全 文 ：第 10 卷 第 4 期
1 9 6 2年 1 2月
植 物 学 报
A A B O G T TA N IC A I SN IC A
V ol
.
1 0
,
N
o
.
4
D e e
. ,
1 9 6 2
菱白黑粉菌刺激生长物质的研究
余 永 年*
(中国科学院微生物研究所)
一 、 引 流
菱草 ( iZ 。 瓜` la t汀0 1衍 ) 是一种广泛分布在亚洲东南部的禾本科野生植物 , 受黑粉菌
( sU ilt ag
。 。 哪枷招 .P eH n · ) 侵染后 , 顶茎基部膨大 ,称为菱白 , 或称菱笋 , 江苏名菱瓜 ,
四川呀高笋 。 菱白祖撤娇嫩而柔软 ,营养丰富 ,滋味解美 , 是广大拿众所喜爱的一种蔬菜。、 “ 。菱白在我国早有栽培 ,北至东北 ,南迄海南 ,都可生长 , 尤以长江流域栽培更为普遍。 在越
南 一也简有栽培 。 日本还把这种黑粉菌的冬抱子用作药品 、染料和化版品等。 菱草受黑粉
菌侵染以后的这种突长膨大现象 , 启示我俩从真菌中去寻找促进菱草顶茎膨大的活性物
质 。
虽然异生长素 , 郎叫嗓乙酸 l( A A ) , 最初不是在微生物中发现 , 但是近二十多年来越
来越多的研究表明 , 在微生物的代榭产物中 , IA A 的产生 , 正如在高等植物一样 , 是相当
普遍的 。 特别是在真菌中 ,有关这方面的研究查料 ,正在迅速地与 日俱增〔.26 5司。 有下列一
些真菌的代榭产物研究得比较群相 : 巢子填霉 (尸h y co 、 y cse 瓜 t。习阅 、 布拉氏填霉 (尸 .
去l a左e , l e e a 。 。 , ) [ 2` ]、 赛鲁根霉 (R五i二 o 户“ , , i , u , ) [5` 1、 黑根霉 (R . 形岁`ca 。 , ) tZ司、 啤酒酵母
( s
a c e人a r o m y c e s ce , e t, ￡s `a e )价` ] 、 桃精叶病菌 仕 a p加￡。 a 己e f o r二 a n , ) 1[ B , , ` l、 柑桔疮 痴病菌
(刀z万 , o e f a , “ t t i ) [5〕、 大豆痴斑病菌 ( s户人a ce zo m a 9 2夕 ic , 。 ; ) [5 ’ 、 李黑瘤病菌 (D i西o tr 夕。 ,
。 o r石。 了。 m ) 13` , 、 梨溃瘟病菌 (N e c t r i a g a l l i g e o a ) [1 3 ] 、 玉米黑粉菌 ( U , t萝l a g o 二己 a e ) [` 2 , 59 1、 大麦
散黑穗菌 ( u . 二da ) 41[ 、 槽柏胶锈菌 ( G y m 。 , or 阴梦“ m j仰 `钾序厉 gr in an ae ) e0lL 、 茶爵病
菌 (价 o b a , i d i“ m c a m e l l i a o v a r . 梦 a ic l行 ) [2 6 ]、 稻瘟病菌 ( p t’r `c “ l a r i a o r y 之 a e ) 峥6 ] 、 黑曲霉
( sA娜剪俪 瓜ger )叫以及 爵多的菌根具菌 50[] 等等 。 在这研究中 , 或者着重在生物化学方
面件 2姑.24 9, 沁 5, 57] ; 或者偏重在生物学作用方面 4[, 5,1 6,2 0,2 ` .32 ,3’ 34, 51] ; 还有的在这两方面都进行
了工作 l7[ , 18, 纸 59, 601 。 作为植物生长刺激物质的 IA A , 在促使寄生菌锈起寄主植物的粗撤或
器官发生瘤肿 、 畸形和膨大的现象方面 , 被敲为是起了一定的作用的 4[, 5,1 3,1 4, ` 7,26 :32 3, 34, 42, 49, .59
601
。 菱白粗掀如此娇嫩解美 , 很可能与这类物厦有着密切的内在联系。
本文着重报告菱白黑粉菌所产生的刺激生长物厦的性厦及其生物合成等方面的初步
研究拮果。
本文于 19 6 2 年 8 月 1 5 日收到 。
* 这填研究是在戴芳澜先生和李碌先先生的指导下进行的 , 稿成之后叉承祥加校正 ;王象坤、 刘玉膺 、黄琳以及陈
超英和虞明霞等同志先后参加了或协助进行了部分工作: 苏家玖 、高 日霞、 最衍文等同志及江西 、安徽 、福建 、浙
江 、湖南、 湖北 、 河南、云南等省农业科学研究所惠寄标本 ; 在工作进行之初 , 撮开宇同志拾了一些帮助 ,枕此一
并深致榭忱。
植 物 学 报 1 0 卷
二 、 · 材 料 和 方 法
从湖南 、 四川 、安徽 、 浙江 、 湖北 、 江苏 、 云南 、 福建 、 河南和江西等地搜集来的菱白标
本 ,及时地进行分离 。 无渝是受病的膨大粗辙 (菱瓜 ) , 或成熟的冬抱子 (灰菱 ) , 都可分离
出这个菌 ( U . es o l e耐 a) 来 。 划拔分离 、稀释分离和粗藏分离 , 是我们常用的三种分离方
法。 前二者也是钝化菌种的有效方法。 分离所用培养基为禺耸薯 、 蔗糖 、 洋菜胶培养基
( SP A ) 及 C az pe k’ s 培养基。 支白黑粉菌对培养基的选择性不强 , 在 SP A 、 H as ik sn ,
M B一 , o哆 , ] 、 R a n k e r , s [` 6] 、 R a u l i n 一 T h o m ’ s [3 ] 、 z s e h e i le , s M毛 [6习 及 e z a p e k ’ s 培养基上生长
都相当繁茂 。
图 1 支白黑粉菌 ( U , t i l a g o 。 , e o l。 , , a )
在 sP A 上的培养特征
图 2 安白黑粉菌 ( u . 。 , ` “ le 川 a) 小袍子
的形态特征
所用合色氨酸的 C az ep k’ s 培荞液的成分如下 : 凡H P O , 1克 ; K CI 0 . 5 克 ; 吨 50 ; ·
7 H
2
0 .0 , 克 ; eF S O ; 0 . 01 克 ;蔗糖 30 克 ;蒸馏水 1 0 0 0毫升 ;以 2 克的色氨酸代替 N a N O ,
作为 N 源。 在 卯 。 毫升容积的锥形瓶中盛 C az ep k’ s 培养液 1 0 毫升 , 握 15 磅压力灭菌
30 分钟后 , 接种小抱子悬液 1 毫升 , ’在恒温室 ( 2 7 。 士 1℃ )进行振蕃培养 6一 7 天。 振奋培
养用旋棘式摇床 14 0 斡 /分 。 其他有关工作方法及操作步骤 ,将在后面有关部分里靓明 。
三 、 关千刺激生长物臀的性臀
我们应用生物 、 化学 、 物理的各种方法对所得刺激生长物厦的性厦进行了鉴定 。
(一 ) 生物测定
生物侧定是选用的劈茎黄豆芽弯曲法 , 此法是根据 w en lst l 及 eK nt 训 劈茎豌豆法的
原理加以改进商化而来。 先将选好的黄豆用清水浸清半天 ,然后放入湿渊的据木屑里 ,在
27 ℃ 左右的暗室或温箱内发萌生长 3一 5天 , 选择值而壮的幼茎 , 取上部一段 3一 5 厘米 ,
用刀片从上向下劈开至 2 / 3 处 , 置蒸馏水中 1/ 2一 1 小时 , 最后再选择均一的劈茎放入供
4 期 余永年 : 英白黑粉菌刺激生长物厦的研究 3 4 1
