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活性炭对鼎湖山紫背天葵组培苗生根的影响



全 文 :·药用植物栽培·
活性炭对鼎湖山紫背天葵组培苗生根的影响
陈雄伟,邵 玲* ,梁 廉,潘镇涛
(肇庆学院生命科学学院,广东 肇庆 526061)
摘要 目的:以带有球茎的不定芽为外植体,探讨不同植物生长物质与活性炭(AC)对鼎湖山紫背天葵组培苗
生根和移栽的影响。方法:组织培养单因子试验法。结果:NAA 0. 3 mg /L + IBA 0. 2 mg /L 的组合较好地诱导球茎
芽丛生根,但根数仍较少,根细、短小,幼小的不定芽萌发数量较多。添加 300 mg /L活性炭明显提高生根质量并且
抑制细芽点的分化,根数多达 15. 5 条,根长范围在 2. 0 ~ 5. 1 cm,根系发达,并且组培苗植株较高、球茎和叶片质量
佳,生长健壮。将生根的组培苗带球茎分散为丛芽的形式移栽到泥炭土-珍珠岩(3∶ 1)的混合基质中,移栽后成活
率达到 100%,植株出苗快,长势旺盛。结论:以 MS +蔗糖 30 g /L + NAA 0. 3 mg /L + IBA 0. 2 mg /L +活性炭 300
mg /L +卡拉胶 7. 0 g /L作为紫背天葵组培苗的生根体系,是离体快繁和保存本地特色植物的有效途径。
关键词 鼎湖山;紫背天葵;植物生长物质;活性炭;生根
中图分类号:R282. 2 文献标识码:A 文章编号:1001-4454(2012)09-1369-05
Effect of Activated Charcoal on Rooting in Tissue Culture Seedling of
Begonia fimbristipula on Dinghushan Mountain
CHEN Xiong-wei,SHAO Ling,LIANG Lian,PAN Zhen-tao
(College of Life Science,Zhaoqing University,Zhaoqing,526061,China)
Abstract Objective:To study the effect of different plant growth substance and activated charcoal on rooting in culture seedling
of Begonia fimbristpula on Dinghushan mountain. Methods:Tissue culture single factor experiment method was used. Results :NAA 0. 3
mg /L + IBA 0. 2 mg /L preferably induction adventitious bud clump with corm to take rooting,but the number of adventitious root were
less,short and small,callow shoot more germination. 300 mg /L activated carbon obviously increased radicate quality and inhibited fine
buds point differentiation,root number up to 15. 5 institia,root length range was 2. 0 ~ 5. 1 cm,root system developed. Tissue culture
seedlings were higher,corm and leaf were good quality,strong growth. Took root of seedling cultivation with bulb for bush in the form of
scattered bud planted to peat soil:perlite (3∶ 1)mixed in matrix,after the transplant survival rate reached 100%,plant form seedlings
fast,grew exuberant. Conclusion:MS with sucrose 30 g /L + NAA 0. 3 mg /L + IBA 0. 2 mg /L + activated carbon 300 mg /L + carrag-
eenan 7. 0 g /L as the tissue culture seedling of Begonia fimbristipula radicate system,is rapid propagation and preserve local unique
plant in an effective way.
