全 文 ：2.2　多糖冲剂中多糖含量测定　结果见表 4。本实验测得灰
树花多糖冲剂中多糖含量为 6.988%, RSD 为 1.992 , 说明本测
定误差较少。
表 4　灰树花多糖冲剂中多糖含量测定
样品号 吸光度A
对应的葡萄糖浓度 (μg·mL-1)
样品液多糖总量 mg
样品多糖含量 %
样品多糖含量平均 %
RSD %
1 0.262 4.445 355.625 7.113
2 0.258 4.383 350.625 7.013 6.988 1.992
3 0.251 4.273 341.875 6.838
2.3　回收率　结果见表 5。 本试验提取的回收率值大于
95%, RSD为 4.05 ,表明本试验的测定方法是可靠的。
表 5　多糖回收率试验
取样量 g 原含量 mg 加样量 mg 测定量 mg 回收率 % 平均回收率 % RSD %
2.5011 174.764 20.2 198.3125 101.722
2.5006 174.742 20.1 182.8329 93.837 97.614 4.050
2.5023 174.861 20.3 189.8578 97.283
2.4　多糖冲剂质量控制　①感官指标:本品为浅黄色颗粒 ,
用沸水冲泡后 ,溶液澄清透亮。冲泡后略有灰树花特有的香
味 ,味甜 ,口感舒适。 ②理化指标:水分≤4%, 多糖≥6.988%,
砷≤0.5 mg kg , 铅≤0.5 mg kg , 铜≤5.0 mg kg。 ③卫生学:应
符合中国药典规定。 ④鉴别:取本品加适量蒸馏水溶解 , 加入
4 倍体积的无水乙醇 , 静置后取沉淀 , 挥去溶剂后依法再处理
2 次。最后所得沉淀用 80%乙醇洗涤 2 次 , 挥去溶剂 , 加适量
蒸馏水溶解。取溶解液 1 mL, 加 10%α-萘酚试液 3 滴 ,沿试
管壁加浓硫酸1 mL, 有紫色环出现;或加裴林试液1 mL煮沸 1
min ,生成红棕色沉淀。
3　讨　论
目前微波技术应用于天然产物的提取是一个新的应用领
域 ,有关的应用报道虽然还不多 , 但已有的结果表明微波辅助
提取法比传统水提法相比具有提高产率 、缩短提取时间 、节约
能耗等优点[ 8 , 9] , 因此微波辅助提取法是一种高效的多糖提取
方法。本研究采用微波辅助提取技术对灰树花多糖进行提取
制备 ,相对于传统的水提法是一种改进 , 因为传统水提法耗能
多 ,生产周期长 , 成本也高。
参　考　文　献
[ 1] 　刘振伟 ,史秀娟.灰树花的研究开发现状[ J] .食用菌 , 2001 ,(4):
5-6.
[ 2] 　王增池.灰树花的生态条件与药用价值[ J] .中国食用菌 , 1998 ,
17(6):39-40.
[ 3] 　裘娟萍 ,孙培龙 ,朱家荣 ,等.灰树花深层发酵培养基的研究[ J] .
微生物学通报 ,2000 , 27(4):275-278.
[ 4] 　邢增涛 ,周昌艳 ,潘迎捷 , 等.灰树花多糖研究进展[ J] .食用菌
学报 , 1999 , 6(3):54-58.
[ 5] 　徐吉民.正交法在医药科研中的应用[ M] .中国医药科技出版社 ,
1987.
[ 6] 　刘成梅,万　茵 , 涂宗财 , 等.百合多糖脱蛋白方法的研究[ J] .
食品科学 , 2002 , 23(1):89-90.
超声波提取猪苓菌丝多糖工艺优选
陈德育　田广文＊　李学俊　舒志明
(西北农林科技大学生命学院 ,陕西杨陵 712100)
摘　要　正交试验结果表明 , 超声波能显著提高猪苓菌丝粗多
糖的提取率 ,最佳工艺为破壁时间 8min ,功率为 600 W ,85～ 90℃
热水浸提 1 h ,猪苓菌丝粗多糖的得率可达 11%。
关键词　猪苓菌丝体　多糖　超声波提取工艺　正交优选
文章编号　1000-8357(2006)06-0060-02
猪苓(Grifola umbellata Pilat)又名猪屎苓 、野猪苓 ,是一种
药用真菌 ,其药用价值在我国古代早有记载 ,是重要的传统中
药[1 ,2 ,8] 。猪苓的有效成分为猪苓多糖。猪苓多糖能显著降低
肝脏中氧化脂质的含量 , 清除自由基损伤 ,提高细胞中超氧化
物歧化酶和肝脏过氧化氢酶的活力 ,对延缓组织细胞老化 、保
护机体抗老防衰十分有益[1 ,7] 。随着我国医疗事业的发展 , 以
猪苓为原料的成品药业在不断开发。有关猪苓的研究也愈来
愈受关注[ 8] 。本研究以液体发酵制得的猪苓菌丝体为材料 ,
在参考同行相关试验的基础上[ 4 ,5 ,6] , 通过正交试验方法优选
出提取猪苓菌丝粗多糖的最佳工艺。
1　材料与方法
1.1　试验材料　猪苓菌丝体通过自行设计一套简易液体发
酵装置 , 采用配方为玉米粉1%,麸皮 1%, 蔗糖2%, KH2PO4 0.
