全 文 :第 01卷 第 2期 中国食用菌 EDB I LFE UNG I OF C H I N A
银耳菌丝体多糖对小鼠免疫功能的影响
一。 。 - , 。 ~ 。 郑宝灿 马桂荣 (山东烨 湘 脚 10) ~ 。 . . 一。一一摘耍 本 丈研 完了抓耳蔺丝体 多特时 小 民免疚功能的影响 。 实脸 结 果表明 : 每天灌胃。 . 5 或 1 . 。叮 k g TM P, 连
续即天 , 不仅可 明显地捉进小 鼠特异性抗体 的形成 , 亦可
明显地促进 小 泉腹腔 巨噬细 胞的 吞噬功 能 , 增加外周血 T
琳巴扫 胞教圣 , 延提胸膝姜编 , 并可 时抗 由 C Y 所致的栩
班免渡和体液 免疚低下 的作用 。
关键词 银耳菌丝体 多枪 淋 巴细 胞 吞噬作用
环碑跳胶 免痰功能
银耳 ( T r e o e l l a f u c f f o r o f s B e r k . )
又名白木耳 , 历代医药学家认为具有滋阴润
肺 , 生津养胃 , 嫩肤补肾 , 提神 健 脑 之 功
效 , 作为滋补强壮 、 扶正固本的 名 贵 补 益
中药 , 近年来对银耳多糖 , 主要 是 子 实体
( F r u e t圣f i e a t i o n ) 和担抱子 ( B a s id i o s p o r e )
多糖的药理作用研究较多。 结果指出 , 银耳多辅其有玩炎 、 强心 、 抗辐射 、 抗肿瘤和增
强机体免狡功能等作用〔 , 一的 , 但对菌丝体
( M yc iel 。 ) 多糖的药理作用研究较少 。 我
们在研究银耳多糖的强心作用同时 , 发现银
耳菌丝体多糖也同样具有强心作用 〔 6 〕 。 于
是将菌丝体多糖对小鼠免疫功能的影响进行
了实验研究 , 现将结果报道如下 。
实验材料
一 、 样品 : 1 . 银耳菌丝体的培养 : 以鼓
皮没出汁液体浅层静止培养 , 挑取菌丝体 ,
水洗 , 风干 。
2
. 多搪提取 : 选取上述菌丝 体 风 干 样
品 , 参照 T : : u t o m u l r ik u r a 和昊梧桐等人的
方法略加修改苹取多糖 〔 7 一 “ 〕。
二 、 动物 : 1 。小鼠: 选 用 L A C A 种 小
鼠 , 体重 20 . 48 土 1 . 0 5 9 , 雌雄皆用 , 由本校
动物房提供。
2
. 豚鼠 : 购自齐普制药厂 , 取新鲜豚鼠
血清 , 1 : 10 稀释 , 作补体用 。
3
· 鸡红 细胞 ( C h i e k e n r e d b l o o d e e l l ,
C R B )C
: 健康成年公鸡 , 心脏取血 , 按 1 : 5
的比例保存于灭菌 过 的 A 卜ve l(r ’ s 液中 , 投
婆℃冰箱内 , 临用时用生理盐水离心洗涤三
次 , 再 配成 5 % 的 C R B C悬液 , 每鼠腹腔注
射 0 . 2m l免疫 。
三 、 药物与试荆 , 1 . 环磷 酞 胺 (C cy l -
o p h ” p h a m id c , C Y ) 针剂 , 上海第十二制药
厂产品 , 批号 8 9 0 5 0 1。 2 . 糖原 ( G l y co g c n )
上海化学试剂采购站经销 , 国 产 分 装 , 批
号 8 2 0 4 0 1。 3 . 醋酸一 1 一禁 酷 ( 1 一 N a p l t h y l
a c e t a t e ) 上海试剂一厂生产 , 批号 8 60 7 0 ! 。
方 法 与结果
~
、 对正常及 C丫 小眼休液免疫的影晌
用 体 重 20 . 18 土 1 .肠 g 小鼠 80 只 , 随机
分为 5 组 , 雌雄各半 。 实验组每天灌胃T M P
0
.
