全 文 ：华西药学杂志
W C J·P S 2016，31(3)∶251 ～ 253
基金项目:广西自然科学基金项目(2013GXNSFBA019137);广西高校科学技术研究项目开发计划项目(2013YB128);广西卫生厅资助项目
(Z2012191)
作者简介:黄丽贞(1982—)，女，广西南宁，硕士，从事中药药效的筛选工作。Email:88011457@ qq． com
* 通信作者(Correspondent author)，Email:alswen@ 163． com
山桔叶醇提物抗炎镇痛作用的研究
黄丽贞，侯宁宁，马雯芳* ，余洪环，廖志亮，黄丽萍
(广西中医药大学药学院，广西 南宁 530001)
摘要:目的 观察山桔叶醇提物(GPE)对小鼠的抗炎镇痛作用。方法 通过二甲苯致小鼠耳廓肿胀、0． 6%冰乙酸致小鼠腹
腔毛细血管通透性、1%角叉菜胶致小鼠足肿胀及用小鼠棉球肉芽肿法观察 GPE的抗炎作用;通过冰乙酸致小鼠扭体反应和
热板致小鼠疼痛法观察 GPE的镇痛作用。结果 GPE高、中、低剂量均可显著抑制二甲苯致小鼠耳廓肿胀的肿胀度、1%角叉
菜胶致小鼠的足肿胀、0． 7%冰乙酸致小鼠的扭体反应次数;GPE高、低剂量可显著抑制冰乙酸致小鼠腹腔毛细血管通透性的
增高;GPE高、中剂量均可抑制角叉菜胶致小鼠足肿胀中 PGE2 的渗出及小鼠棉球肉芽肿的重量，可增高热板致小鼠疼痛的痛
阈值。结论 GPE对小鼠有抗炎镇痛的作用。
关键词:山桔叶;醇提物;耳肿胀;腹腔通透性;足肿胀;肉芽肿;扭体反应;热板致痛
中图分类号:Ｒ96 文献标志码:A 文章编号:1006 － 0103(2016)03 － 0251 － 03
DOI:10． 13375 / j． cnki． wcjps． 2016． 03． 011
Study on the anti － inflammatory and analgesic effect of the ethanol extracts of Glycosmis
parriflorae
HUANG Lizhen，HOU Ningning，MA Wenfang* ，XU Honghuan，LIAO Zhiliang，HUANG Liping
(Guangxi University of Chinese Medicine，Nanning，Guangxi，530001 P． Ｒ． China)
Abstract:OBJECTIVE To study anti － inflammatory and analgesic effect of the ethanol extract of Glycosmis parriflorae leaves
(GPE)．METHODS Dimethybenzene was used to induce ear swelloen，0． 6% acetic acid was used to induce mouse peritoneal capil-
lary，1% carrageenan was used to induce paw edema，and granuloma was used to observe the anti － inflammatory effects of GPE in the
mice． The writhing response times and the plate heating tests induced by acetic acid in the mice were used to observe the analgesic
effect of GPE． ＲESULTS The GPE with three doses could significantly inhibit the dimethybenzene － induced ear swelloen，1% carrag-
eenan － induced foot swelloen，and 0． 7% acetic acid － induced writhing reaction times in the mice． The high and low dose GPE could
obviously inhibit the increasing of acetic acid － induced peritoneal permeability in the mice． The high dose and middle dose GPE could
