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襄荷脱毒组培苗培养技术



全 文 :襄荷脱毒组培苗培养技术
石拥军 1 , 李 进 2 , 顾 绘2 , 胡桂华 2 , 许逢美 2
(1.江苏省南通市科学技术局 ,江苏南通 226005;2.江苏省南通市蔬菜科学研究所 ,江苏南通 226007)
  摘要:研究襄荷脱毒组培苗培养技术 ,结果表明:由 MS+KT0.6mg/L+NAA0.1 mg/L接种不定芽 ,增殖系
数可达 5.6, 并且不定芽健壮;由 1/2MS+IBA0.1 mg/L生根效果最好 , 25 d后生根率达 100%, 并且根系粗壮
发达。
  关键词:襄荷;培养基;激素;试管苗
  中图分类号:S63  文献标识码:A  文章编号:1002-1302(2006)05-0131-02
(上接第 130页)
2.3 降低了成本
同接种室(箱)相比 ,用农用塑料薄膜制作接种
帐成本很低 ,而且制作方法简单 ,一个塑料接种帐可
用 2 ~ 3年。另外 ,接好的菌棒直接用地膜盖垛就地
发菌 ,待菌圈长至 5 ~ 10 cm(约 15 ~ 20 d)即可掀去
地膜 ,进行倒垛 ,省去了原普遍使用的套袋发菌后刺
孔增氧至脱袋的工序 ,既节约了成本 ,又省工省时。
3 讨论
通过多次生产试验证明 ,在菇棚内用接种帐 、打
穴接种 、塑料地膜盖垛发菌的生产技术是高效可行
的。在本接种技术中 ,有两点创新之处:一是自制成
本低的塑料接种帐 ,克服了接种箱操作不便 、接种室
消毒不彻底的缺点;二是用地膜盖垛进行发菌 ,改变
了传统的打穴接种后用胶布(或石蜡)封口或是套
袋发菌的方法 。本接种技术适合各种熟料袋栽的菌
菇类 ,是一种值得在食用菌工厂化 、规模化生产中推
广使用的高效接种技术 。
  襄荷(Z.miogaRoscoe)又名茗荷 、阳藿 、野姜 、
襄草 ,膨大花序 、嫩芽 、花轴和地下茎都可食用 ,花 、
叶 、根 、茎均可入药 ,是一种极具地方特色的高档蔬
菜 。随着人们生活水平的提高 ,市场需求量越来越
大 ,并出口日本等国家 ,种植经济效益显著 。生产上
农民长期小面积利用地下茎繁殖 ,由于病虫害侵染
病毒积累等原因 ,造成了种性退化 ,产量变低 ,品质
变差。江苏省南通市蔬菜科学研究所以利用组培技
术对襄荷进行脱毒提纯 ,成功地获得了脱毒组培苗 。
1 材料与方法
1.1 供试材料
如东地方品种白花襄荷和红花襄荷。
1.2 培养基
1.2.1 基本培养基 以 MS为基本培养基 ,加琼脂
收稿日期:2006-02-09
基金项目:江苏省南通市科技攻关项目(编号:L99001)。
作者简介:石拥军(1963—),男 ,新疆石河子人 ,农艺师 ,主要从事农
业科研管理工作。 Tel:(0513)85128892。
0.7%,糖 3%, pH值为 5.8。
1.2.2 增殖培养基 本实验共配制了 14种增殖培
养基 ,激素配比如下:(1)MS+BA0.2 mg/L+IAA
0.1 mg/L;(2)MS+BA0.4 mg/L+NAA0.1 mg/L;
(3)MS+BA0.6 mg/L+IAA0.1 mg/L;(4)MS+
BA0.8 mg/L+IAA0.1 mg/L;(5)MS+BA1.0
mg/L+IAA0.1mg/L;(6)MS+KT0.2 mg/L+IAA
0.1 mg/L;(7)MS+KT0.4mg/L+NAA0.1 mg/L;
(8)MS+KT0.6 mg/L+NAA0.1 mg/L;(9)MS+
KT0.8 mg/L+IAA0.1 mg/L;(10)MS+KT1.0
mg/L+IAA0.1mg/L;(11)MS+BA0.1 mg/L+KT
0.1 mg/L+IAA0.1 mg/L;(12)MS+BA0.2 mg/L
+KT0.2 mg/L+NAA0.1 mg/L;(13)MS+BA0.3
mg/L+KT0.3 mg/L+IAA0.1 mg/L;(14)MS+BA
0.4 mg/L+KT0.4 mg/L+NAA0.1 mg/L。
1.2.3 生根培养基 本实验共配制了 9种生根培
养基 , 激素配比如下:(1)MS;(2)MS+IAA0.1
mg/L;(3)MS+NAA0.1 mg/L;(4)MS+IBA0.1
mg/L;(5)1 /2MS+IAA0.1mg/L;(6)1 /2MS+NAA
—131—江苏农业科学 2006年第 5期DOI :10.15889/j.issn.1002-1302.2006.05.052
0.1 mg/L;(7)1/2MS+IBA0.1 mg/L;(8)MS+
NAA0.1 mg/L+IBA0.1 mg/L;(9)1 /2MS+NAA
0.1mg/L+IBA0.1mg/L。
1.3 培养方法
1.3.1 外植体消毒 春天选择具有本品种特征特
性 、刚刚萌发的地下茎的顶芽作为外植体 ,在流水下
冲洗 4h以上 ,用滤纸吸干表面残留水分 ,在 75%的
酒精中消毒 8 s,再用 0.1% HgCl2溶液浸泡 8 min,
用无菌水冲洗 6遍以上 ,即完成外植体消毒工作。
1.3.2 诱导脱毒苗试管苗 将 1.3.1所获得地下
茎的顶芽 ,在解剖镜下剖掉外层苞片 ,露出茎尖生长
点 ,用解剖刀切取生长点(0.3 mm以下),垂直接入
含高浓度激素培养基上 (MS+BA4.0 mg/L+IAA
0.1mg/L)。为防止污染 ,每只试管只接入 1只外
植体 ,在光照 12h/d、光强 1 500 ~ 2 000 lx、室温 24
~ 25 ℃条件下 ,培养 50 d即可获得脱毒苗试管苗 。
1.3.3 细胞分裂素对不定芽的增殖作用 将 1.3.
