全 文 ：。 中室芍 还乏夕受奥拉荃芍牛勿 ·
蜜环菌发酵液在猪荃菌发酵过程中的应用
中国医学科学院药用植物资源开发研究所 (1 。。 0 9 4) 王秋领 徐锦堂
摘要 试脸证 明 不 同蜜环 菌 〔A rm i“ ar 伍 m el lea (V ha l. xe Fr . ) ]菌株的发酵液均对猪荃 菌 〔G ri of ar
u m加 u al 口 (Fr . Pi dl t )〕发酵生产过程中 菌丝体的生长及多糖 的产生具有促进 作用 。 表现在菌球数童 多 、 重
量大 、 多糖的含童高 。 其 中尤以 A m 23 一 4号及 A m 28 一 l号蜜环 菌菌株效果最 佳 , 在其最 佳产糖期发 酵液 中粗
多糖含圣达 7 . Om g / m l , 而 未加蜜环菌发酵液 的对照仅有 5 . Zm g / m l 。
关键词 蜜环 菌 ; 猪茶 菌 ; 发酵 ; 粗 多糖 ; 菌丝 体
猪荃 (G , ij o r a u m be l za t a )是一种常用中药 ,
在我 国具 有 2 5 0 0 多年的药用历 史 。 70 年代 T .
M
, y a z a k
, 和 N . o ik a w a 首次从猪菩菌核中提取
出猪等多糖 〔’ 〕 , 经临床证明具有免疫刺激作用 ,
能提高人体的免疫机能比 ’ 〕 。 猪荃作为肿瘤治疗
均 ·种辅助药 , 越来越得到人们的重视 。 随着猪
等多糖在临床上的应用闭 , 扩大 了猪等在医疗
中的用药范围 , 对猪菩的需要量逐年增加 。蜜环
疥可以 为猪菩菌生长提供营养 , 已在猪等栽培
实践中得到 了确认 〔 5〕 。猪荃 多糖在猪荃菌丝体
发酵过程中是其 目的产物 , 其产量的高低取决
于菌丝体的生长状况 , 而菌丝体生长又与培养
甚中的营养条件有密切关系 ; 研究清楚蜜环菌
发酵液在猪等菌 发酵培 养过 程 中对菌丝体生
民 、 多糖产生的影响及将其应用于猪等菌的发
酵生产中 , 对于发酵工艺的改革及多糖产量的
提高均具有一定的意义 。
l 实验材料
菌种 : 猪答菌是采 自山西古县猪菩场的猪
荃菌核中分离获得的 。 蜜环菌由中国医学 科学
院药用植物资源开发研究所真菌室提供 A m 23 -
4
、
A m o l
一
1
、
A m l l
一
1
、
A m Z o
一
1
、
A m 2 8
一 l 号等
5个菌株 。
培养基 : 蜜环菌和猪等菌发酵培养基都为
麦赴 一葡萄糖培养基 , 其成分为麦赶 50 9 , 葡萄糖
20 9
, 磷 酸 二 氢 钾 1 . 59 , 硫 酸镁 1 9 , 自来 水
1 0 () o n : l
,
P H 6
.
O一 6 . 5 。
2 实验方法
2
.
1 蜜环菌发酵液的制备
.
4 6 6
.
麦赶 一葡萄糖培养基高压灭菌后接入 各种
蜜环菌菌株 , 在室温 25 ℃ 、 气液比 1 : 1 、 转速 1 0
一 1 2 0 r / m in 的条件下振荡培养 d9 后过滤 , 得蜜
环菌滤液 。
2
.
2 猪荃菌发酵培养
用麦赶 一葡萄糖培养基与不同蜜环菌菌株
滤液按 1 , 1配制培养基 , 培养猪荃菌 , 以麦趁 一葡
萄糖培养基 为对照 ( C K ) , 使处理与对照总糖一
致 , p H .S 5 ~ .6 0 。 各处理重复 3次 , 高压灭菌后
接入猪荃菌种在上述条件下振荡培养 。
2
.
3 发酵液的处理及多糖的测定
2
.
3
.
1 发酵液的处理 : 取待测发酵液 10 m l 过
滤 , 将其滤液用 S v ag 法闭除蛋白 。将除净蛋 白
的待测液于 3 0 0 o r / m in 的条件下离心 , 去除淀
粉 , 用碘化钾试剂检查上清液中淀粉完全除净
后用于糖的测定 。
2
.
3
.