贰液中 ,每皿放 2一 5个 , 供贰液以刚淹没豆芽为度 , 在 25 ℃ 温箱中豹握 12 小时 , 观察弯
曲情况 。
根据劈茎黄豆芽的多次侧定精果 ,培养液中的这种刺激生长物厦 , 在引起劈茎黄豆芽
发生弯曲现象方面 , 与 IA A 所
引起的没有发现任何差异 。 具
有叫嗓环的某 些刺激生长物
厦 , 它激发豆芽幼茎的表皮扣
胞加速向纵的方向分裂 , 而促 口
进内皮层袖胞加速向横的方向
分裂 , 由于这两类扣胞分裂发
展的不平衡 , 以至最后使劈开
的豆芽幼茎 , 显现了向内侧弯
旋卷曲的现象 (图 3 ) 。
(二 ) 化学反应
sa lk ow isk 431[ 反应是侧定刺 图 3 劈茎黄豆茅的弯曲 (在稀释 10 倍液中握 12 小时 ) ;
激生长物厦的一个快速筒便方 右边是对照 (在蒸翩水中 )
法 。 这主要是根据 IA A 与 eF cl 3在高饭度的弦酸溶液中所显现的颜色特点来侧定 IA A 的
存在的 。 这种方法的优点很多 , 是 目前用比色法来测定异生长素应用较广泛较筒便的方
法 。 我们比较了温玉璋及 B o n n e r L52 ] 的 、 H u b e r [ ,习 的 、 G o r d o n & w e b e r [2 , ] 的 、 和 A [g 6u s [7 ]
的方法 。
用上述四种方法对菱白黑粉菌的培养液和提取液进行了侧定 , 除后者外 ,其他三种都
表 1 不同来源菌系形成 IA A 的能力的测定
菌 系 劈茎黄豆芽弯曲情况 培养液中 I A人的浓度 材 料 来 源
l( 0 倍稀释液 ) 光 密 度 P P l fl
对 照 不 曲 〔) . 0 0 0 0 蒸姻水
对 照 不 曲 0 。 0 0 0 O 培养液
9 9 微 曲 0 . 〔) 5 0 5 江西南昌 (省农研所 )
10 0 微 曲 0 . 0弓0 ) 河南郑州 (省农研所 )
10 6 微 曲 0 . 0 5 0 5 福建福州 (省农研所 )
9 6 微 曲 0 。 10 0 l 2 江苏南京 (于积厚采 )
9 8 微 曲 0 . 10 0 12 云南昆明 (最衍文采 )
10 1 不 曲 * 0 . 10 0 12 福建魁歧 (高 日霞采 )
1 0 7 微 曲 〔) 。 10 0 l 2 云南昆明 (省农研所 )
9 3 微 曲 0 。 15 0 2 0 江苏吴县 (王祈楷采 )
1 0 3 微 曲 0 。 15 0 2 0 湖北武昌(省农研所 )
1 0 5 微 曲 0 。 2 0 0 2 7 浙江杭州 (省农研所 )
1 0斗 微 曲十 0 . 2 5 0 3 4 安徽合肥 (省农研所 )
9 7 弯 曲 0 。 3 0 0 4 2 四川重庆 (苏家玖采 )
对 照 弯 曲 0 。 3 0 0 42 月一 I A A (捷克产品 )
1 0 2 弯 曲 0 . 5 0 0 72 湖南长沙 (省农研所 )
* 可能由于豆芽选择不当所致 。
植 物 学 报 .10 卷
显现了杠色或紫杠色 。 同时 , 用未接种的培养液及 IA A 作对照 。 IA A 也生成了与样品相
似的颜色 , 而未接种的培养液 lRJ 不显现这类颜色 。 由此便可看出 ,菱白黑粉菌的培养液中
是合有 IA A 或叫嗓环的衍生物的 。 四种方法中以第一种为最好 。 因此 ,在后来的化学侧
定中 ,主要是采用的爵玉璋等的方法 ( T B 贰剂 ) 。 所用光电比色舒为上海科伟 兜 1型 ,滤
色片号数为 5 2 0 。
在工作中发现不同地区的菌系 , 产生 I A A 的能力也各不相同 。 因此对一些已握分离
出来的菌系 , 用劈茎黄豆芽和 T B贰剂进行了侧定 ,枯果见表 1 。
从表 1 可以看出 , 不同地区的菱白黑粉菌一般都能形成 IA A , 但是形成 IA A 能力的
差异却相当大 , 以湖南长沙系 ( 1 0 2 )为最高 , 四川重庆系 ( 9 7 )次之 。
(三 ) 粗带分析
将培养液用除去过氧化物的乙醚提取并浓精以作单相抵谱分析1[,1 .94 0, 48, 50, 601 。 采用的
下列两种提取法 , 效果都较好 。 ( 1 ) 先将培养液过滤 , 翎声至 2 . 8 , 加入相当于其容量
1/ 2 的乙醚 , 振蕃 ( 2 7 ,一 28 , 次 /分 ) 30 分钟 , 取乙醚层离心 ( 40 0 裤 /分 ) 10 分钟 , 用水
浴锅加热除去乙醚 , 再加入少量的蒸绍水使变为 10 0一 15 0倍浓精液 , 将 p H 稠至 .4 , , 点
祥 ( 0 . 02 毫升 ) 。 ( 2 ) 用与培养液等量的乙醚 ,在振淇机上直接提取 10 分钟 ,提 2一 3 次 ,
取乙醚层用韧菌滤器 (卜an G S) 过滤 , 除去乙醚 ,加蒸馏水使成一定倍数的浓精液 ,备用 。
以介 I A A (捷克 aL hc e m a 厂出品 ) 1 0月 M 的水溶液作为对
照。 这个贰膝用了苯酚 、 异丙醇 、正丁醇 、 异丁醇四种扩展
剂 ,并用亚稍酸钾 、 对一二甲基氨基苯甲醛 、氯化高铁三种显
色剂 。 抵谱是采用的上行法 。 滤抵是用的 w ha mt an n l 号 。
所得精果分别祥兑图 斗及表 2 。
我 2 菱白黑粉苗所座刺激生长物矍在不同绷展荆中的 左护值
苯酚一水 异丙醇一氨一水 正丁醇一氨一水
( 9 0 : 1 0 ) ( 8 0 : 1 0 : 1 0 ) ( 6 0: 3 0 : 10 )
样 品 9 7 0 。 8 6 0 . 6 8 0 . 7 5
(菌系 ) 10 2 0 . 8 6 0 . 6 8 0 . 7 5 0 . 3 3
对照 (月一 1 A A ) 0 . 8 6 0 . 6 8 0 . 7 5 0 . 3 3
图 4 菱白黑粉菌 ( U · 。 s c u l c ” -
at ) 97 号菌系培养提取液在新
藉上所出砚的三个斑点 , 其中最
上面一个斑点的 研 值与作为对
照的 IA A 的 R f 值完全相等
从图 4 和表 2 可以看出 , 菱白黑粉菌所产生的这种刺
激生长物盾 , 不管是在各种不同扩展剂中的 fR 值也好 , 或
是各种显色剂的颜色反应也好 , 都与作为对照的压 IA A 是
完全一致的 。
在显色前用紫外援灯 (波长 3 6 5 0入 ) 照射显现灰 色 。
将这种灰色斑点剪下洗脱作活性mlJ 定 , 桔果劈茎黄豆芽表
现出了具有生长刺激物厦存在的典型性弯曲现象 。
、 除上述以外 ,在抵谱上还出现了另外一个斑点 (简或还
出现两个 ) 。 关于这个斑点的性盾 , 将在 “ 生物合成 , ,一节中加以尉萧。
4 期 余永年 : 芡白黑粉菌刺激生长物盾的研究
( 四 )提取
H
a a g e n
一
s m i t [
2 ,
,
2` ] 和 B e r g e r & A v e r y [1 , ] 从玉米中分离提钝异生长素 , T h im a n n [, ` ] 从
赛鲁根霉培养液中分离提钝异生长素 , 步舔都相当复杂 , 所用溶剂的种类也很多 ,从人力
物力肘力各方面来靓都是不太握济的 。 我们贰用了以离子交换为主的提取方法 , 拮果也
较好 , 具体步糠如图 乡。
培 养 滤液
{
, p H至 , · 8 , 乙` 提取
区困 1{乙 ` 层 一
!
