全 文 :王 欣,夏新奎. 郁李仁粗多糖的提取工艺研究[J]. 江苏农业科学,2013,41(1) :269 - 270.
郁李仁粗多糖的提取工艺研究
王 欣,夏新奎
(信阳农业高等专科学校,河南信阳 464000)
摘要:为探讨中药郁李仁中可溶性粗多糖的提取工艺,通过单因素试验和 L9(3
3)正交试验研究提取温度、料液
比、提取时间对粗多糖提取率的影响。结果显示,3 个因素对粗多糖提取率影响的主次顺序为提取温度 >料液比 >提
取时间,最佳提取工艺为提取温度 80 ℃、料液比为 1 g ∶ 18 mL、提取时间 90 min,在该条件下郁李仁粗多糖的提取率
为 3. 63%。
关键词:郁李仁;可溶性粗多糖;提取工艺
中图分类号:R284. 2 文献标志码:A 文章编号:1002 - 1302(2013)01 - 0269 - 02
收稿日期:2012 - 06 - 02
基金项目:河南省科技攻关计划(编号:102102310319)。
作者简介:王 欣(1968—) ,女,河南信阳人,硕士,副教授,主要从事
天然产物有效成分研究。E - mail:13598575036@ 126. com。
多糖作为构成生命活动的基本物质之一,在抗肿瘤、抗
炎、抗病毒、降血糖、抗衰老、抗凝血等方面均发挥着特殊的生
物活性作用。随着分子生物学和细胞生物学的发展,多糖及
其缀合物作为支持组织和能量来源的传统观念早已被突破,
而被认为是生物体内除核酸以外的又一类重要的信息分子,
而且它们常是细胞表面信号识别、抗原抗体反应、细胞间信息
的传递和感受的关键因子,因此具有生物活性的活性多糖的
研究日益受到重视。多糖种类繁多,广泛存在于动物、植物和
微生物中,为充分开发多糖资源,我国近年来对植物多糖特别
是具有中国特色的中草药多糖的药物活性进行了广泛研究。
郁李仁(semen pruni)为蔷薇科植物欧李(Prunus humilis
Bge.)、郁李(Prunus japonica Thunb.)或长柄扁桃(Prunus pe-
dunculata Maxim.)的干燥成熟种子,前 2 种习称“小李仁”,后
1 种习称“大李仁”,主要分布于东北、内蒙古、河北、河南、山
东和宁夏等地区。郁李仁具有润燥滑肠、下气、利水的作用,
用于津枯肠燥、积气滞、腹胀便秘、水肿、脚气、小便不利
等[1]。目前,已从郁李仁中分离得到苦杏仁苷、脂肪油、皂苷
等化学成分[2],但郁李仁粗多糖的研究还鲜见报道。因此,
本试验以郁李仁粗多糖为研究对象,以郁李仁粗多糖的提取
率为考察指标,采用单因素试验和正交试验方法对提取过程
中提取温度、料液比、提取时间 3 个因素进行了优选研究,得
出了郁李仁粗多糖的最佳提取工艺。
1 材料与方法
1. 1 试验材料
郁李仁购自河南省信阳市药材公司,产地为河南,经信阳
农业高等专科学校药用植物教研室鉴定为中药郁李仁。
1. 2 试剂
甲醇、乙醇、丙酮、葡萄糖、苯酚、浓硫酸、三氯甲烷、正丁
醇均为国产分析纯。
1. 3 主要仪器
电热恒温水溶槽(北京市医疗设备厂) ,Z323K 高速冷冻
离心机(德国 HERMLE公司) ,752 紫外可见分光光度计(上
海精密科学仪器有限公司)。
1. 4 试验方法
1. 4. 1 提取方法 称取粉碎的郁李仁干品粉末 200 g,用甲
醇回流脱去其表面脂肪,抽滤,药渣风干;再用 80%乙醇回流
除去小分子糖、苷类、生物碱等,药渣风干;分别取药渣 5 g,以
水作溶剂,采用不同的提取温度、料液比、提取时间对药渣进
行粗多糖的提取试验。水提液离心除去杂质,减压浓缩至小
体积,加无水乙醇至浓度为 75%,沉淀,静置 24 h 后过滤,用
95%乙醇、无水乙醇、丙酮洗涤数次,真空干燥,得郁李仁粗
多糖。
1. 4. 2 提取工艺条件的选择 要得到较高的提取率,就必须
选择合适的提取条件。本试验分别考察了提取温度、料液比、
提取时间对提取率的影响。
1. 4. 2. 1 单因素试验 分别考察提取温度、料液比、提取时
间对提取率的影响: (1)提取温度。分别在 50、60、70、80、
90 ℃ 下用料液比 1 g ∶ 12 mL提取 45 min。(2)料液比。固