1%,MgSO4 0.05%,酵母膏 0.5%, 发酵 7 d 获得猪苓菌丝体低
温烘干备用。
1.2　仪器及设备　JY98-Ⅲ超声波细胞粉碎机 、FW-400A倾
斜式高速万能粉碎机 、RE-52AA 旋转蒸发仪 、SHB-Ⅲ循环式
多用真空泵 、电热鼓风烘箱 、TDL-5 落地式离心机 、真空干燥
箱 、自制简易液体发酵装置。
1.3　试验方法
1.3.1　操作工艺　干猪苓菌丝体※高速万能粉碎机粉碎※
称取 9份 10 g样分别放入 500 mL烧杯中加水 200 mL※按(正
交试验设计方案)超声波破壁处理※70℃、80℃、90℃水浸提※
离心※残渣再浸提 30 min ※离心混合上清夜※减压浓缩※
85%乙醇沉淀※离心取不溶物※低温干燥※猪苓粗多糖。
1.3.2　正交试验设计　本实验选取四因素三水平正交设计
试验表 L9(34), 以超声波破壁时间 、功率和水浸提时间 、温度
作为优选四因素[3 ,4] ,见表 1 、表 2。
[ 7] 　张惟杰.糖复合物生化研究技术[ M] .第 2版.杭州:浙江大学出
版社 , 1998.
[ 8] 　龚盛昭 ,杨卓如.微波辅助提取黄芪多糖的工艺研究[ J] .华南理
工大学学报(自然科学版), 2004 , 32(8):93-96.
[ 9] 　范志刚 ,李玉莲 ,杨莉斌 ,等.微波技术对槐花中芸香甙浸出量影
响的研究[ J] .解放军药学学报 ,2000 , 16(1):36-38.
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1.3.3　多糖提取率计算　多糖得率(%)=粗多糖干重 猪苓
菌丝体干重×100
表 1　超声波提取猪苓菌丝多糖因素水平
因　　素 水　　平
1 2 3
A.超声波破壁时间 min 4 6 8
B.超声波功率 W 400 600 800
C.水浸提时间 h 1.0 1.5 2.0
D.水浸提温度 ℃ 70 80 90
表 2　L9(34)正交试验方案与结果直观分析
试验序号
因　　素
A B C D
粗多糖得率 %
1 4 400 1.0 70 6.41
2 4 600 1.5 80 8.89
3 4 800 2.0 90 9.07
4 6 400 1.5 90 8.71
5 6 600 2.0 70 8.42
6 6 800 1.0 80 10.08
7 8 400 2.0 80 9.35
8 8 600 1.0 90 11.53
9 8 800 1.5 70 9.15
K1(%) 24.37 24.47 28.02 23.98
K2(%) 27.21 28.84 26.75 28.32
K3(%) 30.03 28.30 26.84 29.31
K1(%) 8.21 8.16 9.34 7.99
K2(%) 9.07 9.61 8.92 9.44
K3(%) 10.01 9.43 8.95 9.77
R 1.89 1.45 0.42 1.78
2　结果与讨论
2.1　试验结果　据表 1 、2正交设计方案进行多糖提取工艺优
选 , 其结果分析见表 2。 由表 2 可得 , 最佳处理组合为
A3B2C1B3 ,即 8 min、600 W、1 h 、90℃。影响多糖提取率因素的
重要性为A>D>B>C ,即超声波破壁时间和水浸提温度影响
最大 ,处理功率次之 , 浸提时间影响最小。
2.2　结论分析与讨论　本实验所选四因素对猪苓菌丝粗多
糖的提取率均有不同程度影响 ,见图 1 ～ 4。
2.2.1　超声波破壁时间最适条件确定　超声波破壁时间
4 min ,菌丝粗多糖的得率 8.12%, 6 min 为 9.07%, 8 min 为
10.01%, 可见超声波处理时间长多糖得率高。但在实验中发
现 ,处理时间长的品液温度较高 、不愉快气味浓 、品液色泽较
深 ,因而 , 破壁时间不宜超过 8 min。
2.2.2　超声波功率最适条件确定　超声波功率 400 W时 , 粗
多糖得率 8.16%, 600 W为 9.61%, 800 W 为 9.43%。 显然 ,
600 W 和800 W粗多糖得率较 400 W提高 , 而超过 600 W已意