2所获得的脱毒苗试管苗丛芽 ,用枪头镊和手术剪
剪下分成小株 ,按大小垂直接种于增殖培养基上 。
为了降低生产成本 ,增殖培养一般用 240 ml普通玻
璃瓶代替试管或三角瓶 ,每瓶可接入 8 ~ 10个单株 。
此阶段可不断重复至所需数量。培养条件与 1.3.2
相同 ,培养 25 d统计不定芽的增殖情况 。
1.3.4 生长素对试管苗生根的影响 将 1.3.3所
得不定芽分成单株 ,选健壮的分别垂直接入生根培
养基。 25d后观察统计生根情况 ,培养条件与 1.3.2
相同。
2 结果与分析
2.1 细胞分裂素对襄荷不定芽诱导的增殖作用
从表 1统计数据分析可得知 , KT对襄荷不定芽
诱导的增殖效果好 ,配方 8增殖系数达 5.6,并且不
定芽生长健壮 ,随着 KT浓度的提高增殖系数进一
步提高 ,配方 10增殖系数达 6.3。但配方 9、配方 10
不定芽较纤细 ,生根培养较困难 ,假植成活率低 。
BA对不定芽的增殖作用不理想 ,增殖系数达不到
5, BA、KT相互作用对不定芽的增殖作用较差 ,增殖
系数多在 3.5以下(表 1)。
2.2 生长素对试管苗生根的影响
从表 2数据分析得知:MS浓度减半 , IBA有利
于试管苗生根;各处理中以配方 7生根效果最好 , 15
d后生根率达 73.3%, 25 d后生根率达 100%,并且
表 1 细胞分裂素对襄荷不定芽诱导的增殖作用
增殖培养基序号 接种芽数 25d后芽数 增殖倍数
1 150 304 2.0
2 150 320 2.1
3 150 453 3.0
4 150 681 4.5
5 150 709 4.7
6 150 500 3.3
7 150 658 4.4
8 150 842 5.6
9 150 895 6.0
10 150 952 6.3
11 150 396 2.6
12 150 450 3.0
13 150 498 3.3
14 150 523 3.5
表 2 生长素对襄荷试管苗生根的影响
生根培养
基序号 总苗数
15d
生根
株数
生根率
(%)
25d
生根
株数
生根率
(%)
根系
外观
1 120 3 2.5 5 4.2 细短
2 120 25 20.8 51 42.5 细长
3 120 45 37.5 67 55.8 粗短
4 120 31 25.9 48 40.0 粗短
5 120 33 27.5 62 51.7 细长
6 120 42 35.0 55 45.9 粗短
7 120 88 73.3 120 100.0 粗长
8 120 40 33.3 78 65.0 细长
9 120 56 46.7 65 54.2 粗长
根系粗长发达;其余配方生根效果都不太好 ,并且根
系不发达 , MS培养基基本不生根(表 2)。
2.3 试管苗的假植
生根的试管苗在温室炼苗 7 ~ 10d,用水洗尽根
部残留培养基 ,假植到基质上 ,基质用泥碳 ∶珍珠岩
∶田园土 =2∶1 ∶2配制 。假植搭小拱棚保温保湿 ,
每天上午 9∶00、下午 4∶00用喷雾器对叶片喷雾保
湿 ,苗一般都能成活 。
3 讨论
不定芽增殖过程中 ,随着培养世代的增加 ,激素
会在植株体内积累 ,容易出现玻璃化现象 ,交替使用
不含激素的 MS培养基 ,可有效地减少玻璃化现象
的发生。在生根培养基中加入 0.1%的活性炭 ,可
吸附有毒的代谢产物 ,有利于生根培养 ,提高假植成
活率 。用脱毒组培技术培养生产的襄荷 ,恢复了原
有的种性 ,植株生长旺盛整齐 ,色泽鲜艳 ,香味浓 ,可
产出商品襄荷 500 ~ 750kg/667m2。
—132— 江苏农业科学 2006年第 5期