Key words Dinghushan Mountain;Begonia fimbristipula Hance;Plant growth substance;Activated carbon;Rooting
收稿日期:. 2010-01-09
基金项目:广东省科技计划项目(2010B060200012)
作者简介:陈雄伟(1958-) ,男,副教授,研究方向:药用植物生理及栽培;Tel:0758-2716359,E-mail:cxw@ zqu. edu. cn。
* 通讯作者:邵玲,Tel:0758-2716359,E-mail:shaoling@ zqu. edu. cn。
紫背天葵(Begonia fimbritipula Hance)是秋海棠
科多年生、稍肉质的矮小草本植物〔1〕,自然栖息于
山谷、溪边或林中阴湿的石缝中,以生于溪流附近悬
崖石壁处的株型较大,植株一般具 1 ~ 2 叶,常见叶
面绿色,背面红紫色,形似葵扇,故而得名〔2〕。紫背
天葵地上茎盘状短缩,地下茎肉质,一般呈球形,俗
称“球茎”。球茎是其主要的无性生殖器官,须根通
常由球茎发出,根系的长度和丰度一般随植株大小
而异。鼎湖山紫背天葵以其广为人知的药用保健功
效而声名远扬,享誉全国。但是,由于其险峻的生长
环境、较低的生物产量,加上长期人为破坏性采挖及
自然繁殖系数偏低,导致野生紫背天葵资源日益缺
乏。近年,在前人研究的基础上〔3〕,结合现时组织
培养技术手段的成熟,通过不定芽诱导的途径,我们
已建立了一套基本成熟的紫背天葵快繁体系〔4〕,但
实验中发现,以不定芽诱导单株幼苗生根的效果仍
不佳,根的数量偏少,根的质量偏低。根系是植物吸
收营养和固定植株的主要器官,因此提高紫背天葵
组培苗生根质量是一个必不可少的关键环节。
一般认为,活性炭能吸附外植体产生的有害物
质,且其所创造的黑暗环境也有利于不定根的诱导
和根系的生长,将活性炭应用于组培苗的生根是一
种常用的附加物。为提高紫背天葵组培苗的生根率
及其质量,我们在筛选出适合紫背天葵生根的基础
培养基后,进一步开展活性炭对紫背天葵组培苗生
根的研究试验,以期建立完善的秋海棠科紫背天葵
·9631·Journal of Chinese Medicinal Materials 第 35 卷第 9 期 2012 年 9 月
DOI:10.13863/j.issn1001-4454.2012.09.007
组织培养体系,更好地保存鼎湖山珍稀特有植物的
种质资源。
1 材料与方法
1. 1 试验材料 供试的紫背天葵(Begonia fim-
britipula Hance)采自鼎湖山国家级自然保护区草
塘,均为本地野生资源,经愈伤组织诱导和不定芽分
化增殖后,取已分化出芽,苗高约 1. 0 cm 带有球茎
的无根试管苗(以下简称为球茎芽)进行生根试验;
活性炭(分析纯,由上海国药化学试剂有限公司生
产)。
1. 2 方法
1. 2. 1 紫背天葵组培苗生根配方的设计:以 MS
为基本培养基,选择球茎直径约 0. 3 ~ 0. 5 cm 的芽
丛作为外植体,接种入由不同浓度植物生长调节剂
NAA(0. 1、0. 2、0. 3 mg /L)和 IBA(0、0. 2、0. 4 mg /
L)组成的生根培养基中诱导生根,并分别添加卡拉
胶 7. 0 g /L、蔗糖 30 g /L,调整 pH为 6. 0。培养过程
中,观察各培养基的平均生根时间,并于 40 d 时进
行统计分析,同时筛选出诱导生根的最佳基本培养
基。然后,进一步加入 0、50、100、200、300、400、
500、1 000、2 000 mg /L 活性炭进行单因素试验,探
讨添加活性炭对紫背天葵生根的影响。
1. 2. 2 培养室条件设置:将接种后的瓶苗存放于
(25 ± 1)℃,空气相对湿度 70%;光照强度为 8 ~ 10
μmol /(m2·s)左右,每天光照 10 h 的条件下培养。
每隔 10 d记录球茎芽生根及植株生长情况,并在 40
d后,开瓶测定不定根、球茎、叶片和植株整体的生
长情况。其中,生根率 =(总根数 /接种外植体的总
数)× 100%;出芽系数 = 新增殖的芽数 /接种外植