2 糖的测定方法 : 采用 3 . 5一二硝基水杨
酸法川 。
3 结 果
.3 1 不同蜜环菌菌株的发酵液在猪荃菌发酵
过程中对其菌丝体生长的影响 。
含有不同蜜环菌菌株的发酵液的培养基 ,
在 p H .S 5一 .6 0 、 温度 25 ℃的条件下培养猪菩
菌 , 经 3 2 h4 后测猪荃菌球干重 , 结果见表 1 。
由表 1可以看出 , 不同蜜环菌菌株的发酵液
均对猪菩菌丝的生长具有促进作用 。发 酵 液静
止后 , 在三角瓶的底部布满了菌球 , 而对照的三
角瓶底部菌球明显稀疏 , 且无细碎的小菌球分
布 。 各处理的菌球干重均显著高于对照 , 尤以用
中国药学杂志 1 9 9 3年第28 卷第 8期
表 l不同蜜环菌株的发酵液在猪菩菌
发酵中对菌球干重的影响
蜜环菌 猪等菌球干重 (m g/ m ) l
株 1 1 班 份 平均
差异显著性
LS R
.
5 %
Am l l
一
1
Am 2 3
一 4
m A2 8
一 1
m Ao l
一 1
m A20
一 1
C K
4
.
1 4 8
2
.
7 4 8
2
.
5 26
2
.
9 36
2
.
36 4
2
.
1 4 8
3
.
31 42
.
2 4 8
2
.
5 5 2 2
.
4 38
2
.
2 2 8 3
.
0 6 3
2
.
1 30 2
.
9 7 2
2
.
0 0 0 2
.
7 0 4
1 6 40 1
.
9 6 8
3
.
7 6 4
3
.
6 7 4
2
.
82 2
2
.
6 2 8
2
.
35 2
1
.
9 1 8
4 341
2
.
6 2 8
2
.
80 2
26 80
51 2 3
1 9 1 9
* 相 同字母者表示差异不显著 (p < 0. 0 5) 。
m A l l
一
1号蜜环菌菌株发酵液配制培养基培养
的 猪等 菌效 果 最佳 , 发酵 液 中菌球 干 重 达
3
.
4 4 l m g / m l
, 比对照高 1 . 5 2 2m g / m l 。
3
.
2 不同蜜环菌菌株的发酵液对猪荃发酵过
程中多糖的影响
3
.
2
.
1 猪荃发酵过程中多糖的变化 : A m 2 3 -
4号蜜环菌发酵液配制的培养基培养的猪荃菌 ,
在培养的不同时间取样 , 测定多糖的含量 , 见附
图 。
中粗多糖 含量达 5 . 2 0 m g / m l , 猪 菩多糖净增
2
.
S OOm g / m l
。
3
.
2
.
2 不同蜜环菌菌株的发酵液对猪荃发酵
过程中多糖产量的影响 : 经测其最佳产糖期粗
. 多糖的含量 ,结果见表 2 。
表 2 不同蜜环菌菌株的发酵液对猪荃
发酵中多糖产量的影响
蜜环菌 猪等粗多糖含量 ( m g / m l) 最佳产糖 差异显著性
菌 株 I 一 班 平均 期 ( h ) L S R , 5 %
0月1只U0一h5八口Q曰,曰勺山A m 2 3
一
4 6
A m 2 8
一 1 7
A m l l
一 1 6
A m 2 0
一 1 5
A m o l
一 1 6
平均 5
8 7 5 7
.
12 5 7
.
00 0
2 7 5 6
.
7 5 0 6
,
8 7 5
8 7 5 5
.
8 7 5 6
.
0 0 0
5 0 0 7
.
1 2 5 6
.
0 0 0
0 0 0 6 0 00 6
.
0 0 0
1 5 0 5
.
2 0 0 5
.