5 m l/ 只 , 对照组淄 胃等量蒸 馏 水 , 连续
2 0天 , 在实验第 13 天时 , 用 C R J一 ( 作为免疫
原进行免痊 。 C Y及 T M P + C 、 2组同时腹腔注
射 ( ip ) 1 5 0 m g / k g C Y , 7 天后用 溶 血 素
测定法〔 `。〕测每组 Ig M抗体的生成情况 , 以光
密度 ( 0 . D . 值 x 10 0) 表示 , 结果见表 1 。
表 I T淤对正常及 C丫小殷体液免疫的影响
.
1`.L
组 别 小鼠只数
,塑
气g /
皿
k只. d )
0
.
D位 ( x 玉0。)
(又土 SD )
对 照
T M P
T M P
C Y
T M P + C Y
l 6
1 6
16
l 6
1 6
0
.
5 x 2 0
1
.
0 X 2 0
1
.
0 x 2 0
5 0
.
4a 6 4 士 14 . 2 9 4 7
7 V
.
5 0 7 5土 15 . 马6 7盛二 ’
七2 . 色 1 7 5土 2 2 . 8 5 7 7…
2 3
.
6 10 6 士 12 . 7 6 1 6…
4 4
.
5 23 5 士 a肠. 3 2 4 4峥 心 .
与对照组比 . 一 P < 。 . 0 0 1 ; 与C Y 组 比 , 一 + 一 P ( 0 . 0 0 1
由表 1 可见 , T M P对特异性抗体形成有
明显促进作用 , 对 C Y所致的 lg M抗体生成减
少有明显对抗作用 。
二 、 对小鼠腹腔巨噬细胞吞 噬 功 能 的
影晌
用 体 熏 2 0 . 5 6 士 1 。 0 4 5 9 小 鼠 6 0只 , 分
为 3 组 , 每组雌雄各半。 给药组 每 天 灌 胃
T M P 0
.
5 m l/ 只 , 对照组灌胃同 体 积 蒸 馏
水 , 连续 20 天 , 于给药第 16 天腹腔注射搪原
2 1 ! (浓度 0 . 2% ) , 4 天后取腹腔巨噬细肥
中国 *用菌 它 OTB L它 p U付 C了 OH C PIN A Vlo .1 0. No .
表 4T M户对小鼠胸腺及脾脏重盆的影响 (m幻比幻不 它 )
重 ) D脏朽ù
X
脾 (宽 ) D腺朽一 X脚 (
加定 t的 CB R C, 一起孵育 、 制片 、 镜检 ,
每片计数 20 0 个巨噬细胞 , 测定其吞噬百分
率及吞噬指数 , 结果见表 2 。
表 2 T MP对小限旅腔巨噬细胞吞哇功能的影响
。 。 。 小限致 剂 云 春曦细胞 (% ) 春蓝 指 数组 别 岑曾黔 , 竺 t _ 竹 、 叮尺群咫林{ “ 产 愁咨几咨律. 劝 ( 只 ) (味/玩 . d ) (又士 SD ) (又士 SD )
小俄 剂 云只数 ( g / k g . d )
对 照
T M P
T M P
CY
T M P + C Y
3 2
3 2
3 2
3 2
3 2
0
.
5 X 2 0
1
.
0 火 2 0
对 照
T M P
T M P
一 4 5。 7 9 士 1 5 . 9 9 0 . 8 4士 0 . 12 1 . 0 X 2 0
2 9
.
56 士 4 . 5 5 5 6 . 8 1 士 9 . 7 8
3 6
.
3 6 士 5 . 6 5… 6 1 . 2 3 士 12 . 5 4李
3 6
.
