全 文 ：食用官 E D皿江卫 F IJ NG 】 2 侧场 ( 5 )
必须回流到锅内 ,保持内外压力平衡 ,在回流口上必须安装高
效空气过滤装置 ,防治杂菌进人锅体 。 冷却过程中 , 冷却室内
空气回流到瓶内 ,室内空气必须经过净化处理 ,并尽量减少空
气的流动。
1
.
5 接 种 衣服 、 手指 、 接种器具必须经过消毒处理 ,接种
室保持充分的洁净 , 接种机放置在层流罩的下方。 使用的菌
种必须经过严格挑选 , 要求菌丝活力强 、 无任何污染 。
1
.
6 培 养 在培养初期特别容易引起杂菌污染 ,对培养室
定期检查 ,发现有污染的瓶及时挑出 。 培养房空气流动大 , 杂
菌抱子传播的速度也加快 ,蜻虫 、 老鼠也是杂菌携带者 ,应及
时驱除 。 高温 、 高湿的培养环境 ,有利于各种杂菌的繁殖 , 必
须进行有效的控制。
1
.
7 子实体生长 食用菌催曹和生长需要较高的湿度 ,一般
在 90 % 以上 ,长时间处于高湿环境中 ,瓶口表面堵养料或菇体
表面聚集大量水滴 , 导致细菌大盘繁殖引起菇体腐烂 。 发现
有细菌污染的瓶应及时挑出 ,有效控制温度 、 湿度 ,抑制杂菌
繁殖 。
两种不同标准品测定猪等
粗 多 糖 含 贵 ’
雷 萍 孙悦迎 张文隽
张 慧 毛 勇 邓 媛
(陕西省徽生物研究所 , 陕西西安 71 以妈 3)
摘 要 试脸以苯酚一硫酸法侧定猪等液体发醉菌丝体粗多特
含t ,用翻萄精与猪等多精注射液做标准品进行比较 。 结果表
明 :蔺萄糖做标准品所侧定的多糖含量稍大于猪菩注射液做标
准品侧定的多箱含量 。
关挂佣 猪荃 粗多锗 测定
文章编号 1《以】一 8 3 5 7 ( 2以巧 ) 0 5 一 《乃M 一 0 2
2 虫害的发生和控制
食用菌工厂化生产过程中控制杂菌污染比虫害更为重
要 。 但是虫害在早期未能发现和有效控制 ,也能导致毁灭性
损失 。 在进排风口安装网罩阻止昆虫或小动物的进人 ,光对
昆虫有引诱作用 ,晚间室内的光尽量避免泄漏到室外 ,厂区内
的培养料和菇体要清扫干净 ,采收结束后 ,对空房间消毒处
理。
工厂化生产危害最严重的是蜻害 ,在米糠 、教皮等茜养物
上萦殖很快 ,厂区周围草丛 、木屑堆场也大 t 存在 。 培养周期
长的真姬菇上蜻虫发生尤为严重 ,菌种带蜻是引起蜡虫大爆
发的主要原因 ,可导致大量污染 ,转色困难 ,出菇整齐度差 ,产
量低下 。 发现蜡虫应及早隔离并用杀端剂处理 ,控制人员流
动 ,保持个人卫生和服装清沽 ,阻止蜻虫传播 。
笋幽告幽台告幽* 幽告告幽幽 . 幽浇去幽* 合` 去去飞
▲欢迎邮劝《中华仙草 · 灵芝》该书由中国教育文化出
版社出版 。 全书 30 余万字 ( 16 开本 ) . 共分 13 幸。 正文
前有 16 版彩页 , 彩照 90 余幅 。 内容极其丰富 , 取材新
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8
.
