全 文 : 药理药化
收稿日期:2007-06-03; 修订日期:2007-10-20
基金项目:香港浸会大学基金项目(No.FRG/03-04/Ⅱ -39)
作者简介:孟 江(1976-),女(汉族),河南三门峡人 ,现任广东药学院中
药学院讲师 ,博士学位 ,主要从事中药及饮片质量标准化研究工作.
*通讯作者简介:董小萍(1957-), 女(汉族),四川成都人 , 现任成都中医
药大学药学院教授 ,学士学位 ,主要从事中药新药的开发研究工作.
鲜 、干鱼腥草的药效学实验比较研究
孟 江1 , 宗晓萍 2 , 董小萍3*
(1.广东药学院 ·中药学院 ,广东 广州 510006;
2.浙江三联专修学院 ,浙江 杭州 310023; 3.成都中医药大学药学院 ,四川 成都 610000)
摘要:目的 比较鲜 、干鱼腥草的药理活性。方法 通过体外抑菌法实验 ,考察鲜 、干鱼腥草的抑菌作用;二甲苯致小鼠耳
炎症实验 , 观察鲜 、干鱼腥草的抗炎作用;采用浓氨水诱导法引起的咳嗽实验 , 观察鲜 、干鱼腥草的止咳作用。结果 鱼腥
草鲜 、干药材的水提取物的大小剂量组和醇提物的大剂量组均有较好的抑菌 、抗炎和止咳的作用 , 其中鲜品水提物大剂
量组药效作用最优。结论 鱼腥草鲜品抑菌 、抗炎和止咳药理活性优于干品 ,水提物药理活性优于醇提物。
关键词:鱼腥草; 鲜品; 干品; 药效活性
中图分类号:R961.1 文献标识码:A 文章编号:1008-0805(2008)06-1315-02
StudyonPharmacologicalEffectsofFreshandDryHoutuyniacordataThunb.
MENGJiang1* , ZONGXiao-ping2 ,DONGXiao-ping3*
(1.GuangdongPharmaceuticalUniversity, Guangzhou510006, China;2.ZhejiangSanlianColege, Zhe-jiang, Hangzhou, 310023, China;3.ChengduUniversityofTraditionalChineseMedicine, Chengdu610081,
China)
Abstract:ObjectiveTocomparethepharmacologicalefectoffreshanddryHoutuyniacordataThunb..MethodsExperi-
mentofbacteriostasisinvitrowascarriedouttoobservetheefectoffreshanddryextractsofHouttuyniacordataontheactiveof
bacteriostasis.Experimentofinflammationcausedbydimethylbenzeneontheearofmicewascarriedouttoobservetheeffecton
inflammation.Experimentofcoughinducedbystrongaquawascarriedouttoobservetheeffectofstoppingcough.ResultsWater
andethanolextractsoffresh/dryHouttuyniacordatahadgoodbacteriostasis, stoppingcoughandanti-inflammationpharmacolog-
icalaction.WaterextractoffreshHoutuyniacordatahadbeterpharmacologicalaction.ConclusionThefreshextractofHout-
tuyniacordatahasbeterpharmacologicalactivitythanthatofdryone.Whilethewaterextracthasbetterpharmacologicalactivity
thanethanolextract.
