 亚硝酰铁氰化钠试验 红色逐渐褪去 －
碱性苦味酸试验 橙红色 －
3，5 －二硝基苯甲酸试验 红紫色 －
—903—江苏农业科学 2016 年第 44 卷第 7 期
表 4 酸水提取物化学鉴别试验结果
试验方法 试验现象 试验结果
碘化汞钾试剂反应 黄白色沉淀 +
碘 －碘化试剂反应 棕红色沉淀 +
硅钨酸试液反应 黄白色沉淀 +
注:检查物质为生物碱。
表 5 水提取物化学鉴别试验结果
检查物质 试验方法 试验现象
试验
结果
氨基酸、多
肽、蛋白质
0． 2%茚三酮反应 蓝紫色 +
双缩脲反应 蓝、红色 －
蛋白质沉淀试验 加热煮沸(沉淀
反应)
+
糖、多糖、苷类 Fehling反应 砖红色沉淀 +
Molish反应 形成紫红色环 +
鞣质 氯化钠明胶试验 白色沉淀或浑浊 +
1%三氯化铁试验 绿，蓝或暗紫色 +
有机酸 pH试纸 试纸颜色近 pH
值 = 7
－
0． 1%溴甲酚绿的
乙醇试液
蓝色背景有黄色斑点 －
皂苷 泡沫试验 泡沫不消失 +
表 6 矮冷水花不同提取物黄酮、总酚含量
提取物名称
总黄酮含量
(%)
总酚含量
(%)
水提物 1． 92 0． 27
水溶性 1． 83 0． 59
乙醇提取物 21． 76 0． 77
乙酸乙酯提取物 28． 43 2． 16
增强;在浓度为 0． 5 mg /mL时，乙酸乙酯提取物对 DPPH·清
除活性可达到 97． 0%，高于同浓度乙醇提取物的 76． 2%、水
溶性部分的 53． 7%，以及水提物的 7． 4%。因此可知，矮冷水
花乙酸乙酯提取物对 DPPH·清除活性最强。
2． 4 ·OH清除活性
从图 2 可以看出，矮冷水花不同提取物对·OH 均具有
一定的清除作用，且随着提取物浓度的增加，清除活性逐渐增
强。在浓度为 1． 5 mg /mL 时，乙酸乙酯提取物对·OH 清除
活性可达到 99． 9%，同浓度的水提物、乙醇提取物、水溶性部
分的清除率分别为 94． 8%、73． 2%、67． 7%。因此矮冷水花
乙酸乙酯提取物对·OH 自由基清除活性最强，其次为水提
取物部位。
2． 5 还原力测定
从图 3 可以看出，矮冷水花不同提取物均具有一定的还
原能力，且随着提取物浓度的增加，还原能力逐渐增强。在浓
度为 1 mg /mL时，乙酸乙酯提取物还原能力 D700 nm为 1． 31，同
浓度的乙醇提取物、水溶性部分、水提物 D700 nm分别为 0． 78、
0． 39、0． 19。因此，矮冷水花乙酸乙酯提取物的还原能力
最强。
2． 6 螯合能力测定
从图 4 可以看出，矮冷水花不同提取物均具有一定的螯
合能力，且随着提取物浓度的增加，螯合能力逐渐增强。在浓
度为 1． 2 mg /mL时，水提取物螯合能力 D562 nm为 0． 87，同浓度
的乙酸乙酯提取物、乙醇提取物、水溶性部分的 D562 nm分别为
0． 53、0． 52、0． 16。因此可知:矮冷水花水提取物的螯合能力
最强，乙酸乙酯提取物次之。
2． 7 总抗氧化能力的测定
从图 5 可以看出，矮冷水花不同提取物均具有一定的总
—013— 江苏农业科学 2016 年第 44 卷第 7 期
抗氧化能力，且随着提取物浓度的增加，总抗氧化能力逐渐增
强。在浓度为 1． 2 mg /mL时，乙酸乙酯提取物总抗氧化能力
D695 nm为 1． 35，高于同浓度的乙醇提取物的 0． 52;水溶性提取
物的 D695 nm为 0． 13，明显高于水提物的 0． 01。因此可知，矮冷
水花水提取物的总抗氧化能力最强，主要集中在乙酸乙酯、乙
醇提取物部位。
2． 8 矮冷水花不同提取物抗氧化 IC50值
由表 7 可见，在 4 个不同提取物中，清除 DPPH·能力、还
原力、总抗氧化能力大小依次是:乙酸乙酯提取物 ＞乙醇提取
物 ＞水溶性 ＞水提物，其中乙酸乙酯提取物清除 DPPH·的
活性约为维生素 C的 1 /10，乙醇提取物约为维生素 C的 1 /20
左右;清除·OH自由基活性能力大小依次是:乙酸乙酯提取
物 ＞水提物 ＞ 乙醇提取物 ＞ 水溶性，水提物表现较强的清
除·OH活性，其活性约为纯品维生素 C 的 1 /6;螯合能力大
小依次是:水提物 ＞乙酸乙酯提取物 ＞乙醇提取物 ＞水溶性。
表 7 矮冷水花不同提取物抗氧化能力的 IC50值
类别
DPPH·
浓度
(mg /mL)
·OH
浓度
(mg /mL)
还原力
(mg /mL)
螯合力
(mg /mL)
总抗氧
化能力
(mg /mL)
水提物 13． 871 0． 706 2． 798 0． 709 13． 672
水溶性 1． 011 1． 105 1． 284 4． 135 4． 501
乙醇提取物 0． 262 1． 101 0． 611 1． 144 1． 008
乙酸乙酯提取物 0． 142 0． 598 0． 328 1． 008 0． 298
维生素 C 0． 014 0． 113 0． 005 — 0． 003
EDTA — — — 0． 003 —
3 结论
预试验结果初步表明:矮冷水花中可能含有黄酮类、酚
类、香豆素类、挥发油、植物甾醇、糖类、苷类、鞣质、有机酸等
化学成分。本研究初步确定了矮冷水花可能存在的化学成
分，为矮冷水花活性成分的提取、分离、纯化和筛选研究提供
了科学依据。
本研究表明，植物提取物的抗氧化活性与植物中多酚、黄
酮含量密切相关［13 － 16］。通过对比冷水花抗氧化活性与总黄
酮、总酚含量可知，矮冷水花提取物不同极性部位黄酮、总酚
含量大小依次为:乙酸乙酯提取物 ＞乙醇提取物 ＞水溶性 ＞
水提物。体外抗氧化研究结果表明:4 种提取物对 DPPH·清
