全 文 ：dib le fungi 2011（3）
黄绿蜜环菌 [Armillaria luteo-virens（Alb.et Schw.Fr.）Sacc.]
是一种名贵野生药食兼用真菌。 主要分布于青海、西藏海拔
2 500～4 500 m 的草原或高山草甸上，单生或群生，形成蘑菇
圈。 四川西部、甘肃南部等地也有少量分布。 黄绿蜜环菌子实
体肥厚，味道鲜美，香气浓郁，营养丰富，是一种名贵野生药、
食兼用真菌。 由于黄绿蜜环菌遗传特性及长期的高寒适应性
造成其生长发育缓慢，菌株培养需较长时间。研究试图了解生
长调节剂三十烷醇、 培养液起始 pH 和环境培养温度对黄绿
蜜环菌菌丝体生长的影响， 试图寻找黄绿蜜环菌的菌丝体细
胞培养最佳环境影响因素。
1 材料与方法
1.1 供试菌株 试验菌株为由青海大学提供，从青海祁连额
堡草原黄绿蜜环菌子实体分离的 AL-12 号菌株。
1.2 基本培养基配制方法 培养基配方：葡萄糖 20 g，酵母
膏 4 g，小麦 50 g，K2HPO4 0.5 g，KH2PO4 0.8 g，MgSO4 0.3 g，VB1
50 mg，微量元素母液 20 mL，琼脂 20 g，加水至 1 000 mL[微量
元素母液配方：FeCl3 0.5042 g；CaSO4 0.5015 g；ZnCl 0.1986 g；
Cu（NO3）2 0.1021 g，加水至 1 000 mL]。 先将小麦浸泡 24 h，加
水煮沸 30 min 过滤取小麦汁， 培养基配方按试验设计配制，
在 121℃条件下灭菌 30 min[3]，[4]备用。
1.3 实验设计方法 生长调节剂对菌丝体生长的影响试验
设计为：采用单因素 6 水平试验设计，试验重复 5 次。 选用三
十烷醇（triacontanol）生长调节剂，先配置成 10-4 mg/mL 母液。
在培养基中分别加入母液 0、0.5、1、1.5、2、2.5 mL/L。 在 23~
24℃条件下恒温培养 60 d 测定菌落生长直径[5]，[6]。
培养液起始 pH 和培养温度对菌丝体生长的影响试验设
计方法：采用单因素设计 6 水平，试验重复 5 次。 选用基本培
养基配方中不加琼脂为培养液。培养液的装液量 100 mL/500
mL，接种量 10%。转速 100~110 r/min。培养液起始 pH 对菌丝
体生长的影响试验在 23~24℃条件下恒温培养。
培养温度对菌丝体生长的影响试验设计按起始 pH 6.5
配制。 在恒温条件下振荡培养 120 h 后测定菌丝体干重。
2 结果与分析
2.1 生长调节剂三十烷醇对黄绿蜜环菌菌丝体生长的影响 生
长调节剂三十烷醇对黄绿蜜环菌菌丝体生长有明显的影响。
从图 1 看出在（0~1.5）×10-7 mg/mL 间随着浓度提高菌丝体生
长加速。 1.5×10-7 mg/mL 效果显著（菌落直径 4.238 cm），而对
照只有 3.237 cm。 但超过 2.0×10-7 mg/mL 时对菌丝细胞生长
反而有抑制作用。菌落生长直径与三十烷醇添加浓度符合：y=
0.3523x4-2.0373x3 + 3.1709x2-0.7182x+3.2453 数学模型；拟合
度为 R2=0.9825。 在培养基中添加 1.5×10-7 mg/mL 三十烷醇生
长调节剂，可加快细胞培养速度，缩短培养周期。
2.2 培养液起始 pH 对黄绿蜜环菌菌丝体生长的影响 培
养液起始 pH 不同对菌丝体生长有明显的影响。 从图 2 中可
知培养液起始 pH 4~7 间随着 pH 提高菌丝体生长加快。 培养
三十烷醇与培养液 pH及培养温度的变化对黄绿蜜环菌
菌丝体生长的影响
周劲松 1 焦迎春 2 盛海彦 2 熊辉岩 2 杨春江 2
（浙江建设职业技术学院，浙江杭州 311231；2 青海大学，青海西宁 810016）
摘 要 研究了黄绿蜜环菌在生长调节剂三十烷醇、培养液起
始 pH 值和培养环境温度的变化对菌丝体生长的影响， 结果表
明：培养基加入生长调节剂三十烷醇 1.5×10-7 mg/mL 效果显著，
菌落直径达 4.238 cm， 而对照只有 3.237 cm。 培养液起始
pH 6.0~7.0时，菌丝体细胞干重达到 5.474~5.828 mg/mL。 而培养
温度在 25~30℃菌丝体生长迅速，细胞干重达 6.910~7.232 mg/mL。
关键词 黄绿蜜环菌 环境因素 生长影响
文章编号 1000-8357（2011）03-0008-02
收稿日期：2010-12-08 一稿；2011-01-21 修改稿。
基金项目：国家自然科学基金项目资助（30460083）；教育部重
点科学技术研究项目资助（205164）部分研究内容。
e-mail：zhoujs64@126.com
y=0.3523x4-2.0373x3 + 3.1709x2-0.7182x+3.2453
R2=0.9825
图 1 生长调节剂三十烷醇对黄绿蜜环菌菌丝体生长的影响
菌
落
直
径
/c
m
浓度/（×10-7 mg/mL）
生 理 生 化
图 2 培养液起始 pH对黄绿蜜环菌菌丝体生长的影响
菌
丝
干
重
/（
m
g·
m
L-
1 ）
pH
y=-0.4755x3+7.5544x2-37.564x+61.541
R2=0.9984
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（上接 P2）
液起始 pH 6.0~7.0 时， 菌丝体干重达到 5.474~5.828 mg/mL，
菌丝生长迅速。 培养液起始 pH 超过 7.0 时，菌丝生长受到抑
制。 培养液起始 pH 对菌丝体生长的影响符合：y=-0.4755x3+
7.5544x2-37.564x+61.541 数学模型；拟合度为 R2=0.9984。
2.3 培养温度对黄绿蜜环菌菌丝体生长的影响 培养温度
对菌丝体生长有明显的影响。 从图 3 中可知温度在 10~25℃
间随着温度提高菌丝生长加快， 菌丝干重是随着温度而提高
增加。 温度在 25℃时， 菌丝干重达 7.232 mg/mL。 温度超过
35℃时，菌丝生长反而受到抑制。培养温度对细胞生长的影响
符合：y=-0.001x3+0.0482x2-0.354x+1.371 数学模型；拟合度为
R2=0.9923。
3 结 论
3.1 生长调节剂三十烷醇对黄绿蜜环菌菌丝体生长有明显
的影响。 加入三十烷醇 1.5×10-7 mg/mL效果显著，60 d 菌落直
径达 4.238 cm，而对照只有 3.237 cm。
3.2 培养液起始 pH 不同对菌丝体细胞生长有明显的影响。
培养液起始 pH 6.0~7.0 时，培养液菌丝体干重达到 5.474~
5.828 mg/mL。
3.3 培养温度对菌丝体细胞生长有明显的影响。 培养温度
25~30℃菌丝生长迅速，菌丝体干重达 6.910~7.232 mg/mL。
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生 理 生 化
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图 3 培养温度对黄绿蜜环菌菌丝体生长的影响
菌
丝
干
重
/（
m
g·
m
L-
1 ）
温度/℃
y=-0.001x3+0.0482x2-0.354x+1.371
R2=0.9923。
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