“ · , M N · H C o 3 提取
l
、 层
} {
“ 醚 层
}
.
{
“ 液
酸化至 p H 2 . 8 , 乙醋提取
.…乙 、 层 {
}
, 子 , 加” ,留水
{
水 溶 液
{雨衬 . . _ _ _ 一 ~ 一~ ~ 一 ~ ~ ~ 一 ~ ~ ,’5一一上逻二乙甄 N~ 洗脱 产一一 , 几
} 破 . * } 、 } 畏子交换 l匕兰丫卫 L二竺竺兰当雨 · …一一— 一下· ~ ~ ~ 一一一· 一· -· ·一 {〔呸口’ p H至 ’ ` “ ’ “雌”遴犷一一厄为
}
.
!
桔 晶
}
图 5 黄白黑粉菌 ( U . 。 ` t’l 。耐 a) 所产刺激生长物盾提取过程图解
将生长发育正常而又无杂菌污染的培养液减压过碱两次 , 稠 p H 至 2 . 8 , 乙醚提取
2一 3 次 ,每次振淇提取 30 分钟 , 握 G , 相菌滤器过滤后加入 。 .弓 M N a H C O 3 , 稠节 p H ~ 9 ,
植 物 学 报 1 0 卷
照前法提取 5分钟 , 取碱液层 ,加 H CI 使其酸化至 p H 2 . 8 , 再照前法用乙醚提取 , 得粗制
品溶液 , 然后再将这种粗制品水溶液通过人工合成树脂进行离子交换 。
把释砂树脂 ( z e r o l i t一 G er e n s a n d , 1 4 / 5 2 筋孔 ) 或阴离子交换杆推 ( E e t e o l a ) , 先用 6 万
H cl 洗三次 ,再用 自来水洗至中性 , 然后以 20 多 N a o H 溶液洗三次 ,又再用 自来水冲洗至
接近于中性 ,最后用蒸馏水洗 3一 4 次 , 盛入长 40 厘米 、直径为 1 . 8 厘米的玻璃柱中 , 进行
动态离子交换 , 液体通过交换柱的速度为每 2一 3 秒钟一漏。
用椽砂树脂进行交换时 , 以乙醇 ( 1 5 分 ) 、 乙醚 ( 1 , 分 ) 和 0 . , N N a Q H ( 20 分 ) 混
合液洗脱 , 然后再将洗脱液通过氧化铭 (1A 2O 3 ) 层离柱以除去杂色 ,酸化洗脱液并用乙醚
0
.
3 6
耙
米 o · 2 8
斗
馨 0 ·2 。
0
,
1 2
0
一
0 4
/ 入
\扭
2 6 0 2 8 0 3 0 0 3 2 0 3斗0
提取 , 使在表玻璃内枯晶 。 另外 , 我们还用了阴离子交换
杆椎进行离子交换 , 以 .0 弓务或 1务 N aC I溶液洗脱 , 酸
化 ( p H一 2 . 5) 洗脱液后 , 再用乙醚提取 , 同样使在表玻
璃内拮晶 ,效果似此释砂树脂为佳 (未重复 ) 。
粗拮晶为片状或叶状 , 具有同样生物活性 。 在 iH l g er
分光光度豁下测定紫外枝的最大吸 收 攀为 2 7乡毫微 米
(m沁 , 与作为对照的钝品 压 IA A 基本上是相符的 (图
6 )
o
根据以上的生物测定 、 化学反应 、 抵谱分析 、 桔晶形
状以及光谱分析等一系列的就硫研究拮果 ,我们款为 :菱
白黑粉菌所产生的刺激生长物厦 , 是叫嗓乙酸 (l A A ) , 郎
波长( m川
图 6 提取物质水溶液在 H i l g er
分光光度静下测定的紫外版的吸
玫光藉曲袋图
异生长素
C H
Z一 C O O H
}
。
四 、 生 物 合 成
由色氨酸生物合成 IA A , 在高等植物中研究得比较多队 38, .57 .61 62] , 可总拮为下列三个
途径 : ( l) 色氨酸一色胺一卿嗓乙醛一叫嗓乙酸 ; ( 2 )色氮酸一 , 叫嗓丙酮酸一叫嗓乙醛一叫嗓乙酸 ; ( 3 )色氨酸一叫嗓亚氨基丙酸一叫嗓亚乙胺一叫 嗓 乙 猜一叫嗓乙眺胺一叫嗓乙酸 。 关于真菌合成 IA A 的研究 , 工作做得不多 , 而且深度也嫌不够 。 T ih m an lsn 4] 推测赛鲁根霉合成 I A A 的途径可能为 :
R e H Ze H N H Ze o o H 上竺享R e H Ze o e o o H + N H 3 ~业落 R e H Ze o o H + C o Z。
w olf 591t 靓明玉米黑粉菌合成 IA A 的途径为 : 色氨酸一叫嗓丙酮酸一叫嗓乙醛一卿嗓乙酸 。 在槽柏胶锈菌的研究中 , W ol fl0 01 款为合成 I A A 的途径是 : 色氨酸一色胺一叫嗓乙醛一叫嗓乙酸 。 cr ad ly 幻 的研究指出 , 桃缩叶病菌及李黑瘤病菌合成 IA A 的途径为 : 色氨酸一色胺一令叫嗓乙酸 。 为了了解菱白黑粉菌是如何把色氨酸变为 IA A 的?我们对它的生物合成的途径也进行了初步的探索。
(一 ) 色氮酸是菱白黑粉菌含成 IA A 的前体
用无 N源的 c az p ke , s 培养液作为基本培养液 , 分别加入各种不同的 N源进行就验 。
蛋白膝 、 酪素 、 明胶 、脱脂牛奶 、 甘氨酸 、 D L一丙氨酸 、 D卜林氨酸 、 D L一苏氨酸 、 L 一亮氨酸、
4 期 余永年 : 菱白黑粉菌刺激生长物盾的研究
L一四冬氨酸 、 L一谷氨酸 、 L一精氨酸 、 L一相氨酸 、 L一脆氨酸 、 D L一蛋氨酸 、 酪氨酸 、 L一粗氨
酸 、 L一 脯氨酸 、 卜色氨酸以及甲状腺素等 。 每 10 毫升培养液加 10 毫克 ,稠 p H 至 乡. , ,
盛入 卯 。毫升锥形瓶内 , 灭菌 , 接种 , 在 诊匝温室振蔫培养 , 并分别在 乡、 10 及 15 .天上进行
观察和侧定 。
贰睑桔果表明 : p H 一般都下降到 多一 .4 , ; 菌体的生长发育情况 , 除加 D L一蛋氨酸 、
L 一肤氨酸及甲状腺素的以外 , 一般都比较正常 。 生物侧定及化学反应的桔果表明 :仅仅只
有 L 一色氨酸显示了明显的正拮果 , 自p劈茎黄豆芽发生弯曲现象 ; 加入 T B 贰剂后产生杠
色 。 后来又用 D 一色氨酸和 D L - 色氨酸进行裁输 , 也获得了同样的拮果 。 由此靓明 , 色氨
酸是菱白黑粉菌合成 I A A 的前体。
鉴于色氨酸既是形成 IA A 的前体 , 所以后来又把不 同数量的 L一色氨酸加入无 N 源
的 C az pe k’ s 培养液中进行培养 ,用 T B 栽剂侧定 I A A 的产量 ,桔果兑表 3o
我 3 不同欲 t 的色氮酸对 IA A 座且的影响 (潺玉璋及 oB n en r 法 )
10 0毫升培养液中色氨酸的含量(毫克 )
{ 光 密 度 l一万一 {万丽丁
I A A 的产量 ( l 毫升 ) }— !— {— -P P坦 ! U
5 0 1 0 0 1 5 0 2 0 0
0
。
03 0 0
.