inhibit the PGE2 exudative and the weight of inflammation of the carrageenan induced paw edema and granuloma weight in mice，besides，
which could significantly increase the pain threshold of mice． CONCLUSION GPE has anti － inflammatory and analgesic effect．
Key words:Glycosmis parriflorae(Sims)Kurz;Ethanol extracts;Ear swelling;Peritoneal capillary permeability;Paw edema;Granuloma;
Writhing response;Hot － plate test
CLC number:Ｒ96 Document code:A Article ID:1006 － 0103(2016)03 － 0251 － 03
山桔叶为芸香科植物小花山小橘 Glycosmis
parriflorae(Sims)Kurz 的干燥叶［1］，具有抗炎镇痛、
消散淤肿的功效，在广西、广东、福建、台湾等省区均
有分布［2］。文献［3 － 4］中对其叶、根的生药性状、显微
特征进行了鉴别。现研究了山桔叶醇提物对小鼠的
抗炎镇痛作用，可为其资源的开发利用提供依据。
1 实验部分
1． 1 仪器、试药与动物
TU －1901 双光束紫外可见分光光度计(北京普
析通用仪器有限责任公司);YLS － 6A 型智能热板
仪(山东省医学科学院设备站)。醋酸地塞米松片
(浙江仙琚制药有限公司);硫酸罗通定注射液(广
东新峰药业股份有限公司);氯化钠注射液(贵州天
地药业有限责任公司);山桔叶采自广西伊岭岩，经
广西中医药大学蔡毅教授鉴定为芸香科小橘
Glycosmis parriflorae(Sims)Kurz的干燥叶;水为纯净
水;其余试剂为分析纯。清洁级昆明种小鼠(广西
中医药大学实验动物中心，许可证号:桂医动字第
11004 号)20 ± 2 g，♀♂兼用。
1. 2 方法与结果
1． 2． 1 山桔叶醇提物(GPE)的制备 将山桔叶药
材剪碎后，称取 1． 5 kg，置开口反应器中，分别加入
9、7． 5、7． 5 L 70%乙醇回流提取 3 次，提取时间依次
为 2、1、1 h，过滤提取液后，合并滤液，浓缩回收乙
醇，得 GPE浸膏，置冰箱中保存。每克浸膏相当于
5． 88 g生药。
1． 2． 2 GPE对二甲苯致小鼠耳肿胀的影响［5］ 取
50 只♂小鼠，随机均分为空白组、阳性组(地塞米松
5． 0 mg·kg －1)和 GPE 高、中、低剂量组(19． 5、9． 8、
4． 9 g·kg －1)。各组小鼠均 ig 给药，qd，连续 7 d，给
药容量为 20 mL·kg －1，ig给予空白组小鼠等体积的
纯净水。末次给药前禁食不禁水 16 h，末次药后 1
h，于各组小鼠右耳滴 20 μL 二甲苯致炎(正、反两
面各滴 10 μL)，15 min后脱颈椎处死，用 6 mm的打
孔器打下左右两耳片，称重，右耳片重量减去左耳片
重量的差值即为肿胀度，并计算肿胀度抑制率。与
空白组比较，GPE高、中、低剂量均可显著抑制小鼠
的耳廓肿胀度(P ＜ 0． 01 或 P ＜ 0． 05)(表 1)。
1． 2． 3 GPE对小鼠腹腔毛细血管通透性的影响［6］
小鼠的分组与给药同“1． 2． 2”项。末次给药前禁
食不禁水 16 h，末次药后 1 h，于各小鼠尾静脉注射
0． 25 %伊文思兰，并 ip 0． 6 %冰乙酸，给药容量均
为 10 mL·kg －1，15 min后，脱颈椎处死各小鼠，于腹
腔注入 6 mL生理盐水冲洗腹腔，腹腔洗出液经 2 ×
103 r·min －1离心 10 min，取上清液，于 590 nm 处测
定吸光度。与空白组比较，GPE 高、低剂量可显著
抑制冰乙酸致小鼠腹腔通透性的增高(P ＜ 0． 05，
表 1)。
表 1 GPE对二甲苯致小鼠耳肿胀和冰乙酸致小鼠腹腔毛细血管通
透性的影响(珔x ± s，n =10)
Table 1 Effects of GPE on the dimethybenzene － induced ear
swelloen and acetic acid － induced peritoneal permeability
in the mice(珔x ± s，n =10)
Groups Dose /g·kg － 1
Swelling degree /
mg
Inhibition rate /
% A
