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不同种植密度对白花曼陀罗不同部位总黄酮含量的影响



全 文 :北方园艺2013(02):153~155 ·中草药·
第一作者简介:李敏(1984-),女,硕士,助教,研究方向为天然药物
化学。E-mail:limin1042004@163.com.
基金项目:吉林农业科技学院校内青年基金资助项目(2011207)。
收稿日期:2012-09-19
不同种植密度对白花曼陀罗不同部位
总黄酮含量的影响
李   敏,赵   权,武 晓 林
(吉林农业科技学院 中药学院,吉林 吉林132101)
  摘 要:以白花曼陀罗种子为试材,采用紫外分光光度法,研究了不同种植密度对白花曼陀
罗不同部位总黄酮含量的影响。结果表明:白花曼陀罗叶和花中总黄酮含量明显比种子中总黄
酮含量高,在行距×株距=60cm×60cm的种植密度下,种子、叶和花中总黄酮含量明显比其它
种植密度的含量高。
关键词:白花曼陀罗;总黄酮;紫外分光光度法
中图分类号:S 681.9 文献标识码:B 文章编号:1001-0009(2013)02-0153-03
  白花曼陀罗(Datura stramonium L.)属茄科
(Solanales)曼陀罗属(Datura)1a生草本植物,别名醉心
花、狗核桃,分布于热带和温带,生于荒地、旱地、宅旁、路
旁、向阳山坡、林缘、草地[1]。全株有剧毒,其叶、花、籽均
可入药,味辛性温,有大毒,特别是种子毒性最大[2],药性
镇痛麻醉、止咳平喘[3]。主治咳逆气喘、面上生疮、脱肛
及风湿、跌打损伤,还可作麻药,白花曼陀罗花不仅可用
于麻醉,而且还可用于治疗疾病[4-5]。目前对白花曼陀
罗化学成分系统预试结果表明,白花曼陀罗中还含有黄
酮、多糖、生物碱、鞣质类、甾体、萜类、蒽醌及其甙类、香
豆素及其甙类、皂甙类、挥发油、油脂类、氨基酸等化学
成分[6]。
由于白花曼陀罗生理活性较强,应用广泛,目前白
花曼陀罗为国际市场上生产和流通量最大的8种药用
植物之一。在白花曼陀罗化学成分研究方面,姚士岩
等[7]用乙醇从白花曼陀罗叶、花中分离并鉴定了莨菪碱
和东莨菪碱;金振国等[8]对白花曼陀罗植株和果实挥发
油化学成分进行了对比分析;江恒等[9]测定了白花曼陀
罗种子中托烷类生物碱的含量。但尚鲜见有关种植密
度对总黄酮含量及糖类成分含量影响的相关文献报道。
现以白花曼陀罗种子为试材,采用紫外分光光度法,研
究了不同种植密度对白花曼陀罗不同部位总黄酮含量
的影响,以期为提高白花曼陀罗资源的利用率提供
参考。
1 材料与方法
1.1 试验材料
试验所用材料采自吉林农业科技学院南校区药植
园内3种种植密度下(行距×株距为A:60cm×70cm、
B:60cm×60cm、C:60cm×50cm)长势好、无病虫害的
白花曼陀罗种子、叶及花。放阴凉处阴干至恒重,编号
为种子A、种子B、种子C,叶A、叶B、叶C,花A、花B、花
C,保存备用。试验仪器:电子天平(梅特勒);722分光光
度计(上海精密仪器有限公司);恒温槽(上海仪器厂);刻
度吸管;量筒;容量瓶;锥形瓶。试验试剂:芦丁标准品
(吉林生物制品检验所);3,5-二硝基水杨酸;无水乙醇;
甲醇;5%亚硝酸;10%硝酸铝;0.1mol/L氢氧化钠(以
上试剂均为分析级)。
1.2 试验方法
1.2.1 标准溶液制备 精密称取在120℃下减压干燥
至恒重的芦丁对照品10mg于100mL容量瓶中,加入
适量甲醇,于水浴上微热,溶解,放冷,加入甲醇定容至
刻度,摇匀。即得浓度为0.1mg/mL的芦丁对照品
溶液。
1.2.2 样品溶液的制备 精密称取干燥至恒重的不同
种植密度白花曼陀罗种子(花、叶)粉末1.000g于索氏
提取器中,用石油醚加热回流至无色,取出,干燥。再用
甲醇提取8h,将提取液移入100mL容量瓶并定容至刻
度,摇匀,备用。
1.2.3 标准曲线制备 精密吸取对照品溶液0、1.0、
2.0、3.0、4.0、5.0mL,分别置于10mL容量瓶中,各加水
至5mL,加入5%亚硝酸钠溶液0.3mL,摇匀,静置6min,
加入10%硝酸铝溶液0.3mL,摇匀,静置6min,加入
0.1mol/L氢氧化钠溶液4mL,再加水定容至刻度,摇