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猪等 O 倾户白 “ 州` 以勿幼 (氏招 . : rF . ) Pi坛t . ,别名猪荃花 、
猪粪菌 、猪灵芝 。 属无摺菌目 ,多孔菌科川 。 食药用菌 ,幼嫩
子实体可以食用 21[ 且味道鲜美 。 菌核黑色 ,形似姜 , 形状多
样 ,是一种传统的中药材 ,有利尿 、 治水肿作用 。 《本草纲目》
有 “开腆理 ,治淋肿 ,脚气 、 白浊带下 ,小便不利 ” 的功效。 《汤
液本草》载 “泻膀雌” , 《本草备要 》有 “利水利窍 ” 。 猪等多精对
肝炎 、 肺瘤 、肝瘤 、 子宫颈痛 、食管瘤 、 胃痛 、 肠癌 、 白血病 、 乳膝
庙 、 淋巴肉瘤等都有一定的疗效 ,对小 白鼠肉瘤 1即抑制率达
70 % t
11
。
近年来 ,药用真菌多糖的研究 已引起人们的广泛注意。
先后从香菇 、冬虫夏草 、 金顶侧耳 、 槐耳等药用真菌中分离出
多箱3[J ,并对粗多精的含量进行侧定 。 目前 ,国家还没有统一
规定真菌多箱的侧定方法 ,大部分采用苯酣一硫酸法和葱酮
一硫酸法 ,并以箱萄糖做标准品来进行侧定。 而药用真菌中
所含的具有增强免疫 、 抑制肿瘤 、镇静 .jI 、 强心 、 消炎等生理活
性的水溶性多精均由日( 1 一 3) 或日( 1 一 6) 箱昔健连接有聚精构
成的主链和支链 ,有的甚至就是 日一有聚精 ,所以用荡萄精作
标准品测定的多糖含量与实际含量有一定的误差 。 然而国内
又无法购到猪等标准品 。 为此 ,用猪等注射液作替代品进行
试验 ,现将试验过程报道如下 。
·更正 ·安徽省阜阳园艺食用菌研究所 20 6 年
第 4 期刊彩色广告中左图 1 ,小型自走式食用菌
原料 自动搅拌机 , 每小时翻拌料 50 掩 , 应为书竺二二_一 二丫二二 ;劫 5仪 j0 叱 ,符此更止 。
1 材料与方法
1
.
1 供试材料 猪等液体发醉菌丝体粗多精 (陕西省徽生物
研究所菌种资游中心食用药用菌研究室提供 ) ;荀萄箱市场购
买天 津市化学试剂三厂 生 产 (分析纯 符合 圣心了抖7 5 一
199 ) ;猪等多箱注射液市场购买江苏正大天晴药业股份有限
公司生产 (规格 2 m L : Z grn )。
1
.
2 试 荆
1
.
2
.
1 氮氧化钠溶液 ( 10 % ) 称取氢氧化钠 10 9 ,加水溶解
并稀释至 l o n止 ,加人固体无水硫酸钠至饱和 ,备用 。
1
.
2
.
2 栩储备液 称取 O . 3 g uC 3巩 · 5践 0 , 3 9 柠橄酸钠 ,加
性下垃吐万咬ù佳监应吸性下挂睦军生ù五下山节,勿业翻翁妇五不盆翎,
先举带带带举带带带带带带带带带带带带带带举带带必 . 国家中小型企业创新基金项目 (例口 6 2 1 6 1 1 14 2 )中部分内容 。
食用官 20 6 ( 5 )
水溶解并稀释至 10 m L,棍匀 ,备用 。
1
.
2
.
3 钢试剂溶液 取铜储备液 50 m L ,加水 50 m L , 混匀后
加人固体无水硫酸钠 12 . 5 9 并使其溶解 。 临用新配 。
1
.
2
.
4 洗涤剂 取水 50 m L ,加人 10 n止铜试剂溶液 , 10 m L
氢氧化钠溶液 ,混匀。
1
.
2
.
5 苯酚溶液 (5 % ) 取苯酚 50 9 ,油浴蒸馏 ,收集 180 一
182 ℃馏分 。 称取精制苯酚 5 . 0 9 ,用水溶解并稀释至 10 m L ,
混匀 ,溶液置冰箱中可保存 1 个月 。
1
.
2
.
6 葡萄糖标准储备溶液 精密称取在 105 ℃干燥至恒中
的葡萄糖标准品 L 0 80 9 ,加水溶解 ,并定容至 10 m L ,混匀 ,
置冰箱中保存 。 此溶液葡萄糖含量为 10 . 080 n l刁m L o
1
.
2
.
7 菊萄粉标准工作溶液 吸取葡萄糖标准储备溶液
2
.
o m L
,置于 l o m L 容量瓶中 ,加水至刻度 ,混匀 ,置冰箱中
保存。
1
.
2
.
8 猪茶 多特注射 液标 准工作 溶液 用 1 支规格为
2
.
0 m l赌等针剂 ,置于 10 m L 容量瓶中 ,加水至刻度 ,棍匀 ,
置冰箱中保存。
1
.
3 仪 器 0 . 加0 1 9 理艾 2 45 电子天平 , 德国赛多利斯股
份有限公司 ; T G L 6一W S 型台式高速离心机 ,长沙湘仪离心机
仪器有限公司 ; 1、 /一 190() 双光束紫外可见光分光光度计 ,北
京普析通用仪器有限公司等 。
1
,
4 实验方法
1
.
4
.