体芽的总数;生物增长量 =瓶苗总生物量 -接种外
植体的生物量;球茎增殖系数 =新增殖的球茎总数 /
接种外植体球茎的总数。
1. 2. 3 紫背天葵组培苗的驯化移栽:当紫背天葵
组培苗培养 40 d 后,将组培苗移至窗边,加强光照
(约 15 μmol /(m2·s) )7 ~ 10 d 后,松动瓶盖,逐步
炼苗。然后打开培养瓶,并用镊子搅动培养基,以免
把苗子倒出时损伤根。流水洗净球茎和根部的培养
基(避免因带培养基而使微生物滋长) ,移栽到装有
基质(泥炭土∶珍珠岩 = 3∶ 1)的营养盆中,适量浇水
后,移置光照度为 18 ~ 20 μmol /(m2·s)、平均温度
为(25 ± 1)℃、相对湿度为 90% ~93 %的培养室中
培养,光照时间为 12 h /d。30 d 后统计移栽成活
率,成活率 =(移栽存活的试管苗数 /移栽试管苗的
总数)× 100%。试验重复 3 次。
2 结果分析
2. 1 不同 NAA与 IBA 组合生根培养基对紫背天
葵试管苗生根的影响 紫背天葵野生植株固有的生
物学性状,须根系从球茎表面发出〔1〕。因此,我们
选取带有 1 ~ 2 个球茎的芽丛作为外植体进行不定
根诱导。结果显示,NAA与 IBA组合对外植体不定
根与不定芽的形成均有较大的影响(表 1) ,新生不
定根在培养基表面和培养基里面均有分布。其中,
单独 NAA处理有利于不定芽的生成(A1 ~ A3) ,出
芽系数达到 3. 42 以上,密密麻麻分布于接种球茎或
新生细小球茎表面,形成团状芽丛的形态;虽然有不
定根的形成,但生根时间偏长,单株根数极少。在
A5、A6 和 A7 的组合中,不定芽的形成受到一定的
抑制,但却明显有利于不定根的诱导,表现为生根时
间提早 4 ~ 5 d,单株根数较多,根长度为 1. 0 cm 左
右,其诱导效果比 A8 和 A9 的组合还好。综合不定
根各项评价指标,经重复试验表明,A6 培养基最有
利于诱导球茎芽丛的生根。因此,我们将 MS +蔗糖
30 g /L + NAA 0. 3 mg /L + IBA 0. 2 mg /L +卡拉胶
7. 0 g /L的组合作为紫背天葵生根的基本培养基。
2. 2 添加不同浓度活性炭对紫背天葵试管苗生根
的影响 表 2 可见,在上述基本培养基中添加适宜
浓度(50 ~ 500 mg /L)的活性炭后,对紫背天葵球茎
芽丛不定根的生长有明显的协同促进作用。低浓度
(50 ~ 300 mg /L)活性炭诱导生根的效果最好,生根
时间基本一致,根数多,平均单株根数达到 10 ~ 15
条,根长度与根系表观质量明显优于基本培养基的
处理。但是,当活性炭含量高于(1 000 ~ 2 000 mg /
L)时,其不定根数量及长度与 B1(未添加时)的效
果相近甚至下降,表现出一定程度的抑制效应。这
说明活性炭的浓度与紫背天葵试管苗生根的诱导效
果不呈线性关系,低浓度的活性炭更有利于紫背天
葵不定根的生长。活性炭浓度太高可能使培养基中
相关的生根调控因子也被吸附,从而影响了不定根
的诱导效果。
图 1 揭示适宜的暗环境有利于紫背天葵不定根
的避光生长,根系生长旺盛。没有添加活性炭的基
本培养基中不仅根数少,根细短,并且不定根大部分
着生在培养基表面(图 1-a)。活性炭浓度为300 mg /
L的培养基中不定根的根数最多,根系丰富且潜入培
养基里面,生长旺盛(图 1-b)。与图 1-a 相似,1 000
mg /L的培养基根数较少,根较短,大部分在培养基表
面生长(图 1-c)。根系有避光生长的特性,B1、B8 和
B9(表 1)的不定根大部分生长在培养基的表面,这可
能也是影响其不定根生长质量的原因之一。
·0731· Journal of Chinese Medicinal Materials 第 35 卷第 9 期 2012 年 9 月
表 1 植物生长调节剂 NAA和 IBA组合对紫背天葵不定根与不定芽生长的影响
编号
NAA
/(mg /L)
IBA
/(mg /L)
生根时间
/d
生根率
/%
总根数
/条
平均根数
/(条 /株)
根长度范围
/cm
不定芽总
数 /个 出芽系数