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·中草药· 北方园艺2013(02):153~155
匀,静置15min。在波长510nm处测定吸光度值[10],以
吸光度值A为纵坐标,芦丁浓度C为横坐标,绘制标准
曲线。
1.2.4 样品测定 分别精密吸取供试品 A、B、C溶
液1mL于3个10mL容量瓶中,各加水至5mL,加入
5%亚硝酸钠溶液0.3mL,摇匀,静置6min,加入10%硝
酸铝溶液0.3mL,摇匀,静置6min,加入氢氧化钠试液
4mL,再加水定容至刻度,摇匀,静置15min。在波长
510nm处测定吸光度值。根据标准曲线计算总黄酮含
量。3次重复,取平均值。
2 结果与分析
2.1 绘制标准曲线
经线性回归得回归方程为y=7.9857x-0.0041,
R2=0.9981,见图1。
图1 芦丁标准曲线
Fig.1 Rutin standard curve
2.2 精密度试验
精密称取种子C样品1.000g,5份,按1.2.2项下
方法提取,按1.2.4项下操作方法测定吸光度并计算总
黄酮含量。由表1可知,RSD<2%,表明此方法精密度
良好。
表1 精密度试验
  Table 1 Theprecsion experiment
序号 含量/% 平均值/% RSD/%
1  1.920
2  1.965
3  1.970  1.949  1.013
4  1.944
5  1.949
2.3 加样回收率试验
精密称取种子A和叶A样品,各3份,分别将对照溶
液1.0、2.0、3.0mL置于磨口锥形瓶中,按1.2.2项下方法
提取,按1.2.4项下方法操作测定吸光度,并计算回收率。
由表2可知,平均加样回收率为100.12%,RSD=1.386%,
表明此方法测定结果准确。从精密度和回收率可看出,该
试验方法准确度和精密度均良好,方法可行。
2.4 不同种植密度对白花曼陀罗不同部位总黄酮含量
的影响
由表3各样品总黄酮含量测定结果可知,3种种植
   表2 加样回收率试验
  Table 2 The rate of recovery experiment
序号
取样量
/mL
标准品加入量
/mL
检出量
/mg
回收率
/%
平均加样回
收率/%
RSD
/%
种子A1  1  1  0.448  101.74
种子A2  1  2  0.536  99.71
种子A3  1  3  0.664  103.64
叶A1  1  1  1.636  96.92
叶A2  1  2  1.758  98.37
叶A3  1  3  1.894  100.34
100.12  1.386
  表3 总黄酮含量
  Table 3 The total flavonoids content
编号 种子A 种子B 种子C 叶A 叶B 叶C 花A 花B 花C
总黄酮含
量/%
0.8537 0.9360 0.8592 3.6972 4.0620 3.3685 3.9530 4.4917 3.5877
平均值
/%
0.8830  3.7092  4.0108
密度下的白花曼陀罗叶和花中总黄酮含量均较高,而种
子中总黄酮含量均较低。白花曼陀罗各不同部位在3
种不同种植密度比较中,株行距为60cm×60cm的种植
密度总黄酮含量普遍高于其它2种种植密度。
3 结论与讨论
该试验结果表明,白花曼陀罗叶和花中的总黄酮含
量较高,且与种子间存在显著差异,但这种差异与种植
密度无关。种植密度比较结果显示,B组白花曼陀罗各
部位总黄酮含量较高,与其它2组存在差异,与 A
(行距×株距=60cm×70cm)、C(行距×株距=60cm×
50cm)比较,B(行距×株距=60cm×60cm)种植密度更
有利于白花曼陀罗植物体内成分的富集。
该试验旨在研究不同种植密度对白花曼陀罗不同
部位总黄酮成分影响,结果表明,密度对各部位总黄酮
成分含量均有一定的影响。该研究所得的数据含量较
低,可能是由于采收和保存过程中受到影响,也有可能
是因为提取工艺的选择造成的,因此试验提取方案还有
待改进。该试验所设密度组较少,进一步了解密度对白
花曼陀罗成分的影响,有待进一步扩大密度范围再进行
深入研究。
参考文献
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版社,1999:145.
