全 文 ：湖北小连翘与贯叶连翘中金丝桃素的含量比较
李云和1，王发松2* (1．中山大学肿瘤防治中心，广东广州 510060;2．湖北民族学院化学与环境工程学院，湖北恩施 445000)
摘要 ［目的］比较测定贯叶连翘和湖北小连翘中金丝桃素的含量，以期为湖北小连翘这一新金丝桃素植物资源的开发利用奠定基础。
［方法］采用 HPLC法测定金丝桃素含量，色谱条件为:Supelcosil ODS色谱柱(4． 6 mm × 250 mm，5 μm)，流动相为甲醇 －乙腈 －水 －
0. 3%磷酸，(V∶ V =45∶ 50∶ 4． 5∶ 0． 5，用三乙胺调 pH值至 6． 0)，流速为 1 ml /min，检测波长为 590 nm。［结果］相同生长环境下的湖北小
连翘中金丝桃素含量约为贯叶连翘中的 3倍;湖北小连翘中金丝桃素的含量随着海拔高度的升高呈逐渐下降趋势;金丝桃素在湖北小
连翘各部位中以花和幼果中含量最高，可达 0． 617% ～0． 877%，在叶和成熟果实中的含量约为 0． 35%，根和茎中含量极低。［结论］该试
验为湖北小连翘的人工种植和科学采收研究提供了理论指导，为湖北小连翘这一新金丝桃素植物资源的开发利用奠定基础。
关键词 湖北小连翘;贯叶连翘;金丝桃素;含量比较
中图分类号 S682． 36 文献标识码 A 文章编号 0517 －6611(2010)28 －15598 －02
Comparison of Hypericin Contents in Hypericum hubeiense and Hypericum perforatum
LI Yun-he et al (Cancer Center，Sun Yat-sen University，Guangzhou，Guangdong 510060)
Abstract ［Objective］The contents of hypericin in Hypericum hubeiense and Hypericum perforatum were comparatively determined，aiming at
providing basis for the development and utilization of Hypericum hubeiense． ［Method］HPLC was used，and the chromatographic conditions
were as follows:Supelcosil ODS (4． 6 mm × 250 mm，5 μm)column，mobile phase of methanol － acetonitrile － water － 0． 3% aqueous solu-
tion of phosphoric acid (v∶ v = 45∶ 50∶ 4． 5∶ 0． 5，adjusting the pH to 6 with triethylamine)，flow rate of 1 ml /min and detection wavelength of
590 nm． ［Result］The content of hypericin in Hypericum hubeiense was 3 times as that in Hypericum perforatum growing in the same environ-
ment and decreased with the increasing elevation of its growth． Meanwhile，the hypericin content in the flowers and young fruits of Hypericum
hubeiense was the highest which was 0． 617% － 0． 877%，and that in leaves and ripe fruits was about 0． 35%，while that in roots and stems
was extremely low． ［Conclusion］This will provide theoretical basis for the artificial cultivation，scientific harvest and development of Hyperi-
cum hubeiense．