0 5 0 0
.
0 75 0
.
1 1 5
从表 3 可以看出 , 在 1 0 毫升的无 N 源 C az eP k’ s 培养液中 , 以加入 2 0 毫克的色氨
酸所合成的 I A A 量为最高 ,每 1克的色氨酸豹可产生 。 . 01 5 克的 IA A 。 -
(二 ) 色氨酸是菱白黑粉菌合成 IA A 的最初前体
上面的贰硫桔果表明色氨酸是菱白黑粉菌合成 IA A 的前体。 但是 , T ih m an lsn 月 报告
赛鲁根霉可利用蛋白膝而形成大量的 I A ;A G ur en 〔2司 报告黑根霉 ( R形。娜 , 厉梦 ica 。 ) 能
利用麦芽汁而生成 I A ;A T at u m 53[] 报导罐抱霉 (N翻 or : 如 ar ` ar , ; a) 可以把叫嗓和林氨酸
合成色氮酸等 。 关于菱白黑粉菌的情况以前未兑有所报导 。
在无 N源的 C az eP k’ s 培养液中 , 分别加入下列贰剂 , 每 1 0 毫升培养液中加入贰剂
1 0 毫克 , 如为两种贰剂 R[] 各加 50 毫克。 所加贰剂种类和数量如后 : 叮咤 , 1 0 毫克 ; 硝
酸纳 , 10 0 毫克 ;叫嗓丙酸 , 1 0 毫克 ;叫嗓丁酸 , 10 0 毫克 ;氨基苯甲酸 , 1 0 毫克 ;叫嗓及
叮咤 ,各 知 毫克 ;叫嗓及丙酮酸 , 各 卯 毫克 ;叫嗓及 D L 一林氨酸 ,各 知 毫克 ; 叫嗓及 D L -
丙氨酸 ,各 50 毫克 。
加入后照前法进行灭菌 、 接种及振淇培养 , 用 T B 贰剂测定 , 并如前法用乙醚提取作
抵谱 。 以上两法都靓明加入这些就剂都不生成 IA A 。 特别是氨基苯甲酸 、 叫嗓 + D卜林
氨酸 、 叫嗓 + D L一丙氨酸这三种处理 ,曾进行多次重复贰膝 , 从未晃有产生 IA A 的任何迹
象 。 由此可兄 , 色氨酸不仅是菱白黑粉菌合成 I A A 的前体 , 而且是合成 I A A 的最初前体 。
(三 ) 叫嗓乙醛是菱 白黑粉菌合成 IA A 途径中的中简产物
如前所示 ,在确定这种生长刺激物厦性厦的抵谱上 , 有时 出现三个斑点 , 除其中一个
为 I A A 外 , 另外还有两个 。 这两个斑点的颜色 : 用 K N o : 显色时 , 一个为紫色 ;另一个为浅
黄色 。 前者的 fR 值在以异丁醇作扩展剂时为 0 . 8七 异丙醇时为 0 . 74 ; 正丁醇时为 .0 69 ;
植 物 学 报 1 0 卷
苯酚时为 。 .男 。 浅黄色斑点的 f R值在以异丁醇作扩展剂时为 0. 9 2 。 群兄表 先
表 4极谱上除 I A A以外的另二佃斑点的 况f 值
(K No
: +H NO
: +e : H
s
o H 显色)
扩 二 齐。
{ 型 l
一 堕 一— }一进 - 一旦一竺堕一一}一矍一里竺. ~竺一1 一异丁醒一甲擎水 (阴 : 5: 1 ) 5 } 。 · “ 4} ” · 92异丙醇一氨一水 〔9 5: 3:刃 _} 。 · 7 “ } 一正丁酚氨一水 (6 0 : 0 3, ’ o ) 】 。· 6 9 } 一苯酚一水 `, U: ` u ) } 。 · ” 斗 } 一紫色斑点 ( K N氏显色 ) 在多次抵谱中差不多每次都出现 , 用 eF 1C 3显色时为暗灰色 ,用对一二甲基氨基苯甲醛显色时为蓝紫色 。定时取 1 02 号菌系的培养液 , 分别在酸性 ( p H 2 . 5) 和碱性 ( p H g ) 中用乙醚提取并
作抵谱 ,抵谱拮果表明 : 紫色斑点是在第 30 小时 出昵的 , 而杠色斑点 ( IA A ) lAJ 在第 36 小
时才出现。 由此可知 , 紫色斑点比 I A A 要形成得早一些 , 看来它就是色氨酸形成 IA A 合
成途径中的中简产物 。
我佣选择了加二稍基苯阱的方法来确定这个紫色斑点的性厦。 取 10 2 号菌系培养液
的乙醚提取物厦的水溶液 0 . , 毫升 , 加入 0 . 1务 的二稍基胁 .0 5 毫升 , 再加入 1 N H 1C 2 毫
升 ,混匀 , 在室温下静置 10 分钟 , 用乙醚提取 ,溶于乙醚物厦在抵谱上的代号为 ( 1 0 2十 ) ;将
剩下的水层用 N a H C o ; 稠 p H 至 9 , 再用乙醚提取 , 抵谱上代号为 ( 10 2一 ) 。 然后将这两种
鲁 昌 ,
翩甘
欣í
自留热ù铡瓜哪禹娜
1 山 ~ se se se上 - - se se se人一 ~
NN 一02 lo a+ 102一 IAA 下YR TRT
图 7 10 2号菌系培养提取液趣二硝基
苯阱处理后所形成的 、 含醛基团的浅黄
色斑点 ( 1 0 2+ 中 )。 (抵藉复制品照相 )
样品代号 : N N 一 二硝基苯脐 ; 10 2 “
1 0 2号菌种发酵提取液 ; 1 0 2+ 二 1 ( )2趣
N N处理后在酸性中提取 : 1 0 2一 = 同
前 , 在碱性中提取 ; 1A A ~ 叫嵘 乙酸 ;
T R Y = 色氨酸 ; T R T = 色胺。
样品 ( 1 0 2 + 及 1 02 一 )分别点样作抵谱 , 井用未加二稍基
苯阱处理过的提取液 ( 1 0 2 ) 、 二稍基苯胖 (N N ) 、 月一引
嗓乙酸 (l A A ) 、 色胺 ( T R T ) 、及色氨酸 ( T R Y ) 等作对
照 。 用异丙醇 一氨一水 ( 9 , : 3 : 2 )作扩展剂 , 用 K N O : 显
色 ,枯果祥兑图 7。
从图 7 可以清楚看出 : 用二稍基苯阱处理后在酸
性中提取的 ( 10 2 +) , 在抵谱上显现出了三个清晰的斑
点 : 第一个是杠色的 , R f 值为 .0 先 , 与作 为 对照 的
所 I A A 完全一致 ; 第二个是黄色的 , 研值为 0 . 93 , 与
已知的 N N 一致 ; 第三个斑点也是黄色的 , 郎图 7 中
1 0 2十 中简的一个颜色较浅的黄色斑点 , 它的 fR 值为
.0 68
, 是一个新形成的斑点 。 而未握处理过的 ( 1 0 2 ) ,
象通常一样 , 出现了两个斑点 :一个是杠色的 , fR 值为
.0 ” , 与已知的庄 I A A 完全一致 ; 另一个是紫色的 , fR
值为 .0 7 4 , 也就是所要研究的对象。 如将图 7 上的
10 2 与 1 0 2 十 加以比较 , 便可清楚看出 : 握二稍基苯胖处理过的样品 ( 1 0 2 十 ) 中 , 紫色斑点
( jR 一 0 . 7的 消失了 ,不难理解这是因为它与二稍基苯胁发生作用后 , 产生了一个新的化
合物 , 形成了一个新的 、 脚 值为 .0 68 的黄色斑点 。 据此 ,我们推 ifJ : 这个 jR 值为 0 . 7斗的
