全 文 ：组(P ＜ 0． 01) ，HDL 含量明显第低于正常对照组(P ＜ 0． 01) ;特
定穴位针刺治疗组与模型对照组比较，TG、TC 含量降低，HDL 含
量上升，统计学差异有显著意义(P ＜ 0． 01) ;模型对照组与非特
定穴位针刺治疗组比较，无明显统计学差异(P ＞ 0． 05)。结果见
表 2。
表 2 干预后各组大鼠血清 HDL、TG、TC水平变化(珋x ± s)
组别 HDL TG TC
正常对照组 1． 36 ± 0． 14 1． 68 ± 0． 15 1． 71 ± 0． 55
模型对照组 0． 96 ± 0． 19▲▲ 1． 72 ± 0． 18▲▲ 2． 63 ± 0． 74▲▲
特定穴位针刺 1． 20 ± 0． 15★★ 1． 69 ± 0． 84★ 1． 85 ± 0． 65★★
非穴位针刺 1． 04 ± 0． 14 1． 71 ± 0． 52 2． 53 ± 0． 46
与正常对照组比较，▲ P ＜ 0． 01;与特定穴位针刺治疗组比较，★ P ＜
0． 05，★★P ＜ 0． 01;n = 15
3 讨论
单纯性肥胖症是由遗传、饮食及生活习惯等多种因素共同作
用而产生的，当体脂增加使体质量超过标准体质量 20%或 BMI ＞
24 kg /m2 者称为肥胖症。肥胖是多种疾病发生的重要诱因，与高
血压、糖尿病、心脑血管疾病等密切相关。肥胖动物模型是研究
肥胖及其相关疾病发病机制的主要工具。目前研究肥胖的动物
模型主要有高脂饮食诱导肥胖模型、遗传性肥胖转基因动物模
型、下丘脑性肥胖模型(谷氨酸钠或金硫葡萄糖)、内分泌性肥胖
模型(去卵巢、注射胰岛素)等诱导形成。其中与人类肥胖最为
接近的高脂饮食诱导营养性肥胖动物模型的应用最为广泛。高
脂饮食诱导营养性肥胖动物模型已在肥胖的发病及防治研究中
广泛应用［2，3］。课题组在前期的实验中，以营养性肥胖动物模型
作为研究对象，均达到预期目标，由此本项目在前期研究基础上，
以营养性肥胖大鼠为研究对象，探讨特定穴位针刺的减肥效应。
研究发现肥胖患者血脂代谢紊乱的主要表现为甘油三酯
(triglyceride，TG)和总胆固醇(total cholesterol，TC)增高，高密度
脂蛋白(High density lipoproteins，HDL)降低［4，5］。肥胖患者脂肪
分解产生的过多游离脂肪酸(free fat acid，FFA)通过门静脉系统
进入肝脏，使肝脏合成 TG 增加，富含 TG 的 HDL 被肝脂酶水解
后生成 HDL残粒。血浆甘油三酯、总胆固醇及高密度脂蛋白水
平的检测可用于肥胖的诊断和治疗效应评测［6］。
中医学认为，肥胖是由于气血运行不畅，脾胃呆滞，运化失
司，水谷精微失于输布，化为膏脂和水湿，留滞于肌肤、脏腑、经络
而致肥胖［7］。足三里是足阳明胃经穴，具有调理脾胃、补中益气
之功用;三阴交为足太阴脾经、足少阴肾经、足厥阴肝经交会之
穴，既可健脾益血，也可调肝补肾;天枢穴属于足阳明胃经，是手
阳明大肠经募穴，具有升降清浊之功用;中脘穴为任脉上的要穴，
具有理气健胃之功用;丰隆为足阳明胃经之络穴，可沉降胃浊。
关元为小肠募穴，足三阴、任脉之会，具有培补元气之功。全方合
用，具有补益气血、调理脾胃、祛湿利水之功效。本课题研究发
现:特定穴位针刺治疗可显著降低大鼠体重及肥胖 Lee＇s指数，同
时，特定穴位针刺亦可显著提升血浆 HDL水平，降低血浆 TG、TC
水平，具有较好的减肥效应。
参考文献:
［1］ 刘光红．肥胖的成因、危害及对策［J］． 湖北体育科技，2000，(4) :
60．
［2］ 李 娟，何海霞，周远大，等． D －异苯环戊胺对营养性肥胖模型大
鼠的减肥作用研究［J］．中国药房，2010，21(29) :2736．
［3］ 任亚萍，孙 莉，宫晓洁，等． 雄性 SD 大鼠性成熟期营养性肥胖模
型的建立［J］．现代医药卫生，2010，26(1) :3．
［4］ 刘 颖，李 伶，杨刚毅，等．血浆脂肪甘油三酯脂酶水平与肥胖、
胰岛素抵抗相关因素的关系研究［J］． 解放军医学杂志，2010，35
(7) :871．
［5］ 方少波，陈毓雄，吴冬娜．中小学生肥胖与血压、甘油三酯、总胆固
醇间的关系［J］．现代预防医学，2004，(2) :196．
［6］ 朱耀国，任叶慧，孙黎黎． 肥胖的诊断与治疗进展［J］． 中国医刊，
2003，38(7) :32．
［7］ 祝建龙，方 瑜，杨柏灿． 肥胖的中医病证探析［J］．上海中医药杂
志，2011，(5) :17．