Key words Hypericum hubeiense;Hypericum perforatum;Hypericin;Comparison of contents
基金项目 湖北省教育厅科技研究计划优秀中青年人才项目(Q20082901)。
作者简介 李云和(1969 －) ，男，广东兴宁人，本科，主管药师，从事药
物质量分析与药效学方面的研究。* 通讯作者，博士，副教
授，E-mail:zsuwangfasong@ yahoo． com． cn。
收稿日期 2010-05-12
湖北小连翘(Hypericum hubeiense)系藤黄科金丝桃属植
物［1］。金丝桃素(hypericin)是金丝桃属植物中具有抗艾滋
病病毒等多种逆转录病毒、抗抑郁和抗肿瘤等生理活性的成
分［2］，也是该属植物的特征成分之一。其不同纯度产品广泛
应用于抗抑郁食品补充剂、神经保健剂、动物抗病毒饲料添
加剂等，同时又是抗艾滋病病毒(HIV病毒)新药的热点化合
物［3 －5］。过去对金丝桃素的源植物及应用开发研究主要集
中在贯叶连翘(Hypericum perforatum L．) ;关于湖北小连翘的
相关研究报道在近期才见，如白洁等［6］在 2008 年利用
HPLC-DAD-ESI2MS分析鉴定了湖北巴东产湖北小连翘的化
学成分，明确该植物中含有金丝桃素和伪金丝桃素等成分。
笔者在对该植物金丝桃素的含量测定中发现，其全株中金丝
桃素的含量显著高于贯叶连翘这一传统金丝桃素植物资源。
因此，该试验对该植物资源进行了深入的金丝桃素含量分
析，为湖北小连翘这一新金丝桃素植物资源的开发利用奠定
基础。
1 材料与方法
1． 1 材料
1． 1． 1 研究对象及其预处理。野生湖北小连翘，花果期为 8
～10月，全株采自于湖北巴东大支坪至绿葱坡一带，海拔
900 ～1 700 m，按不同海拔和部位对试验材料分类后阴干，
备用。野生贯叶连翘，花期为 8月，采自于湖北巴东大支坪，
海拔 980 m，生长环境与同海拔下的湖北小连翘相同，采集部
位为花枝 20 ～40 cm部分，阴干，备用。
1． 1． 2 主要设备。DIONEX P680 HPLC PUMP 泵、DIONEX
UVD170U紫外检测仪，由美国 DIONEX公司生产。
1． 1． 3 主要试剂。金丝桃素对照品(纯度为 96． 34%) ，
HPLC法自制。
1． 2 方法
1． 2． 1 色谱条件。Supelcosil ODS 色谱柱(4． 6 mm × 250
mm，5 μm) ;流动相为甲醇 －乙腈 －水 － 0． 3%磷酸 (V∶ V =
45 ∶ 50∶ 4． 5∶ 0． 5，用三乙胺调 pH值至6． 0) ;流速为1 ml /min;
检测波长为 590 nm。
1． 2． 2 对照品与供试品溶液的制备。将样品粉碎，过 40 目
筛。分别称取样品各 5． 00 g(精确至 0． 001 g)置于三角烧瓶
中，加入 50 ml的体积分数为 95%的乙醇，避光超声提取 20
min，共 3次，每次提取后过滤，合并滤液。45 ℃以下减压浓
缩除去部分溶剂，定容至 250 ml，0． 45 μm微孔滤膜过滤后，
进样分析。
1． 2． 3 金丝桃素标准曲线的绘制。分别精密量取金丝桃素
对照品溶液(40 μg /ml)1． 0、2． 0、4． 0、5． 0、10． 0 ml置于 10 ml
容量瓶，用甲醇定容，依次作为 1、2、3、4、5 号对照品溶液，混
匀，0． 45 μm 滤膜过滤。各溶液分别以 20 μl 进样，重复 3
次。以平均峰面积(A)对浓度(C)进行线性回归，得回归
方程。
1． 2． 4 方法学考察。
1． 2． 4． 1 精密度试验。取金丝桃素对照品溶液重复进样 5
次，计算峰面积相对标准偏差(RSD)值。
1． 2． 4． 2 稳定性试验。取金丝桃素对照品溶液，于 0、4、8、
12、24 h分别进样分析，计算峰面积的 RSD值。
1． 2． 4． 3 重现性试验。取同一批样品 5份，每份约 5 mg，平
行测定 5次，计算金丝桃素含量 RSD值。
1． 2． 4． 4 加样回收率试验。取已知金丝桃素含量的样品 5
责任编辑 刘群燕 责任校对 况玲玲安徽农业科学，Journal of Anhui Agri． Sci． 2010，38(28):15598 － 15599
DOI:10.13989/j.cnki.0517-6611.2010.28.165
份，每份约 5 mg，分别精密加入金丝桃素对照品溶液(40
μg /ml)1 ml，测定，计算加样回收率。
2 结果与讨论