义不大 ,因此 , 选 600 W较好。
2.2.3　水浸提时间和温度最适条件确定　图 3 可看出 , 水浸
提时间过长粗多糖得率反而下降 , 所以水浸提时间最好选
1.0 h;而水浸提温度 70℃、80℃、90℃时粗多糖得率分别为
7.99%、9.44%、9.77%,水浸提温度选 80 ～ 90℃为宜。
2.2.4　讨　论　从正交试验分析结果可知 , 超声波破壁时间
图 1　超声波破壁时间对猪苓多糖提取率的影响
图 2　超声波功率对猪苓多糖提取率的影响
图 3　水浸提时间对猪苓多糖提取率的影响
图 4　水浸提温度对猪苓多糖提取率的影响
对猪苓菌丝体粗多糖提取率有明显影响 , 这可能是由于猪苓
菌丝细胞壁含有使菌丝具有较好维持力的纤维素 、半纤维素
等成分 ,而胞内多糖就存在于菌丝的细胞壁内 , 高频率的超声
波及其产生的“空化效应”降低了菌丝细胞壁的维持力 , 胞内
多糖较容易从细胞内释放出来[ 5] ;水浸提温度对粗多糖提取
率影响显著 ,主要是由于猪苓多糖在水温 90℃以下 ,随温度的
提高其多糖溶解度有所增加 , 但超过 90℃时有可能对多糖结
构有破坏[ 5] ;而水浸提时间影响较小的因是本设计最短时间
为 1.0 h , 残渣再浸提时间 0.5 h , 合计 1.5 h , 足以使猪苓菌丝
中的大部分多糖溶解析出 , 再延长时间反而会使多糖水解量
加大 ,不利于得率提高。
超声波提取液体发酵猪苓菌丝体粗多糖的最佳工艺应为
破壁时间 8 min ,功率 600 W , 85 ～ 90℃热水浸提 1 h , 粗多糖
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小型常压锅炉在香菇料棒灭菌上
的 应 用 技 术
吴志贤
(浙江省庆元县松源镇农技站 , 庆元 323800)
文章编号　1000-8357(2006)06-0062-01
袋料香菇栽培中 , 料棒灭菌是生产的重要环节。 浙西南
山区的庆元县是香菇主产县 , 该县菇农香菇料棒灭菌从前采
用土锅灶灭菌法。推广小型常压锅炉在袋料香菇料棒灭菌上
的应用 , 与土锅灶灭菌法相比较 , 具有两个优点:一是灭菌程
度一致;二是节约成本。该县袋料香菇年生产量 8 000 万袋 ,
如果全面推广这一技术 ,一年可节约费用 83.84 万元。效益显
著。现将应用技术总结如下。
1　设备材料　购置小型常压锅炉 1 只 , 约 1 600 元;4 根长
2.8 m的横木;6根长 3.0 m的纵木;15块长 2.8 m×宽 15 cm×
厚 2.5 cm 的木板;20块长 3.0 m×宽 15 cm×厚 2.5 cm 的木
板;一张长×宽为 4 m×4 m 、厚 0.04 mm 的聚乙烯薄膜;8 根2
m 长 、口径 12 cm 的木柱;8 条 6 mm 钢筋制成的卡套;一张宽 8
m 、长 9 m 、厚 0.04 mm 聚乙烯薄膜;一张彩条尼龙布。设备材
料投资费约 2 000元 。设备出租给菇农灭菌每次租金 100 元 ,
出租 20 次就可收回设备成本。由此当地派生出一个香菇料
棒灭菌设备出租的服务行业。
2　料棒叠堆　灭菌时 ,在香菇生产户就近选择一处 4 m×5 m
的平整场地 ,可选室内 , 也可选露天地。在场地中心将长×宽
为 4 m×4 m 、厚 0.04 mm 的聚乙烯薄膜铺在地上 , 在其上搭
得率可达 11%。
需进一步探讨的问题有 ,本法提取的粗多糖纯度 、超声波
破壁对猪苓多糖活性的影响以及水浸提液 pH 值对多糖提取
率的影响程度等。
参　考　文　献
[ 1] 　徐锦堂.中国药用真菌学[M] .北京医科大学 , 中国协和医科大
学联合出版 , 1997.
[ 2] 　郭顺星 , 徐锦堂.等.猪苓生物学特性的研究进展[ J] .中国中
药 , 1996 ,(21):9.
[ 3] 　郑少华 , 姜奉华.试验设计与数据处理.中国建材工业出版社
[M] , 2004年 3:58-126.
[ 4] 　高娟娟 , 梁安慧 ,等.超声波对杏鲍菇多糖提取率影响试验[ J] .
食用菌 , 2005(6):49-50.