收稿日期:2011-07-09; 修订日期:2011-11-21
基金项目:江西省自然科学基金(No． 2007GQY0114)
作者简介:姜登钊(1982-) ，男(汉族) ，山东威海人，现任九江学院基础医学院讲师，博士学位，主要从事中药药代动力学研究工作．
对叶百部多糖的提取及其抗氧化活性研究
姜登钊，吴家忠，李辉敏
(九江学院基础医学院，江西 九江 332000)
摘要:目的 对对叶百部多糖(STP)的抗氧化作用进行研究。方法 以水提醇沉法提取对叶百部多糖，采用分光光度法研
究对叶百部多糖在不同体系中对超氧阴离子自由基(·O2
－)、羟基自由基(·OH)、DPPH 自由基 (DPPH·)的清除作
用。结果 对叶百部多糖对·O2
－、·OH 和 DPPH·均具有一定的清除作用，其 IC50分别为(218． 6 ± 16． 1) ，(319． 1 ±
18． 2)和(375． 3 ± 16． 4)μg /ml。结论 对叶百部多糖对自由基的清除作用存在明显的量效关系，具有较好的抗氧化活性。
关键词:对叶百部; 多糖; 抗氧化活性
DOI标识:doi:10． 3969 / j． issn． 1008-0805． 2012． 06． 066
中图分类号:R284． 2 文献标识码:A 文章编号:1008-0805(2012)06-1467-03
Polysaccharides from Stemona tuberosa Lour．:Extraction and Antioxidant Activity
JIANG Deng-zhao，WU Jia-zhong，LI Hui-min
(School of Basic Medical Science，Jiujiang University，Jiujiang 332000，China)
Abstract:Objective To study on the antioxidant activity of polysaccharides from Stemona tuberosa Lour．(STP)．Methods STP
was obtained by water － extracting and alcohol precipitating． The antioxidant potency of the polysaccharides was investigated by
·7641·
LISHIZHEN MEDICINE AND MATERIA MEDICA RESEARCH 2012 VOL． 23 NO． 6 时珍国医国药 2012 年第 23 卷第 6 期
spectrophotometry，employing various established in vitro systems，such as superoxide anion (·O2
－) ，hydroxyl radical (·OH)
and DPPH· scavenging． Results STP had scavenging effects to ·O2
－，·OH and DPPH· of which the IC50 were(218． 6 ±
16． 1) ，(319． 1 ± 18． 2)and(375． 3 ± 16． 4)μg /ml，respectively． Conclusion The STP has a good antioxidant activity to ·O2
－，
·OH and DPPH· whose scavenging effects show significant dose － effect relationship．
Key words:Stemona tuberosa Lour．; Polysaccharide; Antioxidant activity
百部始载于《名医别录》，历代本草均有记载。该药性甘，味
苦、微温，归肺经，有润肺止咳、杀虫灭虱的功效。在 2010 版《中
国药典》中，百部科(Stemonaceae)植物直立百部 Stemona sessilifo-
lia (Miq．)Miq．、蔓生百部 S． japonica (Blume)Miq．和对叶百部
S． tuberosa Lour．的干燥块根均作为正品百部入药［1］。目前对于
对叶百部的次级代谢产物研究已有较多报道［2 ～ 5］，本研究小组对
对叶百部根的无机元素和氨基酸也进行了研究［6］，但百部多糖
的研究较少，为了全面评价百部的药效作用，本文对对叶百部的