2 5 0
6 0 0 0
5 2 0 0
3 2 4
3 2 4
3 2 4
3 2 4
3 2 4
2 16
附图 不同培养时间多糖变化情况
1一对照 ; 2一 A m 2 3一 4号菌株处理的
由附图可以看出 ,猪菩菌生长初期 , 多糖呈
下 降趋势 , 生长到一定时间 ( l o s h 后 ) , 多糖开
始上升 , 到一定时期后 , 多糖的产量达到最高 。
多糖的这种变化趋势均 比对照组显著 。 这表明
生长旺盛的猪菩菌有大量的代谢产物分泌到培
养基 中 , 直到 3 2 4h , 达到最佳产糖期 ,粗多糖含
量达 7 . o o o m g / m l ,猪菩多糖净增 5 . Z o o m g / m l 。
对照组在培养到 1 4 4 h一 1 8 h0 时培养基中的多
糖呈下降趋势 , 由 18h0 开始培养基 中的多糖含
量上升 , 直到 21 6 h 达到最佳产糖期 , 其发酵液
中国药学杂志 19 9 3年第 28 卷第8期
* 相同字母者表示差异不显著 ( p < 0 . 0 5 ) 。
由表 2可以看出 : 不同蜜环菌菌株的发酵液
在猪荃菌发酵过程中 ,对多糖的产生均具有促
进作用 。差异显著性测验结果表明 : 各处理与对
照 之 间 差异 均 显著 。 尤 以 A m 2 3一 4号 菌 株及
A m 2 8
一
1号菌株发酵液配制的培养基培养的猪
荃菌产糖效果最佳 , 每毫升发酵液中粗多糖的
含量高达 7 · o o o m g / m l 。
4 讨 论
在猪荃菌发酵过程中 ,其发酵液中的多糖
系 由两部分组成 : 一部分为培养基中原有的多
糖 ; 另一部分为猪菩菌发酵过程 中分泌到培养
基中的猪荃多糖 。 这两部分多糖 ,在猪荃菌发酵
过程中存在着一种消长关系 。 在猪荃菌培养前
期 ,猪荃菌主要利用培养基 中的糖分作为碳源供其生长 ,这时猪等菌体对多糖的莉用大于菌
体分泌的多糖 。 当这两部分多糖的消长达到一
个平衡点时 , 培养基中多糖含量最低 。 随着猪菩
菌代谢旺盛 , 菌体分泌的多糖增加 ,而对培养基
中多糖的利用减少 , 这时多糖的消耗小于长 ,培
养基中多 糖的含量开始增加 , 当菌体对多糖的
利用和菌体 自身分泌的多糖再次达到平衡点
时 ,培养基中的多糖含量达到最高 。
对经处理的猪菩发酵液 中产生的多糖进行
分离 、 提纯 ,后经红外光谱测定 , 此图谱与文献
的标准猪荃多糖图谱一致 lj[ 。
启、切任
参 考 文 献
1 M i y
az ak i T
,
O ik a w a N
.
S t a d
l c s o n F
u n g a l P o 1y
s a e e h a r
zd e
.
X ll
.
W a t e r
一 s o l u b l e P o ly s a e e h a r id e o f G
r访 l a u m 加l l a z a
( F
r
.
) P i l a t
.
(
、
h e m l ,六“ r ” 2 召 u u 1 97 3 , 2 1 ( 1 1 ) : 2 5 4 5 .
2 中医研究院中药研 究所 . 猪 荃提取物 “ 丁吕7 ” 的抗肿瘤实验和
临床观察 . 新医药学 杂志 , 19 79 , ( 2 ) , 9 ,
3 王 德昌 , 李佩茵 , 王 永泉 , 等 . 猪答多糖的某些药理作 用 . 中
草药 , 1 9 8 3 , 14 ( 1 6 ) : 2 7 .
戴如琴 , 刘文巨 , 兰江丽 . 等 . 猪芍菌丝体的液体培养及 扰杭
肿瘤作用的研 究 . 新 医药学杂志 , 1 9 79 , ( 2 ) , 1 )
李承志 (执笔 ) . 猪答生 态环境及 生物学特性的 调查研究初
报 . 中药材科技 , 19 81 . ( 3 ) : 7 .
吴东儒 , 李振华 ,黄德 民 , 等. 糖类的生物化学 . _ {匕京 高等教
育出版社 19 8 7 : 8 8 2一 8 9 4 .
张龙翔 , 张庭芳 , 李令媛 , 等 . 生化实验方法和技 术一化京 高
等教育出版社 , 1 9 8 1 : 9一 1 .