[ 5] 　张桂春 , 辛晓林 , 李绍龙.榆黄菇发酵全液多糖提取工艺的优化
[ J] .食用菌 , 2005(4):62-63.
[ 6] 　张立娟 , 于国萍.细胞破壁酶在黑木耳多糖提取中作用条件的
研究[ J] .食用菌 , 2005(3):8-10.
[ 7] 　罗　英 , 李　梁.猪苓生长的土壤条件研究[ J] .核农学报 ,
2002, 16(2):115-118.
[ 8] 　许广波 , 傅伟杰 ,等.我国猪苓研究进展[ J] .菌物研究 , 2003, 1
(1):58-61.
建 3.0 m×2.8 m 的木板平台 。平台搭建:底部铺 4 根 2.8 m
长的横木 ,(用杉木制成高 14cm 条木 , 纵木同), 横木上铺 6 根
长 3.0 m 的纵木。纵木上铺长 2.8 m ,宽 15 cm , 厚2.5 cm 的木
板 ,木板间留 5 cm 间隙以利上汽 ,然后在平台上叠堆 6行香菇
料棒。叠堆前在边长为 3 m 的两边各立 4根木柱 ,底部和上部
套上钢筋卡 ,沿木柱内则立上长 3.0 m 的木板 , 随料棒叠高加
上木板。待香菇料棒叠到木柱顶端时 , 在上面盖一张彩条尼
龙布。叠堆完成后 ,用宽幅8 m、长 9 m 、厚 0.04 mm 聚乙烯薄
膜由上向下包裹 , 水平扎上几道绳子。
3　灭菌要求　小型常压锅炉设置于离料棒堆 1.0 m 的边上 ,
接出 2根蒸汽管插料棒堆底部横木间隙中 , 使蒸汽从木板缝
上汽。锅炉进火至料温达 97～ 100℃的状态下 , 保持恒温 12～
16 h , 即可彻底灭菌。约需持续进火 60 h , 达到灭菌效果。灭
菌结束后 ,待料棒温度自然降至 60～ 70℃时 ,方可趁热把料棒
搬到冷却室冷却 , 若在料温高于 80℃时搬动 , 易发生料棒袋膜
破裂。
4　效益分析　香菇料棒采用土锅灶灭菌法 , 每灶一次只能装
料棒 1 200 余袋 ,每灶灭菌时间 48 h , 折合 6 个标准工 , 需消耗
柴木 400 kg。一个年生产袋料香菇 4 800袋的农户 , 灭菌要分
4灶次才能完成。需化工 24 d(折合标准工), 需消耗柴木1 600
kg。不仅工作劳动强度大 , 而且费时 、费工 、费柴木。推广小
型常压锅炉在袋料栽培香菇料棒灭菌上的应用 , 一次能给 4
800袋香菇料棒灭菌 , 灭菌时间 60 h , 折合 8 个标准工 ,需消耗
柴木 1 000 kg。据庆元县松源镇下滩村介绍 , 小型常压锅炉在
袋料栽培香菇料棒灭菌:一是具有灭菌程度一致;二是节约成
本 ,一个年生产袋料香菇 4 800 袋的规模户 , 节省 16 个标准
工 、节省柴木 600 kg。按当地民工工资 30元 d 、用工项可节省
480元;当地柴木单价 0.24 元 kg , 用柴项可节省 144 元 , 扣除
租用锅炉设备费用 100 元 次 , 可节省费用 524 元。 这一技术
已在该县推广应用。该县袋料香菇年生产量 8 000 万袋 , 如果
全面推广这一技术 , 一年可节约费用 83.84 万元。
致力标准化　西峡食用菌产业
与 国际 接 轨
5月 20 ～ 21 日 , 中国食品土畜进出口商会香菇标准化(西
峡)出口基地“联合体” 成立大会暨香菇标准化(西峡)研究推
广中心挂牌仪式在西峡举行。
香菇标准化(西峡)出口基地“联合体”是由中国食品土畜
进出口商会和西峡县人民政府共同组建的标准化产销一体化
的经济合作组织。通过产销经纪人的联合运作 , 创造品牌香
菇 ,实现香菇生产的可持续发展 ,保障香菇出口价格体系的良
性化 ,进而达到行业利益最大化。“联合体”将设置 4 大组织
机构;3 000 t标准化香菇栽培基地 , 3 000 t标准化香菇收购加
工基地 ,标准化香菇研究推广中心 ,食用菌集团总公司。
会议讨论通过了香菇标准化(西峡)出口基地“联合体”章
程和试行规则 , 选举产生了“联合体”组织机构。香菇标准化
(西峡)研究推广中心也同时成立 , 中国食品土畜进出口商会
副会长杨胜军和西峡县县长张生起为研究推广中心揭牌。
(关良洲)—62—
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