Keywords:Houttuyniacordata; Freshherb; Dryherb; Pharmacologicalactivity
鱼腥草为三白草科 (Saururaceae)蕺菜属植物蕺菜 Hout-
tuyniacordataThunb.的干燥地上部分和新鲜全草 , 具有清热解
毒 、利尿通淋 、祛痰止咳 、镇痛等功效 [ 1] 。现代研究表明鱼腥草
含有挥发油 、黄酮类 、酚类 、生物碱 、多糖等成分 [ 2, 3] , 课题组对
干 、鲜鱼腥草进行 GC-MS, HPLC-MS指纹图谱的系列化学研
究 [ 4, 5] , 研究结果发现鱼腥草干鲜品的 GC-MS, HPLC-MS指纹
图谱有一定的相识性 ,但峰的强度及化学成分的含量有一定的差
别 , 因此对干 、鲜鱼腥草的药理活性进行对比研究 ,为鱼腥草活性
成分的研究及鲜鱼腥草的开发奠定一定的理论基础。
1 仪器与材料
1.1 动物 昆明种健康小鼠 , 雌雄皆用 ,体重 18~ 22 g, 由四川省
实验动物专委会养殖场提供。
1.2 菌种 金黄色葡萄球菌(Atcc25923)、大肠杆菌(O111 B4),
由四川省卫生干部进修学院提供。
1.3 药材与试剂 鱼腥草与 2005年采自四川峨嵋山 , 经陈幼竹
博士鉴定为三白草科蕺菜属植物蕺菜 HoutuyniacordataThunb.。
鱼腥草分为两批 , 一批鲜药直接提取;另一部分室温晾干作为干
品药材。
乙醇 、二甲苯等均为分析纯由成都科龙化工试剂厂提供 ,水
为蒸馏水。
1.4 仪器 CM-1超声雾化治疗仪 , 合力医疗器械厂 , 中国上
海;电子天平(BS210S, madebystartoriu)。
2 方法与结果
2.1 供试品溶液的制备 精密称取鱼腥草鲜 、干药材各 500 g, 分
别加水适量煎煮两次 ,每次 2 h, 过滤 ,合并两次滤液 , 浓缩至 2g/
ml(每毫升含 2g生药), 得鱼腥草鲜 、干药材的水提物 , 灭菌后冰
箱保存备用。
精密称取鱼腥草鲜 、干药材各 500 g, 分别加适量 95%乙醇 ,
回流提取 2次 , 每次 2 h, 过滤 ,合并两次滤液 , 浓缩至 2 g/ml(每
毫升含 2 g生药),得鱼腥草鲜 、干药材的醇提物 , 灭菌后冰箱保
存备用 。
2.2 体外抑菌作用考察 [ 6, 7] 将致病菌金黄色葡萄球菌和大肠
杆菌接种于普通培养基中 ,按以下两种方法观察抑菌作用。
2.2.1 稀释法 将菌种活化 , 挑取典型菌落接种于肉汤管中 , 置
37℃温箱中 24 h,作活菌计数并稀释成 1×106CFU/ml待用 。将
营养琼脂加热溶化 ,冷至 50℃左右 , 加入药物做成含不同浓度药
物(1/2.5 ~ 1/320)的营养琼脂 , 混匀 , 倾注于平皿作成平板 , 将
上述菌液分别接种药物琼脂平板 ,置 37℃, 24h,观察结果。结果
见表 1。
由表 1可知 , 鱼腥草鲜品水提物 、干品水提物 、鲜品醇提物和
干品醇提物对金黄色葡萄球菌的最低抑菌浓度分别为 12.5,
100, 25, 100mg/ml;对大肠杆菌的最低抑菌浓度分别为 12.5,
400, 50, 800mg/ml。
2.2.2 打孔法 用吸管吸取 1×106 CFU/ml菌液 0.1 ml于营养
琼脂平板中 , 用打孔器打孔 ,除去孔内琼脂 , 加入 1 g/ml浓度的
鱼腥草鲜 、干药材醇提物和水提物的药液 0.1 ml于孔内 , 37℃培
养 24h,用米尺量取抑菌圈直径。结果见表 2。
·1315·
LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH 2008VOL.19NO.6 时珍国医国药 2008年第 19卷第 6期
表 1 鱼腥草鲜 、干药材醇提物和水提物的抑菌作用