4 期 余永年 :姜白黑粉菌刺激生长物盾的研究
紫色斑点 (1 0 2 ), 是一个含有醛基团的化合物 , 而且很可能是叫嗓乙醛 。 目前由于没有获
得叫嗓乙醛钝品作标准 , 难于作进一步的靓明 。 此外 , 还用了 。 . 1多 的 A g N O 。 与 S N 的
N H旧 H 在抵谱上进行了处理 ,常兑到有醛基团化合物特性的褐色斑点 出现 。
(四 ) 色胺不是菱白黑粉菌从色氮酸合成 IA A 篷径中的中简产物
爵多高等植物从色氨酸合成 IA A 的途径中 , 往往是要握过色胺阶段的 。 w olf 叫 及
cr ad y ls[] 靓明色胺是槽柏胶锈菌 、 桃精叶病菌和李黑瘤病菌从色氨酸合成 IA A 的中简产
物 。 但 w olf 冈 款为色胺却不是玉米黑粉菌合成途径中的中简产物 。 关于色胺是否是菱
白黑粉菌合成 IA A 途径中的中简产物阴题 , 我佣也进行了研究 。 ( l) 用乙醇 、乙醚 、 丙酮
照前法对培养液进行提取并点样作抵谱 ,以 1 0一 Z M 色胺作对照 , 用异丙醇一氨一水 ( 1 0 : 1 : l)
作扩展剂 , 不渝用紫外筱灯照射 , 或 K N O : 显色 , 在抵谱上都未发现与标准色胺类似的化
合物出现 ; ( 2 ) 在无 N 源的 C az ep k’ s 培养液中 , 分别于每 1 0 毫升培养液 内加入色胺 卯
或 10 0 毫克 , 并以不加任何 N 源和加 10 0 毫克色氨酸的以及加入色胺后不接种的作为对
照 。 灭菌后接入等量的小抱子悬液 , 然后同前法在恒温室振淇培养后 , 用 T B 贰剂测定 ,
并照前法用乙醚提取作抵蹭 。 就硫的多次重复拮果表明 : 一方面没有发现 IA A 的产生 ;
另一方面在抵谱上与对照作粗略的比较 , 色胺的数量也未晃有所减少 。 所以从上面贰硫
可以清楚看出 : 色胺不是菱白黑粉菌从色氨酸形成 I A A 合成途径中的中简产物 ; 色胺似
不被菱白黑粉菌利用作为 N 源 。
从上面一系列的贰硫看来 , 菱白黑粉菌利用色氨酸形成叫嗓乙酸的合成途径可能是 :
_ _ _ 「尸沐— 不 C H ,一cH 一 c o oH I _ r , _ _ 二。 _ 「}广、一cH 二 C 一co oH IL 又 / \ N H / N H Z J L \ / 、 N H , O
[才( ? ? )一弓!嗓乙醛 } } 1}L、 / 厂丁C -zH下H“
N H
I
O
( ? )一。 !嗓乙酸 [产饰一 C H Z一 c o ( ) H }。t、 / \ N H / 」
五 、 甜篇和 桔输
如前所述 ,在我们的抵谱上 , 除本文着重尉渝的叫嗓乙酸 ( IA A ) 和卿嗓乙醛 ( ? )两个
斑点以外 , 菱白黑粉菌的培养提取液 , 在抵谱上有时还出现第三个斑点 。 它在以异丙醇和
异丁一醇作扩展剂时的 fR 值分别为 0 . 6 7 和 0 . 92 。 用 K N O : 显色时为浅黄色 。 这个化合物
是否为叫嗓丙酮酸 ? 尚待进一步的研究 。
菱白黑粉菌能形成一种具有刺激植物生长作用的代榭产物 , 这种代榭产物 ,根据生物
测定 、化学反应 、抵谱分析以及精晶形状和紫外筱最大吸收攀等一系列的鉴定征明 , 它是
叫嗓乙酸 (l A A ) , 自口一般所稠的异生长素 。 生物侧定中以劈茎黄豆芽弯曲法较为敏咸而
明显 ; 4 种化学反应中以瀑玉璋等的方法为最好 ; 抵谱分析以异丙醇或异丁醇作扩展剂 ,
亚稍酸钾显色效果最理想 ;用椽砂树脂或阴离子交换杆推进行提取 , 桔果都此较好 ; 在乙
醚中的粗桔晶为片状 ;在分光光度舒下测定紫外援的最大吸收攀为 2 7 , 毫微米 。
用蛋白膝 、 酪素 、 明胶及 18 种氨基酸等作 N源 , 仅仅只有色氨酸显示出了明显的正桔
果 , 表明色氨酸是菱白黑粉菌形成 I A A 的前体 ,并且是最初前体 。 色氨酸的数量及不同地
3 4 8植 物 学 报 1 0卷
区的菌系 ,对 I A A 的产量也各不相同 。
含醛基团的一种化合物 , 很可能是叫嗓乙醛 , 是菱白黑粉菌从色氨酸形成 IA A 合成
途径中的中简产物。 这种中简产物的形成 , 可能还要通过叫嗓丙酮酸阶段 。 就瀚荻明色
胺不是菱白黑粉菌从色氨酸形成 IA A 合成途径中的 中简产物。 所以菱白黑粉菌从 色氨
酸形成 I A A 的合成途径可能 是 : 色氨酸一叫嗓丙酮酸一叫嗓乙醛一叫嗓乙酸 。
摘 耍一、一/
菱白黑粉菌 (阶it lag 口 。 ; ` “ l翻 t。 P , H e n . ) 能形成一种具有刺激植物生长的代榭产
物 。 这种代榭产物 ,根据劈茎黄豆芽的弯曲 、 sa lko w s ik 基反应 、 抵型层离分析和紫外搔最
大吸收攀等一系列的鉴定靓明 , 它是叫嗓乙酸 l( A A ) , 郎异生长素。 色氨酸是形成这种异
生长素的最初前体 。 色氨酸的数量及不同地区的菌系 , 对 I A A 的产量也各不相同 。 舍醛
基团的一种化合物 ,很可能是叫嗓乙醛 , 是菱白黑粉菌从色氨酸形成 I A A 生物合成中的中
简产物 , 这种中简产物的形成 , 可能还要通过叫嗓丙酮酸阶段 。 拭膝靓明色胺不是菱白黑
粉菌从色氨酸形成 IA A 合成途径中的中简产物 。
参 考 文 献
周光宇 , 19 5 :7 抵型层离法。 仪器分析及生物化学实靛法 。 21 一 57 , 科学出版社 , 1 9 5 7 。
赵同芳 , 19 56 : 类似生长素躺剂及其应用 。 植物生理学通靓 , 1 9 5:6 23 一 39 , 1 9 5 6 。
俞大拔 , 19 59 : 植物病理学和真菌学技术汇福 。 卷一 。 高教出版社 , 1 9 5 9。
平田正一 , 1 9 5:9 病态植物 。植物水 介 毛 y (vi l) 。 价 ilt 叮口 洲 da 。 才 y 犷一 v) 酣酸。产生乏同菌寄生 l :
上 乙宫崎裸种。 异常发育。 日本化学总霓 , 3:3 2 6 2 9 。— , 19 , :9 病态植物。植物 水 户 毛 , ( vi l ) . IE五。 。 属菌。 才 , 犷一 户醋酸 。产生 。 日本化学总霓 , 3 : 2 6 2 9 。P y 6 a H , E . 月 . 1 9 5 3 : 0 n p只珊 H e R n 班 y 月b T p a 3 6 y K o B o 泛 K o 几 e 6 a H n R B M “ K训6习。 几o r n n . 对 u KP o万u o 滩。己a习12 : 2 3一 2 7 .A l g乙u s , 5 . 1 9 4 6 : B o t a n , N o t i s e , (L u n d ) . 1 9 4 6 : 1 2 9 .