定提取温度 80 ℃、提取时间 45 min,分别以 1 ∶ 8、1 ∶ 10、
1 ∶ 12、1 ∶ 15、1 ∶ 18(g ∶ mL)的料液比进行提取试验。(3)提
取时间。固定提取温度 80 ℃、料液比 1 g ∶ 12 mL,分别以提
取时间 30、45、60、90、120 min提取郁李仁粗多糖。
1. 4. 2. 2 正交试验 选取提取温度、料液比、提取时间 3 个
因素,参照单因素试验,各设置 3 个水平进行正交试验,因素
及水平见表 1。
表 1 正交试验因素与水平
水平
因素
A:提取温度
(℃)
B:料液比
(g ∶ mL)
C:提取时间
(min)
1 70 1 ∶ 12 45
2 80 1 ∶ 15 60
3 90 1 ∶ 18 90
2 结果与分析
2. 1 提取工艺的优化
2. 1. 1 提取温度对提取率的影响 由图 1 可以看出,提取率
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DOI:10.15889/j.issn.1002-1302.2013.01.011
先随提取温度升高缓慢上升,到 70 ℃时升高速度加快,70 ~
90 ℃为较理想的提取温度范围。这是因为温度过低,不利于
多糖物质的溶出;而温度过高,容易引起多糖降解,也不利于
多糖的提取。
2. 1. 2 料液比对提取率的影响 从图 2 可以看出,提取率随
料液比的增大呈先增大后减小的趋势,料液比为 1 g ∶ 15 mL
时提取率达到最大,之后提取率随料液比的增大而减小。一
般来说,只要能将活性物质溶出,料液比越小越好,因为料液
比过大时,会给以后的浓缩带来不便。因此选择料液比
1 ∶ 12、1 ∶ 15、1 ∶ 18(g ∶ mL)进行正交试验为宜。
2. 1. 3 提取时间对提取率的影响 由图 3 可以看出,提取率
先随提取时间的延长而增大,到 60 min 时提取率达到最大,
此后再延长提取时间,提取率反而下降。延长提取时间会提
高提取率,但当细胞中的有效成分已完全溶出时,再延长提取
时间,非但不能提高提取率,反而会增加提取液中杂质的含
量。因此,选择提取时间 45 ~ 90 min为宜。
2. 2 正交试验
由表 2 可见,不同因素水平对提取率有明显的影响,其中
提取温度对提取率影响最大,提取时间对提取率的影响最小。
以提取率为目标,则最佳提取方案为 A2B3C3,即提取温度
80 ℃、料液比 1 g ∶ 18 mL、提取时间 90 min。由于最优提取
工艺没有包含在正交试验内,因而进行了验证试验,在最优条
件下提取郁李仁粗多糖,所得提取率为 3. 63%,高于其他试
验组合。
表 2 郁李仁粗多糖提取正交试验结果
编号
因素
A B C
提取率
(%)
1 1 1 1 2. 40
2 1 2 2 1. 80
3 1 3 3 2. 48
4 2 1 2 2. 65
5 2 2 3 3. 08
6 2 3 1 3. 33
7 3 1 3 2. 63
8 3 2 1 2. 38
9 3 3 2 3. 55
K1 6. 68 7. 68 8. 11
K2 9. 06 7. 26 8. 00
K3 8. 56 9. 36 8. 19
k1 2. 23 2. 56 2. 70
k2 3. 02 2. 42 2. 67
k3 2. 85 3. 12 2. 73
R 0. 79 0. 70 0. 06
3 结论
为了寻求较为满意的提取郁李仁粗多糖的方法,本试验
主要研究了郁李仁粗多糖的提取工艺,得出结论如下:以水为
溶剂进行提取,控制提取温度为 80 ℃、料液比为 1 g ∶ 18 mL、
提取时间为 90 min,可达到较高的提取率。
参考文献:
[1]中国药材公司. 中国中药资源志要[M]. 北京:科学出版
社,1994.
[2]杨国勤,徐国钧,金蓉鸾,等. 10 种郁李仁有效成分的分析鉴定研
究[J]. 中国药科大学学报,1992,23(2) :77 - 81.
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