全 文 ：Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ Ｙａｎｂｉａｎ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｍａｒ．２０１３ Ｖｏｌ．３６ Ｎｏ．１
３ 讨论
Ｄ－ＧａｌＮ和四氯化碳是肝损伤诱导剂，常用于制
作肝损伤模型，其中Ｄ－ＧａｌＮ引起的肝损伤是多因
素参与的复杂过程．一方面Ｄ－ＧａｌＮ作为肝细胞磷
酸尿苷的干扰剂，竞争性捕捉三磷酸尿苷（ＵＴＰ）生
成二磷酸尿苷半乳糖（ＵＤＰ－Ｇａｌ），使磷酸尿苷耗竭，
导致糖原、核酸、蛋白质等物质代谢发生障碍，引起
肝细胞损伤甚至坏死．ＡＬＴ，ＧＳＴ和ＡＳＴ主要存在
于肝、心肌细胞的胞浆或线粒体．当Ｄ－ＧａｌＮ进入体
内诱发肝细胞损伤或坏死时，因细胞膜的通透性增
加或发生炎症性改变，原来位于细胞内的酶迅速释
放入血，导致血清ＡＬＴ，ＡＳＴ和ＧＳＴ活性升高．同时
因肝细胞受损伤引起ＡＬＢ合成下降，导致血清ＡＬＢ
水平降低．Ｄ－ＧａｌＮ引起细胞损伤的另一机制是由于
自由基及其启动的脂质过氧化连锁反应［６］，导致机
体抗氧化酶活性降低和脂质过氧化作用增强．本实
验结果表明，花脸蘑多糖水提取物 明 显 降 低
由Ｄ－ＧａｌＮ引起的小鼠血清ＡＬＴ，ＡＳＴ和ＧＳＴ活性
的升高，提高ＡＬＢ合成能力，提示花脸蘑具有保护
肝脏作用．本实验结果亦表明，花脸蘑多糖水提取物
能明显增加小鼠肝组织ＳＯＤ，ＧＳＨ－Ｐｘ活性，降低脂
质过氧化产物 ＭＤＡ的含量，提示它具有抗氧化作
用．本实验结果表明花脸蘑多糖水提取物中、大剂量
组的降低酶活性作用和抗氧化能力优于阳性对照联
苯双酯组．本课题组曾研究过花脸蘑对四氯化碳诱
发的小鼠肝损伤的保护作用，结果与本实验结果一
致．均表明花脸蘑具有保护肝脏作用．另外，王欣彤
等［４］的研究结果表明，花脸蘑具有清除自由基等抗
氧化作用．总之，认为花脸蘑抗氧化作用有可能为花
脸蘑的保护肝脏机制之一．
［参 考 文 献］
［１］ 谢福泉，林远崇，蒋陈军，等．野生花脸香蘑人工控制条
件栽培技术初探［Ｊ］．菌物研究，２００７，５（２）：８９－９２．
［２］ 罗心毅，洪江，张勇民．人工栽培花脸香蘑氨基酸研究
［Ｊ］．氨基酸和生物资源，２００３，２５（３）：１４－１５．
［３］ 王欣彤，崔海丹，沈明花．花脸香蘑抗氧化作用的研究
［Ｊ］．食品科技，２０１０，３５（３）：２０８－２１０．
［４］ 陈湘莲，李泰辉，沈亚恒．花脸香蘑发酵物的体外抗氧
化及抗肿瘤活性研究［Ｊ］．安徽农业科学，２０１１，３９
（１４）：８２７６－８２７８．
［５］ 黄年来．中国食用菌百科［Ｍ］．北京：农业出版社，
１９９３：１２５．
［６］ 魏静元，张馨木，赵荣梅，等．抑肽酶对Ｄ－氨基半乳糖
大鼠急性肝损伤的保护作用［Ｊ］．分子科学学报，２００７，
２３（３）：１９４－１９７．?