A1 0. 1 0 13. 7 ± 1. 5 63 7 ± 1. 4 0. 6 ± 0. 04 0. 1 ~ 0. 3 53 ± 5. 2 3. 42 ± 0. 41
A2 0. 2 0 13. 3 ± 2. 1 100 39 ± 3. 3 3. 25 ± 0. 27 0. 1 ~ 0. 3 56 ± 5. 1 3. 67 ± 0. 58
A3 0. 3 0 14. 0 ± 1. 0 100 45 ± 5. 1 3. 75 ± 0. 55 0. 2 ~ 0. 7 52 ± 3. 4 3. 33 ± 0. 63
A4 0. 1 0. 2 9. 0 ± 1. 0 100 65 ± 7. 4 5. 41 ± 0. 19 0. 3 ~ 0. 8 40 ± 2. 3 2. 33 ± 0. 04
A5 0. 2 0. 2 10. 7 ± 0. 6 100 73 ± 6. 6 6. 08 ± 0. 36 0. 3 ~ 1. 0 40 ± 3. 8 2. 33 ± 0. 37
A6 0. 3 0. 2 8. 7 ± 1. 2 100 93 ± 9. 2 7. 75 ± 0. 52 0. 2 ~ 1. 4 36 ± 3. 3 2. 00 ± 0. 11
A7 0. 1 0. 4 12. 7 ± 1. 5 100 56 ± 5. 8 4. 67 ± 0. 41 0. 2 ~ 0. 9 30 ± 1. 7 1. 50 ± 0. 25
A8 0. 2 0. 4 12. 3 ± 1. 5 100 31 ± 4. 5 2. 58 ± 0. 61 0. 2 ~ 0. 8 30 ± 2. 7 1. 50 ± 0. 38
A9 0. 3 0. 4 10. 0 ± 1. 9 100 23 ± 4. 4 2. 92 ± 0. 23 0. 2 ~ 0. 4 31 ± 4. 6 1. 58 ± 0. 07
表 2 不同浓度活性炭与基本培养基组合对紫背天葵生根的影响
编号 活性炭/(mg /L)
生根时间
/d
生根率
/%
总根数
/条
平均根数
/(条 /株)
根长度范围
/cm 根系外观形态
B1 0 9. 3 ± 1. 5 100 67 ± 4. 1 6. 09 ± 0. 84 0. 5 ~ 1. 3 根少,细短,白色半透明
B2 50 10. 3 ± 2. 1 100 103 ± 3. 9 9. 36 ± 1. 69 2. 1 ~ 3. 2 根多,细长,白色半透明
B3 100 8. 7 ± 0. 6 100 111 ± 6. 5 10. 09 ± 0. 18 1. 9 ~ 3. 5 根多,细长,白色半透明
B4 200 7. 7 ± 0. 6 100 135 ± 4. 4 12. 27 ± 2. 50 2. 3 ~ 4. 8 根系丰富,稍粗,较长,白色半透明
B5 300 8. 3 ± 1. 5 100 171 ± 10. 6 15. 54 ± 1. 83 2. 0 ~ 5. 1 根系丰富,稍粗,较长,白色半透明
B6 400 9. 0 ± 1. 0 100 83 ± 9. 8 7. 54 ± 1. 15 1. 3 ~ 2. 0 根多,细长,白色半透明
B7 500 10. 0 ± 1. 0 100 69 ± 3. 5 6. 27 ± 1. 37 1. 5 ~ 2. 2 根多,细长,白色半透明
B8 1000 13. 7 ± 1. 5 100 45 ± 5. 5 4. 09 ± 0. 85 0. 7 ~ 1. 3 根少,较粗,短,浅黄色透明状
B9 2000 15. 7 ± 1. 5 100 41 ± 6. 6 3. 72 ± 0. 20 1. 1 ~ 1. 5 根稀少,较粗,短,浅黄色透明状
图 1 紫背天葵不定根在几种活性炭浓度培养基中的生长情况
a 、b、c活性炭浓度分别为 0 mg /L、300 mg /L、1 000 mg /L
2. 3 不同浓度活性炭对紫背天葵外植体部分生长
指标的影响 在掌握活性炭诱导紫背天葵不定根生
长的情况下,我们同时对外植体球茎芽丛的生长状
况进行统计。表 3 显示,与对照 B1 相比,活性炭对
外植体生长也具有较好的促进作用,球茎芽丛的生
物增长量、株高、叶片直径等指标均有不同程度的增
加。其中 300 ~ 500 mg /L的活性炭对组培苗的生长
