全 文 ：第 30卷　第 6期
2008 年 12月
三峡大学学报(自然科学版)
J of China Three Go rges Univ.(Natural Sciences)
Vol.30 No.6
Dec.2008
收稿日期:2008-10-12
基金项目:湖北省教育厅自然科学研究重点项目(D20081302);天然产物研究与利用湖北省重点实验室开放基金项目(2006NP08)
通讯作者:但飞君(1972-),女 ,副教授 ,博士 ,主要从事天然产物的基础研究.
中药白根独活中总香豆素成分的含量测定
但飞君1 　蔡正军1 　郭军辉1 　潘家荣2 　王　力2
(1.三峡大学 天然产物研究与利用湖北省重点实验室 , 湖北 宜昌　443002;2.三峡大学 化学与生命科学学
院 , 湖北 宜昌　443002)
摘要:建立紫外分光光度法测定白根独活中总香豆素的含量.方法:白根独活药材粉末经超声波提
取 ,采用紫外分光光度法 ,检测波长为 303.7 nm 对白根独活药材中的总香豆素进行测定.结果:采
用该方法可准确测定白根独活药材中总香豆素的含量 ,水合氧化前胡素在 6.4 ～ 19.2μg/mL 范围
内 ,吸光度与浓度的线性关系良好(r =0.999 1),样品平均回收率为 98.53%,精密度 RSD 为
0.17%,稳定性 RSD为 0.37%(5 h),重复性 RSD为 0.55%.结论:该方法简单 、准确 ,可用于白根
独活药材中总呋喃香豆素的含量测定.
关键词:白根独活;　总香豆素;　紫外分光光度法;　含量测定
中图分类号:R965:O657.3　　　文献标识码:A　　　文章编号:1672-948X(2008)06-0091-03
Determination of Total Coumarins in Angelica Polymorpha Maxim.
Dan Feijun
1 　Cai Zhengjun1 　Guo Junhui1 　Pan Jiarong2 　Wang Li2
(1.Hubei Key Labo rato ry o f Natural Products Research & Development , China Three G orges Univ.,
Yichang 443002 , China;2.Co lleg e of Chemist ry & Life Science , China Three Gorges U niv., Yichang
443002 , China)
Abstract　An UV spectrophotometry fo r de termining total coumarins in Angelica polymorpha Maxim.is es-
tablished.The powder of Angelica polymorpha Maxim .is ex t racted by ul trasonic technolo gy.The to tal cou-
marins is de tected at 303.7 nm by UV spect ropho tometry .There is a good linear relationship w ithin the range
of 6.4-19.2 μg/mL(r =0.999 1).The relative standard deviation of accurate test and stability test are
0.17% and 0.37% respectively .The average recovery is 98.53%(n=6)w ith RSD of 0.55%.The me thod is
simple and accurate;and it can be used fo r dete rmining o f the total couma rins in Angel ica polymorpha
Maxim ..
Keywords　Angelica polymorpha Maxim.;　total coumarins;　UV spect rophotometry;　content determination
　　白根独活(Angel ica polymorpha Maxim.)为伞
形科当归属植物 ,又名拐芹 、紫金砂[ 1-2] ,药用部位为
其根及根茎.具有温中散寒 、理气止痛的功效 ,为著名
的治疗胃痛的土家族常用药物 ,在鄂西渝东民族民间
药中享有盛誉.民间常用其治疗胃腹痛 、胸胁痛 、风湿
关节痛 、跌打损伤 、毒蛇咬伤等 ,具有疗效确切 ,起效
快 、治愈率高 、不良反应少等特点[ 2] .本实验室曾对其
进行抗菌 、抗胃溃疡实验研究 ,发现其提取物 、提取部
位具有良好的抗菌[ 3] 和抗胃溃疡活性[ 4] .本实验室经
过分离纯化得到一系列香豆素类化合物 ,确定香豆素
类化合物是白根独活的主要化学成分及有效活性物
质[ 5] .文献报道[ 6-10] 香豆素类化合物具有抗艾滋病 、
抗肿瘤 、抗氧化 、抗菌 、降压 、抗辐射 、抗凝血等多方面
的生物活性 ,香豆素类化合物分子量较小 ,合成相对
简单 ,生物利用度高 ,近年来已成为国内外许多药学
工作者的研究重点.
实验以水合氧化前胡素为对照品 ,建立用紫外分
光光度法测定总香豆素含量的方法 ,结果表明该方法
简便 、准确 ,适用于白根独活药材中总香豆素含量测
定.
1　实验部分
1.1　仪器与试药
UV/V U3010 型分光光度计(日本日立 HITA-
CHI);VARIAN prostar 210 高效液相色谱(美国瓦
里安公司);A L204 型万分之一电子天平(梅特勒-托
利多仪器有限公司);KQ3200DB型数控超声器(昆山
市超声仪器有限公司);N-1001型旋转蒸发器(日本
EYELA).
对照品:水合氧化前胡素(HPLC测定 ,峰面积归
一化法测定含量为 99.3%,由本实验室提供),其余
试剂为分析纯.药材:白根独活于 2007年 7月采于神
农架林区木鱼镇 ,经三峡大学汪鋆植教授鉴定为伞形
科植物当归属植物白根独活(Angelica polymor pha
Maxim .)的根.
