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田基黄对人喉癌Hep-2和人宫颈癌Hela细胞株生长的抑制作用



全 文 :华西药学飞V C J 。 杂志 PS 19 9 3; 8 ( 2): 9 3~ 9 4
田基黄对人喉癌H P e一 2和人宫颈癌
H l ea 细胞株生长的抑制作用
黎七雄 孙忠义 . 陈金和
(湖北医学院药理学教研室 武汉 4 30 0 7 1)
提要 体外实验研究结果 , 田基黄对 11e p 一 2 和 H el a人癌细胞株的生长均 有 明显抑制作 J日, 使细
跑圆缩、 不贴壁和死亡 。 电镜观察 , 给药组 H e p 一 2 、 H el a细胞线粒体肿胀 、 耗损和结构模糊 ; 细胞核
膜不完整 、 界限不清 。
关健词 田基黄 H e p 一 2 细胞 H el a 细胞抑制 超徽结构
和给药组 田基 黄 2 5 m g 、 s o m g 、 z o o f: , g 、 1 5 0 , , l 、 o
每组 3 瓶细胞 37 ℃ 、 5 % C O : 孵 育箱 ` ! `培养 2 至、
4 8小 时后用台盼蓝染色排除法计活细胞数 , 不
复实验三次 , 计算药物对细胞生 长平均抑制率 。
抑 “ 率 · 对理组 l嗜袭拿一 给药组 活细 )atJ 数活细胞数
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匕l么愁黄 ( H y p e r i e u m J a p o n i e u m T h u n d
简称 H JT ) 。 又名地耳草 。 为金丝桃科金丝桃
属植物 。 药用全草。 属传统清热利湿 , 消肿解
毒药 。 田基黄对痢疫杆菌 、 肺炎双球菌 、 金葡
球菌 、 链球菌、 牛型结核杆菌均有不同程度的
抑制作用 〔 1 〕。 有文献报道〔 2 〕 , 田基黄对子宫
颈癌 J T G 一26 细胞株生长也有抑制作用 。本文观
察了田基黄对 H e p一 2 和 H e la 细胞株生长抑制
作用 , 并用电镜分析其对细胞超微结构变化 。
实 验 材 料
一 、 田基黄注刺液 常熟制药厂生产 , 每
毫升相当生药 1 9 。 批号 : 5 5 0 3 0 7。
二 、 细胞培养液 日本产 M E M , 以 双 蒸
水配制而成。 用时加 10 %小牛血清及适量双抗
(青 、 链霉素吐0 o u /m l ) 。
三、 人喉癌 H e p 一 2细胞株及人宫颈癌 H e la
细胞株均由中国医学科学院武汉分院提供 。
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图 1 . 不同浓度的田基黄对 H e p一 2细胞生长抑制曲线
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方法与结果
一 、 对 H eP 一 2细胞株生长的抑翻作用
H e p一 2细胞株按常规传代于 10 %小牛血清
的 M E M 培养液中。 将培养生长 良好的 H e p一 2
细胞定量接种于培养瓶中 1 0 ” 个 / m l 。 设对 照组
. 氏汉市绍一医院肿脚科
如图所示 , 不同浓度的田基黄孵 育 H e p一 2
细胞 , 计算不同时间细胞生长抑制率 , 得到它
们的关系曲线。 田基黄对 H e p一 2细胞 2 4 、 4 8小
时半数抑制浓 度 IC 50 分别为 95 m g 、 58 m g 。 田
基黄对H e p一2细胞随时间和剂量的增加 , 其抑
制率也增加 , 呈量效关系 。 ) 50 m g 48 小时培养
时抑制率为 1 0 % 。
二 、 对 eH la 细胞株生长的抑制作用
细胞培养及给药方法同上 。 计算药物24 小
DOI : 10. 13375 /j . cnki . wcjps . 1993. 02. 010
华 西 药 学 杂 志 2 期
时 、 48 小时培养对 H ola 细胞生长的抑 制率。
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图 2 .
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不同剂t 的田基黄对 H le a细胞生长抑制率 , 线
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图 2 结果表明 , 不 同剂量的 田 基 黄 孵育
H
e la 细胞 , 24 小时 、 48 小时半数抑 制 浓 度
I C 5 o分别为 s 3 m g和 3 3m g 。 田基黄对 H e l a 细
胞的抑制作用随浓度增加和培养的时间延长其
抑制率明显增加 。 1 0 m g 4 8小时培养 时其抑制
率为 1 0 0% 。
三 、 对eH P 一2细脸和 H le a 细袍形态学改
变和超橄结构的影晌
待 H e p一 2和 H o la 细胞株生长成单层后 , 制
成细胞悬液 , 分别按 1 0 5个 / m l (接种于培养瓶
内 。 设对照组 、 H e p一 2细胞给药组 、 H e la 胞细
给药组 , 每组 3 瓶 。 5 % C O : 、 37 ℃培养48 小
日寸。
48 小时后 H eP 一2细胞给药组 加 入 田 基黄
1 5 0m g
,
H e l a 细胞给药组加入田基黄 1 0 0m g再
培养48 小时 , 观察给药组 、 对照组 H o p一2和 H e la
细胞形态学改变及生长情况 。 双倒置镜表明 ,
对照组细胞伸展好 , 境界清楚 , 胞质均匀 、 核
大 、 核仁清晰 , 生长 良好 , 基本形成致密草层 。
给药组 H e p 一2和 H e la 细胞均表现为细胞伸展不
良 , 胞质混浊 。 细胞脱落 , 干枯圆缩 、 死亡 。
双倒置镜观察后 , 将培养液中 的 细 胞 刮
起 , 离心 。 按文献〔” 固定、 包 埋 、 切 片 、 染
色 。 透射电镜观察H叩一 2和 H e la 细胞超微结构
的变化。 给药组 H e p 一 2细胞与对照组 比较 , 线
粒体肿胀 , 断脊和耗损 , 结构模糊不清 ; 细胞
核膜不完整 、 界限不清 , 粗面内质网消失 。 给
药组 H o al 细胞与对照组比较 , 线粒体损害更为
明显 , 线粒体结构完全耗损 , 形成空泡 。
讨 论
田基黄是民间常用的消肿解毒药 , 除有较
好的抗菌作用外 , 还有抑制子宫颈 癌 细 胞 株
J T G

26 的作用 〔幻 。 本实验 表 明 , 田基黄 对 -
H eP
一2和 H e la 人癌细胞株有一定的抗癌活性 。
其抑制及杀伤作用 , 不仅有药物 浓 度 的 依赖
性 , 也有作用时间的依赖性 。 电镜观察所见 ,
田基黄对 H o p 一 2和 H e la 细胞的杀伤作用 , 可能:
与线粒体超微结构严重受损有关 。
. 考 文 公
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