5 6士 6 . 通5… 6 3 . 1 3士 13 . 6 3 .
! 8
. 马9 土连. 9 5… 4 4 . 35 土 18 . 6 6二
2 5
.
6 8土 5 . 6 5… 4 4一 5士 13 . 4 9 书
0
.
5 x 2 0 60
.
0 7 土 17 . 4 9 . ’ 1 . ! 3士 0 . 16…
l
。
0 x 2 0 6 5
.
4分土 18 . 99二 1 . 5 3土 0 . 16 . ’ .
0
ólICù曲`,山n
。 。
P < 0
.
0 1
, 。 二 P < 。 . 0 1
由表 2 可见 , T M P对小鼠腹腔巨噬细胞
吞噬功能有显著的促进作用 。
三 、 TMp对正常砚和 C Y限外周血 T淋巴
细胞狱 t 的形晌
用体重 20 。 45 土 1 。 14 9 小鼠 80 只 , 分组及
处理同一 。采用酸性 a 一醋酸蔡醋酶 ( A N A E )
反应法侧定小鼠外周血 T 淋巴细胞数量阳 〕,
以 A N A E 阳性细胞百 分 率 表 示 , 结果 如
表 3 。
表石 TM P对小夙外周血 T淋巴细胞数的影响
{
组 别 小既数
(只 )
刻 世
g / k又. d )
T 琳巴 细胞阳性率
(%
, 又 士 SD )
对 照 16 — 石2 . 3 18 6土 12 . 8 5 4 4
T M P 16 0
.
5 x 2 Q 6 5
.
7 0 18士一2 . 9 8一4二
T M P 1 6 1
.
0 x 2 0 6 9
.
9 4 7 4士 1 4 . 4 8 4 5二
CY I肠 — 7 3 . 6 7 5 2士 1 4 . e 3 4 1…
T M P + C Y 16 l
.
O x 2 0 7 0
.
4 8 77 士 13 , 2 4 12…
*
d i t t
o
由表 3 可见 , T M P对小鼠外周血 T 淋巴
细胞有明显的促进作用 , 明显提高正常情况
下外周血 A N A E阳性率 , T M P + C Y 却降低
C Y所至的 A N A E阳性率升高现象。
四 、 TM p 对正常及 C丫吸脚膝和脾脏盆
. 的形晌
动物分组及处理 同一 , 连续 灌 胃 20 天
后 , 颈椎兑臼处死 , 仔细分离并摘取胸腺及
脾脏 , 分析天秤称重 , 结果以每 10 9 体重的
脚腺和脾脏的 m g数表示 , 结集见表 4 。
由表 4 可见 , 给予 T M P可显著 地 促 进
脚腺重 t , 亦可明显地对抗由 C Y 而致的胸
腺重 t 的显著降低作用 。
讨 论
巨噬细胞既是特异性免疫的诱导细胞 ,
又是特异性免疫的效应细胞 , 它的功能状态
.
P> 0
.
0 5
, *
P ( 0
.
0 5
, . ,
P ( 0
.