1 荀萄糖标准曲线制备 精密吸取葡萄糖标准工作溶
液 0 , 0 . 2 , 0 . 4 , 0 . 6 , 0 . 8 , 1 . 0 (相 当于葡萄糖 0 , 0 . 04 0 32 ,
0
.
0 8() 6 4
,
0
.
120 96
,
0
.
16 128
,
0
.
20 1 6 吨 ) ,分别置于 50 n u J 容
量瓶中 ,准确补充水至 2 . 0 m L ,加人苯酚溶液 2 . 0 m L ,在旋转
棍匀器上混匀 ,小心加入浓硫酸 10 m L ,小心混匀 ,置沸水浴
中煮沸巧 而 n ,冷却后用紫外分光光度计在 490 nm 波长处以
试剂空白溶液为参比 51[ , l mr 比色皿测定吸光度值 。 具体结
果见表 1o
衰 i 佑萄份标准与浓度的关系
标准工作液体积数 lm L 0 0 . 2 0 . 4 0 . 6 0 . 8 1 . 0
浓度 l (吨 · m L一 ’ ) 0 0 . 0 2 0 . 04 0 . 06 0 . 0 8 0 . 1
吸光度 IA比 0 0 . 15 8 0 . 2 8 6 0 . 4 6 3 0 . 6 2 1 0 . 7 9 9
1
.
5 样品的测定
1
.
5
.
1 样品提取 称取混合均匀的含粗多糖样品 (M )0 . 5 9,
置于 50 m L (从 )容量瓶中 ,加水 40 n止左右 ,于沸水浴上加热
Z h
,冷却至室温后补加水至刻度 ,混匀 ,抽滤 ,滤液供沉淀多糖。
1
.
5
.
2 沉淀粗多糖 精密取 1 . 5 . 1 项下滤液 4 . 0 n 1L (从 )
(作四组平行实验 ) 置于 50 m L 离心 管中 , 加人无水 乙 醇
16
1l lL
,混匀后 , 以 40 0 lr 而 n 离心 15 ~
,弃去上清液 。 沉淀
用 80 % 乙醇溶液数毫升洗涤 ,离心后弃去上清液 , 重复操作
3 次 。 沉淀物用水溶解并定容至 10 . 0 m以叭 ) ,混匀后 ,供沉
淀葡聚糖。
1
.
5
.
3 沉淀葡聚糖 精密吸取 1 . 5 . 2 项下溶液 Z m L (从 )置
于 20 1n L离心管中 ,加人 N a 0 H 溶液 2 . o m L ,铜试剂溶液
2
.
0 m L
,沸水浴中煮沸 3 m in , 冷却后 以 40 0 lr m in 离 心
15 而 n ,弃去上清液。 沉淀用洗涤剂数毫升洗涤 ,离心后弃去
上清液 ,反复操作 3 次后 ,沉淀用 10 %硫酸溶液 2 . o m L溶解
并转移至 50 m以叽 )容量瓶中 ,加水稀释至刻度 ,混匀。 此溶
液为样品测定液 。
1
.
5
.
4 浏 定 精密吸取 1 . 5 . 3 项下的样品测定液 2 . 0 n 1L
(v6 )置于 25 m L 比色管中 ,加人苯酚溶液 2 . O n止 ,在旋转混
合器上混匀后 ,小心加人浓硫酸 10 . 0 m L 后于旋转混合器上
混匀后 ,置于水浴中煮沸 10 而 n ,冷却至室温用分光光度计在
490 nm 波长处 , 以试剂空白为参比 , I cm 比色皿测定吸光度
值 , 同时做样品空白实验 。
其回归方程 A b s = 0 . 7 948 7C 一 0 . 加9 5 4 , 相关 系数 r 二 0 . 9望沁
1
.
4
.
2 猪苹多粉注封液标准曲线的制备 精密吸取猪荃多
糖注射液标准工作溶液 0 , 0 . 2 , 0 . 4 , 0 . 6 , 0 . 8 , l . 0( 相当于猪菩
多糖 0 , 0 . 叫加 , 0 . 0 8X)I , 0 . 1200 , 0 . 16X() , 0 . 20 0() 吨 ) ,分别置
于 50 m L 容量瓶中 , 准确补充水至 2 . O m L , 加人苯酚溶液
2
.
