全 文 ：羊肚菌免疫调节作用研究
孙晓明　张卫明　吴素玲　史劲松　张广伦
(南京野生植物综合利用研究院　210042)
　　摘　要　观察 DNFB诱导小鼠迟发型变态反应 、血清溶血素测定(血凝法)、小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞
试验 ,结果表明 , 羊肚菌可以促进小鼠细胞免疫功能提高体液免疫功能 , 促进小鼠体内抗体的产生 , 具有增强小鼠
腹腔巨噬细胞吞噬功能 ,是一种比较有效的免疫调节剂。
关键词　羊肚菌;多糖;免疫调节
Studies on the Regulating Immunization Function of Morchella Powder
Sun Xiaoming ,Zhang Weiming ,Wu Suling ,Shi Jingsong ,Zhang Guanglun
(Nanjing Academy for the Comprehensive Ut il ization of Wild Plants , 210042)
Abstract　To observe the inf luence upon mice fed w ith Mo rchella pow der in DNFB to induce delayed
hypersensitivity/ serum hemoly sin determinat ions and mice belly cavity macrophage to sw allow chicken
RBC test.The results show that M orchella pow der have the function of regulating immunization.
Key words　Morchel la , polysaccharide , regulating immunizat ion
　　羊肚菌属子囊菌亚门(Ascomycot ina)盘菌目
(Peziaies)马 鞍 菌科 (Helveliiaceae)羊 肚 菌 属
(Morchel la)。羊肚菌有 28个种 ,分布于法 、德 、美 、
印度和中国等地 。我国羊肚菌属的种已载入《中国
真菌总汇》的计有羊肚菌(Morchella esculenta)、尖
顶羊肚菌(M .conica)和粗柄羊肚菌(M.crassipes)
等8 种。我国河北 、山西 、内蒙古 、新疆 、河南 、四川
和云南等省都有野生羊肚菌的分布 。羊肚菌因其菌
盖凹凸不平 、状如羊肚而名 。早在本草中就有羊肚
菜即羊肚菌的记述:“甘寒无毒 、益肠胃 、化痰理气” 。
据现代研究表明 ,羊肚菌富含蛋白质 、多糖 、核酸以
及各种微量元素和维生素 。在西欧市场 ,羊肚菌供
不应求 ,以羊肚菌为原料的保健品已得到美国 FDA
的正式许可。特别对真菌中的活性物质 ,如多糖 、蛋
白质 、核酸 、生物碱 、有机酸 、甾醇 、萜类以及无机盐 、
维生素作了众多的研究分析 ,发掘生产了灵芝多糖 、
灵芝孢子粉 、香菇多糖 、银耳多糖 、猪苓多糖 、银密
片 、金菇锌等多种药品或保健食品 ,使菌类资源得到
了广泛的应用。
为了开发这个珍稀食用菌 ,我们在对羊肚菌进
行了全面分析的基础上 ,除食用菌固有的成份外 ,尚
有许多与生命代谢有关的因子 ,鉴于以上研究 ,我们
认为羊肚菌的主要保健功能是免疫调节作用 ,为此 ,
进行了实验来验证 。
1　材料与方法
1.1　材料　羊肚菌 ,采自云南。
1.2 　样品处理 　人体推荐摄入量为 25mg/kg ,
BW/d(每日推荐量为 1.2 ～ 2.4g ,以 1.8g 计;人体
重量以 60kg 计)。样品用蒸馏水配制成混悬液 。
1.3 　动物及分组 　雄性昆明种小鼠 , 体重 18 ～
22g ,由南京铁道医学院实验动物中心提供 。合格证
号:苏动(质 97002);苏动(环 97003)。随机分为:羊
肚菌粉 0mg/kg·BW/d(阴性对照组)、150mg/kg·
BW/d 、300mg/kg·BW/d 、600mg/kg·BW/d(三个剂
量组),分别相当于人体推荐摄入量的 5倍 、10倍和
20倍)。所有试验动物均食用常规饲料 。
1.4　方法　按卫生部卫生监督司《保健食品功能学
评价程序和检验方法》 ,免疫调节作用检验方法中
3.2 、3.4及 3.6方法执行 。灌胃容积 2m l/100g ,每
天 1次 ,连续 28d。
2　结果与分析
2.1　二硝基氟(DNFB)诱导小鼠迟发性变态反应
12 　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　中国野生植物资源　　　　　　　　　　　　　　　第 20卷第 2期
试验(DTU)　羊肚菌对小鼠迟发性变态反应的影
响结果见表 1 ,方差分析见表 2。
表 1　羊肚菌粉对小鼠迟发性变态反应的影响
剂量组别(mg/ kg) 动物数 耳廓重量值(mg)
0 10 18.40±2.01
150 10 23.30±4.62
300 10 22.70±4.16
600 10 23.50±3.57
P 值 0.0123
表 2　各组小鼠耳壳重量差的方差分析(Dunnett s t检验)
比较组别
(mg/ kg)
差值 95%可
信区间下限 均数差值
差值 95%可
信区间上限
150 ～ 0 0.817 4.900 8.983＊＊＊
300 ～ 0 0.217 4.300 8.383＊＊＊
600 ～ 0 1.017 5.100 9.183＊＊＊
　　NOTE:＊＊＊试验组与对照组比较有显著差异。