0 一, . * 一 P ( 0 . 0 0 1
直接影响着特异性免疫反应的强弱程度 。 给
小鼠每天灌胃T M P 0 . 5或 1 . 0 9 / k g . d , 能激
活巨噬细胞 , 增强其吞噬功能 , 能促进特异性
抗体的产生 , 增加外周血 T 淋巴细胞数量 ,
对 T 淋巴细胞和中枢免疫器官的胸服与脾脏
也有明显的促进作用与改善作用 , 并可对抗
由 C Y 所致体液免疫功能降低和胸腺重量减
少的作用 。 这些结果提示 , T M P 也与子 实
体 、 担抱子多糖一样 , 无论对特异性免疫功
能或是非特异性免疫功能 , 是细胞免疫功能
或是体液免疫功能均有显著的促进作用 。
据报道〔 , 2〕 , C Y对 T 、 B淋巴细胞都有抑
制作用 , 但主要抑制 B淋巴细胞的功能 , 系
通过抑制 B 细胞的早期激活而实现 。 而 T M P
对 C Y 所致体液免疫功能降低的对抗作用是
否也作用 B 淋巴细胞早期激活的同一环节 ,
有待进一步研究。
参 考 文 献
〔 l 〕
〔 2 〕
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19 8 7年一2月第 l 版 。
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Sh ig
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U k a i
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F o ly s a e e h
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B u l l
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2 2 ( 5 ) : 1 10 2
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e c h 八r id e s o n i m m u n e
P h a r田 a e o . S in一 9 8 9 ,
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A e t a
10 ( 5 ) : 今5 3 。
〔 5 〕
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s u t o m ” I r i k u r a , Y o s h in a r i H as e g a w a , T 、 。 n -
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. , 一。 7 3 , 7 5 : Z o x 7 3 x .
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s u t o m u I r ik盯 a , Y o : 卜i灯a r i 壬l : s 。减“ xl’ ` . , ` r : 公n -
第 01 . 第 2期 中国食用菌 E D EIB L F UNG I OF C印 NA ! 1
. . . . .~一~ -一一一 . . -~ -, ~ -一一一` - 一一一一 . ~ . 口 . . ~ ./ \ / \ / \ / \ /\糖\/多\/菇\/针\/\ / \ / \ / \ / \ /的 抗 肿 瘤 作 用
曾庆 田 赵军宁 邓治文
( 四川省中药研究所 重庆 6 3 。。6的
提要 从金舒菇培养液 中提 出的水溶性 多桂烤小 盆肿
瘤5 1 8。等其有明显的杭肿瘤活性 。 能使瘤组织坏死增加 、
辘元减少 , 与云芝多帷的疗效相近 。 但对冶纽 织 的非特异
醋膝的作用本品强 于云芝 多楠。
关键词 全针菇 多糖 云芝 多糖 51 80 非特异酷 踌
. .
金针菇 F l a 阴川 “ l宕n a 刁 e l“ r i p e s C u r t . S i n g又
名朴菇 、 冬菇 、 构菌等。 T e t s u r o I k e k a w a ( 1 9 73 )
〔 1 〕等报道冬菇水溶性多糖对小鼠 5 180 有较高的抑
制作用 。 其后 , 大缘重远 〔 2 〕把从培养液中提出的
朴菇多糖作为一抗癌剂应用于临床和生产 。 我所胡
德群〔 3 〕从金针菇培养液中提取的水 溶 液 多 糖 与
Y u k o Y o s h i o k a 〔 ` 〕报道的同类多糖有所不同 。 本
文对它的抗肿瘤作用进行了初探 , 现报道于下 :
材 料
.