A v e r y
,
G
.
5
.
J
r
.
J
.
B e r g e r
, a n d B
.
S h a l u e h a
.
1 9 4 1 : T I丈e t o t a l e x t r a c亡io n o f f re e a u ix n a n d a u x i n p r e -
c u r s o r f r o m p l a n t t i s s u e
.
A 叨 . J . B o t . 2 5 : 5 9 6一6 0 7 .— 1 9 4 2 : T o t a l a u x in c x t r a ct io n f or m w h e a t . A o . J . B o t . 2 9 : 6 1 2一6 1 6 ·B 即 n e t 一 C la r k , T A . & N . P K e f f o r d . 1 9 5 3 : 助r o m a t o g r a p场 o f ht e g r o wt h s u b s t a n e e s i n p l a n t e x -t r a c t s . N a t “ 尹e 1 7 1 : 6 4 5 .B e n t l e y , J . A . & A . B . B ic k l e . 1 9 5 2 : S t u d ie s o n p l a n t g r o w ht h o rm o n e s . I · B i o lo ig e a l a e t ivi t i e s o f3一 in d o ly la e e t a l d e h y d e a n d 3 一 in d o l yl a e e to n i t r il e . J o u r . 瓜P . B o t . 3 : 3 9 3- 4 0 5·— . 1 9 5 2 : S t u d ie s o n p la n t g r o w th h o r m o n e s . 11. F u r t he r b io l o g ic a l P r o p e r t ie s o f 3 一 i n d o le ly -
,J.ō工.,JJ1ō32月’ t`护产OrL. r
. LlrL
1 7 ]
更8 ]
汇9 ]
王1 0 ]
l a e e ot
n i t r il e
.
B e : d u c o u
,
J
.
R
.
A c a d
.
S c i
.
]
o 召产 . 刀义夕. B o t . 3 : 4 0 6一 4 2 3 .
1 9 4 9
:
(P
a r i s)
1 9 5 2 :
ch 能 l e s v e g e t a u x . C
B e r g e r
,
J
.
& G
.
S
·
f r o m
B t i a n
t口a 1 Z C -
P W
A牌 . 了
R e c h e r c h e : : u : le m o d 。 d ,a e t i o n d e e e r t a in s : h a m p i g n o n s p a r a s i t e s (N e c t r i a )
.
C
.
2 2 8 : 1 0 5 2
.
L e r 6 le d e la e i d e i n d o l
一
B a e e t i q u e d a n s la f o r m a t i o n d e s e h a n e r e s p a r a s i t a i r e s
R
.
A
c政d . S c i . (P a r is ) 2 35 : 3 0 9
.
vA
e r y
.
1 9 4 4 : I s o l a之io n o f a n a u x i n p r e e u r s or a n d a n a u x i n ( in d o le a e e t ie a e i d )
B o t
.
3 1 : 1 9 9一2 0 3 .
& H
.
G
.
H e m m i n g
.
1 9 5 7 : A r e l at i o n b e tw e e n 山 e e f fe e t s o f g i b b e re ll ie a c i d a n d i n d o -
Jyl
a a 沈 i c
.ocsadnB
r ia n
E 冲 .
a ic d o n p l a n t e e ll e xt
e n s io n
.
N a t u , e 1 79 : 4 17
·
.
W
.
1 9 5 7
:
T h
e e f f e ct s o f s o m e m i e r o b ia l m e t a b o li` p r o d u c t s o n p la n t g r o w th . s ,牌 P
0 .1 1 1
: 1 6 6一 1 8 2 .
PiB
C r ad y
,
E
.
D ib o try
o 刀
C ar Ol e 艺 , F
.
E
.
& F
.
T
.
W
o lf。 1 9 5 9 : T h e p r o d u吐 i o n o f i n d o l e a c e t iC a c id b y T a户h犷in d d e j o r , a n s
形。 , b o s u舰 . P八y s宕0 1. P I召 n t , 12 : 5 2 6 .
1 9 5 4
:
4
P a p e r c h
r o m at
o gra p h y
. (S
e 口n d r e v i s e d a n d e n la r g e d e d it o n ) , 1 24 p p . L o n d o n
123]45678]
、
9jn仁lT[
4 期 余永年 :姜白黑粉菌刺激生长物盾的研究 3 4 9
M a eM ill a n
C u t ris
,
R
.
A劝盯 g 订俪
&
W
C o
.
L td
.
1 9 5 8 : C u vr a t u r e s
力仓e r . P la n t P人iys o l .
a n d
3 3 :
R o o t e u vr a t u t e s
m a l f o r m a t i o n s o f b e a n
1 7一 2 2 .
i n d u e e d b y c u lt
u r e fi l t r a t e s
p l a n t s e a u s e d b y
e u l亡u re f il t r a te o f
o f A s P e r g il俪 n i g e ; . S c i e n c e 1 2 8 : 6 6 1 .
F盖h r a e u s
iF s ch e r
,
P P
-
G
o rd o n
,
G
.
G
.
W
.
1 9 5 8 :
1 9 6 1 : o x id a t i o n
& C
.
5
.
H
o l t o n
.
o f i n d
o
l
e 一 3
一 a c e t i e a e id b y f
u n g a l L a e c a s e
. 助y s io l . 尸之`刀 t . 14 : 1 7 1一 1 7 6 ·
1 9 5 7 : B i o l o g y a n d
c o n t r o l o f ht e s m u t f u n g i
.
R o n a ld P
r e s s
oC
.
6 2 2
5
. 人 .
hT
o p re
c u r s o r s
& F
.
S a n ch
e z 一N ive a
.
o
f i
n
d
o
l
e a c e右e a e id .
& R P
. 双产 e b e r . 1 9 5 1
1 9 4 9 : T h e b i
o s y n th e s i s o f a u x in i n th e v e g e t a t i v e p i n e a P p l e
.
11
.
A忍滩. B jo c入e牌. & B矛o P乃夕. 2 0 : 3 6 7一 3 8 5 .
: c o l o r im e t r i e es t i m a d o n o f i
n d o le a e e t i e a c i d
. 尸za 龙 t 尸人,石 0 1. 2 6 :
下`J1.J,JIJ1.,
nl
J .,`内J月咔尸j,`,2,ór
. Lr丈fLftf
.几`
〔2 6 ]
12 7 ]
1 9 2一1 9 5 .
G r u e n
,
H
.
E
.
1 9 5 9
;
A
u x i n a n d fu n g i
.
A朋 . R印 . 尸艺朋 t 以 iys o z. 10 : 4 0 5~ 一 4 4 0 .