( 一l女稿 1 9 9 2 4 8 )
3 种 桑 缥 峭 的 生 药 学 研 究
洁波姜张大连中药 厂科学研究所 ( 1 1 6。 23) 赵荣国
长春中医学院中药 系 ( 13 0 2 1 ) 高士 ’异
摘要 本 文 对团缥峭 、长缥峭和 黑 蝶峭的药材性状 、粉末 显微特征 、 纸层析 、 薄层层析及 红 外光谱 图
等方面 进行 了比较研 兄 , 为 3种桑漂峭 药材的生 药鉴定和 品质评价提供 了科学依据 。
关键词 团镖峭 ; 长蝶峭 ;黑漂峭 ;生药学研 究
桑缥峭为常用的动物药 , 系蝗螂科多种昆虫
的卵鞘 ,具有益肾 、 涩精 、 缩尿等功效 。近人川认为
它有抗衰老的作用 。 中国药典 1 9 9。年版规定桑缥
峭的商品分为团漂峭 、 长缥峭和黑缥峭 3种 。 邓正
己等川通过大量实地观察证实大刀螂 ( T 绷 do er a
s i n 尸 n s i : S a u S S u r e )
、 南 方 刀 螂 ( 了’ . a : i d确 l i a
s t o l l ) 和 拒 斧 蝗 螂 ( H i e r o d u l a P a t e l l fet r a
S e r vi l e )分别产团缥峭 、 长缥峭和黑缥峭 。 据考
证川 ,本草中桑缥峭正品应为长缥峭 , 虽有团缥峭
的记载 ,但古人要将它与桑白皮合用 。黑缥峭在本
草书籍上均未记载 。 目前临床常将这 3种药材混合
使用 ,既无质量标准 , 又无生药鉴定指标 , 更不知
三者的化学成分是否相同 。 为此 , 本文对 3种桑缥
峭进行了生药学的比较研究 。
1 3种桑螺峭的药材性状
3种桑燎峭均系 1 9 9 1年 2月购于四川省内江
市中药材公司仓库 ,经高士贤教授和邓明鲁教
授鉴定分别为团缥峭 、 长缥峭和黑缥峭 。实验所
用试剂均为分析纯 。
L l 团缥峭的药材性状
.
4 68
.
整体略 呈扁 圆柱形 , 长 2 . 5 ~ c4 m , 宽 2 一
3 e m
,厚 1 · 4一 2 . l e r n 。 表面浅黄褐色 , 背部中 臾
由 2 9一 4 2个膜状薄片 ,前后纵向排列成 一 条宽
0
.
3 一 .0 c4 m 的黄色小脊 。 薄 片两侧 向腹面 延
伸 , 但肋纹不明显 。 腹部平坦或有凹沟 , 常附有
石粒 、 炭渣或树皮 。 尾端有两 个扇形 的光 滑平
面 。体轻 , 质松而韧 。有清香气 , 尤以湿润后加热
时更明显 。
纵切面呈黄褐色 , 由16 一 23 个卵室纵 向排
列而成 , 背部膜状薄片之 间距离较大 。 除尾部 8
一 1。个薄 片之间无卵室外 , 其余膜状薄片皆两
两夹住 1个卵室 。 卵室底部为较厚的外层 。
横断面外层较厚 ,呈海绵状 ; 内层为 16 一 23
个卵室呈放射状排列 , 室壁光滑 ,每室各有 1个卵 。
卵呈长锥状体 ,深棕色 ,卵长 2一 3 m m 。
1
·
2 长缥虫肖的药材性状
全体 呈 长条形 , 长 2 . 5 一 5 . o e m , 宽 0 . 7 ~
1
·
O e m
,厚 0 · 8一 1 . Ze m 。表面黄 白色 , 背部中央
由 4 2~ 58个膜状薄片前后呈覆瓦状排列成一条
小脊 ,其两侧各有一条黑褐色 的浅 沟 。 肋纹明
中国药学杂志 19 9 3年第 28 卷第 8期
ABST R C AT S OF OR I G I N AL R AT I CL E S
AP Pl ie a t io n o f Ar m l l ia r ia m e le ta f e r
-
m e n t in I gq i uo r s in m y c e l ia f e r m e n t io n
o f G r 习乞ra um b e l a ta
W AG NQ i u
一
y in g
,
X U J i n
一
t a n g 叹 八 s t i z u t召 of
几轰子d i e i n a l P l a n t eD v e l oP m e n t
,
C h i n e s e A c a d e卿 of
M亡d i c a l S c i e n c e 、 , B e 汀in g l 0 0 0 9 4 )
T h e f e r m e n t i n g l iq u o r s f
r o m d i f f e r e n t
s t r a i n s o f A
r
m i l l a
r i a m e l l e a w e r e P r o v e d t o
p r o m o t e t h e g r o w t h o f m y e e li a o f G
r
fot ar
u m
-
b e l l a t a a s w e l l a
s i t s p o l y s a e e h a r i d e s y i e ld s
d u r i n g t h e f e r m e n t a t io n o f G
.
u 切 b e l l a t a . I t w a s
f o u n d t h a t t h e m o r e f e r m e n t iv e m y e e l i a
,
t h e
h ig h t e o n t e n t
s o f p o l y s a e e h a r i d e s s t
r a i n 2 3
一
4
a n d
s t r a in 2 8
一
1
.
T h e e o n t e n t s o f t h
e i r e r u d e
p o l y s a e e h a r id e s i n f e r m e n t i n g l i q u o r s w e r e u p
t o 7m g / m l in t h e h i g h e s t p o l y s a
e e
h a r i d
e s
p
r o -
d u e i n g s t a g e a n d o n l y 5
.