多糖成分进行提取纯化，得到对叶百部粗多糖，并对其抗氧化作
用进行研究，进一步阐释中药百部的药效物质基础。
1 材料与仪器
中药百部产自广西柳州，由中国海洋大学刘红兵副教授鉴定
为对叶百部 Stemona tuberosa Lour．的根。
1，1 －二苯基苦基苯肼 (1，1 － diphenyl － 2 － picrylhydrazyl，
DPPH) ，N，N，N，N － 四甲基乙二胺 (tetramethyl ethylenedia-
mine，TEMED)均为美国 Sigma 公司产品;D －无水葡萄糖标准品
(110833 － 200904)、维生素 C(100425 － 200702)购自中国食品药
品检定研究院，过硫酸铵(AP) ，盐酸羟胺，对氨基苯磺酸，α －萘
胺，30% H2O2，邻二氮菲，FeSO4 均为分析纯，Tris为生化试剂，实
验用水为 MilliQ级纯水。
奥地利产 RAINBOW自动酶标仪;涡旋振荡器 WH － 90A:上
海振荣科学仪器有限公司;恒温水浴箱:杭州四季春生物工程材
料有限公司。
2 方法
2． 1 多糖提取 对叶百部药材 50℃恒温干燥，粉碎过 60 目筛。
称取 100g药材粉末，以料液比(M/V)1∶ 30，沸水回流提取 3 次，
每次 2h，收集提取液，离心过滤，将滤液浓缩为 100 ml，加入 300
ml无水乙醇进行醇沉，放置过夜后，过滤，沉淀以 Sevage 法除蛋
白后复溶，再以 75%乙醇进行沉淀，沉淀经无水乙醇，丙酮反复
洗涤后得到对叶百部多糖，对得到的多糖进行透析 48h 后，将样
品浓缩，冷冻干燥后得到对叶百部多糖(STP)。
2． 2 STP中多糖含量测定 采用苯酚 －硫酸法［7］测定 STP 中的
总糖含量，3，5 －二硝基水杨酸盐(DNS)法［7］测定对 STP 中的还
原糖含量。
多糖含量 = 总糖含量 － 还原糖含量
2． 3 STP对 DPPH·的清除作用 称取一定量的 STP，配制浓度
分别为 100，200，300，400，500 μg /ml 的样品溶液，震荡器充分震
荡后，待测。配制浓度分别为 50，100，150，200，250 μg /ml 的维
生素 C(Vc)标准溶液作为对照溶液。用 80% 乙醇溶液配制
0． 15 mmol /L DPPH，取 0． 11 ml 的该溶液加入 0． 01 ml 不同浓度
的待测样品中，立即混匀，室温避光反应 30 min，酶标仪于波长
517 nm 处测定各样品吸光度，清除率按下式计算［8］:
清除率 (%) = ［1 －(A样品 － A空白)/(A对照 － A0) ］× 100%
注:A0:0． 11 ml的 0． 15 mmol /L的 DPPH˙ 溶液的溶剂 + 0． 01
ml 样品的溶剂;A样品:0． 11 ml 的 0． 15 mmol /L 的 DPPH ˙ 溶液
+ 0． 01 ml 样品;A空白:0． 11 ml的 0． 15 mmol /L的 DPPH˙ 溶液
的溶剂 + 0． 01 ml 样品;A对照:0． 11 ml 的 0． 15 mmol /L 的 DPPH
˙ 溶液 + 0． 01 ml 样品的溶剂。
2． 4 STP对超氧阴离子自由基 (·O2
－)的清除作用 称取一定
量的 STP，配制浓度分别为 100，200，300，400，500 μg /ml 的样品
溶液，震荡器充分震荡，待测。配制浓度分别为 50，100，150，200，
250 μg /ml的 Vc标准溶液作为对照溶液。过硫酸铵 / N，N，N，
N －四甲基乙二胺 (AP － TEMED)体系产生超氧阴离子自由
基。其溶液按表 1 配制，将 A、B 两液按 1∶ 4 混合 1 min 后，取
0． 312 5 ml 该混合液加入 0． 062 5 ml 不同浓度的样品溶液，加入
0． 125 ml的 10 mmol /L盐酸羟胺，25 ℃混合反应 20 min 后，再分
别加入 0． 125 ml的 17 mmmol /L对氨基苯磺酸和 0． 125 ml的 17
mmol /L α －萘胺，25℃下混合反应 25 min，反应后显色液用同体
积正丁醇充分摇匀，静止 (或离心)分层，取正丁醇相，酶标仪于
波长 530 nm 处测定各样品吸光度，清除率按下式计算［9］:清除率
(%) = ［1 －(A样品 － A空白)/(A对照 － A0) ］× 100%，
注:A0:0． 312 5 ml A －双蒸水混合液 (1∶ 4) + 0． 062 5 ml