最有利,球茎芽丛株高 2. 5 ~ 2. 8 cm 左右,叶片大,
叶色翠绿,外植体生物增长量达到 6 ~ 7 倍,明显高
于其它浓度的处理。随着活性炭浓度的增加,组培
苗叶片的颜色随之变得更加浓绿,长势旺盛;老叶叶
背和叶脉略显浅红色。值得注意的是,在 1 000 ~
2 000 mg /L 的培养基中,外植体的生物增长量较
低,组培苗较矮,但叶片的直径最大,叶片苍绿,结合
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两者不定根生长都受到抑制的现象(表 2) ,从植株
生长的相关性分析,这可能属于一种无菌苗地上部
分补偿性生长的现象。
紫背天葵的植物学形态主要由叶片、球茎和须
根 3 部分组成,一般呈簇状或丛生状。生根培养中
我们发现(图 2-a) ,在不含活性炭的基本培养基中,
外植体球茎的增殖系数为 1. 94,球茎芽丛呈明显的
簇生状,叶片与球茎直径均较为细小。而添加活性
炭后,外植体球茎的分蘖数量都小于基本培养基,活
性炭浓度超过 500 mg /L 时,几乎没有新增球茎出
现,增殖系数仅为 0. 31。由于球茎主要生长于培养
基的基质中,活性炭所制造的黑暗环境及其对培养
基基质中抑制物质的吸收均有利于球茎的生长,因
此,添加活性炭的培养基中球茎有明显的生长之势,
直径在 0. 4 ~0. 6 cm之间,而基本培养基的球茎直径
只在 0. 25 ~0. 33 cm左右(图 2-b)。埋入基质中的球
茎颜色以绿色居多,小部分黑褐色,而新生球茎呈粉
红色或深红色,通常位于培养基表面,与野生紫背天
葵球茎分蘖性状相似。综合分析,200 ~ 400 mg /L 的
活性炭对球茎的增殖和生长具有良好的促进作用。
表 3 不同浓度活性炭对紫背天葵组培苗生长情况的影响
编号 活性炭/(mg /L)
生物增长量
/g
平均株高
/cm
叶片直径
/cm 叶片颜色
B1 0 5. 85 ± 0. 40 1. 24 ± 0. 15 0. 60 ± 0. 14 淡绿稍黄,叶面有白斑
B2 50 12. 88 ± 2. 46 1. 84 ± 0. 15 0. 90 ± 0. 16 淡绿,叶面有白斑,老叶叶背轻微泛红
B3 100 10. 35 ± 1. 85 2. 50 ± 0. 41 1. 32 ± 0. 30 绿色,叶面有白斑,老叶叶背轻微泛红
B4 200 11. 38 ± 2. 35 2. 66 ± 0. 13 1. 46 ± 0. 11 绿色,叶面有白斑,老叶叶背轻微泛红
B5 300 14. 94 ± 3. 66 2. 68 ± 0. 24 1. 60 ± 0. 21 翠绿,叶面有白斑,老叶叶背轻微泛红
B6 400 17. 5 ± 0. 90 2. 68 ± 0. 72 1. 57 ± 0. 32 翠绿,叶面有白斑,老叶叶背微红
B7 500 18. 18 ± 5. 75 2. 80 ± 0. 12 1. 92 ± 0. 38 翠绿,叶面有白斑,老叶叶背微红
B8 1000 6. 16 ± 2. 15 1. 72 ± 0. 19 1. 98 ± 0. 59 苍绿,叶面有白斑,老叶叶背、叶柄浅红
B9 2000 9. 41 ± 0. 66 1. 72 ± 0. 19 1. 94 ± 0. 30 苍绿,叶面有白斑,老叶叶背、叶柄浅红
图 2 不同浓度活性炭对紫背天葵球茎增殖系数(a)和生长直径(b)的影响
2. 4 不同浓度活性炭对紫背天葵组培苗移栽成活
率的影响 经过约 10 d加强光照度炼苗后,瓶苗的
成熟度进一步提高。然后,参照野生紫背天葵群居
丛生的性状,将生根后密集簇生的组培苗分散为带
有 2 ~ 3 个球茎的丛芽形式进行移栽。移栽基质采
用泥炭土∶珍珠岩 (3∶ 1)的混合基质,模拟自然生长
条件,放置于人工培养室进行培养,30 d 后统计各
处理组的成活率。结果如表 4 所示,B4 和 B5 组的
移栽成活率达到 100%,并且丛芽移栽后组培苗生
长较快,长势旺盛(图 3) ;其次为 B3、B6 和 B7,丛芽
的成活率为 70%以上,植株长势也较好。B9 虽然
叶片长势最好,叶形大,但由于不定根少,球茎质量
较差,移栽后植株失水较为严重,故成活率最低。