Zm g / m l i n t h e e o n
-
t r o l
.
K e y w o r d s A r明 i l l a r i a m e l l e a , G r t’fo ar u m -
b e l l a t a
,
f e r m e n t i o n
,
p o l y s a e e h a
r id e
s
( O r i g i n a l a r t ie l e o n p a g e 4 6 6 )
E x i s t i n g f o r m o f t r a c e e l e m e n t s ( T E ) o f
t r a d i t i o n a l C h i n e s e m e d i e i n e
:
i o n e x
-
e h a n g e a e t i o n o f T E i n w a t e r l e a e h i n g
s o l u t i o n
D U A N Y u
一
f e n g
,
L I U C h e n g
一
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,
L U O Y o n g
-
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,
G A O B o ( 刀` 户a r t m e n t of e 人 e m i s t即 , s 人a n 二i
入 7口rm a l U n i 刀 e rs ity
,
X ia n 7 1 0 0 6 2 )
C A O Z h i
一
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,
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e t e w a s s t u d i e d
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T h e e o n t e n t o f T E w a
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, a n d o
r g a n i e e o m p o u n d
s w e r e
d e t e r m i n e d b y I C P e m i
s s i o n s P e e t r u m
.
T h e n o
e x e h a n g e r a t io w a s e a l e u l a t e d
·
T h e e x is t i n g
f o
r
m o f
s o m e T E i n t h e l e a e h in g
s o l u t i o n w a s
s u g g e s t e d
.
K e y w o r d s r r a d i t i o n a l C h i n e
s e m e d i
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,
t r a e e e l e m e n t
,
i o n e x e h a n g e
( O r ig i n a l a r t i e l e o n p a g e 4 7 0 )
P h a r m a c o g n o s t i e s t u d y o f t h r e e s o r t s o f
口d t h e e a m a n t id i s
Z H A O Y o n g
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g u o
,
J IA N G B o ( D
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T h r o u g h e o m p a r a t i v e s t u d y o f
“ r o u n d
O 6 t h e e a
” , “
l o n g O 6 t h e e a
” , “
b l a e d O 6 t h e e a
” o n
t h e d r u g e h a r a e t e r s
, s t r u e t u r e o f t i s s u e
,
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e h a r a e t e r s o f P o w d e r
,
P a p e r e h r o m a t o g r a p h y
,
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一
l a y e r
一 e h r o m a t o g r a p h y
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-
t r a e t
,
w e p r o p o s e d t h e s e i e n t i f i e b a s e f o r t h e i
-
d e n t i t ie a t i o n a n d q u a l i t y e s t im a t io n o f t h e
t h r e e
s o r t s o f 口占t h e c a m a n t dz l’s e r u d e d r u g .
K e y w o r d s r o u n d O 6 t h e e a
,
l o n g O 6 t h e e a
,
b l a e k O 6 t h e e a
,
p h a r m a e o g n o s t i e s t u d y
( O
r i g i n a l a r t ie l e o n p a g e 4 6 8 )
中国药学杂志 19 9 3年第28 卷第 8期
T h e e f f e e t o f e u l t u r e d C o
r
dy e eP s m i l i
-
t a ir s o n a n t i o x id a t i o n
G U A N D a i
一
y i
,
C H E N C u n
一
h u a
,
S U N L u
一
w e i
,
S U N L ia n
一
y u
,
Z H A N G X i u
一
q i n g
,
Z H A N G
Y u a n
一
P i n g (几￡ 2 0 5 万。护 i t a z of 尸乙八 , 1 2 2 0 0 1 )
C H E N S h u n
一 z h i
,
W U P e i
一
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,
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,
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C u l t u r e d C o
r
dy
c eP s m i l i ta
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i s ( C CM ) w a s
f o u n d t o h a v e m a r k e d p r o t e e t i v e e f f e e t o n l i p id
p e r o x id a t i o n ( L PO ) o f t i s s u e h o m o g e n a t e o f
l iv e r s
,
h e a r t
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k id n e y s a n d b r a i n s o f m i e e
,
T h e
d e g r e e o f L P O p r o d u e e d i n d i f f e r e n t t is s u e s
w a s n o t t h e s a m e
,
t h e i n h ib i t io n r a t e o f C C M
o f t h e s a m e e o n e e n t r a t i o n a t t h e s a m e d o s e
w a s e x t r e m e l y s i g n i f ie a n t l y d i f f e r e n t
, a n d t h a t
o f t h e h e a r t w a
s t h e h i g h e s t
.
T h e s u p e r o x id e
.
5 0 7
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