H a a g e n
一
Sm i t
,
A
.
T
.
e t a l
. ,
1 9 4 2 : hT
e es t im a t访n , i s o la t io n a n d id e n t i f ic a t i o n o f a u 石 n s i n P la n t m a -
t e r i a l s
.
A脚 . J . B o t . 幼 : 5 0 0一5 0 6 .— . 1 9 4 6 : I s o la t i o n o f 3一 i n d o ! e a e e t i e a c id f r o m i m m a t u r e c o r n k e r n e ls . A舰 . J , B o t . 3 3 :1 1 8一1 2 0 .H a s k in s , R . H . 1 9 4 9 : F e r m e n t a t io n s t u d i e s o f sU “ l a g o s p p . A 附. ] . 丑o t . 3 6 : 8 0 9一8 1 0 .— . 1 9 5 0 : B io ch e m is t ry o f th e U s t il a g i n a l e s . I . P r e lim i n a ry e u l t u r a l s t u d ies o f 阶 t ial g o之心召 e , C明 . 了. B 口.t C . 2乐 21 3 e 223 . !— et al . , 1 9 5 5 : B i o hc e m i s t r y o f ht e U s t i la g in a l e s x l . M e t a b o li c p r o d u e t : o f U s“ 坛 9 0 之e a ein s曲m e r罗d cu lt u r e . C a n . J . 粼 i c , o bi o l . 1 : 7 4 9e 75 6 .H i r a t a , 5 . ` 1 9 5 4 : S tu d ie s o n th e P h y t o h o r m o n e i n ht e m a l fo r m e d p o r t io n o f 出 e d i s ae : e d P l a n t s ,1 . 孔 e r e la t io n b et w e n t h e g r o w th r a t e a n d t h e a m o u n t o f fr e e a u x in i n th e f un g o u s g a ll s a n dv i r u s一 in f e ct e d P la n t : . A朋 , Ph y t o P a t h . S o c . ] a P a n 1 9 : 3 3一 3 8 ·— . 1 9 5 6 : S t u d ie s o n ht e 卢h y t o h o r m o n e in t h e m a l f o r m e d p o r t i o n o f th e d is e a ` e d p la n t s ,11 . o n ht e r e f o r m a t i o n a n d t h e s it u a it o n o f f r e e 一 a u x in i n th e t i s s u e o f fu n g o u s g a ll s . A n . Ph少云。 -P ` t人,. So c . ] a P a n 2 1 : 1 8 5一1 9 0 .— . 1 9 5 7 : S t u d i e s o n th e p h y t o h o r m o n e in th e m a lf o r m e d P o r t io n o f t h e d is e a忿e d P la n t s .11 . A u x in f o r m a t i o n o n th e ; u lt u re 歇 o w n xE o b召了矛d潇召用 , 了即再~ a n d 乙7“ 月` 9 0 sp p . A 。刀 . P左yt o P召2tjJSo c . ] a P a n . 2 .2 : 1 5 3一1 5 8 .H u b e r , H . 1 9 5 2 : U b e r d e n E i n g lu s s d e r B e lie h t u n g a u f d ie W u ch s s t o ff e m p fi n d一ie h k e i t d e r K e im s t e n g e lv o n C 邵
~
t’s , a t沁脚 L . B e r . Se滩创 e女 . B o t . G ` 又 6 1 : 4 9 9一 5 3 8 .
K
e f f o rd
,
N
.
P
.
1 9 5 5
:
hT
e 歹o w t h s u b s t a n c e s s o p a r a t e d f r o m P la n t e x t r a e t s by c bx o m a t o g r a p h y . ] . 反 P .
B o t
.
6 : 1 2 9一1 5 1
K e n t
,
M
.
& W
.
A
.
G
o r t n e r
.
1 9 5 1
: E f f e c t o f p r e
一
i llu m i n a t io n o n t h
e r e s p o n s e o f s P li t p e a s t e m s ot
g r o w ht
s u b s at n c e s
.
B o才. G程 . 1 12 : 3 0 7一 3 1 1 .
L a r s e n
,
P
.
1 9 4 9 : C o vn
e r s io n o f i n d o le a c e t a l d e h y d e t o i n d o l e a e e t i e a c i d i n e x c i s e d
c o le o p t il e s a n d
i n c o le o p t i l e iu i c e
.
A脚 . J . B o t . 3 6 : 3 2一 4 1 .— . 1 95 5 : G r o w ht s u b s t a n e e s i n h i gh e r p la n t s , I n M o d e nr m e th o d s o f p l a n t a n a ly s is . V o l .11工. P P . 5 6 5we 6 2 5 .L e o p o ld , A . C . 1 9 5 5 : A u泛 n s a n d P l a n t g r o w t h . U n iv . o f C a li f o r n i a P r e s s , B e r k e ley a n d L o s A n -g e le s . 3 5 4 , p p ·M e i s t e r , A 1 9 5 7 : B io e h e m is t ry o f t h e a m in o a e i d s . A ca d e m i e P r e s s I n e . 4 8 5 p p .
M o u t o n
,
J
.
E
.
1 9 4 2 : E x t ar
c t i o n o f a u x 还 f r o m m a iz e , f r o m s m u t 切 m o r s o f m a i: e , a n d f r o m U st i l a ` o
之e a e . B o t . G a 之. 1 03 : 7 2 5 .
N i t
s hc
,
J
.
P
.
a n d C N i t
s e h 1 9 5 6 : S t u d i e s o n t h e g r o wt h
o f e o l e o p t i l
e a n d fi r s t int e r n o d e s e c t io n s
,
A n e w
,
s e n s i t i v e
, s t r a i g h t
一
g r o w t h t e s t f o r a u x 加 5 . P la 称 t P人ys 宕0 1 . 3 1 : 9 4 .
o u
,
5
.
H
.
(欧世脚 . 29 3 5 : A p r e li m i n a r y r e p o r t o n th e s t u d y o f th e s m u t o f Z趁a 刀 i召 勿 t ifb ial 肠 r e z ·
S衍 e n万 ` 9 : 2 5 9一 2 6 1 .
P e a e h
,
K
.
a n d M
.
V
.
rT
a c e u
.
1 9 5 5 : M o d e r n m et h o d s o f p la n t a n a ly s i s
.
V o l
.
1 11
.
7 6 1 P p
.
7 7 fi gs
.
R a n k e r
,
E
.
R
.
1 9 3 0
: S y n t h e t i c n u t r i e n t s o lu t io n s f o r e u l t u r i n g U s t公l召 9 0 z e a e . ] . A g , . R e , . 4 1 : 4 3 5一
4 4 3
.
Sa rt o r i s
,
G
.
B
.
1 9 2 4 : S t u di e s in rh e lif e h i s t o r y a n d P h y
s io l
o
gy
o f e e r t a in s m u t s
.
A 脚. J . B o r . 1 1 :
6 1 7一6 4 7 .
S e n
,
5
.
p
.
a n d A
.
C
.
L e o p o ld
.
1 9 5 4
: P a p e r ch r o m a t o g ar p h y o f p la n t g r o w th r e g u l a t o r s a心 a lli e d c o m -
p o u n d s
.
P 八y : 10 1 . P I召n t . 7 : 9 8一 10 8 .
8190]22
飞é,jù人ùr.Lr`r.L`
1J., .J月j4月j,
r
.`
.`
I
J1..1JIJ
, we三只一ù人U11ǎ卜n,U门、à内、ó月jJ斗
!
4 1
t 4 2
1..JJ内J4连.4r.
.
L峨.胜L
)4 5 ]
L4 6 ]
1..J1
.
7
才nēù
4
r卫.Lr
3 5 0植 物 学 报 1 0卷
f 5 6 ]
[5 7 ]
S e hro e de r
,
G
.