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北方园艺2013(02):155~158 ·中草药·
第一作者简介:方海涛(1973-),男,蒙古族,在读博士,副教授,研
究方向为森林保护。
责任作者:段立清(1960-),女,博士,教授,博士生导师,研究方向
为害虫综合治理。
基金项目:内蒙古自治区高等学校科学研究资助项目(NJ10168)。
收稿日期:2012-10-10
外源茉莉酸甲酯诱导蒙古扁桃物理防御反应的研究
方 海 涛1,2,张   乐2,邹 明 新2,段 立 清1
(1.内蒙古农业大学 林学院,内蒙古 呼和浩特010019;2.包头师范学院 生物科学与技术学院,内蒙古 包头014030)
  摘 要:研究了不同浓度的茉莉酸甲酯(MeJA)对蒙古扁桃木质素、晶细胞及水势的诱导作
用及其时间效应,探讨了外源茉莉酸甲酯是否对蒙古扁桃产生诱导防御反应。结果表明:茉莉酸
甲酯处理使蒙古扁桃叶片木质素含量增加,中脉周围的晶细胞数量增多,水势下降。3种浓度
MeJA处理蒙古扁桃,叶片木质素含量均于第3天增幅最大,至第5天木质素含量与对照组无差
异;0.10mmol/L MeJA处理效果显著高于其它2种浓度处理效果(P<0.05)。3种浓度MeJA处
理蒙古扁桃1d后,叶片水势显著低于对照(P<0.05);处理3、5d后,叶片水势先升高后降低,水
势均低于对照,但差异不显著(P>0.05)。3种MeJA处理的蒙古扁桃,叶中脉周围晶细胞数量显
著高于对照组。
关键词:蒙古扁桃;茉莉酸甲酯;木质素;晶细胞;水势
中图分类号:S 482.8 文献标识码:A 文章编号:1001-0009(2013)02-0155-04
  茉莉酸甲酯(Methyl Jasmonate,MeJA)被认为是一
种新型的植物激素,参与植物种子萌发、生根和开花、果
实成熟、胚胎发育、气孔关闭、色素合成、衰老等各种生
长发育过程[1]。外源茉莉酸甲酯还能够诱导植物的抗
虫性,1×10-3 mmol/L的MeJA诱导植物基因表达水平
   
的变化[2-3]。施用MeJA能诱导植物体大豆营养贮藏蛋
白酸性磷酸酶VspB的表达,引起叶片水势降低,渗透压
升高,从而影响取食者的形态、取食行为以及它们的空
间、时间分布。另外,植物细胞在受到茉莉酸甲酯作用
下,细胞会发生一系列形态、生理上的变化[4-5]。用MeJA
水溶液喷云杉幼苗,木质部导管数目增多,树脂导管中
出现萜类物质积累[6]。MeJA处理烟草(Nicotiana taba-
cumL.)、水稻(Oryza sativa L.)、哈密瓜(Acidovorax
subsp.)幼苗,可明显提高幼苗的木质素含量,而且木质
素含量与植物抗病虫能力呈正相关[6-7]。
蒙古扁桃(Prunus mongolica)是蒙古高原特有的古
   
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Effect of Planting Density on Total Flavonoid in
Different Parts of Datura stramoniumL.
LI Min,ZHAO Quan,WU Xiao-lin
(Colege of Traditional Chinese Medicine,Jilin Agricultural Science and Technology Colege,Jilin,Jilin 132101)
Abstract:Taking the seed of Datura stramoniumL.as the material,the total flavonoid in diferent planting densities of
DaturastramoniumL.were determined by UV spectrophotometric.The results showed that the total flavonoids in Datura
stramoniumL.leaves and flowers were significantly higher than seeds.In B(row,planting spacing of 60cm×60cm)
planting density,the total flavonoid in seeds,leaves and flowers were higher than the others planting densities.
Key words:Datura stramoniumL.;total flavoniod;UV spectrophotometry
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