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［收稿日期］ ２０１３－０１－１２
［作者简介］ 耿聪（１９８５—），女，博士研究生，研究方向为中
药物质基础研究 ．
［通信作者］ 姜英子，Ｅｍａｉｌ：ｙｚｊｉａｎｇ＠ｙｂｕ．ｅｄｕ．ｃｎ．
不同年生传统朝药材关苍术中粗多糖的含量比较
耿聪１，马娟２，张善玉２，姜英子２
（１．吉林大学药学院，吉林 长春１３００００；２．延边大学药学院，吉林 延吉１３３００２）
［摘要］ ［目的］比较不同年生传统朝药材关苍术粗多糖的含量．［方法］采用苯酚－硫酸比色法，以葡聚
糖作为标准对照物，测定不同年生关苍术中粗多糖的含量．［结果］不同年生关苍术粗多糖的含量从高
到低的顺序依次为野生、６年生、８年生、４年生、７年生．［结论］不同年生关苍术中粗多糖的含量间存在
差异．
［关键词］ 关苍属；粗多糖；比色法
［中图分类号］ Ｒ ２８４ ［文献标志码］ Ａ ［文章编号］ １０００－１８２４（２０１３）０１－００２４－０３
Ｃｏｎｔｅｎｔ ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ ｏｆ ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ ｆｒｏｍ ｔｈｅ Ｒｈｉｚｏｍａ Ａｅｔｒａｃｔｙｃｏｄｅｓ
Ｊａｐｏｎｌｃａ ｏｆ ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ Ｋｏｒｅａｎ ｍｅｄｉｃｉｎｅ ｉｎ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｇｒｏｗｔｈ ｙｅａｒｓ
ＧＥＮＧ Ｃｏｎｇ１，ＭＡ Ｊｕａｎ２，ＺＨＡＮＧ Ｓｈａｎ－ｙｕ２，ＪＩＡＮＧ Ｙｉｎｇ－ｚｉ ２
·４２·
DOI:10.16068/j.1000-1824.2013.01.006
延边大学医学学报 ２０１３年３月 第３６卷 第１期
（１．Ｐｈａｒｍａｃｙ Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｊｉｌｉｎ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｃｈａｎｇｃｕｎ１３００００，Ｊｉｌｉｎ，Ｃｈｉｎａ；２．Ｙａｎｂｉａｎ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ，
Ｙａｎｊｉ １３３００２，Ｊｉｌｉｎ，Ｃｈｉｎａ）
ＡＢＳＴＲＡＣＴ：ＯＢＪＥＣＴＩＶＥ Ｔｏ ｃｏｍｐａｒｅ ｔｈｅ ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ ｆｒｏｍ ｔｈｅ Ｒｈｉｚｏｍａ Ａｅｔｒａｃｔｙｃｏｄｅｓ
Ｊａｐｏｎｌｃａ （Ａ．Ｊ）ｏｆ ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ Ｋｏｒｅａｎ ｍｅｄｉｃｉｎｅ ｄｅｒｉｖｅｄ ｆｒｏｍ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｇｒｏｗｔｈ ｙｅａｒｓ．ＭＥＴＨＯＤＳ Ｔｈｅ
ｃｏｎｔｅｎｔｓ ｏｆ ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ ｗｅｒｅ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ ｂｙ Ｐｈｅｎｏｌ－Ｈ２ＳＯ４ｃｏｌｏｒｉｍｅｔｒｙ ｗｉｔｈ ｄｅｘｔｒａｎ ａｓ ａ ｓｔａｎｄａｒｄ．
ＲＥＳＵＬＴＳ Ｔｈｅ ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ ｉｎ Ａ．Ｊ ｆｒｏｍ ｈｉｇｈ ｔｏ ｌｏｗ ｗｅｒｅ ｗｉｌｄ ｇｒｏｗｔｈ，ｓｉｘ－ｙｅａｒ ｇｒｏｗｔｈ，
ｅｉｇｈｔ－ｙｅａｒ ｇｒｏｗｔｈ，ｆｏｕｒ－ｙｅａｒ ｇｒｏｗｔｈ，ｓｅｖｅｎ－ｙｅａｒ ｇｒｏｗｔｈ ｉｎ ｔｕｒｎ．ＣＯＮＣＬＵＳＩＯＮ Ｔｈｅ ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ
ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ ｉｎ Ａ．Ｊ ｄｅｒｉｖｅｄ ｆｒｏｍ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｇｒｏｗｔｈ ｙｅａｒｓ ｉｓ ｑｕｉｔｅ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ．
Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：Ａｔｒａｃｔｙｌｏｄｅｓ；ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ；ｃｏｌｏｒｉｍｅｔｒｙ
关苍术为菊科植物关苍术（Ａｔｒａｃｔｙｌｏｄｅｓ Ｊａ－
ｐｏｎｉｃａ Ｋｏｉｄｚ ｅｘ Ｋｉｔａｍ）的干燥根茎，性味辛、苦、
温，主产于东北地区，在长白山地区有大量分布．关
苍术具有健脾燥湿，发汗解表，明目祛风和避秽之功
效［１］．近年来，对多糖的深入研究［２］结果表明，多糖
具有多种生物活性．据报道，有关植物多糖参与免疫
调节、抗肿瘤、降低血糖、保肝、抗感染、抗消化道溃
疡、抗衰老、降低血脂、抗凝血、抗辐射等作用［３］．近
年来的研究［４］结果表明，苍术植物多糖也具有重要
的生理活性，是临床疗效的物质基础之一，它的含量
高低直接影响疗效．本实验以关苍术粗多糖为指标，
采用苯酚－硫酸法［５］测定不同年生关苍术多糖含量，
并进行比较，以确定关苍术的最佳生长年限，旨在为
传统朝药材关苍术的合理开发利用提供依据．
１ 材料
１．１ 药品 所用关苍术采集于汪清县塔子沟，标本
经延边大学药学院生药学教研部吕惠子副教授鉴定
为菊科植物关苍术的根茎．
１．２ 试剂 酚试剂（重蒸）；其他试剂均为分析纯；
葡聚糖标准品为天津市福晨化学试剂厂产品，批号
为２００３１１１０．
１．３ 主要仪器 ７２２光栅分光光度计（上海精密科
学仪器有限公司）；ＢＳ２２４型电子分析天平（北京赛
多利斯仪器系统有限公司）；０２型电热鼓风恒温干
燥箱（江苏恒丰仪器厂）；ＲＥ－５２型旋转蒸发仪（Ｒ２０６
上海申生科技有限公司）；ＳＨＢ－３循环水多用真空泵
（上海豫康科教仪器设备有限公司）；加热回流装置
（杭州常青玻璃仪器有限公司）．
２ 方法与结果
２．１ 葡聚糖标准曲线的绘制
２．１．１ 葡聚糖标准溶液的制备 精密称取于１０５
℃干燥至恒质量的葡聚糖１０ｍｇ，置于１００ｍＬ容量
瓶中，加蒸馏水稀释至刻度，摇匀，制备成０．１ｇ／Ｌ
的标准葡聚糖溶液．
２．１．２ 苯酚溶液的配制 称取苯酚１５０ｇ、镁片
０．３ｇ，置于圆底烧瓶中，沙浴蒸馏，收集１８２℃的馏
分，称取２０ｇ，加水稀释至４００ｍＬ，置于棕色瓶中避
光保存．
２．１．３ 标准曲线的绘制 精密吸取标准葡聚糖溶
液０．１，０．２，０．３，０．４，０．５，０．６，０．７ｍＬ，加入具塞试
管中，补水至２．０ｍＬ，精密加入５％（体积分数）重蒸
苯酚溶液１．０ｍＬ，迅速加入浓硫酸５．０ｍＬ，盖上
盖，摇匀，静置１０ｍｉｎ后，置沸水浴中１５ｍｉｎ，取出
置于冷水浴中放置１５ｍｉｎ取出，以蒸馏水为空白于
波长为４９２ｎｍ处测定吸光度，以质量浓度为（ｇ／Ｌ）
为横坐标，吸光度为纵坐标绘制标准曲线（图１）．得
回归方程：ｙ＝０．０７０ ６ ｘ－０．００７ ７，相关系数ｒ＝
０．９９９ ２．经３次重复行验证试验，ＲＳＤ 值均小于
１．０％，提示重复性良好．
图１ 葡聚糖标准曲线
２．２ 关苍术粗多糖溶液的制备 关苍术多糖的提
取采用水溶液回流提取，ＺｎＳＯ４ 和饱和Ｂａ（ＯＨ）２ 除
蛋白，水提取液浓缩，静置过夜，除去沉淀，抽滤得提
取液，浓缩后加入５倍量９５％（体积分数）乙醇冷却
静置过夜，抽滤，再用少量９５％（体积分数）乙醇洗
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Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ Ｙａｎｂｉａｎ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｍａｒ．２０１３ Ｖｏｌ．３６ Ｎｏ．１
涤，减压抽滤，沉淀物经真空干燥即得关苍术粗多
糖，称取质量．
２．３ 关苍术粗多糖的含量测定
２．３．１ 供试样品制备 分别精密称取干燥至恒质
量的样品２０ｍｇ，置于１００ｍＬ容量瓶中，加入适量
水使其溶解，稀释至刻度，摇匀．精密吸取上述溶液
１．０ｍＬ加入到具塞试管中，补水至２．０ｍＬ，按照标