药物 菌种 不同稀释度之抑菌作用
1/2.5 1/5 1/10 1/20 1/40 1/80 1/160 1/320
最小抑菌浓度
MIC/mg· ml-1
鲜品 金黄色葡萄球菌 - - - - - - - + 1/160(12.5)
水提物 大肠杆菌 - - - - - - - + 1/160(12.5)
干品 金黄色葡萄球菌 - - - - + + + + 1/20(100)
水提物 大肠杆菌 - - + + + + + + 1/5(400)
鲜品 金黄色葡萄球菌 - - - - - - + + 1/80(25)
醇提物 大肠杆菌 - - - - - + + + 1/40(50)
干品 金黄色葡萄球菌 - - - + + + + + 1/20(100)
醇提物 大肠杆菌 - + + + + + + + 1/2.5(800)
“ +”表示无抑菌作用 , “ -”表示有抑菌作用
表 2 鱼腥草鲜 、干药材醇提物和水提物的抑菌作用 mm
药物 抑菌圈直径金黄色葡萄球菌 大肠杆菌
鲜品水提物 22 16
干品水提物 8 +
鲜品醇提物 14 10
干品醇提物 + +
“ +”表示无抑菌圈
由表 2可知 , 鲜品水提物 、干品水提物和鲜品醇提物对金黄色葡萄球菌均具有较强的
抑制作用 , 尤其是鲜品水提物。鲜品水提物和鲜品醇提物对大肠杆菌亦有抑制作用。而
干品醇提物对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌均未发现抑制作用 ,有待进一步研究。
2.3 抗炎作用的考察 [ 8] 取雄性小鼠 99只 , 随机分为 9组 ,每组 11只。每日灌胃给药 1
次(0.2ml/10g小鼠重量),连续 6d, 于末次给药 1 h后 ,用鼠耳肿胀法观察抗炎作用。分
别于各组小鼠左耳前后涂二甲苯 0.05ml/只 ,右耳不涂作对照 , 1 h后将小鼠颈部脱臼处
死 , 剪下左右耳 ,用 9 mm直径打孔器分别在同一部位打下圆耳片 , 称重 , 左右耳重量之差
作为肿胀度 , 并计算耳肿抑制率。给药组与生理盐水组对照。结果见表 3。
抑制率(%)=对照组平均肿胀值 -给药组平均肿胀值对照组平均肿胀值 ×100%
由表 3可知 , 与生理盐水组相比 ,鲜 、干药材水提物的大小剂量组和醇提物大剂量组
对小鼠二甲苯性耳廓肿胀均有明显的抑制作用 ,其中鲜品水提物大剂量组作用最强。
表 3 鱼腥草鲜 、干药材醇提物和水提物对小鼠耳肿胀抗炎作用观察( x±s)
组别 剂量C/g· kg-1 耳肿胀度 m/mg 抑制率(%)
生理盐水 12.84±1.98 -
鲜品水提物小剂量 2.5 6.45±1.96■■ 49.77
鲜品水提物大剂量 3.75 4.85±2.86■■ 62.23
干品水提物小剂量 2.5 9.03±1.46■■ 29.67
干品水提物大剂量 3.75 7.29±1.82■■ 43.22
鲜品醇提物小剂量 2.5 7.64±1.88■■ 40.50
鲜品醇提物大剂量 3.75 6.80±1.88■■ 47.04
干品醇提物小剂量 2.5 10.82±1.90■ 15.73
干品醇提物大剂量 3.75 10.13±2.40■ 21.11
与生理盐水组比较 , ■P<0.01, ■■P<0.05;n=11
2.4 镇咳作用考察 [ 9] 取小鼠 99只 , 雌 、雄各半 , 随机分为 9组 ,每组 11只。每日灌胃给
药 1次(0.2ml/10g小鼠重量),连续 6d, 于末次给药 1 h后 , 用浓氨水诱导法观察镇咳作
用。即将小鼠放入玻璃钟罩内 ,打开通过橡皮管与之相连的超声雾化器 , 将浓氨水均匀地
喷入玻璃钟罩内 , 喷雾 10 s, 立即取出小鼠 , 以小鼠腹肌收缩并张大口为咳嗽动作指标 ,分
别观察各组小鼠 2 min中咳嗽次数。结果见表 4。