Critieai Valuc of Dunnctt s T=2.452;最小有意义差值
=4.083。
对各组小鼠左右耳片重量均差值进行单因素方
差分析及各剂量组左右耳片差与对照组比较 ,可以
认为羊肚菌三个剂量(150mg/kg .BW 及以上)组左
右耳片重量差大于正常对照组 。
2.2　血脂溶血素的测定(血凝法)
羊肚菌粉对小鼠血清溶血素抗体积数的影响结
果见表 3 ,方差分析结果见表 4。
表 3　羊肚菌粉对小鼠血清溶血素抗体积数的影响
剂量组别
(mg/ kg)动物数(只) 抗体积数＊
0 10 1.5263±0.0853(34.1±6.5)
150 10 1.8020±0.0498(63.8±7.3)
300 10 1.7856±0.0596(61.6±9.0)
600 10 1.8580±0.0188(72.2±3.2)
P 值 0.0001
＊抗体积数为对数均值 ,括号内为几何均值。
表 4　各组小鼠血清溶血素抗体积数对数的方差分析(Dun-
nett s t检验)
比较组别
(mg/ kg)
差值 95%可
信区间下限 均数差值
差值 95%可
信区间上限
150 ～ 0 0.2125 0.2767 0.3409＊＊＊
300 ～ 0 0.1961 0.2603 0.3245＊＊＊
600 ～ 0 0.2685 0.3327 0.3969＊＊＊
NOTE:＊＊＊试验组与对照组比较有显著差异。
对各组小鼠血清溶血素抗体积数进行单因素方
差分析及各剂量组血清溶血素抗体积数与对照组比
较 ,可以认为羊肚菌三个剂量(150mg/kg.BW 及以
上)组血清溶血素抗体积数大于正常对照组。
2.4　小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞试验(半体内
法)
羊肚菌粉对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的
吞噬率及吞噬指数的影响结果见表 5 ,方差分析见
表 6及表 7。
表 5　羊肚菌对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的影响
剂量组别
(mg/kg)
动物只数
(只) 吞噬率(%) 吞噬指数(a)
0 10 18.20±1.95 0.1990±0.0197
150 10 22.30±3.53 0.2840±0.0378
300 10 23.20±4.17 0.2890±0.0469
600 10 35.15±5.94 0.4600±0.1200
P值 0.0001 0.0001
表 6　各试验组与对照组吞噬率的 Dunnett s t检验结果
比较组别
(mg/ kg)
差值 95%可
信区间下降 均数差值
差值 95%可
信区间上限
150 ～ 0 -0.0310 0.0410 0.1130
300 ～ 0 -0.0229 0.0500 0.1229
600 ～ 0 0.2051 0.2780 0.3509＊＊＊
　　NOTE:＊＊＊与对照组比较有显著差异。
Critiai Value of Dummett s T=2.452;最小有意义差值
=0.0729。
吞噬指数的方差分析 P <0.01 ,各组之间有极
显著性差异 。
表 7　各试验组与对照组吞噬指数的 Dunnett s t检验结果
比较组别
(mg/ kg)
差值 95%可
信区间下降 均数差值
差值 95%可
信区间上限
150 ～ 0 0.0109 0.0850 0.1225＊＊＊
300 ～ 0 0.0159 0.0900 0.2325＊＊＊
600 ～ 0 0.1869 0.2610 0.4695＊＊＊
NOTE:＊＊＊与对照组比较有显著差异。
Critical Valuc of Dunnctt s T=2.452;最小有意义差值
=0.0741。
对各组吞噬率 、吞噬指数进行单因素方差分析
及各剂量组吞噬率 、吞噬指数与对照组比较 ,可以认
为羊肚菌粉 600mg/kg.BW组吞噬率高于正常对照
组;三个剂量(150mg/kg.BW 及以上)组吞噬指数
大于正常对照组。
3　结　论
(1)DNFB诱导小鼠迟发型变态反应试验结果
说明 ,在本实验条件下 ,羊肚菌粉在 150mg/kg.BW
及以上剂量时 ,可以促进小鼠细胞免疫功能。
(下转第 20页)
13羊肚菌免疫调节作用研究
表 3　榛子杂交当代坚果(F 0)与母本自然生坚果单果重差异比较表＊
杂交组合与亲本来源 坚果来源
单果重(g)
平均 变异系数(%)
F0 与母本比较
% T(P)
组合 1
♀饶河三人班乡平榛
♂大连杂交种 82-34
杂交当代坚果 F0 2.00±0.09 14.70 176.27-183.33 <0.01
母本自然生坚果 P1 1.14±0.05 16.18 100
父本大连栽培园坚果 P2 3.217±0.11 13.00 - -
组合 2
♀饶河大通河乡平榛
♂大连杂交种 81-17
杂交当代坚果 F0 1.64±0.11 21.5 208.11-218.75 <0.01
母本自然生坚果 P1 0.77±0.03 12.32 100
父本大连栽培园坚果 P2 2.83±0.19 18.9 - -
　　＊注:(1)果径与果重间相关极显著 , 相关系数:横径与单果重相关系数等于 0.8130 ～ 0.8623;纵径与单果重相关系数等于
0.7023～ 0.8944;(2)表 1 、表 2 中 50%t 值为 2.26 , 1%t 值为 3.257。
参 考 文 献
[ 1] 　梁维坚.出席二十三届国际园艺大会的报告.辽宁经济林研究
所研究报告汇编 , 1987-1990 ,71～ 75.