2． 1 金丝桃素标准曲线的绘制结果 通过计算得回归方程
为:A =439 763C +305 002(r =0． 999 1) ，线性范围为 4． 38 ～
44． 7 μg /ml。
2． 2 方法学考察结果
2． 2． 1 精密度试验结果。通过对金丝桃素对照品溶液重复
进样 5次，最后测得的 RSD值为 3． 11%，表明仪器的精确度
良好。
2． 2． 2 稳定性试验结果。测得金丝桃素含量的 RSD 值为
4． 18%，表明仪器在 24 h内稳定，符合测定要求。
2． 2． 3 重现性试验结果。5 次测得的 RSD 值为 1． 29%，表
明该方法的重复性良好。
2． 2． 4 加样回收率试验结果。按样品测定的方法测定其含量
并计算回收率，得平均加样回收率为100．7%，RSD值为3．46%。
2． 3 样品中金丝桃素含量的测定结果 测定按“1． 2． 2”制
备的每种待测样品金丝桃素含量，测定结果见表 1和表 2。
表 1 贯叶连翘和不同海拔湖北小连翘中金丝桃素的含量
Table 1 The content of hypericin in Hypericum perforatum and Hypericum hubeiense from different elevation
样品号
No． of samples
贯叶连翘中含量∥%
Content of hypericin in Hypericum perforatum L．
不同海拔湖北小连翘全株中含量∥%
Content of hypericin in Hypericum hubeiense from different elevation
980 m 1 240 m 1 450 m 1 680 m
1 0． 065 0． 260 0． 255 0． 230 0． 196
2 0． 102 0． 244 0． 231 0． 199 0． 227
3 0． 097 0． 258 0． 237 0． 216 0． 202
平均值 Average 0． 088 0． 254 0． 241 0． 215 0． 208
表 2 野生湖北小连翘不同部位金丝桃素的含量
Table 2 The content of hypericin in different parts of wild Hypericum hubeiense
样品号
No． of samples
不同部位中的含量∥% Content of hypericin in different parts of Hypericum hubeiense
根 Root 茎 Stem 叶 Leaf 花 Flower 幼果 Young fruit 成熟果 Ripe fruit
1 － 痕迹量 Trace 0． 352 0． 872 0． 667 0． 288
2 － 痕迹量 Trace 0． 414 0． 822 0． 613 0． 327
3 － 痕迹量 Trace 0． 361 0． 936 0． 572 0． 394
平均值 Average content － 痕迹量 Trace 0． 376 0． 877 0． 617 0． 336
注:－ 表示未检测到。
Note:－ stands for no detection．
由表 1、2可知，湖北小连翘全株中的金丝桃素含量与产
地的海拔有关:随着海拔高度的升高，金丝桃素的含量呈逐
渐下降趋势。相同采集地(海拔 980 m)的湖北小连翘中的
金丝桃素含量约为贯叶连翘中的 3 倍。金丝桃素在湖北小
连翘各部位中以花和幼果中含量最高，可达到 0． 617% ～
0. 877%，在叶和成熟果实中的含量约为 0． 35%，但在根和茎
中含量极低。
3 结论与讨论
由于湖北小连翘金丝桃素的含量显著高于贯叶连翘这
一传统金丝桃素植物资源，表明湖北小连翘可能成为 1种金
丝桃素开发的新优植物资源。
通过对产自不同海拔(980 ～ 1 680 m)的湖北小连翘的
不同部位中金丝桃素的含量测定，可为湖北小连翘的人工种
植和科学采收研究给予理论指导:初步设定其第一阶段的人
工栽培试验适宜地为鄂西山区海拔 1 000 m左右地区;最佳
采集期为尚带少量花的幼果期;最佳采集部位为带叶、花和
果的枝条，并可留根翌年发芽，可持续采收。
参考文献
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9955138 卷 28 期 李云和等 湖北小连翘与贯叶连翘中金丝桃素的含量比较