A
,
a n d G
.
S p e e t o r
.
1 9 5 7 : E f f e e t o f g ib b e r e l lie a e id a n d in d o le a c e t i e a c id o n g r o w t h
o f ex
e i s e d fr u i t t i : s u e
.
S c i e 刀七e 126 : 7 0 1一7 0 2 .
S k o o g
,
F
.
1 9 5 1
: p la n t g r o w t h s u b s t a n c e s
.
U n iv
.
o f W i
s e o n s i n P r e s s
.
4 7 6 p p
,
S o m m e r
,
N
.
F
.
1 9 6 1 : P r o d u ct io n b y T a P乃, in a d e f o r , 召 n : o f s u b s t a n e e s s t im u la t i n g e e l l e l o n g a t i o n
a n d d iv i si o n
. 尸人少 10 2. p l a n t . 1 4 : 4 6 0一 4 6 9 .
aT
n g
,
y
.
w
.
(潺玉璋 ) , a n d J . B o n n e r . 1 9 4 7 : hT e e n z ym a t i c i n a ct iv a t i o n o f i n d o l e a e e t ic a e i d . I ·
S o m e c h a r a e t e r i s t i e o f ht e e n z y m e c o n t a in i n g in p e a s e e d li n g s
.
A r c人. B云o c乃e邢 . 1 3 : 1 1一 2 5 .
T a t u m
,
E
.
L
.
a n d D
.
B o n n e r
.
1 9 4 4 : I n d o le a n d s e r i n e i n t h e b io sy n t h e s is a n d b r e a k d o w n o f t r y P
-
t o P h a n
.
P r o c
.
N 召t l
.
A c a d
.
S c矛. U . 5 . 3 0 : 3 0一 3 7 .
hT i m
a n n
,
K
.
V
.
1 9 3 5
:
O n t h e p l a n t g r o w t h h
o r m o n e p r o d u c e d b y R人iz o P。 : 5 0 1。 。 5 . J . B i o l . C左e牌 .
1 0 9 : 2 7 9一 2 9 1 .
OT
n h a z y
,
N
.
E
.
& M
.
J
.
P e l c z a r
.
1 9 5 4 : O x id a t i o n o f in d o l e a e e t ic a c id b y a n e x t r a c e ll u la r e n z y m e
f r o m P o ly P o拟 s 刀 e rs ic o l o , a n d a s im ila r o x i d a t i o n c a t a l邓 e d b y n i t r i t e , S c i e n c e 12 0 : 1 4 1一1 4 2 .
U lr i c h
,
J
.
M
.
1 9 6 0 : A u x in p r o d
u e t io n b y m y e o r r h i , a l f u n g i
.
Ph岁 10 1. { lP a n一 1 3 : 4 2 9一4 4 3 .
W
a i n
,
R
.
E
.
a n d F
.
W ig h
tm a n
.
1 9 5 6 : hT
e e h e m i s t即 a n d m o d e o f a ct i o n o f p la n t g r o w th s u b s t a n c e s .
L o n d o n
.
3 1 2 p P
.
W
e n t , F
.
W
.
1 9 3 4 : o n th e p e a t e s t m e t h o d f o r a u x i n
, t h e p la n t g r owt h h
o r m o n e
.
rP
o c
.
K
o形 . A k a以 .
军 e r e 龙s c人. A 脚对 e dr a 邢 3 7 : 5 4 7一5 5 5 .
W
o l f
,
`
F
.
T
.
1 9 5 2 : 竹 e p r o d u e t i o n o f in d o l e a e e t ic a c i d b y U s t iz a g o 之e a e , a n d i t s p o s s i b le s ig n i f ie a n c e
i n t u nt o r f o r m a t io n
.
P了o e
.
N a t
’
l
,
A e a d
.
S` 滋. U . 5 . 3 8 : 1 0 6一 1 1 1 .— . 1 9 5 6 : T h e p r o d u c t io n o f i n d o le a c e t i e a e id b y t h e e e d a r a p p l e r u s t f u n即 s , a n d i t sid e n t i fi e a t io n b y p a p e r e h r o m a t o g r a p h y . P人夕t o P以人. 2 . 2 6 : 2 1 9一2 2 3 .W i ld m a n , 5 . G . e z a l , 1 9 4 7 : T h e e n z y m a t ic e o n v e r s io n o f t r y p t o p h a n t o a u x in b y s p in a c h l e a v e s . j .A r c人. B i o c人e m . 1 3 : 1 3 1一 1 4 4 .— . 1 9 4 8 : o b s e vr a t io n s o n th e ch e m ic a l n a t u r e a n d f o r m a t io n o f a u石 n in t h e A 口e n a e o -l e o p t i le . A m . ] . B o t . 3 5 : 7 4 0一7 4 6 .Z s e h e il e , F . P . 1 9 5 1 : N u t r i e n t s t u d i e s w ith ht e w h e a t b u n t f u n g u s , T il et ia “ r萝e s . P人夕t o P a t 滩. 4 1 :1 1 1 5一1 1 2 4 .
, .J, .Jù
we
月1
O
声`门J .`,一,j41勺4ù勺ō051为尸jj
r
we
óù..LL学
ef1
r
1..1JJ, ,`JJù找0nlj,1勺`ZJù勺óJZUzO`人了0r,t.Lf月
卫rLLf
.`
ST U D IE S O N T H E P R O D U C T IO N O F IN D O L E A C ET IC
A CDI B Y t IS T IL A G O E S C U L石N T A P . H EN N .
Y 廿 Y u N O 一 N z E N
( I
n s t i t o t e o f 粼 i.c r o b i o l o g , , ` A e a d e撰 ia Si n i e a )
A B s T R A e T
A m e t a b o l i e p r o d u e t
,
p r e s e n t i n t h e e u l t u r e m e d i a o f U s t il 铭 0 e s c配 l e 刀 t a P . H e n n . ,
h a s b e e n id e n r i f i e d a s i n d o l e a c e t i c a e id (I A A )
.
T h e id e n t i f三c a t i o n o f t h i s c o m P o u n d
w a s b a s e d u p o n t h e s p l i t
一 s o y b e a n e u r v a t u r e t e s t
,
f o u r i n d e p e n d e n t c o l o r t e s t s
,
p a p e r c h r o
-
m a t o g r a ph y a n d t h e a b s o r p t i o n s p e c t r u m i n u l t r a
一 v i o l e t li g h t
, a s e o m p a r e d w it h t h o s e o f
t h e k n o w n s y n t h e t i c c om
p o u n d
.
P e P t o n e
,
g e l a t i n
, c a s e i n h y d r o ly s a t e
,
f a t
一
f r e e m i lk a n d a n u m b e r o f a m i n o a c id s w e r e
u s e d a s t h e n i t r o g e n s o u r e e i n t h e c u l t u r e m e d i a
.
T r y p t o p h a n a p p e a r e d t o b e t h e o n ly
p r im a r y P r e c u r s o r o f IA A i n U s t滚l咭 0 e s c u l e耐 a . O n e o f ht e i n t e rm e d i a r y P r o d u e t s id e n -
t i f i e d b y P a P e r c h r o m a t o g r a P h y s e e m e d t o b e i n d o l e a e e t a ld e场 d e . T h e i n d o l e a e e t a l d e -
h y d e 15 t h o u g h t t o b e p r o d u e e d f r o m t r y p t o p h a n t h r o u g h i n d o l e p y r u v i e a c id
.
E v id e n c e
15 P r e s e n t e d t o s h o w t h a t t r y P t a m i n e 15 n o t a n i n t e rm e d i a t e m e t a b o li t e f o r I A A P r o d u c
-
t i o n i n t h i s m i c r o o r g a n i s m
.