o m L
,棍匀 ,小心加人浓硫酸 10 m L ,小心混匀 ,置沸水浴中 2
煮沸 15 而n , 冷却后用紫外分光光度计在 490 nm 波长处以试
剂空白溶液为参比 , I cnr 比色皿测定吸光度值。 具体结果见 一
表 2 。
裹 2 猪等多粉注射液标准与浓度的关系
结 果
计算公式
(W
, 一 、 V , ) X V , X V , X V 改
M x V
Z x 叭 x 叽
式中 :
X , 样品中粗多糖含量 , m创g
w
:一样品测定液中葡萄糖质量 , mg
跳一样品空白液中葡萄糖质量 , gm
v ,一样品提取液总体积 , n止
从一沉淀粗多糖所用样品提取液体积 , m L
叭一粗多糖溶液体积 , m L
从一沉淀葡聚糖所用粗多糖溶液体积 , m L
Vs 一样品测定液总体积 , m L
从一测定用样品测定溶液体积 , m L
M , 样品质量 , g
计算结果 样品中粗多糖含量见表 2o
表 2 以布萄精计和以猪等注射液计粗多旅的含t / (mg · g 一 ’ )
编号 吸光度 粗多糖含量葡萄搪 猪荃多搪注射液 猪荃多搪注射液
标准工作液体积数 In l L 0 0 . 2 0 . 4 0 . 6
浓度Z(吨 · m L 一 ’ ) 02 0 . 04 0 . 06
吸光度 /A坛 . 20 7 0 . 42 0 0 . 62 5 0 . 8 2 8 1 . 0 8 2
.
0 34
0 3 4 2
.
0 3 4 5
.
0 3 4 1
0
.
0 4 62
0
.
0 4 6 0
0
.
0 464
0
.
0 4 59
葡萄糖
0
.
3 4 5 6
0
.
3 4 3 8
0
.
3 4 2 3
0
.
3 4 3 1
0
.
34 3 7
0
.
3 1 2 5
0
.
3 1 1 4
0
.
3 13 8
0
.
3 10 8
0
.
3 12 1
8一08
o一众
其回 归方程户七s = 1 . 06 84 5 C 一 0 . 0 724 ,相关系数 r 二 0 . 99 9 4
一 65 一
E D n叹卫 叭邓心l 2侧场 ( 5 )
结果表明 ,葡萄糖作标准品测定的粗多糖含量为 0 . 3437
n官 g ,猪菩注射液作标准品测定的粗多糖含量为 0 . 3 121
n喇 g ,葡萄糖做标准品所侧定的多精含量稍大于猪荃注射液
做标准品侧定的多械含量 。
杏 鲍 菇 栽 培 技 术
郭美英
(福建省三明市真菌研究所 , 36 5砚X用 )
3 稳定性实验
样品显色后 ,每隔一定时间测定吸光度 ,结果见表 3 。
裹 3 吸光度称定性实脸
文章绷号 1侧刃 一 83 5 7〔2的6 )05 一 0 6 一 03
时刚~吸光度 /
如 120
0
.
0夕闰 O , 0 34 5 0
.
0 34 0 0
.
0匆5 0 , O叼 5 0 . 0别4 0 . 03 39
结果表明 ,该显色反应稳定 。
4 回收率测定 (采用加样回收法 )
吸取多糖样品溶液 1 . 0 nt L ,分别加人标准葡萄格溶液 1 ,
0
.
2
,
0
.
4
,
0
.
6
,
0 8
,
1
.
o m L
,分别置于 50 m L 容t 瓶中 ,各加水
1 m L
,加人苯酚溶液 2 m L ,再缓缓加浓硫酸 10 m L ,充分摇小
心混匀 ,置沸水浴中煮沸 巧 而 n ,冷却后用紫外分光光度计在
4卯 nr 波长处以试剂空白溶液为参比 , I cm 比色皿测定吸光
度值 。 结果显示回收率是 95 . 98 % 一 99 . 80 % 。
5 讨 论
5
.
1 目前国家还没有统一规定真菌多糖的侧定方法 ,大部分
采用苯酚 一硫酸法和葱酮 一 硫酸法 ,并以葡萄糖做标准品来
进行测定 。 而药用真菌中所含的具有增强免疫 、抑制肿瘤 、镇
静阁 、强心 、消炎等生理活性的水溶性多糖均由阿 1一3) 或日( 1-
6) 糖昔键连接葡聚糖构成的主链和支链 ,有的甚至就是日一葡
聚糖 ,所以用葡萄糖作标准品测定的多糖含量与实际含量有
一定的误差 。
5
.
2 分子量大于 10 仪X)道尔顿的多糖经 80 % 乙醉沉淀后 ,
与水溶性单糖和低聚糖分离 ,用碱性二价铜试剂选择性的从
其他高分子中沉淀出具有葡聚褚结构的多糖 ,粗多糖在硫酸
的作用下 ,水解成单糖并迅速脱水生成糖醛衍生物 .与苯酚缩
合成有色化合物 ,用紫外分光光度计在 490 rn 波长测定样品
粗多糖含量。
5
.