图 3 紫背天葵组培苗移栽后的生长情况
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表 4 紫背天葵组培苗移栽成活的情况
编号 活性炭/(mg /L)
成活率
/% 长势情况
B1 0 63. 2 ± 3. 33 **
B2 50 65. 5 ± 5. 37 **
B3 100 71. 3 ± 8. 13 ***
B4 200 100 ± 0. 00 ****
B5 300 100 ± 0. 00 *****
B6 400 84. 6 ± 6. 33 ***
B7 500 88. 1 ± 1. 67 **
B8 1000 60. 3 ± 7. 07 **
B9 2000 55. 8 ± 1. 53 *
注:“*”、“**”、“***”、“****”和“*****”分别表示移栽苗
生长情况为极差、差、一般、较好和好
3 讨论
目前,有关活性炭在植物组织培养中应用的报
道认为,活性炭所创造的暗环境及其对培养物分泌
的有害副作用物质的吸附,是其促进外植体根系诱
导及生长的主因〔5〕。本实验中,与 MS +蔗糖 30 g /
L + NAA 0. 3 mg /L + IBA 0. 2 mg /L +卡拉胶 7. 0 g /
L的基本培养基诱导生根结果相比,添加 50 ~ 500
mg /L活性炭诱导不定根形成的时间并没有明显的
提前或延后,对生根率的影响也不显著。但是,活性
炭形成的适度暗环境吻合了根系避光生长的特性,
不定根生长方向稳定,扎入培养基里充分吸收营养,
因此其根系丰富,根质量高。值得注意的是,不同的
活性炭浓度梯度对外植体各器官的诱导生长效果不
一样。50 ~ 300 mg /L 活性炭诱导根器官生长的质
量效果最好;300 ~ 500 mg /L 活性炭则明显促进组
培苗的增高和球茎长粗,外植体生物增长量最大;而
1 000 ~ 2 000 mg /L 的浓度却对组培苗地上部叶片
的生长有利,叶面积大,叶片浓绿。这表明活性炭对
球茎、苗高和叶片的生长均具有一定的促进作用。
其原因可能是活性炭所提供的暗环境,降低了光照
对培养基中光敏性物质(如生长素类)的光氧化作
用,在促进不定根生长的同时,也间接促进了的植株
地上部分的生长〔6〕。据报道,活性炭除了吸附培养
基中有害物质外,同时又能吸附生长调节物质和培
养基中如硫胺素、吡哆素、叶酸和烟酸等有益物
质〔7〕,对酚类及其氧化物、生长素类(IAA、NAA、
IBA)、细胞分裂素类(BA、KT)均有着强烈的亲和
性〔8〕。本实验中,估计 1 000 ~ 2 000 mg /L活性炭试
验浓度偏高,吸附能力增强,导致单株根数较低,从
而影响到组培苗的移栽,成活率仅为 55. 8 %。
通过紫背天葵不定芽培养基获得的球茎芽外植
体,一般携带有较多的不定芽生长中心(或称为芽
原基) ,因此在生根培养基中,需要调整生长调节物
质的用量,以抑制芽原基的过度萌发。与基本培养
基相比,添加活性炭不同程度上阻碍了芽原基的分
化,促进外植体的健壮生长。从表 1 可知,NAA 0. 3
mg /L + IBA 0. 2 mg /L 的组合对芽和根两者协调生
长相对有利;图 2 表明,添加活性炭后球茎及不定芽
的增殖系数显著下降,但对球茎及苗的生长都有明
显的促进作用。这与活性炭对非洲菊组培苗诱
导〔5〕过程中芽苗数分化的作用效果相一致。
紫背天葵组培苗生根一般发育为丛状根,其组
培苗移栽的成活率又与球茎、芽苗和根系的生长质
量密切相关。本研究表明,在基本生根培养基中添
加 200 ~ 300 mg /L 的活性炭,能显著促进紫背天葵
再生体系中分化出大量的不定根,根系发达,球茎、
芽丛生长健壮,经炼苗移栽后成活率达到 100%,再
生苗长势良好。可见,该生根培养方法完善了紫背
天葵的快繁体系,既达到高效保存本地特色植物种
质资源的目的,又适合大规模发展紫背天葵组培苗
的生产和推广。
参 考 文 献
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·3731·Journal of Chinese Medicinal Materials 第 35 卷第 9 期 2012 年 9 月