全 文 ：第 7卷第 4期
2 9 92年 22月
中 国 病 毒 学
V I R O L O G I CA S I N r CA
V 0 1
D e e
N o
.
4
19 92
感染大丽菊花叶病毒的大丽菊细胞超微结构观察
李 汝 刚
〔中国农科院生物技术研究中心 , 北京 1。。0 3 1 )
裘 维 蕃
( 北京农业大学植物保护系 , 北京 10 0 0 9 4
提 要
本文描述了大丽菊花叶病毒 ( D a M V ) 感染大丽菊叶片纳欢为超微结构变化。 受侵细
胞内形成切面直径约 1 , 6一3 . 1卜m 的球伏或卵球状细胸贡内含体。 病沫细泡内过氧物弃体
的数量显著增加 。 内含体周围较细胞其它部立有较多为该请 体。 高尔基体及微 泡 。 叶绿
体 . 线粒体正常 。
关键饲 : 大丽菊花叶病毒 超微结构
大丽菊花叶病毒 ( D a M v ) 的天然寄主是大丽菊属 ( D a hl 沁 s夕. ) 的植物 , 引起大
丽菊 ( D a h l艺a 刃艺。 介 a 乙a C a o . ) 叶片叶脉褪绿变黄 ` ’ 〕。 寄主范围包括 4 科的 2 5种植物 ,
主要是菊科植物` ” 。 经嫁接 、 蚜虫及机械摩擦传播 〔 3 ’ 。 D o M V粒体球伏 , 直径 5 0n nZ ,
沉降系数 2 5 4 5 〔 2〕 , 核酸为双链 D N A 〔 `〕 , 和花 椰菜花叶病毒 ( aC M v ) 、 香石竹蚀环病
毒 ( C a E v ) 有血清学关系困 。 在证实我国大丽菊感染 D : M V 的基础 日 ` 〕 , 作者研究了
受侵细胞内的微超 结构变化 。
材 料 和 方 法
一 、 材料
北京天坛公园内呈 典型褪绿脉带花叶的大丽菊 , 采回裁于防虫温室内备用 。
二 、 方法
取该植株叶片 切条用 3 够戊二 醛及 2 肠 四 氧化二俄 双固定 , 丙酮系 列脱水 , 包埋 液浸透
( E PO
” 8 12 , D D s A , M N A二 1 3 : 8 : 7 , D M p l . S一 2 肠 ) 置换 , 包埋好的样品经 L K B 一 8 0 80 切
片机切成 70 一 90 n m 的超薄切片 , 捞在铺 oF r m a r a膜的铜网上 , 样品经醋酸双氧铀和柠檬酸双染色 ,
置于 J E M一 1 0 05电镜下观察 。
本文于 1 9 9一年 x l月 2 日收到 , 29 92年 4月 7 日修回。
460 中 国 病 毒 学 第 7 卷
结 果 与 讨 论
1
. 为确定采样值株为 D “ MV 所侵染 , 做超薄切片之前进行了检查 。 将少量叶片
拉碎进行差速离心得到粗提液 , 在 电镜下可 厄到若干直 径 4 8n m 的球形病毒粒子 , 粗提
液和 D o M v 的兔抗血清在双扩散实验中产生沉淀反应 , 免疫电镜中可被 D a M V 的抗血
清所捕获 “ 3。
2
. 受 D a M v 侵染后 , 在 1/ 5一 1l/ 0的细胞内观察到切面直径 1 . 6一 3 . 1声m 的球状
及卵球状内含体 。 内含 体基质呈细颗粒状 , 多个 电子透的 区散于其内 , 电子透的 区
大小差异较大 , 有 的占内含体切而面积的 1/ 2 。 内含体内堆集着若干直径 3 8n m 的球状
病毒粒子 , 也有少数粒子游离于内含休附近的细胞质内 。 内含体内的 病毒粒子 , 多数
空心 , 直径比粗提液中的 粒子直径小 10 n m 。 有人认为内含体是病毒装配灼场所 〔 ’ 了, 空
心的粒子可能是不成熟或核酸尚未装进去的病毒粒子 , 也可能与制样过程中脱水有关 。
至于内含体内的病毒粒子直径和汁液中的粒子直径差别如此之大 尚不清楚 。 球状或卵球
细胞质 内含体是花椰菜花叶病毒组的典型特征 , 本文所观察到的内含体病毒粒子直径比
国外报道的粒子直径 4 0一 4 5n m , 也小 3一 7n m 〔“ 〕 , 这是否与株系有关尚待研究 。
3
。 在内含体周围比该细胞的其它部位有着更多的核糖体 , 高尔基体及微泡 , 这些
细胞器的存在与内含体的形成有密切的关系 ` 8 ’ 。
4
。 受侵细胞内过氧化物酶体数量比健康细胞内的数量显著增多 , 并可观察到过氧
化物酶的晶格状沉淀 。 植物受病毒侵染后 , 过氧化酶等酶活性增强是一普遍的现象 , 这