1
. 主共药物 : 金针菇多糖 (F V )P 的 结 构 特征
为日 ( 1 ` 3 ) ( 1 , 6 )位连接以葡一半乳糖为主体
含有少 t 阿拉伯糖和木糖的一种杂多糖 , 水解后有
氨基酸 。 分子蚤为 2 , 4 x 10 ` 。 溶于水 , 易溶于碱性
水溶液。 配制 : o . i N N a O H溶解后 以 o . i N H C I 调
至 p H 7 , 再稀释为。 . 5%的含盘 。 由本 所 化 学 室
提供。
云芝多搪 ( PS K )配制方法同上 。 重庆市制药五
厂提供原药 。
2
.实验动物 : 远交系昆 明 小 白 鼠 和 近 交 系
B L A B / C
、
C 57 B L 6/ 小鼠 , 体重 20 士 2 9 。 本所实
验动物研究室提供 。
3
.移植性小 暇实脸 肿抽 : 瘤 株 为 肉瘤 180
( 5 2 8 0 )
、 肝癌 2 2 ( H 2 2 ) 、 L e w i s 肺痛 ( L e w i s )和艾
氏腹水癌 (E C ) 。 除 L e w i s外均为腹水转移实体型 ,
瘤细胞数均大于 4 x 1 o ./ 鼠 , 本实验室保种传代 。
实脸方法
1
.体内抗肿. 试脸 : 按全国统一常规法〔 5 〕试
验和疗效评价 。
2
。肿. 组织学及组织化学现察 : 颈椎脱臼处死
荷瘤小鼠 , 速取瘤块置 4 ℃的 F or ln al in ca 固定 ,
冷 H ol t 尹 s液冲洗 , 冷丙酮脱水 , 石蜡包埋 切片 , 按
G o m o r i ’ s钙钻法示碱性磷酸酶 ( A l丈P ) 〔 6 〕 . G o m -
o r i 尹 s硫化铅法示酸性磷酸酶 ( A C P ) 〔了〕 , R a n k i ` s
偶联法示酸性非特异酣酶 ( A N人 E ) 〔 8 〕。 另取瘤块
作常规切片 , H . E染色及高碘酸 S c hi f ` s 反应示
糖元 ( P A S ) 。
实验结果
1
.
F V P对小限5 1 80的杭肿它作用 : ( 1 ) F V P
的量效关系: 试验设对照和给药组 , 给药组为 F V p
e k i K叨e山如 , K a z u o H ior se , hS i李 0 U k a i .
伪em . A b s t r . , 一97 5 , ? 8: 2 0一7 4 y .
吴格桐等 : 银耳抱子多精的分离和分析 , 真创
学报 , 19 8 2 , 一 ( 2 ) : 1 1 9 .
吴铁等: 用鸡红细胞作免疫原的溶血 素 浏 定
〔 1 1〕
户 . 〔 9 〕
〔 12〕
〔 1 0〕
法 , 中草药 , 19 8 5 , 1 : 2氏
陶义训等 : 临床免疫学检脸 (上册 ) , 上海科
学技术 出版社 , 19 8 40
朱立平等 : 某些免痰抑制荆对 B 淋巴细胞功能
的影 响 , 中国免疫学杂志 , 19 8了. 3 ( 6 ) ; 36氏
E FF EC TS O F r R EM E L L A M Y C EL IA L P O LY S AC C HR ID E S
ON IMMUN E F UNC T IO N IN M ! C E
Z he n g B a o c a o M a G u ir
o n g
( Sh皿 d o n可 U o iVe sr i t了, J io an 2 5 0 10 0 )
AB STRAC T
. ,
`
r h e e x p e r im e n t a l r e s u l t s i n d i e a t e d t五a t : T r 口拼 e l l a m y e e l i a l p o l y s a e e h r i d e s (T M P ) n o t
o n l y m a r k e d l y p r o zn o t e d s p e e i f i e a n t i b o d y o f m i e e w h e n i t w a s a d m i n i s t e r e d i n t o s t o m a e h
a t a d o s e o f 0
.
5 m l / rn
o u s e ( 0
.
5 o r 1
.
0 9 / k g
.
b o dy ) p e r d a y f o r 2 0 d a y s
,
b u t a l s o p r o m o t e d
i n e r e a s e o f t h e T 一 l y功 p h o e y t e s i n p e r i p h e r a l b l o o d a n d p h a g o e y t o s i s o f t h e p e r i t o n e a l
m a e r o p h a g e
.
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i s t t h e d e p r e s s i o n o f t h e h u m o r a l a n d e e l l u l a r i m m u n e f u 。 ( t i o n
e a u , e d b y C Y
.
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e r e l a t e d t o i m m u n o l o g i e a l f u n e t i o n
.
K e y w o r d s T r e爪 e l la m y e e li u m , p o l y s a e e h r i d e s , l y m p h o e y t e s , P il a g o e y t o s i s . e y e l o p h o s p h a -
m i d e
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