1.2　方法与结果
1.2.1　溶液的制备
精密称取经 105℃减压干燥至恒重的水合氧化
前胡素对照品 1.6 mg ,用无水乙醇溶解 ,定量转入 50
mL 容量瓶中 ,无水乙醇定容 ,摇匀 ,即得 32.0μg/mL
的水合氧化前胡素对照品溶液.取 2.5 g 白根独活样
品 ,丙酮超声提取 ,料液比 1∶18 ,提取温度 65℃,超
声功率 90 W ,超声时间 50 min ,提取 3 次 ,即得样品
溶液.
1.2.2　测定波长的选择
在 200 ～ 400 nm 分别扫描水合氧化前胡素对照
品及样品溶液 ,两者在 303.7 nm 处均有一个吸收峰 ,
且峰形变化平缓 ,便于定量测定 ,因此 ,将 303.7 nm
作为测定波长.
1.2.3　标准曲线的制备
精密吸取上述水合氧化前胡素标准溶液 2.0 ,
3.0 , 4.0 , 5.0 , 6.0mL ,分别置于 10 mL 容量瓶中 ,无
水乙醇定容 ,摇匀 ,在 303.7 nm 波长处测定其吸光
度 ,以无水乙醇作空白试剂.以氧化前胡素质量浓度
C为横坐标 ,吸光度 A为纵坐标作图 ,得标准曲线 ,其
回归方程:A=0.047 6C -0.028 5 , r=0.999 1.结果
表明 ,水合氧化前胡素对照品溶液质量浓度在 6.4 ～
19.2μg/mL 范围内 ,吸光度与浓度的线性关系良好.
1.2.4　精密度试验
精密称取样品约 2.5 g ,按“1.2.1”方法制备样品
溶液 5份 ,平行测定 ,于 303.7 nm 处连续测定 5次.
(见表 1)
表 1　精密度实验结果(n=5)
实验次数 1 2 3 4 5
吸光度 0.458 2 0.459 6 0.457 9 0.4575 0.458 6
　　计算得 RSD=0.17%,精密度实验符合实验要
求.
1.2.5　稳定性试验
取“1.2.4”项下 5号样品溶液 ,于 303.7 nm 处测
定吸光度 ,每隔 1h测定 1次 ,连续测定 6次.(见表 2)
表 2　稳定性实验结果(n=6)
实验时间 0 h 1 h 2 h 3 h 4 h 5 h
吸光度 0.4582 0.4576 0.459 3 0.4568 0.4551 0.4559
　　计算得 RSD=0.37%,实验表明 ,待测样品在 5 h
内稳定性良好.
1.2.6　重复性试验
精密称取样品约 2.5 g ,按“1.2.1”方法制备样品
溶液 5份 ,于 303.7 nm 处连续测定 5次.(见表 3)
表 3　重复性实验结果(n=5)
实验次数 1 2 3 4 5
粗提物量/ g 0.1489 0.1471 0.147 7 0.1481 0.1468
吸光度 A 0.4582 0.5325 0.427 1 0.4476 0.4915
提取物有效含量/ % 39.96 40.11 40.12 40.18 39.99
提取率/ % 2.38 2.36 2.37 2.38 2.35
　　计算得平均提取率为 2.37%, RSD=0.55%,实
验有很高的重复性 ,重现性很好 ,证明该提取方法具
有很高的重复性.
1.2.7　加样回收试验
取已知含量的样品约 1.0 g(总香豆素含量以水
合氧化前胡素计),精密称定 ,分别加入相当于样品中
含量 80%、100%、120%的水合氧化前胡素对照品(3
种不同水平 ,各 2份),按样品溶液制备方法操作进行
含量测定 ,计算回收率.(见表 4)
表 4　加样回收实验结果(n=6)
项目 样品中含量/g
加入对照
量/g
测得总
量/ g
回收率
/ %
平均回收
率/ %
RSD
/ %
1 0.023 5 0.018 9 0.042 5 100.43
2 0.023 8 0.018 9 0.042 3 98.32
3 0.024 1 0.023 7 0.047 3 97.92 98.53 0.88
4 0.023 9 0.023 7 0.047 2 98.33
5 0.023 8 0.028 4 0.051 8 98.31
6 0.023 6 0.028 4 0.051 5 97.88
92 三 峡 大 学 学 报(自 然 科 学 版)　　　　　　　　　　　　　　2008 年 12 月
　　计算得加样回收实验的平均回收率为98.53%,
RSD=0.88%,说明本实验在提取过程中的的样品损
失在误差范围内 ,该检测方法可行.
2　讨　论
香豆素类化合物是白根独活的主要化学成分及
有效活性物质 ,香豆素类成分的含量是评价药材质量
的重要指标.本实验以水合氧化前胡素为对照品 ,应
用紫外分光光度法对白根独活中总香豆素含量进行
测定.通过对该法分别进行精密度 、稳定性 、重现性和
回收率的考察 ,认为该法稳定可靠 ,从回收率来看 ,此
测定方法具有较高特异性 ,可以不受其他具有紫外吸
收干扰物质的干扰.本法简单快速 ,准确性较高 ,适用
于生产单位控制质量时使用 ,本实验研究可为质量控
制标准的制定提供科学依据.
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[责任编辑　周文凯]
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