是植物本身的一种保护反应 , 通过参加一系列代谢 抑制病毒在体内的活动 。 同时过氧化
物酶体是植物光呼吸的场所之一 , 共数 目 的增加也与受侵 后 的植物细抱光 呼吸增强有
关 。
5
. 病株细胞的叶绿体 、 线粒体双层膜完整 , 内部结构清楚 , 未受影响 。
参 考 文 献
〔 1 〕 B r u o t , A . A . 1 9 7 1 . D a h ! i a m o o a i 。 , i r u , . C . M . I . / A . A , B , D e , e r i p t i o n o f p l a n t y i r u e s
〔 2 〕 B r o n t , A . A . 1。了o . A 件” . A p p l . B 主0 1. 6 7 : 3 5了 .
〔 3 〕 n r 玉e r l e y , p , a n d s 二 i t b , F . F . 1 , s o . P工a 月 t D诬s e a s e R 。乡 t r . 4 4 : 3 6 3 .
〔 4 〕 F u ji s a w a , M . R . 下. a n d M a t , u i , c . 2 9 了3 . P 入夕 t o P a t子; 0 10 9夕 6 4 : 2 8 7 .
〔 5 〕 B r u a t , ^ . A . 1 9e 6 . V i r o 正o g y 2 8 : 一 7 7 8 .
〔 6 〕 李汝刚 。 1 9 9。 , 植物病理学报 2 0 ( 2 ) : 2 1 2一 1 1 6
〔 7 ) 5 il e p h e r d , R . J . i 。了9 , A n n . R e , . P la ” t P 入y s饭0 1. 3 0 : 连 0 5 .
〔 8 〕 K i t 。 js m : , E . w . 。衬: 一 z 9 6 o . v 云: 0 10 9 , 3 , : 2 4 0 .
第 4 期 李汝刚等 : 感染大丽菊花叶病毒的大丽菊细胞超微结构观察
2
球状内含体 〔劝 内聚集
了大量病毒粒子 ( , ) ,
内含体和过氧化酶体
( P e ) 靠在一起 ;
卵球状内含体 ( i 〕和正
常的叶绿体 ( 。 ) , 过
氧 化酶体 , 正常曰线粒
体 ( m ) 共同于同一细
胞习一 , 。 内含体匀围有铰
多的核糖体 ( r ) , 高尔
基体 ( g ) 及微泡
( 。 , ) , 内含体有多
个电子透明区 〔 V 。 )
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46 2中 国 病 毒 学 绍 7卷
U ! tr a str uc tur a ! O b sr ve a ti o n o n Da hli a Lea fT i su se s
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T h e m a i n a l t e r n a t i o n s o f e e l l i n f e e t
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.
1
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t h e i n e r e a s e o f P e r o x i s o m e s
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T h e e h l o r o P l a s t s a n d m i t o e h o n d
r i o n s o f t h e
i n f e e t e d e e l l s w e r e n o t ; f f e e t e d i n t h e e a
r l y s t a g e o f i n f e e t i o n
-
K e y w o r d s
: D a h l i a m o s a i e v i r u s U l t r a s t r u e t u r e