除力、还原力、螯合力、总抗氧化力均表现出一定的抗氧化能
力，次序是:乙酸乙酯提取物 ＞乙醇提取物 ＞水溶性 ＞水提
物，对 DPPH·表现出中等极性乙酸乙酯的活性较强，极性大
的水部位相对较弱，但对羟自由基清除能力方面，水提取物明
显较强。总之，本试验结果表明，乙酸乙酯提取物部位是矮冷
水花抗氧化活性的主要部位，提示黄酮、多酚类化合物是矮冷
水花抗氧化作用的主要物质基础。
参考文献:
［1］福建省卫生厅医教科研处．研究资料汇编［Z］． 1983．
［2］陈谢生，汪如明．防治蛇伤药物矮冷水花制剂的研究［J］． 蛇志，
1992，4(4):13 － 14．
［3］张 浩，郭增喜． 矮冷水花的生药学鉴定［J］． 现代应用药学，
1988，5(4):16 － 17．
［4］Athukorala Y，Kim K N，Jeon Y J． Antiproliferative and antioxidant
properties of an enzymatic hydrolysate from brown alga，Ecklonia cave
［J］． Food ＆ Chemical Toxicology，2006，44(7) :1065 － 1074．
［5］Silva J K D，Cazarin C B B，Colomeu T C，et al． Antioxidant activity
of apueous extract of passion fruit (Passiflora edulis)leaves:in vitro
and in vivo study［J］． Food Ｒesearch International，2013，53(2) :
882 － 890．
［6］韦献雅，殷丽琴，钟 成，等． DPPH 法评价抗氧化活性研究进展
［J］． 食品科学，2014，35(9):317 － 322．
［7］Blois M S． Antioxidant determinations by the use of a stable free
radical［J］． Nature，1985，181(4617) :1199 － 1200．
［8］Halliwell B，Gutteridge J M，Aruoma O I． The deoxyribose method:a
simple“test － tube”assay for determination of rate constants for reac-
tions of hydroxyl radicals［J］． Analytical Biochemistry，1987，165
(1) :215 － 219．
［9］Dinis T C P，Madeira V M C，Almeida L M． Action of phenolic deri-
vates (acetoaminophen，salycilate and 5 － aminosalycilate)as inhibi-
tors of membrane lipid peroxidation and as peroxyl radical scavengers
［J］． Archives of Biochemistry ＆ Biophysics，1994，315:161 － 169．
［10］Kumar P S，Sudha S． Evaluation of antioxidant activity and total
phenolic content of Padina boergesenii from Gulf of Mannar［J］．
Drug Invention Today，2012，4(12) :635 － 639．
［11］Gülcinì，爦ati G，Beydemir S，et al． Comparison of antioxidant activity
of clove (Eugenia caryophylata Thunb)bubs and lavender (Lavan-
dula stoechas L．) ［J］． Food Chemietry，2004，87(3) :393 －
400．
［12］Tung Y T，Wu J H，Huang C Y，et al． Antioxidant activities and
phytochemical characteristics of extracts from Acacia confusa bark
［J］． Bioresource Technology，2009，100(1) :509 － 514．
［13］Ｒice － Evans C A，Miller N J，Paganga G． Structure － antioxidant
activity relationships of flavonoids and phenolic acids［J］． Free
Ｒadical Biology ＆ Medicine，1996，20(7) :933 － 956．
［14］李加兴，陈 选，邓佳琴，等． 黄秋葵黄酮的提取工艺和体外抗
氧化活性研究［J］． 食品科学，2014，35(10):121 － 125．
［15］李姝蓓，张 东，杨 岚，等． 荚果蕨贯众提取物中黄酮类成分
的含量测定和抗氧化活性研究［J］． 中国药学杂志，2013，48
(21):1860 － 1863．
［16］李利华． 芹菜不同部位总黄酮含量测定及其抗氧化活性［J］．
食品研究与开发，2013，34(7):12 － 15．
—113—江苏农业科学 2016 年第 44 卷第 7 期