样品的溶剂;A样品:0． 312 5 ml A － B 混合液 (1∶ 4) + 0． 062 5
ml 样品;A空白:0． 312 5 ml A －双蒸水混合液 (1∶ 4) + 0． 062 5
ml 样品;A对照:0． 312 5 ml A － B 混合液 (1∶ 4)+ 0． 062 5 ml 样
品的溶剂。
表 1 AP － TEMED 体系溶液的配制
溶液 100ml
A 1 mol /L HCl 48． 0ml
Tris 36． 6g
TEMED 0． 23ml
B AP 0． 14g
2． 5 STP 对羟基自由基(·OH)的清除作用 称取一定量的
STP，配制浓度分别为 100，200，300，400，500 μg /ml 的样品溶液，
震荡器充分震荡，待测。配制浓度分别为 50，100，150，200，250
μg /ml的维生素 C 标准溶液作为对照溶液。取 0． 2 ml 0． 75
mmol /L 邻二氮菲溶液，依此加入 0． 4 ml 0． 2 mol /L 磷酸盐缓冲
溶液 (PBS，pH 7． 40)和 0． 2 ml 0． 75 mmol /L FeSO4，在该混合
液中加入 0． 2 ml 不同浓度的样品溶液，最后加入 0． 2 ml 0． 01%
(V /V)H2O2，37 ℃水浴 60 min，酶标仪于波长 536 nm 处测定各
样品吸光度，清除率按下式计算［10］:
清除率 (%) = ［1 －(A样品 － A空白)/(A对照 － A0) ］× 100%，
注:A0:0． 2 ml 双蒸水 + 0． 2 ml 样品的溶剂;A样品:0． 2 ml
0． 01%(V /V)H2O2 + 0． 2 ml 样品;A空白:0． 2 ml 双蒸水 + 0． 2 ml
样品;A对照:0． 2 ml 0． 01%(V /V)H2O2 + 0． 2 ml 样品的溶剂。
3 结果与讨论
3． 1 STP的多糖含量 以葡萄糖为标准品，测得总糖的标准曲线
为 Y = 0． 006X + 0． 011，还原糖的标准曲线为 Y = 0． 166X +
0． 053，测得 STP 中总糖和还原糖的含量分别为 67． 71% 和
4． 23%，因此其多糖含量为 63． 48%。
3． 2 STP 对 DPPH·的清除作用 实验中以 Vc 作对比研究了
STP清除 DPPH·的作用(见表 2)。由表 2 可知，STP 具有一定
的清除 DPPH·的能力，清除能力随浓度增大而增强，其 IC50为
(375． 3 ± 16． 4)μg /ml，但其清除能力远弱于 Vc。
3． 3 STP对超氧阴离子自由基 (·O2
－)的清除作用 实验中以
维生素 C作对比研究了 STP清除·O2
－的作用(见表 3)。由表 3
可知，STP具有较强的清除·O2
－的作用，清除能力随浓度增大
而增强，其 IC50为(218． 6 ± 16． 1)μg /ml，与 Vc 的清除能力相
当。
3． 4 STP对羟基自由基(·OH)的清除作用 实验中以维生素 C
作对比研究了 STP清除·OH的作用(见表 4)。由表 4 可知，STP
具有较强的清除·OH 的作用，清除能力随浓度增大而增强，其
·8641·
时珍国医国药 2012 年第 23 卷第 6 期 LISHIZHEN MEDICINE AND MATERIA MEDICA RESEARCH 2012 VOL． 23 NO． 6
IC50为(319． 1 ± 18． 2)μg /ml，其清除能力强于 Vc对·OH的清除
能力。
表 2 STP与 Vc对 DPPH·的清除作用
样品
样品浓度
C /μg·ml －1
清除率
(%)
IC50 /
μg·ml －1
STP 100 18． 5 ± 2． 4
200 28． 2 ± 2． 1
300 39． 4 ± 3． 2 375． 3 ± 16． 4
400 51． 2 ± 4． 1
500 63． 5 ± 4． 2
Vc 50 37． 5 ± 3． 3
100 47． 4 ± 3． 8
150 59． 1 ± 4． 2 89． 8 ± 9． 6
200 71． 2 ± 5． 3
250 85． 5 ± 5． 2
表 3 STP与 Vc对·O －2 的清除作用
样品
样品浓度
C /μg·ml －1
清除率
(%)
IC50
/μg·ml －1
STP 100 35． 5 ± 1． 7
200 46． 2 ± 2． 6
300 55． 4 ± 3． 5 218． 6 ± 16． 1