Blank － 11． 68 ± 1． 94 － 0． 13 ± 7． 1 × 10 － 3
Positive 5 × 10 － 3 4． 96 ± 1． 78＊＊ 57． 53 0． 06 ± 4． 1 × 10 － 3 ＊＊
GPE 19． 5 7． 79 ± 3． 12＊＊ 33． 30 0． 08 ± 0． 02*
9． 8 8． 63 ± 3． 08* 26． 11 0． 10 ± 0． 03
4． 9 7． 94 ± 2． 99＊＊ 32． 02 0． 08 ± 0． 02*
Compared with blank group:* P ＜ 0． 05，＊＊P ＜ 0． 01
1． 2． 4 GPE对角叉菜胶致小鼠足肿胀的影响［6］
小鼠的分组与给药同“1． 2． 1”项。末次给药前禁食
不禁水 16 h，末次药后 1 h，在每只小鼠右后足注射
1%角叉菜胶 20 μL致炎，致炎 3 h 后脱颈椎处死各
小鼠，于膝关节处剪下两后足，分别称左、右足重量，
右后足减左后足重量的差值即为肿胀度。将各小鼠
右后致炎足剪碎后，加入 3 mL 生理盐水浸泡 24 h，
取浸出液于 3 × 103 r·min －1离心 5 min，取上清液
0. 5 mL，加入 0． 5 mol·L －1氢氧化钠 － 甲醇溶液
2 mL，于 50 ℃恒温水浴锅中异构化 2 min，加入甲醇
7 mL稀释，空白管同法处理(不加上清液)，测定
278 nm处的吸光度。与空白组比较，GPE 高、中、低
剂量均可显著抑制角叉菜胶致小鼠足肿胀(P ＜
0. 05);GPE 高、中剂量可显著抑制小鼠足肿胀中
PGE2 的渗出(P ＜ 0． 01)(表 2)。
1． 2． 5 GPE对小鼠棉球肉芽肿的影响［6］ 小鼠的
分组同“1． 2． 1”项。ip给予各组小鼠 0． 2 %戊巴比
妥钠 30 mL·kg －1麻醉后，将 2 个已高压灭菌且滴加
0. 1 mL 双抗供试液的 10 mg 棉球分别植入小鼠两
侧腋下皮下，缝合切口后外涂碘酒抗感染。次日，各
组小鼠均 ig给药，qd，连续 7 d，给药容量为 20 mL·
kg －1，ig给予空白组小鼠同体积纯净水。末次给药
前禁食不禁水 16 h，末次给药 12 h 后处死小鼠，剥
离肉芽组织的棉球，于 60 ℃烘烤至恒重，精密称重，
计算肉芽质量。与空白组比较，GPE 高、中剂量均
可显著抑制小鼠棉球肉芽肿(P ＜ 0． 05，表 2)。
表 2 GPE对角叉菜胶致小鼠足肿胀度、炎足中 PGE2 含量和棉球
肉芽肿的影响(珔x ± s，n =10)
Table 2 Effects of GPE on the carrageenan induced paw edema，
PGE2 exudative and granuloma in the mice(珔x ± s，n =10)
Groups Dose /g·kg － 1
Swelling degree /
mg A
Granuloma weight /
mg
Blank － 70． 40 ± 6． 16 0． 26 ± 0． 03 37． 42 ± 7． 04
Positive 5 × 10 － 3 32． 28 ± 6． 30＊＊ 0． 20 ± 0． 05＊＊ 17． 57 ± 2． 67＊＊
GPE 19． 5 56． 55 ± 13． 95* 0． 22 ± 0． 03＊＊ 28． 38 ± 7． 79*
9． 8 60． 11 ± 10． 53* 0． 20 ± 0． 04＊＊ 31． 56 ± 4． 02*
4． 9 57． 66 ± 14． 60* 0． 27 ± 0． 03 33． 38 ± 4． 91
Compared with blank group:* P ＜ 0． 05，＊＊P ＜ 0． 01
1． 2． 6 GPE 对热板致小鼠疼痛的影响［6 － 7］ 取
18 ～ 22 g ♀小鼠进行筛选。将小鼠放入 55 ± 0． 5 ℃
热板测痛仪内，记录自放入到出现舔后足所需的时
间作为该鼠的痛阈值，5 min 后再测 1 次。凡小于
5 s或大于 30 s时出现舔后足者及喜跳跃者，一律弃
去不用。取合格小鼠按痛阈值随机分为空白组、阳
性组(罗通定 60 mg·kg －1)和 GPE 高、中、低剂量组
(19. 5、9． 8、4． 9 g·kg －1)。各组小鼠均 ig 给药，qd，
连续4 d，给药容量为20 mL·kg －1，空白组小鼠给予同
体积纯净水。末次给药前禁食不禁水 16 h，末次给药
后分别在 30、60、90、120 min 时测定各组小鼠的痛阈
值。若小鼠在热板测痛仪内60 s仍无痛觉反应，应取