准曲线的绘制方法测定吸光度，带入回归方程计算
求得多糖含量．
２．３．２ 精密度试验 分别精密称取野生关苍术供
试液１．０ｍＬ，６份，按照标准曲线的绘制方法测定
吸光度，分别为０．５８９，０．５７５，０．５７２，０．５９７，０．６０２，
０．６０３（ｎ＝６），ＲＳＤ为２．２９％，表明精密度良好．
２．３．３ 稳定性试验 取供试品溶液１．０ｍＬ，按照
标准曲线绘制方法，每３０ｍｉｎ测定１次吸光度，３ｈ
内测 定 的 结 果 为 ０．５９７，０．５９４，０．５９６，０．５９０，
０．５９２，０．５９１（ｎ＝６），ＲＳＤ 为０．４７％，表明３ｈ内
稳定性良好．
２．３．４ 重复性试验 精密称取野生关苍术约１ｇ
６份，按照关苍术粗多糖的制备方法提取多糖，按照
供试样品制备方法制备供试品溶液，按照标准曲线
的绘制方法，测定质量分数（％），分别为１３．１６％，
１２．８５％，１２．７９％，１３．３４％，１３．４５％，１３．４７％．平均
质量分数为１３．１８％，ＲＳＤ 为２．２６％，表明重复性
良好．
２．３．５ 加样回收率试验 精密称取葡聚糖标准品
４．０，６．０，１０．０，１４．０，１６．０ｍｇ，分别置于１００ｍＬ容
量瓶中，加入适量水使溶解，稀释至刻度．精密吸取
０．５ｍＬ 已知含量的样品溶液，共 ５ 份，分别加
入０．５ｍＬ不同质量浓度的葡聚糖标准品溶液，摇
匀．按照标准曲线的绘制方法测定吸光度，结果见表
１．
表１ 加样回收实验结果
样品量
／μｇ
葡聚糖加
入量／μｇ
吸光
度
测定值
／μｇ
回收率
／％
平均回收
率／％
ＲＳＤ
／％
３４．３４
２０．００ ０．４７１ ５４．２２３ ０ ９９．４３
３０．００ ０．５６４ ６４．７５７０ １０１．３９
５０．００ ０．７３２ ８３．７８６ ０ ９８．８９
７０．００ ０．９０２ １０３．０４２０ ９８．１５
８０．００ ０．９７８ １１１．６５００ ９６．６４
９８．９０ １．７６
２．３．６ 关苍术多糖含量的测定 称取不同年生关
苍术供试品５份，每份约为１ｇ，精密称定，按照供试
样品制备方法制备供试品溶液，按照标准曲线绘制
方法分别对不同年生关苍术进行测定．结果表明，关
苍术多糖的含量由高到低依次为野生、６年生、８年
生、４年生、７年生，见表２．
表２ 不同年生关苍术多糖含量的测定结果（ｎ＝５）
样品 多糖含量／％ ＲＳＤ／％
野生关苍术 １３．１８ ２．２６
４年生关苍术 ７．５４ ２．５８
６年生关苍术 １２．０８ １．５３
７年生关苍术 ６．２９ １．７８
８年生关苍术 ７．６１ ２．４０
３ 讨论
多糖类化合物是许多中草药的有效成分之一，
具有多种生物活性，但目前对关苍术药用植物成分
的研究主要还是集中在挥发油方面，对水溶性化学
成分研究报道较少见，因此对关苍术水溶性部位进
行深入的研究具有重要的意义．本实验选用水提取
醇沉法提取关苍术粗多糖，以苯酚－硫酸比色法测定
多糖含量，该法所需仪器、药品价格较低，操作方便，
通过精密度、稳定性、重复性、加样回收率试验结果
表明，此方法简便、重现性好、显色稳定、测定结果稳
定可靠，适合于关苍术中的粗多糖含量测定．本实验
结果表明，不同年生关苍术中粗多糖含量从高到低
的顺序依次为野生、６年生、８年生、４年生、７年生，
因此以关苍术粗多糖成分为指标，关苍术的最佳生
长年限为６年．
［参 考 文 献］
［１］ 吉林省中医中药研究所．长白山植物药志［Ｍ］．长春：
吉林人民出版社，２００２：５０．
［２］ Ｄｉｎｇ ＢＪ，Ｊｉｎ ＬＱ．Ｔｈｅ ｐｒｏｇｒｅｓｓ ｏｎ ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ ｏｆ
ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ［Ｊ］．Ｃｈｉｎ Ｐｈａｒｍ Ｊ，２００４，３９（８）：５６１－
５６４．
［３］ 方积年，丁侃．天然药物多糖的主要生物活性及分离纯
化方法［Ｊ］．中国天然药物，２００７，５（５）：３３８－３４７．
［４］ 肖超成，冯煦．苍术属药用植物水溶性化学成分及其药
理活性的研究进展［Ｊ］．中国野生植物资源，２００９，２８
（３）：１－３．
［５］ 周菁，王伯初．浮萍多糖总糖含量测定与评价［Ｊ］．重庆
大学学报：自然科学版，２００５，２８（１０）：１１１－１１４．?
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