400 61． 2 ± 4． 4
500 69． 5 ± 5． 0
Vc 50 12． 6 ± 1． 2
100 23． 2 ± 1． 5
150 35． 1 ± 2． 6 206． 2 ± 12． 4
200 48． 2 ± 3． 7
250 61． 5 ± 4． 4
表 4 STP与 Vc对·OH的清除作用
样品
样品浓度
C /μg·ml －1
清除率
(%)
IC50
/μg·ml －1
STP 100 12． 5 ± 1． 8
200 27． 2 ± 2． 3
300 42． 4 ± 3． 5 319． 1 ± 18． 2
400 58． 2 ± 4． 4
500 74． 5 ± 5． 1
Vc 50 8． 5 ± 1． 4
100 15． 2 ± 2． 2
150 23． 1 ± 2． 1 384． 9 ± 16． 6
200 31． 2 ± 2． 5
250 39． 5 ± 3． 2
4 结论
作为一种常用的止咳平喘中药，百部的研究主要是集中在其
小分子尤其是生物碱类成分的结构与功效方面，对其多糖成分的
研究极少报道［11］。本研究结果表明，对叶百部多糖对 DPPH·，
超氧阴离子自由基 (·O2
－) ，羟基自由基(·OH)均具有一定的
清除作用，其 IC50分别为(375． 3 ± 16． 4) ，(218． 6 ± 16． 1)和
(319． 1 ± 18． 2)μg /ml。其清除超氧阴离子自由基能力与维生素
C相当，清除羟基自由基能力强于维生素 C，清除 DPPH·能力远
远弱于维生素 C。这些结果表明，百部多糖具有一定的抗氧化能
力，因此可能也是百部在治疗肺部疾病的部分药效成分，其结构
及单糖组成等将会进一步进行研究。
参考文献:
［1］ 国家药典委员会．中国药典，一部［S］．北京:中国医药科技出版社，
2010:123．
［2］ Jiang R W，Hon P M，But P P，et al． Isolation and stereochemistry of two
new alkaloids from Stemona tuberose［J］． Tetrahedron，2002，58 (33) :
6705．
［3］ Chung H S，Hon P M，Lin G，et al． Antitussive activity of Stemona alka-
loids from Stemona tuberose［J］． Planta Med．，2003，69 (10) :914．
［4］ Jiang R W，Hon P M，Zhou Y，et al． Alkaloids and Chemical Diversity of
Stemona tuberose［J］． J Nat Prod．，2006，69 (5) :749．
［5］ Lin L G，Li K M，Tang C P，et al． Antitussive Stemoninine Alkaloids
from the Roots of Stemona tuberose［J］． J Nat Prod，2008，71(6) :
1107．
［6］ 姜登钊，刘红兵，李国强，等．对叶百部根的无机元素与氨基酸成分
分析［J］，中国海洋大学学报，2008，36(6) :902．
［7］ 大连轻工业学院．食品分析［M］． 北京:中国轻工业出版社，1994:
177．
［8］ Hung TM，Na MK，Thuong PT，et al． Antioxidant activity of caffeoyl
quinic acid derivatives from the roots of Dipsacus asper Wall［J］． J Exp
Biol，2006，108:188．
［9］ 萧华山，何文锦，傅文庆，等．一种用分光光度计检测氧自由基的新
方法［J］．生物化学与生物物理进展，1999，26(2) :180．
［10］ 金 鸣，蔡亚欣，李金荣，等．邻二氮菲 － Fe2 + 氧化法检测 H2O2 /
Fe2 +产生的羟自由基［J］． 生物化学与生物物理进展，1996，23
(6) :553．
［11］ 王明艳，杨 凡，李 燕，等．响应面法优化百部多糖提取条件研究
［J］．食品科学，2009，30(6) :80．
·9641·
LISHIZHEN MEDICINE AND MATERIA MEDICA RESEARCH 2012 VOL． 23 NO． 6 时珍国医国药 2012 年第 23 卷第 6 期