3 洗涤粗多糖沉淀时 ,一定要将离心管壁上残留的其他糖
分和碳水化合物用 80 % 乙醉溶液彻底冲洗千净 ,否则会影响
测定结果。
5 栽培技术
杏鲍菇与金针菇一样 ,也是属于原基发生快的品种。 在
我国杏鲍菇的栽培方法有两种 :一是自然季节栽培 ;二是与金
针菇一样 ,利用周年工厂化的生产工艺栽培杏鲍菇 。
5
.
1 自然季节毅培
5
.
1
.
1 栽培季节 杏鲍菇出菇适宜温度为 10 一 18℃ ,低于
10 ℃和高于 18℃都难于形成子实体。 南方地区一般安排在 9
“ 10 月份接种 , 11 月份开始栽培 ;北方地区可根据当地的具
体温度安排好栽培季节 , 以秋末初冬与春末夏初栽培较为适
宜。
5
.
1
.
2 栽培用培养基配方 常用的优质高产培养基配方。
①棉子壳加木屑 (或蔗渣 、 玉米芯等 )培养基 :棉子壳 37 % , 木
屑 37 % ,教皮 24 % ,搪 1% ,碳酸钙 1% ,州 自然。 ②棉子壳
37 %
,木屑 37 % ,鼓皮 20 % ,玉米粉 4 % ,糖 1 % ,碳酸钙 1 % ,
自然p H 目
5
.
1
.
3 栽培管理 杏鲍菇子实体生育阶段的管理是取得高
参 考 文 献
【l] 孙悦迎 , 雷萍 ,沈卫荣 , 等 .药用真菌鉴定学〔M 〕. 北京 :知识产权
出版社 , 2 0( 拓 , 86 ~ 8 .9
〔2 〕 戴肖东 , 张 欣 , 韩增华 , 等 . 野生猪菩菌丝分离培养试验初报
[ J ]
. 食用菌 , 20() l ( 6 ) : 1 0 一 1 1 .
〔3J 刘美琴 . 灵芝多糖的研究进展 , 徽生物学通报〔J] . 19 8 , 2 5 ( 3 ) :
17 3
.
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94 9
.
ts] 昊东儒 . 搪类的生物化学【M ] . 北京 :高等教育出版社 , 1987 , 24
一 2 9
.
一 66 一
产 、德产 、优质的关健。 我国杏鲍菇自然季节栽培采用塑料袋
袋栽。 袋栽有直立式层架栽培和卧式墙式栽培两种方式。
5
.
1
.
3
.
1 直立式栽培管理技术 菌丝长满袋再经 7 d 左右的
后熟阶段 ,当气温降至 18 ℃ 以下时 , 即把菌袋从培养室徽至
栽培室进行催借出菇 。 出菇方式有两种 。A 式 :待袋内的培养
基上出现菇曹后再开袋管理 ,这种方法简单方便 , 出菇快 ,成
功率高 ,但出菇速度不一 ,整齐度稍差 。 B式 :取掉棉花塞和套
环 ,把塑料袋 口翻转至靠近培养基表面 ,之后在袋口上覆盖无
纺布或报纸喷水保湿 ,气温较低时 ,也可以覆盖塑料薄膜促其
出菇。 不管哪种方式栽培 ,都要注意催蓄时的沮度和湿度。
在适合的温度和相对湿度 ( 90 % 一 95 % )的条件下 , 一般经过 7
一 1s d ,就可形成原基。 温度不同 ,形成原基的速度也有所不
同。 当温度在 12 一巧℃时 ,一般经过 7 ~ s d ,就可形成原基 。
当温度在 8一 12℃ 时 ,原基发生的时间明显延长 ,需要 10 一
巧 d左右 ,而且原基往往成球状 ,温度越低 ,球形原基越大 ,越
不容易分化成菇曹 。 当气温回升时 ,有的球形原基经过 3一 5
d 可分化成菇普 ,如果气温继续下降 ,则球形原荃越变越大 ,无
法形成子实体 。 气温若在 16 一 18 ℃时 ,原基发生快 ,但要注愈
气温不能超过 18 ℃ 。 所以栽培时 ,选择优良菌株和合适的栽
培季节对出菇至关重要 。
原基发生后 ,经过 2一 3 d 就可分化成菇曹 ,沮度越适合 ,
产生的菇蓄数就越多 。 但对于杏鲍菇来说 ,菇奋数太多 ,长成
的子实体形似平菇 , 柄短 、盖薄 、 开伞快 ,很难形成柄长 、外形
美观 、品质优良的子实体 ,当气温或通气等环境条件不适合