出，按 60 s计。与空白组比较，GPE高剂量在 30、60、
90、120 min时均可显著延长小鼠的痛阈值(P ＜ 0． 01
或 P ＜0． 05);GPE中剂量在 60、90、120 min时也可显
著延长小鼠的痛阈值(P ＜0． 05)(表 3)。
252 华 西 药 学 杂 志 第 31 卷
表 3 GPE对热刺激致小鼠痛阈值的影响(s，珔x ± s，n =10)
Table 3 Effects of GPE on the pain threshold in the mice(s，珔x ± s，n =10)
Groups Dose /g·kg －1 给药前
给药后 / s
30 min 60 min 90 min 120 min
Blank － 15． 41 ± 3． 52 16． 12 ± 5． 22 13． 40 ± 4． 00 16． 01 ± 6． 67 14． 88 ± 4． 94
Positive 0． 06 15． 38 ± 3． 45 42． 14 ± 23． 11＊＊ 44． 03 ± 20． 79＊＊ 44． 90 ± 18． 92＊＊ 43． 32 ± 21． 79＊＊
GPE 19． 5 15． 36 ± 3． 93 35． 60 ± 21． 56* 38． 88 ± 20． 41＊＊ 38． 87 ± 22． 69* 36． 76 ± 21． 69*
9． 8 15． 34 ± 3． 66 25． 74 ± 13． 29 22． 86 ± 10． 85* 29． 77 ± 16． 83* 27． 74 ± 12． 35*
4． 9 15． 35 ± 3． 77 16． 13 ± 6． 77 16． 07 ± 7． 31 16． 38 ± 4． 11 20． 25 ± 8． 17
Compared with blank group:* P ＜ 0． 05，＊＊P ＜ 0． 01
1． 2． 7 GPE 对冰乙酸致小鼠扭体反应次数的影
响［7］ 取 50 只小鼠，♀♂兼用，随机均分为空白组、
阳性组(罗通定 60 mg·kg －1)和 GPE 高、中、低剂量
组(19． 5、9． 8、4. 9 g·kg －1)。各组小鼠均 ig 给药，
qd，连续 4 d，给药容量为 20 mL·kg －1，ig 给予空白
组小鼠同体积纯净水。末次给药前禁食不禁水 16
h，于末次药后 1 h，予各小鼠 sc 0． 6%冰乙酸溶液 10
mL·kg －1，观察并记录注射冰乙酸后 15 min 内小鼠
出现扭体反应的次数，计算抑制率。与空白组比较，
GPE 3 个剂量均可显著抑制冰乙酸致小鼠的扭体反
应(P ＜ 0． 01 或 P ＜ 0． 05，表 4)。
表 4 GPE对冰乙酸致小鼠扭体反应的影响(珔x ± s，n =10)
Table 4 Effects of GPE on the acetic acid － induced writhing
response in the mice(珔x ± s，n =10)
Groups Dose /g·kg －1 Twisting No． Inhibition rate /%
Blank － 15． 3 ± 7． 9 －
Positive 0． 06 3． 2 ± 3． 0＊＊ 79． 1
GPE 19． 5 8． 1 ± 6． 7* 47． 1
9． 8 5． 5 ± 4． 6＊＊ 64． 0
4． 9 5． 8 ± 6． 2＊＊ 62． 1
Compared with blank group:* P ＜ 0． 05，＊＊P ＜ 0． 01
1． 2． 8 统计学方法 采用 SPSS 17． 0 软件进行数
据分析，数据以 珋x ± s 表示，采用 t 检验，P ＜ 0． 05 为
差异有统计学意义。
2 讨论
文中不同剂量山桔叶醇提物(GPE)对二甲苯致
小鼠耳肿胀均具明显抑制作用。高、低剂量 GPE 对
冰乙酸致小鼠腹腔毛细血管通透性的增高有一定拮
抗作用。不同剂量 GPE 对角叉菜胶致小鼠足肿胀
及炎足中 PGE2 渗出有较好的对抗效果，说明 GPE
能有效地减弱炎症早期的反应，具有较强的抗炎作
用。高、中剂量 GPE对对炎症后期的小鼠棉球肉芽
肿有良好的抑制作用。表明其对炎症组织的增生具
有较好的抑制作用，起到了一定的抗炎作用。此外，
GPE对化学物质刺激及物理刺激引起的小鼠疼痛
反应均具有抑制作用，表明其具较好的镇痛作用。
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收稿日期:2015 － 06 － 30
352第 3 期 黄丽贞，等。山桔叶醇提物抗炎镇痛作用的研究