表 4 鱼腥草鲜 、干药材醇提物和水提物对小鼠的镇咳作用观察( x±s)
组别 剂量 C/g· kg-1 咳嗽次数
生理盐水 27.20±5.49
鲜品水提物小剂量 2.5 19.80±6.70 ■
鲜品水提物大剂量 3.75 14.55±6.28 ■■
干品水提物小剂量 2.5 21.09±5.36 ■
干品水提物大剂量 3.75 20.09±8.75■
鲜品醇提物小剂量 2.5 22.45±6.65
鲜品醇提物大剂量 3.75 19.10±6.28■■
干品醇提物小剂量 2.5 23.55±5.48
干品醇提物大剂量 3.75 21.55±6.47 ■
与生理盐水组比较 , ■P<0.01, ■■P<0.05;n=11
由表 4可知 , 与生理盐水组相比 , 鲜
品 、干品水提物大小剂量组和醇提物高
剂量组均对浓氨水诱导法引起的咳嗽具
有较好的镇咳作用 , 其中鲜品水提物大
剂量组镇咳作用最优 , 而鲜干品醇提物
的小剂量组作用不明显。
3 结论
鱼腥草鲜 、干药材的水提取物的大
小剂量组和醇提物的大剂量组对由二甲
苯致小鼠耳炎症 、浓氨水诱导法引起的
咳嗽均有较好的抗炎和止咳的作用 , 其
中鲜品水提物大剂量组抗炎 、镇咳作用
最优。分别采用稀释法和打孔法考察体
外抑菌作用 ,结果基本一致 , 鲜 、干药材
水提物对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌均
具有抑制作用 , 而干品醇提物作用不明
显。由此看出鱼腥草鲜品抗炎 、止咳和
抑菌药理活性优于干品 ,而鱼腥草水提
物药理活性优于醇提物 ,其作用的药效
物质基础有待进一步深入研究。
对鱼腥草的研究开发及临床应用药
材 , 由于运输和贮存不便 ,大都用鱼腥草
干品。本课题首次对鲜 、干鱼腥草进行
药效学的比较研究 , 为鱼腥草鲜品的开
发研究和鱼腥草药效物质基础的研究提
供了一定的理论依据。
参考文献:
[ 1] 国家药典委员会.中国药典 [ S].北京:
化学工业出版社 , 2005:155.
[ 2] 曹 晖 ,王绍云.鱼腥草的化学成分及
开发前景 [ J].黔东南民族师范高等专
科学校学报 , 2005, 12(23):20.
[ 3] 张 倩 ,万晴姣.鱼腥草水溶性多糖的
提取及鉴定 [ J] .食品科学 , 2000, 21
(3):49.
[ 4] MengJ, DongXP, ZhaoZZ, etal.Es-
tablishmentofGC-MSfingerprintof
freshHoutuyniacordata[ J] . Chem
PharmBul, 2005, 53(11):1484.
[ 5] MengJ, DongXP, ZhaoZZ, etal.Es-
tablishmentofHPLC-DAD-MSfinger-
printoffreshHoutuyniacordata[ J] .
Chem Pharm Bul, 2005, 53
(12):1604.
[ 6] 熊大胜 , 席在星 , 邓应威.鱼腥草提取
物抑菌作用研究 [ J].常德师范学院学
报 , 2002, 14(4):59.
[ 7] 侯远生 ,张旭梅.鱼腥草注射液体外和
小鼠体内抗菌作用研究 [ J] .中国中药
杂志 , 1990, 15(4):29.
[ 8] 徐叔云 ,卞如濂 , 陈 修.药理实验方
法学 [ M].北京:人民卫生出版社 ,
2002:695.
[ 9] 陈 英 ,韦 戈.百银镇咳颗粒止咳药
理作用的研究 [ J] .广西医学 , 2004, 26
(11):1613.
·1316·
时珍国医国药 2008年第 19卷第 6期 LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH2008VOL.19NO.6