[ 2] 　梁维坚.意大利的欧洲榛子栽培.辽宁省经济林研究所研究报
告汇编。 1987-1990 , 76～ 80.
[ 3] 　中国果树实用新技术大全.农业科技出版社.1998, 814～ 526.
[ 4] 　解明.我国北方榛子树资源现状及其开发利用前景.北方果树.
1998(3):3～ 4.
[ 5] 　梁维坚.我国榛属植物资源及利用.辽宁经济林研究所研究报
告汇编 , 1987 , 19～ 23.
[ 6] 　刘万生等.土耳其榛良种选育及栽培技术.辽宁省经济林研究
所研究报告汇编 , 1987 , 28～ 32.
[ 7] 　梁维坚.辽宁野生榛树的调查研究和平榛选优方法的探讨.辽
宁经济林研究所研究报告汇编 , 1980-1981 , 25～ 47.
[ 8] 　许万英等.欧洲榛子引种的研究辽宁经济林研究所.研究报告
汇编 , 1979 , 42～ 51.
[ 9] 　梁维坚.平榛的变异与选种.辽宁经济林研究所研究报告汇编 ,
1985 , 1～ 14.
[ 10] 陈树满等.野生林垦复试验初报.辽宁经济林研究所研究报告
汇编 , 1982(5):16～ 18.
[ 11] 丰宝田.榛的优良类型调查研究 ,特产科学实验 , 1980(4):17～
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[ 12] 张育明等.辽宁野生榛子生物学性状的调查研究.辽宁农业科
学 , 1984(2):31～ 34.
[ 13] 徐文泽.兴安岭榛子结实特点及其经营管理途径.自然资源研
究.1983(4)7～ 8.
[ 14] 梁维坚.经济林生产技术丛书《榛》 .中国林业出版社 , 1987 版
本 , 7～ 21.
[ 15] 李秀霞等.干果佳品-榛子.植物杂志.科学出版社 ,1999(5):20～ 21.
[ 16] 徐秀芳 ,张海洋 ,张丽敏.黑龙江榛树资源及其开发利用.中国
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[ 17] Abst ract s, IV Internt ional Coxgress on Hazelnut , Ordu-T urkey
July 30-August 21 , 1996.
[ 18] Proceedings of the Ⅲ Internat ional congress on Hazelnut , Inter-
national society for Horticultural Science Fruit sect ion , Alba(Cu-
neo)-Itahy:September 14～ 18 , 1992.
[ 19] Andrienko , M , Breeding New Hazelnut Cultivars in Ukraine , A
bst ract s of Ⅳ In ternt ional congress on Hazelnut ,P3 , 1996 , 8.
[ 20] MALUSA E., In terspeci fic relationships among Corylus specis ,
Acta Horticulturae 351 , 1994.Hazelnut Ⅲ , 335～ 338.
[ 21] ANDRIENKO M .V.Hazelnut Cultivat ion in Uk raine , Acta Hor-
ticulturae 351 , 1994 Hazelnut Ⅲ , 55～ 58.
[ 22] Linang Weijiang et , S tudies on Hazelnut in Northern China , Acta
Hort icultu rae 351 , 1994 Hazelnut Ⅲ , 59～ 65.
(上接第 13页)
　　(2)血清溶血素测定(血凝法)结果表明 ,在本实
验条件下 ,所试羊肚菌粉在 150mg/kg.BW 及以上
剂量时 ,可以促进小鼠体内抗体的产生 ,提高体液免
疫功能。
(3)小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞试验结果
说明 ,在本实验条件下 ,所试羊肚菌粉在 150mg/kg.
BW及以上剂量时 ,具有增强小鼠腹腔巨噬细胞吞
噬功能的作用。
根据这些结果综合分析 ,证明羊肚菌粉在较小
的剂量时就有免疫调节作用 ,说明羊肚菌是一种比
较有效的免疫调节剂 。
参 考 文 献
[ 1] 　孙晓明等.中国野生植物资源 , 2001 , 1:17.
[ 2] 　张广伦等 ,中国野生植物资源 , 1999 , 3:1.
[ 3] 　章灵华等 ,中国免疫学杂志 , 1994 , 10(3):169.
[ 4] 　李虹奇等 ,中草药 , 1993 , 24(10):516.
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[ 6] 　何云庆等 ,中国中药杂志 , 1992 , 17:226.
[ 7] 　高斌等 ,中国免疫学杂志 , 1989 , 5:363.
[ 8] 　雷林生等 ,药学学报 , 1993 , 28:577.
20 　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　中国野生植物资源　　　　　　　　　　　　　　　第 20卷第 2期